紫外分光光度法检测规程

依据：《GMP》与药品生产质量检验的要求目的：建立紫外分光度法检验标准操作规程范围：用于成品、原辅料鉴别、检查和含量测定1．仪器：紫外分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处理系统等部分组成。

为了满足紫外可见光区全波长范围的测定，仪器备有二种光源，即氘灯和碘钨灯，前者用于紫外区，后者用于可见光区2．检定2.1波长准确定2.1.1波长准确度的允差范围：双光束光栅型紫外一可见分光光度计波长准确度允许误差为±0.5mm。

单元束棱镜型350mm处±0.7nm，500nm处±2.0nm，700nm±4.8nm2.2吸收度准确度：精密称取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，置1000ml量瓶中，用硫酸液（0.005mol/l）为空白，在235、257、313、350nm分别测定吸收度，然后换算成E1%1cm，测得值应符合下表中规定的允差范围（±1%），国际药典规定的允差亦为±1%。

分光光度法允差范围波长（nm）吸收强度吸收系数（E1%/1cm）允差范围235最小124.5123.3－125.7257最大144.0142.6－145.4313最小48.6248.3－49.11350最大106.6105.5－107.7分辨率、杂散光、基线平直度、稳定度、绝缘电阻等项检定，按中华人民共和国国家计量检定规程JJ6682～90(双光束紫外可见分光光度计检定规程)执行，并应符合有关项下的规定。

日常常规测定主要是对以上两项时常检查。

3．样品测定操作法3.1 吸收系数测定(性状项下)按各该品种项下规定的方法配制供试品溶液，在规定的波长(参见4.8项)测定其吸收度，并计算吸收系数，应符合规定的范围。

3,2鉴别及检查：按各该品种项下的规定，测定供试品溶液在有关波长处的最小及最大吸收，有的并须测定其各最大吸收峰值或最大吸收与最小吸收的比值，均应符合规定。

紫外分光光度法检测标准操作规程1 目的建立紫外分光光度法检测标准操作规程，保证正确操作。

2 范围适用本公司紫外分光光度法检测标准操作规程。

3 责任质量管理部4 内容4.1引用标准《中华人民共和国药典》（2015年版）四部4.2 概述4.2.1 紫外分光光度法是通过被测物质在紫外光区的特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法，本法在药品检验中主要用于药品的鉴别、检查和含量测定。

4.3 定量分析通常选择在物质的最大吸收波长处测出吸收度，然后用对照品或百分吸收系数求算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定。

4.3.1对已知物质定性可用吸收峰波长或吸收度比值作为鉴别方法；若化合物本身在紫外光区无吸收，而杂质在紫外光区有相当强度的吸收，或在杂质的吸收峰处化合物无吸收，则可用本法作杂质检查。

4.3.2 原理物质对紫外辐射的吸收，是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生的，因此，紫外吸收主要决定于分子的电子结构，故紫外光谱又称电子光谱。

有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环或发色基团，均可在近紫外区（200-400nm）或可见光区（400-850nm）产生吸收。

通常使用的紫外分光光度计的工作波长范围为190—900nm，因此又称紫外—可见分光光度计。

紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图。

朗伯·比耳（lambert—Beer）定律为光的吸收定律，它是紫外分光光度法定量分析的依据，其数学表达式为:A=lg 1=ECL T式中：A 为吸收度T 为透光率E 为吸收系数C 为溶液浓度L 为光路长度若溶液的浓度（C）为1%（g/ml），光路长度（L）为1cm，相应的吸收系数为百分吸收系数，以E１％１ｃｍ表示。

若溶液的浓度（C）为摩尔浓度（mol/L），光路长度为1cm时，则相应吸收系数为摩尔吸收系数，以ε来表示。

4.4仪器：4.4.1紫外分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处理系统等部分组成。

紫外可见分光光度计操作规程一、仪器准备1.打开紫外可见分光光度计，等待它进行自检。

2.检查仪器是否正常，包括光源、检测器、单色器等。

如有故障，请及时修复或更换。

3.将样品室清洁干净，并检查透射池是否干净。

如有污染，请用纯水和无尘纸擦拭。

二、仪器校准1.对紫外可见分光光度计进行校准。

校准包括零点校准和波长校准。

2.零点校准：使用纯溶剂（例如纯水或纯乙醇）进行零点校准。

在选定的波长下，将溶剂放入透射池中，点击“零点校准”按钮进行校准。

3.波长校准：使用已知浓度且吸收峰位清晰的标准品进行波长校准。

在选定的波长下，将标准品放入透射池中，点击“波长校准”按钮进行校准。

三、样品测试1.取出已经准备好的样品，在样品室中放入透射池。

2.选择合适的波长范围和波长值。

根据样品的吸收峰位和浓度范围，选择一个适当的波长范围。

四、测量样品吸光度1.点击“开始”按钮进行测量。

仪器将在选定的波长下自动扫描，显示吸光度曲线。

2.观察吸光度曲线，确定样品的吸收峰位和吸光度值。

五、数据处理和结果记录1.根据吸光度曲线，确定样品的吸光度值。

可以选择峰值吸光度或在特定波长下的吸光度值。

2.如果需要，可以进行数据处理，例如计算吸光度差、构建标准曲线等。

3.记录测量结果，包括样品名称、浓度、波长范围、吸光度值等信息。

六、仪器维护1.测量完毕后，及时清洁透射池和样品室，避免样品残留。

2.关闭紫外可见分光光度计，并将仪器盖上，以防尘埃进入。

3.定期维护仪器，例如清洁光源、调整灯泡亮度等。

七、注意事项1.在操作过程中，避免直接接触光源和检测器，以免引起损坏。

2.使用纯净溶剂进行校准，避免杂质对测量结果的影响。

3.在进行波长校准时，选择已知浓度且吸收峰位清晰的标准品，以确保测量结果的准确性。

4.在清洁透射池时，使用纯净水和无尘纸进行擦拭，避免使用有机溶剂和粗糙材质。

5.操作过程中避免碰撞和震动仪器，以免影响测量结果。

6.长时间不使用时，及时关闭仪器，以延长仪器寿命。

绿茶提取物中茶多酚含量测定方法（UV）
一、仪器与试剂
仪器：移液管（1ml）；容量瓶（100、25ml）；分析天平（1/10000）；紫外分光光度计
试剂：超纯水；硫酸亚铁（AR）；酒石酸钾钠（AR）；磷酸氢二钠（AR）；磷酸二氢钾（AR）
二、试剂的配制
酒石酸亚铁溶液：称取1g（精确至0.0001g）硫酸亚铁和5g酒石酸
钾钠（精确至0.0001g）用水溶解并定容至
1000ml。

PH7.5磷酸盐缓冲液：称取23.377g磷酸氢二钠，加水溶解并定容至
1000ml；称取9.078g磷酸二氢钾（磷酸二氢
钾在110℃干燥2h）加水溶解柄定容至1000ml;
二溶液按85：15（V/V）混合均匀。

三、样品处理
称取本品40-45mg，置于50ml容量瓶中，加水，振摇使溶解，定容至刻度，摇匀，取5ml至25ml置容量瓶中，加水4ml，酒石酸铁溶液5ml，用PH7.5磷酸盐缓冲液定容至刻度，摇匀，即得。

四、紫外条件
检测波长：540nm
以试剂空白溶液对照
五、含量计算
茶多酚的含量按下式计算 X(%)=%1001000
50.0957.121⨯⨯⨯⨯⨯⨯M V V A A ：供试液吸光度；
1V ：供试品提取液；
2V ：测定时的取用量；
M ：供试品的称样量（g ）；
1.957:当吸光度等于0.50时，1ml 供试品溶液中含茶多酚相当于
1.957mg 。

1. 目的：建立用紫外分光光度法检测药品质量的标准操作规程，保证标准操作。

2. 引用标准：《中华人民国药典》（2015年版四部）通则。

3. 围：本标准适用于用紫外分光光度法进行的检测。

4. 责任人： QC检验员对本标准的实施负责，QC主管负责检查监督。

5. 容：5.1定义：紫外分光光度法是通过被测物质在紫外光区的特定波长处或一定波长围光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法，本法在药品检验中主要用于药品的鉴别、检查和含量测定。

5.1.1. 定量分析通常选择在物质的最大吸收波长处测出吸收度，然后用对照品或百分吸收系数计算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定。

5.1.2. 对已知物质定性可用吸收峰波长或吸光度比值作为鉴别方法；若化合物本身在紫外光区无吸收，而杂质在紫外光区有相当强度的吸收，或在杂质的吸收峰处该化合物无吸收，则可用本法作杂质检查。

5.2 原理：物质对紫外辐射的吸收，是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生的，因此，紫外吸收主要决定于分子的电子结构，故紫外光谱又称电子光谱。

有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环或发色基团，均可在近紫外区（200~400nm）或可见光区（400~760nm）产生吸收。

通常使用的紫外分光光度计的工作波长围为190~900nm，因此又称紫外-可见分光光度计。

紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图。

朗伯·比耳（lambert-Beer）定律为光的吸收定律，它是紫外分光光度法定量分析的依据，其数学表达式为：A=lg 1=ECL T式中：A 为吸光度T 为透光率E 为吸收系数C 为溶液浓度L 为光路长度若溶液的浓度（C）为1%（g/ml），光路长度（L）为1cm，相应的吸收系数为百分吸收系数，以E１％表示。

若溶液的浓度（C）为摩尔浓度（mol/L），光路长度为1cm时，１ｃｍ则相应吸收系数为摩尔吸收系数，以ε来表示。

5.3. 仪器：5.3.1. 紫外分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处理系统等部分组成。

可编辑修改精选全文完整版1.目的：建立紫外-可见分光光度法标准操作规程。

2.范围：适用于所有样品检验中的紫外-可见分光光度法。

3.责任：QC负责人及相关检测人员。

4.规程：4.1本标准依据《中国药典》2010年版二部附录4.2内容4.2.1简述紫外-可见分光光度法是通过被测物质在紫外光区或可见光区的特定波长处或一定波长范围内的吸光度，对该物质进行定性和定量分析的方法。

本法在药品检验中主要用于药品的鉴别、检查和含量测定。

4.2.2 仪器紫外-可见分光光度计：主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处理等部分组成。

4.2.3 样品测定操作方法4.2.3.1 吸收系数测定（性质项下）按各品种项下规定的方法配制供试品溶液，在规定的波长处测定其吸光度，并计算吸收系数，应符合规定范围。

4.2.3.2 鉴别及检查按各品种项下的规定，测定供试品溶液的最大及最小吸收波长，有的并须测定其在最大吸收波长与最小吸收波长处的吸光度比值，均应符合规定。

4.2.3.3 含量测定4.2.3.3.1 对照品比较法按各品种项下规定的方法，分别配制供试品溶液和对照品溶液，对照品溶液中所含被测成分的量应为供试品溶液中被测成分标示量的100%±10%以内，用同一溶剂，在规定的波长处测定供试品溶液和对照品溶液的吸光度。

4.2.3.3.2 吸收系数法按各品种项下配制供试品溶液，在规定的波长及波长±2nm处测定其吸光度，按各品种在规定条件下给出的吸收系数计算含量。

用本法测定时，吸收系数通常应大于100，并注意仪器的校正和检定，如测定新品种的吸收系数，需按后列“吸收系数测定法”的规定进行。

4.2.3.3.3 计算分光光度法按中国药典规定，计算分光光度法一般不宜用于含量测定，对于少数采用计算分光光度法的品种，应严格按各品种项下规定的方法进行。

4.2.3.3.4 比色法供试品本身在紫外-可见光区没有强吸收，或在紫外光区虽有吸收但为了避免干扰或提高灵敏度，加入适当的显色剂，使反应产物的最大吸收移至可见光区。

1. 目的：建立用紫外分光光度法检测药品质量的标准操作规程，保证标准操作。

2. 引用标准：《中华人民共和国药典》（2015年版四部）通则。

3. 范围：本标准适用于用紫外分光光度法进行的检测。

4. 责任人： QC检验员对本标准的实施负责，QC主管负责检查监督。

5. 内容：定义：紫外分光光度法是通过被测物质在紫外光区的特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法，本法在药品检验中主要用于药品的鉴别、检查和含量测定。

5.1.1. 定量分析通常选择在物质的最大吸收波长处测出吸收度，然后用对照品或百分吸收系数计算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定。

5.1.2. 对已知物质定性可用吸收峰波长或吸光度比值作为鉴别方法；若化合物本身在紫外光区无吸收，而杂质在紫外光区有相当强度的吸收，或在杂质的吸收峰处该化合物无吸收，则可用本法作杂质检查。

原理：物质对紫外辐射的吸收，是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生的，因此，紫外吸收主要决定于分子的电子结构，故紫外光谱又称电子光谱。

有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环或发色基团，均可在近紫外区（200~400nm）或可见光区（400~760nm）产生吸收。

通常使用的紫外分光光度计的工作波长范围为190~900nm，因此又称紫外-可见分光光度计。

紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图。

朗伯·比耳（lambert-Beer）定律为光的吸收定律，它是紫外分光光度法定量分析的依据，其数学表达式为：1式中：A 为吸光度T 为透光率E 为吸收系数C 为溶液浓度L 为光路长度若溶液的浓度（C）为1%（g/ml），光路长度（L）为1cm，相应的吸收系数为百分吸收系数，以E表示。

若溶液的浓度（C）为摩尔浓度（mol/L），光路长度为1cm时，则相应吸收系数为摩尔吸收系数，以ε来表示。

. 仪器：5.3.1. 紫外分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处理系统等部分组成。

1.目的：建立紫外-可见分光光度法(一部)检验标准操作规程，并按规程进行检验，保证检验操作规范化。

2. 依据：2.1. 《中华人民共和国药典》2010年版一部。

3. 范围：适用于所有用紫外-可见分光光度法(一部)测定的供试品。

4. 责任：检验员、质量控制科主任、质量管理部经理对本规程负责。

5. 正文：5.1. 仪器的校正和检定。

5.1.1. 波长：由于环境因素对机械部分的影响，仪器的波长经常会略有变动，因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外，还应于测定前校正测定波长。

常用汞灯中的较强谱线237.83nm、253.65nm、275.28nm、296.73nm、313.16nm、334.15nm、365.02nm、404.66nm、435.83nm、546.07nm与576.96nm，或用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线进行校正；钬玻璃在279.4nm、287.5nm、333.7nm、360.9nm、418.5nm、460.0nm、484.5nm、536.2nm与637.5nm波长处有尖锐吸收峰，也可作波长校正用，但因来源不同或随着时间的推移会有微小的变化，使用时应注意；近年来，常使用高氯酸钬溶液校正双光束仪器，以10%高氯酸溶液为溶剂，配制含氧化钬（Ho2O3）4%的溶液，该溶液的吸收峰波长为241.13nm，278.10nm，287.18nm，333.44nm，345.47nm，361.31nm，416.28nm，451.30nm，485.29nm，536.64nm和640.52nm。

仪器波长的允许误差为：紫外光区±1nm，500nm附近±2nm。

5.1.2. 吸光度的准确度：可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。

取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定 ，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，在规定的波长处测定并计算其吸收系数，并与规定的吸收系数比较，应符合表中的规定。

页数：1/5起草：日期：审核：日期：批准：日期：生效日期：签字：拷贝号：制定（变更）原因及目的：变更记载：修订号批准日期生效日期000102生产部[ ]份计划供应室[ ]份质量部QA [ ]份分发部门生产车间[ ]份仓储管理室[ ]份质量部QC [ ]份(档案存档1份)设备部[ ]份销售管理室[ ]份办公室[ ]份紫外分光光度法操作规程1.适用范围：适用于本厂品种紫外分光光度法检验。

2.职责QC检验员：严格按照操作规程进行检验。

QC主管：监督检查操作规程执行情况。

3.内容紫外分光光度法是通过被测物质在在紫外光区的特定波长处或一定波长范围内的吸收度，对该物质进行定性分析和定量分析的方法。

本法在药品检验中主要用于药品的鉴别、检查、含量测定。

3.1 紫外分光光度计的检定3.1 波长准确度3.1.1 波长准确度的允差范围双光束光栅型紫外-可见分光光度计波长准确度允许误差为±0.5nm。

单光束棱镜型350nm处±0.7nm，500nm处±2.0nm，700处±4.8nm。

3.1.2 波长准确度检定方法用氧化钬玻璃检定将氧化钬玻璃放入样品光路,参比光路为空气，按测定吸收光谱图方法测定。

校正自动记录仪器时，应考虑记录仪的时间常数，测定样品与校正时取同一扫描速度。

氧化钬玻璃在279.4,287.5,333.7,360.9,418.7,460.0,484.5,536.2及637.5nm波长处有尖锐的吸收峰,可供波长检定用。

氧化钬玻璃因制造的原因，每片氧化钬的吸收峰波长有差异，应使用经计量部门校验过的。

3.2 吸收度准确度精密称取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约600mg ，置1000ml 量瓶中，用硫酸液（0.005mol/L ）溶解并稀释至1000ml,用配对的1cm 石英池,以硫酸液(0.005mol/l)为空白,在235,257,313,350nm 分别测定吸收度,然后换算成，测得值应符合下表中%11cm E 规定的允差范围（±1%）。

紫外—可见分光光度计运行检查规程1 目的为使仪器设备在两次校准的有效期内, 关键仪器的关键量值维持良好的置信度, 特制定本程序。

2 范围2.1 本程序适用于食品室北京普析T6紫外—可见光分光光度计的期间核查。

2.2 本程序仅适用于具有仪器分析及实验室工作经验的人员使用。

3 权责3.1 仪器操作人员必须按照指导书进行作业, 实验室技术负责人有监管职责。

3.2质量负责人审核期间核查结果并负责组织处理核查发现的不符合项目。

4 定义本程序所用相关术语的定义JJG375—1996 《单光束紫外-可见分光光度计检定规程》。

5 原子吸收分光光度计（AAS）的期间核查作业内容5.1 概述本期间核查参考JJG375—1996 《单光束紫外-可见分光光度计检定规程》制定。

核查内容覆盖大部分检定规程要求。

核查频率每年一次, 时间为距上次外校6个月时。

5.2 检定条件5.2.1 环境条件5.2.1.1 温度: （10 ～ 30）℃；相对湿度不大于 85%。

5.2.1.2 电源: 电压为（220±22）V；频率为（50±1）Hz 。

5.2.1.3 仪器不应受强光直射, 周围无强磁场、电场干扰, 无强气流及腐蚀性气体。

5.2.2 检定设备5.2.2.1 调压变压器:500W;输出（0～250）V。

5.2.2.2 兆欧表:试验电压 500V；万用表: 2.5 级；秒表:分度值 0.1s。

5.2.3 标准器与标准物质5.2.3.1 石英汞灯5.2.3.2 氧化钬玻璃片、氧化钬溶液、镨钕、镨铒等滤光片, 要求在≤5nm 范围内, 给出 3 个带宽下的波长标准值。

5.2.3.3 标准干涉滤光片, 波长最大允差不超过±1 nm, 光谱带宽＜15 nm, 峰值波长的参考范围如下：(370 ～400)nm ,(430 ～470)nm,(530 ～570)nm,(660～ 690)nm,(760 ～790)nmADSZ/03—SP—QJ006—20075.2.3.4 光谱中性滤光片, 其标称值为 10%、20%、30%（40%）；苯(二级)；1,2,4-三氯苯(三级)。

紫外分光光度法检测规程目的：5. 程序：5.1. 定义：紫外分光光度法是通过被测物质在紫外光区或可见光区的特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法，本法在药品检验中主要用于药品的鉴别、检查和含量测定。

5.1.1. 定量分析通常选择在物质的最大吸收波长处测出吸收度，然后用对照品或百分吸收系数求算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定。

5.1.2. 对已知物质定性可用吸收峰波长或吸收度比值作为鉴别方法；若化合物本身在紫外光区无吸收，而杂质在紫外光区有相当强度的吸收，或在杂质的吸收峰处化合物无吸收，则可用本法作杂质检查。

5.2. 原理：物质对紫外辐射的吸收是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生的，因此，紫外吸收主要决定于分子的电子结构，故紫外光谱又称电子光谱。

有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环或发色基团，均可在近紫外区（200-400nm）或可见光区（400-850nm）产生吸收。

通常使用的紫外分光光度计的工作波长范围为190—900nm，因此又称紫外—可见分光光度计。

紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图。

朗伯·比耳（lambert—Beer）定律为光的吸收定律，它是紫外分光光度法定量分析的依据，其数学表达式为：A=lg 1=ECL T式中：A 为吸收度T 为透光率E 为吸收系数C 为溶液浓度L 为光路长度如溶液的浓度（C）为1%（g/ml），光路长度（L）为1cm，相应的吸收系数为百分吸收系数，以E１％１ｃｍ表示。

若溶液的浓度（C）为摩尔浓度（mol/L），光路长度为1cm时，则相应吸收系数为摩尔吸收系数，以ε来表示。

5.3. 仪器：5.3.1. 紫外分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处理系统等部分组成。

5.3.2.为了满足紫外—可见光区全波长范围的测定，仪器备有二种光源，即氘灯和碘钨灯，前者用于紫外区，后者用于可见光区。

紫外分光操作规程
《紫外分光操作规程》
一、目的
本操作规程旨在规范紫外分光操作流程，确保实验数据的准确性和可靠性。

二、仪器准备
1. 打开紫外分光仪电源，保证仪器处于工作状态。

2. 检查仪器光路和光源是否正常，如有异常情况及时进行维护和调整。

三、样品准备
1. 根据实验要求准备样品溶液，确保溶液浓度适当。

2. 过滤样品溶液，避免杂质影响测量结果。

四、操作步骤
1. 将样品溶液注入样品池中，确保样品池干净并无气泡。

2. 选择合适的波长范围和扫描速度，进行基线调整。

3. 点击开始测量，记录实验数据。

五、实验数据处理
1. 绘制样品吸光度曲线，分析吸光峰和波长。

2. 根据实验要求计算样品的吸光度和浓度。

六、仪器维护
1. 实验结束后，清洗样品池和光路，保持仪器清洁。

2. 关闭仪器电源，注意安全操作。

七、注意事项
1. 避免直接接触紫外光线，使用紫外透明眼镜和手套。

2. 严格按照操作规程进行操作，避免误操作导致仪器损坏或实验数据失真。

通过严格按照《紫外分光操作规程》进行操作，可以确保紫外分光实验的顺利进行，得到准确可靠的实验数据。

紫外 -可见分光光度法1简述紫外 -可见分光光度法是在 190-800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴识、杂质检查和含量测定的方法。

定量剖析往常选择物质的最大汲取波优点测出吸光度，而后用比较品或汲取系数求算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定；对已知物质定性可用汲取峰波长或吸光度比值作为鉴识方法；若该物质自己在紫外光区无汲取，而其杂质在紫外光区有相当强度的汲取，或杂质的汲取峰处该物质无汲取，则可用本法作杂质检查。

物质对紫外辐射的汲取是因为分子中原子的外层电子跃迁所产生，所以，紫外汲取主要决定于分子的电子构造，故紫外光谱又称电子光谱。

有机化合物分子构造中如含有共轭系统、芬芳环等发色基团，均可在紫外区（200~400nm）或可见光区（ 400~850nm）产生汲取。

往常使用的紫外- 可见分光光度计的工作波长范围为190~900nm。

紫外汲取光谱为物质对紫外区辐射的能量汲取图。

朗伯-比尔（ Lambert-Beer）定律为光的汲取定律，它是紫外 -可见分光光度法定量剖析的依照，其数学表达式为:1A=log =ECLT式中 A 为吸光度 ;T为透光率 ;E为汲取系数 ;C为溶液浓度 ;L为光路长度。

如溶液的浓度（ C）为1%（g/ml ），光路长度（ L ）为 lcm，相应的吸光度即为汲取系数以 E1cm1%表示。

如溶液的浓度（ C）为摩尔浓度（ mol/L ），光路长度为 lcm 时，则相应有汲取系数为摩尔汲取系数，以ε表示。

2仪器紫外 -可见分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据办理系统等部分构成。

为了知足紫外 -可见光区全波长范围的测定，仪器备有二种光源，即氘灯和碘钨灯，前者用于紫外区，后者用于可见光区。

单色器往常由进光狭缝、出光狭缝、平行光装置、色散元件，聚焦透镜或反射镜等构成。

色散元件有棱镜和光栅二种，棱镜多用天然石英或熔融硅石制成，对200~40Onm波长光的色散能力很强，对 600nm以上波长的光色散能力较差，棱镜色散所得的光谱为非匀排光谱。

uv254的检测标准方法UV-254（紫外-可见分光光度法）是一种常用的水质检测方法，主要用于测定水中有机物的荧光特性。

这种方法具有灵敏度高、操作简便、成本低廉等优点，因此在环境监测、工业废水检测等领域得到了广泛应用。

本文将介绍UV-254的检测标准方法，包括原理、仪器设备、试剂和样品采集、处理、分析步骤及注意事项等。

一、原理UV-254检测方法基于有机物在紫外-可见光区的荧光特性，通过测量水中有机物在特定波长范围内的荧光强度，从而确定水中有机物的浓度。

在一定浓度范围内，水中有机物的浓度与荧光强度呈线性关系。

通过标准曲线法或截距法等统计方法，可求得水中有机物的浓度。

二、仪器和试剂1. 紫外可见分光光度计：用于测量荧光强度。

2. 离心管或比色管：用于采集和处理样品。

3. 荧光剂：用于增强样品的荧光效应。

4. 盐酸和硝酸：用于消解样品和溶解荧光剂。

5. 无水硫酸钠：用于样品过滤和纯化。

6. 去离子水：用于配制标准溶液和制备标准曲线。

三、样品采集、处理及分析步骤1. 采集样品：取适量水样于离心管或比色管中，加入适量荧光剂和盐酸/硝酸混合酸，振荡混合后静置一定时间。

2. 样品处理：离心或过滤去除悬浮物，取上清液进行荧光强度测量。

若需要，可使用无水硫酸钠进行样品纯化。

3. 标准曲线绘制：采用不同浓度的标准溶液，绘制荧光强度与浓度之间的关系曲线。

可根据曲线形状选择合适的统计方法，如线性回归等。

4. 测量与数据处理：使用紫外可见分光光度计测量样品的荧光强度，根据标准曲线求得相应浓度。

若需要，可使用统计学方法对数据进行处理和分析。

四、注意事项1. 确保样品的采集和处理过程符合相关规定，避免引入干扰因素。

2. 在使用荧光剂时，应遵循安全操作规程，避免对人体和环境造成危害。

3. 确保紫外可见分光光度计的稳定性和准确性，定期进行校准和保养。

4. 在绘制标准曲线时，应选择具有代表性的标准溶液浓度范围，确保曲线的适用性。

1. 目的：建立用紫外分光光度法检测药品质量的标准操作规程，保证标准操作。

2. 引用标准：《中华人民共和国药典》（2015年版四部）通则。

3. 范围：本标准适用于用紫外分光光度法进行的检测。

4. 责任人： QC 检验员对本标准的实施负责，QC 主管负责检查监督。

5. 内容：定义：紫外分光光度法是通过被测物质在紫外光区的特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法，本法在药品检验中主要用于药品的鉴别、检查和含量测定。

5.1.1. 定量分析通常选择在物质的最大吸收波长处测出吸收度，然后用对照品或百分吸收系数计算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定。

5.1.2. 对已知物质定性可用吸收峰波长或吸光度比值作为鉴别方法；若化合物本身在紫外光区无吸收，而杂质在紫外光区有相当强度的吸收，或在杂质的吸收峰处该化合物无吸收，则可用本法作杂质检查。

原理：物质对紫外辐射的吸收，是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生的，因此，紫外吸收主要决定于分子的电子结构，故紫外光谱又称电子光谱。

有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环或发色基团，均可在近紫外区（200~400nm ）或可见光区（400~760nm ）产生吸收。

通常使用的紫外分光光度计的工作波长范围为190~900nm ，因此又称紫外-可见分光光度计。

紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图。

朗伯·比耳（lambert-Beer ）定律为光的吸收定律，它是紫外分光光度法定量分析的依据，其数学表达式为：A=lg 1 =ECL式中：A 为吸光度T 为透光率E 为吸收系数C 为溶液浓度L 为光路长度若溶液的浓度（C）为1%（g/ml），光路长度（L）为1cm，相应的吸收系数为百分吸收系数，以E表示。

若溶液的浓度（C）为摩尔浓度（mol/L），光路长度为1cm时，则相应吸收系数为摩尔吸收系数，以ε来表示。

. 仪器：5.3.1. 紫外分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处理系统等部分组成。

紫外-可见分光光度法标准操作程序1 简述紫外-分光光度法是通过被测物质在特定波长处或一定波长长范围内的吸光度或发光强度，对该物质进行定性和定量分析的方法。

本法的在药品检验中主要用于药品的鉴别、检查和含量测定。

定量分析通常选择物质的最大吸收波长处测出吸光度，然后用对照品或百分吸收系数求算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定；对已知物质定性可用吸收峰波长或吸光度比值作为鉴别方法；若化合物本身在紫外光无吸收，而杂质在紫外光区有相当强度的吸收，或杂质的吸收峰化合物无吸收，则可用本法作检查。

物质对紫外辐射的吸收是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生的。

因此，紫外吸收主要决定于分子的电子结构，故紫外光谱又称电子光谱。

有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环或发色基团，均可在近紫外区(200-400nm)或可见光区(400-850nm)产生吸收。

通常使用紫外分光光度计的工作波长范围为190-900nm，因此又称紫外-可见分光光度计。

紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图。

朗伯－比尔（Lambert-beer）定律为光的吸收定律，它是紫外分光光度法定量分析的依据，其数学表达式为：Ａ=log1/T=ECL式中Ａ为吸光度；Ｔ为透光率；Ｅ为吸收系数；Ｃ溶液浓度；Ｌ为光路长度。

如溶液的浓度（Ｃ）为1%（g/ml），光路长度(L)为1cm，相应的吸收系数为百分吸收系数，以E 表示。

如溶液的浓度(C)为摩尔浓度(mol/L)，液层厚度为1cm时，则相应有吸收系数为摩尔吸收系数，以ε表示。

2 仪器紫外-可见分光光度计：主要由光源、单色器，样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处理系统等部分组成。

为了满足紫外-可见光区全波长范围的测定，仪器备有二种光源，即氘灯和碘钨灯，前者用于紫外区，后者用于可见光区。

单色器通常由进光狭缝、出光狭缝、平行光装置、色散元件、聚焦透镜或反射镜等组成。

色散元件有棱镜和光栅二种，棱镜多用天然石英或熔融硅石制成，对200~400nm波长光的色散能力很强，对600nm以上波长的光色散能力较差，棱镜色散所得的光谱为非匀排光谱。

分 发 部 门 质量治理部文件名称紫外分光光度法检测标准操作规程文件编 码 SW10-04-002-00 页数 第 1 页 共 9 页制 定 人 审 核 人 制定日期 年 审核日期 年 月 月 日 日颁发部门质量治理部批 准 人批准日期年月日 生效日 期年 月 日紫外分光光度法检测标准操作规程1 目的建立紫外分光光度法检测标准操作规程，保证正确操作。

2 范围适用本公司紫外分光光度法检测标准操作规程。

3 责任质量治理部4 内容4.1 引用标准《中华人民共和国药典》〔2023 年版〕四部4.2 概 述4.2.1 紫外分光光度法是通过被测物质在紫外光区的特定波特长或肯定波长范围内光的吸取度，对该物质进展定性和定量分析的方法，本法在药品检验中主要用于药品的鉴别、检查和含量测定。

4.3 定量分析通常选择在物质的最大吸取波特长测出吸取度，然后用比照品或百分吸取系数求算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定。

4.3.1 对物质定性可用吸取峰波长或吸取度比值作为鉴别方法；假设化合物本身在紫外光区无吸取，而杂质在紫外光区有相当强度的吸取，或在杂质的吸取峰处化合物无吸取，则可用本法作杂质检查。

4.3.2 原理 物质对紫外辐射的吸取，是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生的，因此，紫外吸取主要打算于分子的电子构造，故紫外光谱又称电子光谱。

有机化合物分子构造中如含有共轭体系、芳香环或发色基团，均可在近紫外区〔200-400nm〕或可见光区〔400-850nm〕产生吸取。

通常使用的紫外分光光度计的工作波长范围为 190—900nm，因此又称紫外—可见分光光度计。

紫外吸取光谱为物质对紫外区辐射的能量吸取图。

朗伯·比耳〔lambert—Beer〕定律为光的吸取定律，它是紫外分光光度法定量分析的依据，其数学表达式为:A=lg 1=ECL T式中：A 为吸取度T 为透光率E 为吸取系数C 为溶液浓度L 为光路长度假设溶液的浓度〔C〕为 1%〔g/ml〕，光路长度〔L〕为 1cm，相应的吸取系数为百分吸取系数，以 E １％表示。