凝胶成像系统校准规范(报批稿)

凝胶成像系统的使用方法

凝胶成像系统（gel imaging system）是一种用于电泳凝胶图像获取和分析的仪器。它利用荧光或者化学发光等技术，将凝胶上DNA、蛋白等生物分子的分布图像化，并可以进行定量和定性的分析。下面是凝胶成像系统的使用方法：

1.准备工作：

a.确保凝胶室和电源等设备处于正常工作状态。

b.准备与实验相匹配的荧光染料或发光底片。

c.打开成像软件并连接相机和计算机。

2.样本加载：

a.准备好电泳完的凝胶。

b.将凝胶放入凝胶室，保证凝胶与成像仪的光学系统对位。

c.打开凝胶室，将凝胶放置在模板上，并用盖板覆盖好。

d.打开相机和荧光灯或化学发光装置，让其与凝胶进行相机系统的调试。

3.图像捕获：

a.打开成像软件，选择需要的图像捕获模式（荧光或化学发光）。

b.根据实验需求设置合适的曝光时间和光强度。

c.在软件中点击进行图像捕获，等待图像生成。

d.确认图像质量，并检查是否有任何不良效果（如过曝或欠曝）。 4.图像处理：

a.在成像软件中进行图像处理，如亮度、对比度和色彩平衡的调整，背景去除等。

b.根据需要在图像中标注和测量分子带或点。

c.使用相对分子量标准品或分子量估算工具进行标准品校正和分子量计算。

5.数据分析：

a.根据实验目的选择合适的数据分析方法，如定量分析或比较分析。

b.使用软件中的工具计算分子带的相对表达量或相对分子量。

c.根据需要创建图表、图像或报告来呈现分析结果。

6.数据保存和管理：

a.将图像和分析数据保存到计算机或外部存储设备中。

b.给保存的文件起一个有意义的名称，并在文件名中包含相关信息（如实验日期、样品名称等）。

c.建立一个合适的数据管理系统，确保数据的安全和可追溯性。

7.清洁和维护：

a.在使用前，确保仪器的清洁和消毒工作已经完成。

b.在使用后，及时清理凝胶室、过滤器和光学元件等部件。

c.按照仪器的维护手册进行定期的用户维护和保养，包括更换灯泡、检查滤光片和清洁镜面等工作。 以上是凝胶成像系统的使用方法，其中包括准备工作、样本加载、图像捕获、图像处理、数据分析、数据保存和管理以及仪器的清洁和维护等步骤。使用者需要根据具体实验需求和仪器使用手册进行操作，以确保凝胶成像结果的质量和可靠性。

Tanon凝胶成像系统操作规程

Tanon凝胶成像系统操作规程

设备操作流程：

1、开启总电源。

2、开启电脑至Windows处于正常工作状态。

3、打开主机上层箱内电源开关。

4、双击桌面上的“GIS”图标，进入软件。

5、拍摄：1）打开拍摄界面。

2）把凝胶置于投射上。

3）打开相应灯源的电源开关（如用紫外灯源，请勿肉眼无防护直接观测）。

4）经电脑控制进行拍摄、保存图像。

5）拍摄完毕请立即关闭灯源电源。

6、工作完毕，关闭软件窗口。

7、当天工作完毕后，关闭主机上层箱内电源开关。

8、关闭电脑。

注意事项：

1、凝胶成像系统为EB污染区，电脑为非EB污染区，注意严格区

分EB污染区和非污染区，防止污染区向非污染区扩散。

2、仪器配置的电脑专机专用，不得上网。

3、电脑开启时请勿突然断电，以防硬盘损坏导致实验资料丢失。

4、如用紫外灯源，拍摄完毕请立即关闭灯源电源！

5、拍摄时，请注意不要将过量的缓冲液倾倒在投射底座上。

6、请注意保管好软件加密狗和软件光盘，以免遗失。

BIS910凝胶成像系统操作步骤

第一步 将样品放入BIS910

打开仪器和相机电源，打开相应灯管开关

UV：紫外光源，用于琼脂糖凝胶的成像

WL：白光光源，用于可见染料凝胶的成像

第二步 准备获取图像

1. 打开GelCapture软件第一次打开会提示是否进行校正，点击确定开始校正（大概需要10多分钟），校正完成后点击确定。

2. 根据样品选择UV或WL抽屉，点击Preview预览

Flat field correction平场校正：使用WL抽屉进行蛋白胶的拍照时，有效地校正胶的亮度均一

3. 根据光源需要打开光圈（即进光量的调节，仪器前端的IRIS旋钮，向右旋转调大进光量）

 当使用UV光源时，光圈应全部打开，也就是将光圈全部拧向右侧，并轻微向回拧一些，如果样品非常暗，光圈可以全部打开；

 当使用白光时，光圈应轻微关闭，也就是在BIS910光圈中心偏左的位置；

4. 调整焦聚（Focus）：转动BIS910前端的聚焦旋纽（FOCOUS），直到产生一个清晰的图像，默认状态聚焦旋纽放在BIS910指示的中心位置（调好之后无需再动）；

5. 设置相机参数，如：曝光时间Exposure Time、获取Gain和亮度Brightness设置

 灵敏度选择Sensitivity：有普通、高、超高三个选项。一般情况下，默认为Normal

 曝光时间Exposure Time：默认0.42s 有秒和毫秒2个单位，移动滑块选择帧数直到图像中屏幕上显示为止，对于非常暗的图像，可调整到2.8-4.2秒；

 Extended Detection增强检测模式：对信号很强和信号微弱的条带“增强检测”。在Millisecond下，可选择此模式。

 获取Gain：通常应该设为1。为保证图像质量最高不能超过3，因为增加Gain值将增加背景噪点，对于非常暗的样品移动滑块增加Gain值；

 亮度Brightness：亮度不要太高，太亮将容易过曝，影响动态范围。

化学发光凝胶成像仪技术要求

化学发光凝胶成像仪是一种用于凝胶电泳分析和成像的仪器，常用于核酸和蛋白质等生物大分子的分析。在凝胶电泳分析中，通过凝胶材料对待测样品进行分离，然后利用染色剂或化学法将目标生物大分子标记，并使用发光凝胶成像仪对目标生物大分子进行成像。因此，化学发光凝胶成像仪的技术要求主要包括以下几个方面：

1.分辨率：化学发光凝胶成像仪对成像样品的分辨率要求较高，能够实现对凝胶中生物大分子的高清晰成像。分辨率的提高可以提高成像仪的分辨率，并能够更精确地测量和分析目标生物大分子的带状图。

2.灵敏度：化学发光凝胶成像仪的灵敏度要求较高，能够检测到微弱的发光信号。这对于追踪样品中微量的目标生物大分子非常重要，尤其对于低表达的蛋白质和核酸等生物大分子的检测。

3.动态范围：化学发光凝胶成像仪的动态范围要求较宽，能够在不同浓度范围内准确检测目标生物大分子。对于强光信号的高线性响应，可以避免因信号过强或过弱而产生的信号饱和或信号过低的问题。

4.时间分辨率：化学发光凝胶成像仪的时间分辨率要求较高，可以实时监测反应的变化及其动力学过程。在一些情况下，生物大分子的反应会随时间变化，时间分辨率的提高可以更好地观察和分析这种动态过程。

5.图像分析软件：化学发光凝胶成像仪应配备适用的图像分析软件，能够对得到的图像进行分析和处理。该软件应具备功能完善、易于使用，包括带状图分析、信号定量化、带状图比较等功能，以便用户能够准确地分析和解读实验结果。 总之，化学发光凝胶成像仪在分辨率、灵敏度、动态范围、时间分辨率和图像分析软件等方面都有较高的技术要求。只有在满足这些要求的前提下，化学发光凝胶成像仪才能够准确、可靠地进行凝胶电泳分析和成像，从而实现对生物大分子的研究和分析。