高效液相色谱法和紫外分光光度法测定LE101片的溶出度

３４８６　阿北医药２０１３年１１月第３５卷第２２期Ｈｅｂｅｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎ￣，２０１３，Ｖｏｌ　３５　Ｎｏｖ　Ｎｏ．２２　ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－７３８６．２０１３．２２．０７２　高效液相色谱法和紫外分光光度法测定　ＬＥＩＯ１片的溶出度　

赵娜夏锦辉蒋庆峰　

・药物研究与分析・　

【关键词】ＬＥＩＯ１片；溶出度；高效液相色谱法；紫外分光光度法　【中图分类号】　Ｒ　９１　【文献标识码】　Ａ　【文章编号】　１００２—７３８６（２０１３）２２—３４８６—０２　

ＬＥＩＯＩ为吡咯烷酮衍生物，主要用于治疗局限性及继发性　全身性癫痫　。ＬＥＩＯ１于２００７年３月在我国批准上市，本品　具有生物利用度高、药动学呈线性、蛋白结合率低、肝脏代谢　少、能快速获得稳定血药浓度和药物相互作用小等特点，是临　床用药较安全的药物　Ｊ。本试验旨在建立一种快速、灵敏、专　属性强的溶出方法以及测定方法，用以控制片剂质量。　１材料与方法　１．１仪器与试药ｗａｔｅｒｓ　ｅ２６９５高效液相色谱仪，ＲＣ型溶出　测定仪（天津医疗器械研究所），ＨＰ８４５３紫外可见分光光度计，　ＬＥＩＯ１对照品及自制片由合成室提供，片剂批号分别为　１１０３０４、１１０３０５、１１０３０６。乙腈为色谱纯，水为纯化水，其他试剂　均为分析纯。　１．２方法　１．２．１高效液相色谱法　１．２．１．１　色谱条件：柱填料为十八烷基硅烷键合硅胶，以　０．２％磷酸氢二钾溶液－乙腈（９５：５）（用稀磷酸调ｐＨ值至６．０）　为流动相，水为溶剂，检测波长为２２０　ｎｍ，柱温４０￣Ｃ，流速　１　ｍ￣ｍｉｎ，进样量２０　ｌ。　１．２．１．２　溶出介质的选择：取１１０３０４批样品，分别以　０．１　ｍｏＬ／Ｌ盐酸溶液及ｐＨ值４．５醋酸盐缓冲液，ｐＨ值６．８磷酸　盐缓冲液及纯化水９００　ｍｌ为溶剂，转速为５０　ｒ／ｍｉｎ，于５、１０、　ｌ５、２０、３０、４５　ｒａｉｎ取样进行测定。比较不同溶出介质中的溶出　度。样品在０．１　ｍｏｌ／Ｌ盐酸溶液以及ｐＨ值６．８磷酸盐缓冲液　中溶出较快，在ｐＨ值４．５醋酸盐缓冲液中溶出不稳定。最后　确定水为溶出介质。　１．２．１．３　溶出方法的选择：取供试品，以纯化水作为溶出介　质，分别采用浆法和篮法进行试验，转速为５０　ｒ／ｒａｉｎ。篮法比　浆法溶出慢。因此，在试验中选用篮法。见表１。　表１　浆法和篮法的溶出度比较　％　作者单位：３００１９３天津市，天津中医药大学研究生院（赵娜）；天　津药物研究院分析测试中心（夏锦辉、蒋庆峰）　通讯作者：蒋庆峰，３００１９３天津药物研究院分析测试中心；　Ｅ—ｍａｉｌ：ｊｉａｎｇ￣＠Ｏｉｐｒ．ｅｏｍ　１．２．１．４专属性试验：取不含主药的处方比例的辅料２０　ｍｇ　至５０　ｍｌ量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，滤过；精密量取续滤液　５　ｍｌ置５Ｏ　ｍｌ量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。精密量取２０　ｌ，　注入液相色谱仪，记录色谱图。　１．２．１．５线性关系试验：精密称取ＬＥＩＯ１对照品５０　ｍｇ，置于　５０　ｍｌ量瓶中，加水适量，超声使溶解，并稀释至刻度，摇匀。精　密量取对照品溶液０．２５、０．５、１．０、２．０、４．０　ｍｌ到１０　ｒｎｌ量瓶中，　得浓度分别为２５．０３、５０．０６、１００．１２、２００．２４、４００．４８　ｇ／ｍｌ的　标准溶液，加溶剂稀释至刻度，摇匀。精密量取２０　ｌ，注入液　相色谱仪，记录色谱图和峰面积，以峰面积对质量浓度　（　ｍ１）回归，得方程Ａ＝３４４３２Ｃ一３１７１７，ｒ：０．９９９９。　１．２．１．６　回收率试验：称取不含主药的处方比例的辅料　２０　ｍｇ，精密称定９份。分别加入对照品４０　ｍｇ、５０　ｍｇ、６０　ｍｇ，　置５０　ｍｌ量瓶中，用水稀释至刻度、摇匀、滤过；精密量取续滤液　５　ｍｌ置５０　ｒｎｌ量瓶中，用水稀释至刻度、摇匀。同法溶解并稀释　制成每１　ｍｌ含ＬＥ１０１　０．１　ｍｇ的对照品溶液。分别精密量取　２０　，注入液相色谱仪，记录色谱图，外标法以峰面积计算回　收率。　１．２．１．７溶出度测定：取１１０３０４、１１０３０５、ｌ１０３０６三批样品各　６片，按照中国药典２０１０版二部附录ＸＣ溶出度测定法第一　法　，经３０　ｒａｉｎ取溶出液适量，滤过，精密量取２　ｍｌ置１０　ｍｌ量　瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取　ＬＥ１０１对照品５０　ｍｇ，加水溶解并稀释制成每１毫升中约含　０．１　ｍｇ的溶液，作为对照品溶液。分别精密量取２０　，注入液　相色谱仪，记录色谱图。外标法以峰面积计算溶出量。　１．２．２紫外分光光度法　１．２．２．１　ｕＶ法测定波长：紫外分光光度法以纯化水为空白溶　液和溶剂，检测波长为２２０　ｎｍ。　１．２．２．２专属性试验：取不含主药的处方比例的辅料，同法测　定。空白辅料在２２０　ｎｍ处无吸收。辅料对ＬＥ１０１溶出度测定　无干扰。　１．２．２．３线性关系考察：取ＬＥ１０１对照品５５．８　ｍｇ，精密称定，　置１００　ｍｌ量瓶中，加水溶解并稀释至刻度、摇匀，取该溶液１、　２…３　４　５、７、８　ｍｌ于５Ｏ　ｍｌ量瓶中，加水稀释至刻度、摇匀，在波　长２２０　ｎｍ处采用紫外分光光度法测定。以质量浓度Ｃ　（　ｇ／ｍ１）对Ａ（吸光度）回归，得方程：Ａ＝０．００８４３Ｃ一０．００５２３　（ｒ＝０．９９９７）。　河北医药２０１３年１１月第３５卷第２２期Ｈｅｂｅｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　，２０　！　．丝　１．２．２．４　回收率试验：称取不含主药的处方比例的辅料约　２３　ｍｇ，精密称定９份，置１００　ｍｌ量瓶中，分别取ＬＥ１０１对照品　约４４．５、５５．６、６６．７　ｍｇ，加入上述１００　ｍｌ容量瓶中，用水溶解并　稀释至刻度，摇匀，用０．４５　ｔｘｍ滤膜过滤，取续滤液５　ｍｌ置　５０　ｍｌ容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，采用紫外分光光度法　测定。计算回收率。　１．２．２．５溶出度测定：取１１０３０４、１１０３０５、１１０３０６三批样品各　６片，依前法操作，经３０　ｍｉｎ取溶出液适量，滤过，精密量耳更２　Ｉｎｌ　置ｌＯ　ｍｌ量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶　液。另取ＬＥ１０１对照品１４　ｍｇ，至２５０　ｍｌ量瓶中，加水溶解并　稀释制成每１　ｍｌ中约含５６　的溶液，作为对照品溶液。采用　ｕＶ紫外分光光度法在２２０　ａｍ处测定吸收度。计算溶出量。　１．２．２．６溶出均一性试验：取１１０３０６批样品６片，按“１．２．１”　项下溶出条件试验。分别在５、１Ｏ、１５、２０、３０、４５　ｍｉｎ取样，同法　平行操作６次。采用紫外分光光度法测定在不同时间点取样　的溶出量，６次溶出度测定４５　ｍｉｎ溶出量均达８５％以上。作溶　出时间ｔ与溶出量Ｑ％的溶出曲线。　２结果　２．１　高效液相色谱法辅料对ＬＥ１０１溶出度测定无干扰。　ＬＥ１０１在２５．０３—４００．４８　ｇ／ｍｌ范围内，峰面积与浓度呈良好　的线性关系。平均回收率９９．９３％，ＲＳＤ为０．４７％。见表２。　表２三批样品溶出度测定结果　％　

２．２紫外分光光度法辅料对ＬＥ１０１溶出度测定无干扰。本　品１１．１６—８９．２８　ｇ／ｍｌ范围内与吸光度呈良好的线性关系。　平均回收率为９９．９０％，ＲＳＤ为０．６１％。溶出均一性试验表明　

ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－７３８６．２０１３．２２．０７３　雷公藤多苷抗炎作用的研究　

李晓琳　

样品的溶出均一性良好。见表３，图１。　３４８７　表３　三批样品溶出度测定结果　％　

１２Ｏ　ｌ０Ｏ　营。。　６０　茁　缝４０　

２Ｏ　Ｏ　阱同【分）　图１　１１０３０６批样品溶出均一性试验曲线图　

３讨论　药物溶出度检查是评价制剂品质和工艺水平的一种有效　手段，为了更好地控制产品的质量，对ＬＥＩＯ１片进行了溶出度　测定方法的研究。ＨＰＬＣ法和ｕＶ法溶出量测定结果基本一　致。但ｕＶ法更方便、快捷。因此可作为检测本品溶出度的方　法。可以在日后应用紫外分光光度法进行ＬＥＩＯ１片溶出度的　测定以控制片剂质量。　参考文献　１贾建静，李文莉，肖瑶，等．ＨＰＬＣ测定左乙拉西坦中的有关物质．华　西药学杂志，２０１　１，２６：３８２－３８３．　２刘俊杰．左乙拉西坦临床应用研究进展．首都医药，２０１　１，３：１２．１３．　３国家药典委员会主编．中华人民共和国药典．第２部．北京：中国医　学科技出版社。２０１０．８５．　（收稿日期：２０１１一Ｏ１—１５）　

・药物研究－￣５－Ｙ析・　

【关键词】　雷公藤多苷；抗炎剂（中药）；临床研究　【中图分类号】　Ｒ　９６１　【文献标识码】　Ａ　【文章编号】　１００２—７３８６（２０１３）２２—３４８７—０３　

雷公藤属于常见中药，有活血通络、祛风除湿、解毒杀虫、　消肿止痛之效，临床多被应用于类风湿、肾病、系统性红斑狼　疮、皮肤病等疾病，现代药理学研究证实其具有较好的抗肿瘤、　抗菌、抗炎、抗氧化、抗过敏等作用　。雷公藤多苷是从雷公藤　的去皮根部提取的总苷，开始应用于风湿类疾病，后又逐渐被　作者单位：３００１６２天津市，武警后勤学院附属医院药剂科　应用于肾病领域，张新安等将其作为免疫抑制药物应用于老年　原发性肾病综合征患者，达到较好的治疗效果　。本研究通过　动物实验探讨雷公藤多苷的抗炎作用，报道如下。　１材料与方法　１．１动物雄性小鼠２４只，中科院上海动物中心提供，体重　１８～２２　ｇ，随机分为６组，每组４只，分别为雷公藤多苷Ｉ、Ⅱ、　Ⅲ组、吲哚美辛组、模型组和空白对照组。雄性大鼠２４例。山