名词解释
酶：具有生物催化功能的大分子物质，包括蛋白类和核酸类。
酶工程:是将酶、细胞、或者细胞器等置于特定的生物反应装置中，利用酶所具有的生物催化功能，借助工程手段将相应的原料转化成有用物质并应用于社会生活的一门科学技术。（酶的产生和应用的技术的过程）
比活力：指特定条件下，单位质量蛋白质或者RNA拥有的酶活力单位数.
比活力=酶活力(单位)/mg(蛋白质或者RNA)
国际单位:在特定的条件下(25℃,具最适底物浓度、最适温度、最适pH和离子强度系统），每分钟内能转化1μmol底物或催化1μmol产物形成所需要的酶量为一个酶活力单位。
催量：在最适条件下,每秒钟能使1mol/l底物转化为产物所需的酶量定为1kat.
1kat=1mol/s=60mol/min=6*10^7U
转换数Kp: 指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数单位为min-。Kp=底物转变的摩尔数/酶摩尔数×分钟=酶活力（IU）/酶微摩尔数，一般Kp= 为103/min, 碳酸酐酶达3.6×107/min
催化周期：酶进行一次催化所需时间。（ms,μs) 即 T= 1/kp（T=1/Kcat）
终产物阻遏:由于终产物过量积累而导致生物合成途径中酶合成的阻遏.
诱导物:诱发诱导酶合成的物质.
诱导作用:是指加入某种物质使酶的合成开始或加速进行的过程.
分解代谢产物阻遏:指两类同类物资同时存在时，如果一种是快速利用物质，另一种是慢速利用物质，则前者的某种代谢产物阻遏后者酶的生成，使生物利用快速利用物质。
葡糖糖效应:由于葡萄糖常对分解代谢利用其他底物的有关酶的合成有阻遏作用,所以分解代谢产物阻遏又称为葡萄糖效应。（所有迅速代谢能源都能阻抑较慢代谢的能源所需酶的合成。酶的生成被易分解碳源所阻遏。此称葡萄糖效应）
沉降时间：是指颗粒从样品液面完全沉降到离心管底所需的时间，它取决于颗粒的沉降速度和沉降距离
(完整word版)酶工程
名词解释
1。 酶工程：又叫酶技术，是酶制剂的大规模生产和应用的技术。
2。自杀性底物:底物经过酶的催 化后其潜在的反应基团暴露,再作用于酶而成为酶的不可逆抑制剂,这种
底物叫自杀性底物?？
3.别构酶;调节物与酶分子的 调节中心结合后,引起酶分子的构象发生变化,从而改变催化中心对底物的 亲和力，这种影响被称为别构效应，具有别构效应 的酶叫别构酶
4。诱导酶:有些酶在通常的情况下不合成或很少合成，当加入诱导物后就会大量合成,这样的酶叫诱导酶 5。Mol
催化活性:表示在单位时间内,酶分子中每个活性中心转换的分子数目
6。 离子交换层析
9比活力
11葡萄糖效应
13产酶动力学
15双向凝胶电泳
20固定化细胞
21酶化学修饰
1．酶的转换数:酶的转换数Kp.又称为摩尔催化活性,是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数.
2．酶的催化周期:酶进行一次催化所用的时间。
3．固定化酶的比活力：指每克干固定化酶所具有的6活力单位数，它是酶制剂纯度的一个指标。
4．抗体酶：又称催化行抗体。是一类具有生物催化功能的抗体分子。抗体是由抗原诱导产生的抗原特异结构免疫球蛋白,要使机体具有生物催化功能，只要在抗体的可变区赋予酶的催化特性，以及酶的高效催化能力。是通过人工设计采用现代生物技术而获得的一类新的生物催化剂，有些是自然界原本不存在的。
5．端粒酶：是一种核酸核蛋白，包含蛋白质和RNA两种基本成分.其RNA组分包含有构建端粒的重复序列的核苷酸摸板序列,在合成端粒的过程中，端粒酶以其本身的RNA组分为摸板把端粒的重复序列加到染色体DNA的末端上,使端粒延长。 (完整word版)酶工程
6．核酶:核酸类酶。为一类具有生物催化功能的核糖核酸分子。它可以催化本身RNA剪切或剪接作用，还可以催化其他RNA，DNA多糖，酯类等分子进行反应。
酶工程：又称酶技术。从应用的目的出发，将酶学理论与化学工程相结合研究酶，并在一定的反应装置中利用酶的催化特性，将原料转化为产物的一门新技术。
组成酶：细胞固有酶类。
诱导酶：细胞为适应外来底物或底物类似物而临时合成的酶。
贴壁培养：是指细胞贴附在一定的固相表面进行的培养。
锚地依赖性：某些细胞需要附着于带适量电荷的固体或平固体表面才能生长的特性。
SDS-PAGE：聚丙烯酰胺凝胶电泳，用于分离蛋白质和寡合氨基酸。主要用于蛋白质相对分子质量的测定。
等电点聚焦：在电泳系统中，加进两性电解质载体。当接通直流电时，两性电解质载体即形成一个由阳极到阴极连续增高的pH梯度。当酶或其他两性电解质进入这个体系时，不同的两性电解质即移动到(聚焦于)与其等电点相当的pH位置上，从而使不同的等电点的物质得以分离的技术。
酶分子修饰：通过各种方法是酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的催化特性的技术。
大分子结合修饰：采用水溶性大分子与酶的侧链基团共价结合，使酶分子的空间构象发生改变，从而改变酶的催化特性的方法。
侧链基团修饰：采用一定方法使酶的侧链基团发生改变，从而改变酶的催化特性的修饰方法。
氨基修饰：采用某些化合物使酶分子侧链上的氨基发生改变，从而改变酶分子的空间构象和催化特性的方法。
分子内交联修饰：采用双功能基团化合物，与酶分子中相距较近的两个侧链基团之间形成共价交联，从而提高酶的稳定性的修饰方法。
酶的固定化：采用各种方法，将酶固定在水不溶性的载体上，制备成固定化酶的过程。
交联法：借助双功能试剂使酶分子之间发生交联作用，制成网状结构的固定化酶的方法。
双重固定化：将酶先用凝胶包埋后再用戊二醛交联，或先将酶用硅胶等吸附后在进行交联的方法。
细胞固定化：通过各种方法将细胞固定在水不溶性的载体上，制备固定化细胞的过程。
原生质体固定化：通过包埋固定化的方法，将原生质体固定在载体上制备固定化原生质体的过程。
酶的非水相催化：指酶在非水介质中的催化作用。
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酶工程
实验指导
西南农业大学农学与生物科技学院
2009年3月
1 实验一 产蛋白酶菌株的分离
一、 实验目的
学习胞外生产微生物菌种的分离选择，熟悉分离菌种的基本操作。
二、 实验原理
工业上常用的生产酶的微生物有许多，重要的有枯草杆菌和真菌中的曲霉等等，它们都能产生耐热的芽孢或分生孢子，分离这类菌种时可采取先进行一定的热处理杀灭其它营养细胞，提高该菌株的相对数目。根据胞外酶能分泌到培养基的特点，采用一定的方法在培养基上形成单菌落分泌的酶形成的“水解透明圈”，可对产酶的微生物的产酶能力（活力）进行初步估计、分离高产酶的微生物。
三、试剂、仪器
高压灭菌锅，天平，无菌超净工作台，培养皿（8套/组）、试管（2支/组）、三角瓶、烧杯、酵母膏，蛋白胨，NaCl、琼脂粉，奶粉
三、 操作步骤
1、 带菌土壤的热处理 称取1g带菌土壤湿润后放入80℃烘箱处理30min。
2、 分离选择培养基的配制，各组按下列比例配制120ml培养基：
奶粉2g ， 自来水 50ml，装入50ml三角瓶
琼脂1.8g ， NaCl 0.5g，自来水70ml，装入100ml三角瓶
自来水50ml，装入50ml三角瓶
取50ml烧杯一个，放入5支带帽5ml离心管，灭菌备用。
分别封口，常规灭菌（121℃、20min）,灭菌后待冷却至不太烫手时混合上述液体，按无菌操作要领迅速倒平板8个，其中4个加有0.2ml不同稀释倍数（操作5）的样品液（菌悬液），迅速混合冷却形成平板，余4个平板冷却后用于涂布筛选。
3、 稀释制备菌液， 取5支灭菌带帽5ml离心管，各加入无菌水3.6ml备用；将热处理过的土壤放入无菌50ml烧杯中，加入无菌水10ml，搅拌后静置片刻，上层液体为微生物悬液，按下法稀释微生物悬液：
在第一支试管中加入0.4ml微生物悬液，混合均匀后再取0.4ml到第二支试管中混合，从第二支试管中再取0.4ml到第三支试管中，以此类推。
