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实验题目：液相色谱测定酚类化合物实验报告环境工程刘鹏12333511.实验目的（1）了解仪器各部分的构造和功能及分析的原理（2）掌握样品、流动相的处理、仪器的维护等基本知识（3）学会简单样品的分析操作过程（4）掌握HPLC分析的定性、定量方法2.基本原理高效液相色谱仪以液体作为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的主色谱分离技术，在基本理论方面与气相色谱没有显著不同，它们之间的重大差别在于作为流动相的液体与气体之间的性质差别。
与气相色谱相比，高效液相色谱对样品的适用性强，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，可以弥补气相色谱法的不足。
对于酚类化合物的测定，其基本原理是这样的：先用固相小柱吸附水中酚类化合物，然后用溶剂洗脱，经氮吹气浓缩至一定体积后，用反相高压液相色谱法分析。
在反相色谱柱上以甲醇/（水+乙酸）为流动相把经预处理的酚类化合物分离，用二极阵列检测器或紫外检测器，测定各种酚的峰高或峰面积，以外标法定量。
3.仪器与试剂3.1仪器：高效液相色谱仪：可编程紫外检测器微量注射器：50μL、100μL色谱柱：C18或C8柱化学工作站尖底浓缩瓶：10ml 具刻度富集柱3.2试剂：流动相：甲醇/高纯水(需Φ0.22μm滤膜过滤)标准物：六种酚类混合物洗脱液：正己烷、四氢呋喃(需重蒸)硫酸冰醋酸无水亚硫酸钠4.所用仪器的主要组件(1) 高压输液泵♥主要部件之一，压力：150×105～350×105 Pa。
♥为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相(<10μm)，液体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。
♥应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性。
(2) 梯度淋洗装置外梯度（高压梯度）：用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。
内梯度（低压梯度）：一台高压泵，通过比例调节阀，将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。
⾼效液相⾊谱法测定废⽔中苯胺类化合物⾼效液相⾊谱法测定废⽔中苯胺类化合物的实验模拟作者：李佛军，班级：2班，学号：211103350摘要：苯胺类化合物作为⼯业原料被⼴泛⽤于多种⾏业，它的⼤量使⽤对环境和⼈类的饮⽤⽔安全造成了很⼤的危害。
本⽂以⾼效液相⾊谱法(HPLC)检测⽔中5种苯胺类化合物的⽅法，该⽅法等5种苯胺类的检出限为0.10～0.52 µg／L，回收率为70.2％～95.6％，相对标准偏差(RSD)为3.68％～8.79％，线性范围为1.0～10.0 mg／L。
关键词：苯胺类化合物；⽔；环境；⾼效液相⾊谱法。
Measuring the aniline compound in water experiment simulationwith high performance liquid chromatographyFo jun LIAbstract：As industrial raw material，aniline compound is widely used in many industries，and it's heavy use causes great harm to environment and the safety of human's drinking water。
This paper establishes the method，of measuring 5 kinds of aniline compound in water with HPLC。
In this method，for the 5 kinds of aniline categories，detection limit is 0.10～0.52，recovery rate is 70.2％-95.6％，relative standard deviation (RSD) is3.68％-8.79％，linear range is 1.0 - 10.0 mg／L。
对塑料样品中的苯酚进行微波萃取，采用液相色谱仪器紫外检测器进行检测，方法简单，操作方便，结果准确可靠，满足苯酚的测试需求。
1实验部分
1.1 仪器和试剂
高效液相色谱仪（等度系统）
电子天平
微波萃取仪
超声波清洗器
超纯水机
甲醇（色谱纯）
超纯水
苯酚标准物质，纯度≥99.5%
1.2 色谱条件
色谱柱：C18色谱柱，4.6mm×250mm，5μm
流动相：甲醇+水=40+60（体积比）；
流量： 1.0ml/min；
柱温：35℃；
检测波长：210nm；
进样量：10ul；
1.3 标准溶液的配置
苯酚标准储备液的配置：称取100mg苯酚，精确到0.01mg，用甲醇溶解并定容至100ml棕色容量瓶中，配置成1000mg/kg的储备液。
在4℃条件下保存3个月。
（注意：由于苯酚长时间暴露在空气条件下，在有光照时，苯酚会被空气中的氧气氧化，为此在配制标准溶液时最好选用棕色的容量瓶，避免光的直射。
）
苯酚标准溶液配制：取一定量的标准储备液，稀释至所需要的浓度，待用。
准确吸取10ul苯酚标准供试液，上机测试，谱图如图1所示：
图1 苯酚标准溶液色谱图
1.4 样品处理
将塑料样品破碎至5mm×5mm的小块，准确称取1g样品，精确至0.0001g，置于微波萃取罐中。
准确移取20ml甲醇，转移至微波萃取罐中，准确称定重量，在110℃条件下微波萃取20min，取出萃取罐，放冷至室温，用甲醇补充至萃取前的重量，充分混匀萃取液，过0.45µm一次性样品过滤头，待测试。
河北科技师范学院本科毕业论文〔设计〕高效液相色谱法在环境分析中的应用院〔系、部〕名称：理化学院专业名称：应用化学学生姓名：赵亚飞学生学号：1011090229指导教师：解莹2021年11 月 17日河北科技师范学院教务处制摘要高效液相色谱〔HPLC)是现代分析化学中最重要的别离方法之一。
近几年由于化学工业的开展和天然化合物的开发,使得环境污染越来越严重。
高效液相色谱由于其高灵敏度、高效、分析速度快等优点而广泛应用于环境中各物质的监测。
本文介绍了高效液相色谱的组成、根本原理，列举了目前利用高效液相色谱法测定环境样品中多环芳烃、酚类化合物、多氯联苯、邻苯二甲酸脂、有机农药等有机污染物的测定条件及别离结果。
展示了这项技术在该领域的应用并展望了液相色谱分析技术的开展前景。
关键词:高效液相色谱；有机污染物；环境分析；开展前景AbstractHigh performance liquid chromatography ( HPLC ) is one of the most important separation methodsis in the modern analytical chemistry. In recent years because of the development of chemical industry and natural compounds , the environment pollution is more and more serious. High performance liquid chromatography with its high sensitivity, high efficiency, and fast analysis speed has widely applied in the monitoring environment substance. The composition of high performance liquid chromatography and basic principle are introduced in the paper.And at the moment, high performance liquid chromatography method is used in the organic pollutants determination conditions and separation results of environmental samples,such as phenolic compounds, PCBs, phthalic acid ester, organic pesticides and so on.It shows the application of this technique in the field and the development prospects of liquid chromatography analysis technology .Keywords :HPLC ; Organic Pollutants ;Environmental analysis; Development prospect目前，由于化学工业的开展和天然化合物的开发,使得环境污染越来越严重。
高效液相色谱法直接测定废水中苯胺含量李少飞;孙延康【摘要】建立了高效液相色谱直接快速测定废水中苯胺含量的分析方法.方法采用C18反相色谱柱(4.6×150 mm,5um),流动相为甲醇:水=40∶60的混合液,流速1.5 ml/min,波长为280 nm.废水样品1.0 ml与甲醇1.0 ml混匀,过0.45 um有机滤膜后直接进样,简化了前处理环节,减少废水采样体积和有机试剂的使用,回收率在97.3％～101.9％,相对标准偏差小于2％.【期刊名称】《能源环境保护》【年(卷),期】2017(031)002【总页数】3页(P63-64,22)【关键词】高效液相色谱;直接;废水;苯胺【作者】李少飞;孙延康【作者单位】烟台市环境监测中心站,山东烟台264000;烟台市环境监测中心站,山东烟台264000【正文语种】中文【中图分类】X832苯胺类化合物广泛应用于化工、印染、制药等工业，具有致癌和致突变的作用，它对环境造成的污染随着它的广泛应用而日趋严重，因此对这类化合物的监测已越来越受到重视，环保部已将其列入优先控制的污染物名单中[1]。
因此，严格控制废水中苯胺的含量具有重要意义。
国内采用的治理苯胺污水的方法有物理法[2]、化学法[3]、生化法[4]等。
大孔树脂吸附[5-6]是很好的办法，具有成本低处理废水量大的特点，并可回收苯胺，为苯胺的治理开辟了新的途径和方法，因此需要建立一套准确，快速的分析方法来配合苯胺废水处理工艺和废水处理达标情况的研究。
目前测定苯胺常采用分光光度法[7]，电化学法[8]，气相色谱法[9-10]，液相色谱法[11]等，其种分光光度法操作繁琐，干扰因素多，电化学法灵敏度不高，应用范围有限。
气相色谱法和液相色谱法，前处理采用液液萃取，浪费人力和大量有机试剂，对人体有害。
本文建立了高效液相色谱法直接快速分析废水中苯胺的含量的方法。
1.1 仪器与试剂液相色谱仪（Agilent公司），苯胺标准溶液（Accustandard公司），甲醇（HPLC级别，Dikma公司），色谱柱ZOBAX SB-C18（Agilent公司），滤膜（0.45 um，Anpel公司）1.2 色谱条件色谱柱：4.6×150 mm、5 um，柱温：30°C，检测波长：280 nm，流速：1.5ml/min，流动相：甲醇:水=40:60，进样量：10 ul。
高效液相色谱法测定消毒液中对氯间二甲苯酚的含量徐艳丽【摘要】A HPLC method for determination of 4-chloro-3,5-dimethylphenol ( PCMX ) in disinfectant and personal health nursing product was developed. The separation was carried out on a Hypersil C18 ODS column. The mobile phase was methanol-0.5% acetic acid water solution (volume ratio was 60 : 40) with flow rate was 1.0 mL/min. The detector was photodiode array detector. The wavelength of detector was 280 nm. The linear range of determination was 10-400ug / mL with correlative coeff icient of 0.999 8. The detection limit was 0.1μg / mL(n=6). The relative standard deviation ( RSD ) of determination resultswas 0.35%. The recoveries with addition of standard solution were 94.9%-99.6%. The method is accurate to determine the assay of PCMX in disinfectant and personal health nursing product. It is simple, rapid, sensitive and have good repeatability.%建立高效液相色谱法测定消毒液和卫生护理用品中的对氯间二甲苯酚方法.采用Hypersil C18 ODS柱分离,流动相为甲醇- 0.5％乙酸水溶液(体积比为60∶40),流速为1.0 mL/min；用二极管阵列检测器,检测波长280nm.对氯间二甲苯酚在10～400 μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,相关系数r=0.9998.方法的检出限为0.1 μg/mL,测定结果的相对标准偏差为0.35％(n=6),加标回收率在94.9％～99.6％之间.该法能准确检测对氯间二甲苯酚含量,方法简便、快速、灵敏度高、重现性好.【期刊名称】《化学分析计量》【年(卷),期】2011(020)006【总页数】3页(P62-64)【关键词】高效液相色谱;对氯间二甲苯酚;消毒液【作者】徐艳丽【作者单位】上海和黄白猫有限公司技术中心,上海200231【正文语种】中文对氯间二甲苯酚是一种酚类消毒剂，既有高效杀灭病毒、细胞繁殖体、真菌、分枝杆菌和芽孢的作用，又具有高度安全性，被广泛使用于生活的各个方面。
高效液相色谱测定水中酚类化合物褚芸;张吉君【期刊名称】《化工设计通讯》【年(卷),期】2016(042)004【摘要】High performance liquid chromatography detection has advantages of its outstanding performance in many areas, following a brief performance liquid chromatography and high performance liquid chromatography,high performance liquid chromatography and discuss the steps to detect and test compounds in water accuracy of the results.%高效液相色谱法在检测方面具有的优势使其在很多领域表现突出，下面简单介绍高效液相色谱法和高效液相色谱仪，并讨论高效液相色谱法检测水中化合物的步骤及检测结果的准确性。
【总页数】1页(P137-137)【作者】褚芸;张吉君【作者单位】苏州大学卫生与环境技术研究所，江苏苏州 215000;苏州市吴江区公安局交警大队平望中队，江苏苏州 215221【正文语种】中文【中图分类】X832【相关文献】1.固相萃取-高效液相色谱法测定废水中的酚类化合物 [J], 刘彬;李爱民;贺小敏;陈瑞文;张强2.高效液相色谱法测定废水中酚类化合物含量 [J], 张德谨;王君荷;谢永;朱军;李沙沙;张萍花3.固相萃取—高效液相色谱仪测定水中的五种酚类化合物 [J], 黎钰韬4.高效液相色谱法测定废水中酚类化合物含量 [J], 张德谨[1,2];王君荷[1];谢永[1,2];朱军[1];李沙沙[1];张萍花[1]5.枪头式羧基化多壁碳纳米管固相萃取/高效液相色谱测定饮用水中双酚类化合物[J], 朱培杰;涂雪元;周家欢;陈奕全;刘艳清;汪洪武因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
2015届毕业设计（论文） 编号 201201050017 山东化工职业学院 毕业设计（论文）
题 目：排盐水中苯酚含量的测定 系 别： 化学工程系 专 业： 工业分析与检验 班 级： 2012级1班 姓 名： 学 号： 201201050017 指导教师：
设计学期： 2014-2015 学年第 1 学期 完成时间： 2014 年 12 月 20 日 山东化工职业学院 毕 业 设 计（论文）任 务 书
专 业： 工业分析与检验
班 级： 2012级1班
设 计 者： 朱美月
合 作 者： 无
指导教师： 张春逢
课题名称： 排盐水中苯酚含量的测定
一、设计目的： 1.能将所学分析方法应用于实际工作中. 2. 建立排盐水中苯酚含量的测定方法。 3.锻炼分析问题,解决问题的能力。 二、设计要求： 1、建立排盐水中苯酚含量的测定方法。 2、考察排盐水中苯酚含量的测定方法的准确性。 3、排盐水中苯酚含量的测定方法操作简单明了，易于控制，安全可靠。 4、需要足够的数据论证。
三、参考资料： [1]陈文利，欧阳贻德，李蕾，陈中.分析科学学报[J] .万方数据，2003（3）. [2]穆顺勇，雷建武.热力发电厂酸碱废液自动中和排放系统［J］.青海科技,2003.10（3）：33-34. [3]于世林．高效液相色谱方法及应用（第二版）[M].化学工业出版社，2005． [4]王建，李忠红，倪坤义，王志群．分析化学[M].化学工业出版社，2006，34． [5]黄一石，乔子荣．定量化学分析[M]．化学工业出版社，2008．[19]． [6]陈立军等著．高效液相色谱基础与实践．科学出版社，2001． [7]朱良主编．分析仪器手册．北京：化学工业出版社，1997.
四、发题日期： 2014 年 10 月 07 日 五、完成日期： 2014 年 12月20日 系主任签字： II
高效液相色谱法测定工艺排盐水中苯酚含量 摘要：本文利用高效液相色谱法测定工艺排盐水中的2-氨基酚、苯酚、苯胺和硝基苯的含量。主要研究了排盐水的浓度、PH对2-氨基酚、苯酚、苯胺和硝基苯峰面积的影响；以及利用此方法各组分的稳定性和加标回收率。经过实验测定，工艺排盐水的浓度对2-氨基酚、苯酚、苯胺和硝基苯的影响较小； PH对2-氨基酚的影响较大,而对苯酚、苯胺和硝基苯的影响较小，所以对于苯胺、苯酚和硝基苯的测定，中和终点的控制不需要非常严格，但如果样品中有氨基酚，则需要控制滴定终点为6 ~ 7。
关键词：高效液相色谱 苯酚 苯胺 硝基苯。 II
目录 1前言 .............................................................. 1 2实验部分 .......................................................... 2 2.1实验原理..................................................... 2 2.2仪器与试剂................................................... 2 2.3实验条件..................................................... 2 2.4实验步骤..................................................... 2 2.4.1磷酸缓冲溶液（pH = 7）的配制 ........................... 2 2.4.2盐水及标样储备液的配制 ................................. 2 2.4.3标准样品的配置 ......................................... 3 3结果与讨论 ........................................................ 4 3.1各标准样品出峰时间的确定..................................... 4 3.2关样品中盐浓度对结果影响..................................... 6 3.3. 样品pH值对分析结果影响 .................................... 8 3.4. 标准样品线性考察 ........................................... 9 3.5. 实际样品分析 .............................................. 11 3.6．加标回收率测定 ............................................ 12 4总结与展望 ....................................................... 14 参考文献........................................................... 15 致 谢............................................................. 16 16
1前言 苯酚是重要的有机化工原料，主要用于制造酚醛树脂，双酚A及己内酰胺。苯酚是一种剧毒物质，可以致癌，已经被列入有机污染物的黑名单。但是一些药品、食物添加剂、消毒液中均含有一定量的苯酚。如果含量超标，就会产生很大的毒害作用。 随着石油化工、有机合成和焦化工业的发展，生产中产生了大量含苯酚及苯酚的衍生物的有害废水。苯酚具有挥发性，对眼、皮肤、呼吸道有腐蚀性，长期接触将对中枢神经系统，肝、肾产生严重的伤害，且具有致癌的潜在毒性，已经被美国等国家列为优先防治污染物。目前，苯酚、甲酚等挥发性酚类的污染，特别引起人们的重视。美国EPA 制定的关于酚的标准指出，在酚浓度为2. 56 mg /L 的条件下，会对淡水水生生物产生慢性毒性，3. 5 mg /L 是该类化合物对人体产生危害的限定浓度。0. 3 mg /L是保证河水不产生人们所不期望的味道的限定浓度。因此，苯酚一直是水质、食品、环境等检测的一个重要项目。目前国内外对苯酚测定的研究报道主要有分光光度法、荧光分析法、化学发光法、电化学分析方法、气相色谱法、高效液相色谱法等。但是由于分光光度法利用4 － 氨基安替比林的衍生作用，需要用三氯甲烷进行浓缩和萃取，有色溶液不够稳定，灵敏度不高；气相色谱法还需对水中苯酚浓缩和萃取，步骤繁琐；而液相色谱法（HPLC）是近年来发展起来的一项新的分离技术，采用高压泵、高效固定相、高灵敏度检测器，具有分析速度快，分离效能好，检测灵敏度高，样品用量少，操作简便，应用范围广等优点，特别适合于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物的分离与分析。天然水中苯酚含量极微，但工业废水中及受某些工业废水污染的饮用水中可能含有苯酚，因此，国家对工厂排放的污水中和饮用水中苯酚的含量有严格的限制，工艺排盐水中有可能含有苯酚、苯胺、硝基苯、和氨基酚等有机物，这些物质的准确定量对于下一步盐水回用有重要意义。 16
2实验部分 2.1实验原理 高效液相色谱法（HPLC）是20世纪60年代末70年代初发展起来的一种新型分离分析技术，随着不断改进与发展，目前已成为应用极为广泛的化学分离分析的重要手段。它是在经典液相色谱基础上，引入了气相色谱的理论，在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器，因而具备速度快、效率高、灵敏度高、操作自动化的特点；应用范围广，百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势；分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多。
2.2仪器与试剂 仪器：岛津20A高效液相色谱仪，配SIL-20A自动进样器和SPD-M20A二极管阵列检测器（PDA） 试剂：液相色谱级乙腈；去离子水，2- 氨基酚、硝基苯、苯胺、苯酚，氯化钠、浓盐酸、磷酸二氢钾，磷酸氢二钾以上均为分析纯。
2.3实验条件 色谱柱 C18 柱。 流动相的流速:1 mL/min 进样量 5 uL 流动相 磷酸缓冲溶液/乙腈 = 70/30 流速 1 mL/min 运行时间 20 min 柱温箱 50 ℃
2.4实验步骤 2.4.1磷酸缓冲溶液（pH = 7）的配制 分别配制浓度为10 mmol/L的磷酸二氢钾和磷酸氢二钾水溶液，将两者按照体积比4:6混合，即得到pH值为7的磷酸缓冲溶液，使用前应进行真空抽滤以除去溶液中的微小颗粒。 2.4.2盐水及标样储备液的配制 准确称取50 g氯化钠，用去离子水溶解后转移至250 mL容量瓶中，定容至刻线，得到浓度为20 %的盐水。 16
2.4.3标准样品的配置 分别准确称取苯胺、苯酚、2-氨基酚和硝基苯0.1 g（精确至0.1 mg），均用乙腈溶解后转移至四个100 mL棕色容量瓶中，用乙腈定容至刻线，得到浓度均为1000 mg/L的标准样品储备液。标准样品依据其浓度用储备液进行稀释。
