一、基础知识
蛋白质分离的原理：
根据蛋白质各种特性的差异， 如分子的形状和大小、所带电荷 的性质和多少、溶解度、吸附性 质和对其他分子的亲和力等等， 可以用来分离不同种类的蛋白质。
（一） 凝胶色谱法 （分配色谱法）
1.概念： 根据被分离物质的蛋白质相对分子质量的
大小，利用具有网状结构的凝胶，来进行分 离。
离。
3.类型: 琼脂糖凝胶电泳、聚丙稀酰胺凝胶电泳。
3.类型:
琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳。
影响蛋白质分子运动速度的因素
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聚丙烯酰胺凝胶电泳
在测定蛋白质分子量时常用十二烷基硫酸钠 （SDS）—聚丙烯酰胺凝胶电泳。聚丙烯酰胺凝 胶是由单体丙烯酰胺和交联剂N,N’-亚甲基双丙 烯酰胺在引发剂和催化剂的作用下聚合交联成的 具有三维网状结构的凝胶。
磁力搅拌器
搅拌器转子
搅拌器正在工作
3.分离血红蛋白溶液：
• 将搅拌好的混合溶液转移到离心管中，以 2000r/mim的速度离心10mim后，可以看 出溶液分为4层，从上往下数，第一层是无 色透明的甲苯层，第二层为白色薄层固体， 是脂溶性物质沉淀层，第三层为红色透明 液体，这是血红蛋白的水溶液，第四层是 其他杂质的暗红色沉淀物。将试管中的液 体用滤纸过滤，除去脂溶性沉淀物，于分 液漏斗中静置片刻后，分出下层的红色透 明液体
在蒸馏水和甲苯（？）作用下，红细胞破裂释放
3、分离血红蛋白溶液：
红细胞破碎混合液→中速长时离心（2000c/min×10min）→ 滤纸过滤除去脂质→分液漏斗分离出血红蛋白，得到红色透明 液体。
4、透析：（如何除无机盐离子和小分子有机物质呢？）
