硫氢化钠检测方法

网络出版时间：２０２３－０７－２５１１：５３：２１　网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｌｉｎｋ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｕｒｌｉｄ／３４．１０８６．Ｒ．２０２３０７２４．１３４５．０５２◇实验方法学◇荧光探针法检测脏器硫化氢方法的建立及验证李　娜１，２，樊修和１，王　征１，胡　伟１，杨浩东１，熊洋洋１，于金高１，２（陕西中医药大学１．陕西中药资源产业化省部共建协同创新中心，秦药特色资源研究开发国家重点实验室（培育），陕西省创新药物研究中心，２．陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室，陕西咸阳　７１２０４６）收稿日期：２０２３－０１－１１，修回日期：２０２３－０４－１０基金项目：国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８２００３９６４）；陕西中医药大学校级科研课题（ＮｏＣＸＳＪ２０２３３４）作者简介：李　娜（１９９６－），女，硕士生，研究方向：药物作用及机制，Ｅ ｍａｉｌ：ｌｎｓｈ０２１６＠１６３．ｃｏｍ；于金高（１９８９－），男，博士，副教授，硕士生导师，研究方向：药物相互作用及其毒效转化，通信作者，Ｅ ｍａｉｌ：ｊｉｎｇａｏ＿ｙｕ＠ｓｉｎａ．ｃｎｄｏｉ：１０．１２３６０／ＣＰＢ２０２２１０００７文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２３）０８－１５９２－０７中国图书分类号：Ｒ ３３２；Ｒ１９４．３；Ｒ３９４；Ｒ７３；Ｒ９８１．９摘要：目的　快速制备并分离纯化硫化氢特异性荧光探针（ＷａｓｈｉｎｇｔｏｎＳｔａｔｅＰｒｏｂｅ ５），建立动物组织中硫化氢的荧光探针测定法，并在癌性胸水模型中进行方法适用性验证。

方法　优化条件分离纯化ＷＳＰ ５；对荧光探针反应液配制溶剂、ＤＭＳＯ加入体积、ｐＨ、反应液溶剂和反应液体积、样品前处理温度、研磨次数、研磨后静置时间等条件进行考察；以Ｓ １８０腹水瘤细胞建立癌性胸水小鼠模型，测定小鼠各脏器中的硫化氢含量。

结果　以硅胶和葡聚糖凝胶为固定相，二氯甲烷－甲醇－甲酸（６０∶１∶０ １，Ｖ／Ｖ／Ｖ）和二氯甲烷－甲醇（１∶１，Ｖ／Ｖ）为洗脱剂制备ＷＳＰ ５纯品；动物组织样本和硫氢化钠标准溶液加入优化后的５倍量冰冷反应液，低温研磨、高速离心，上清液避光孵育１２ｈ，测定荧光强度并计算硫化氢浓度；该方法检测限约０ ６μｍｏｌ·Ｌ－１，定量限１μｍｏｌ·Ｌ－１，在硫氢化钠一定浓度范围内，浓度与荧光强度线性系数均大于０９９；在癌性胸水小鼠模型中，各脏器硫化氢含量随着注射癌细胞数量的增多均有不同程度的增加趋势。

硫的测定方法－燃烧中和法1、方法提要试样在空（氧）气流中1250－1300℃燃烧分解，将硫转化为二氧化硫被过氧化氢水溶液吸收生成硫酸。

以甲基红－次甲基蓝为指示剂，用氢氧化钠标准溶液滴定，借以测定硫。

主要反应如下：OH OH H H SO O H SO 224222→++→+-++-2、试剂配制2.1 混合指示剂 取甲基红0.02克，溶于乙醇50毫升中；取次甲基蓝0.01克，溶于水50毫升中。

然后互相混合，贮于棕色滴瓶中。

2.2 过氧化氢 3% 取30%过氧化氢（市售试剂）10毫升，用水稀释至100毫升。

现配。

2.3 氢氧化钠标准溶液 0.03（0.003）N 取氢氧化钠6（0.6）克，溶于水中。

移入塑瓶中，加水至5000毫升。

加氯化钡5克，搅匀，置放澄清。

加硫酸钠2.5克，搅匀，放置过夜，取清液使用。

标定称经110－120℃烘2小时的邻苯二甲酸氢钾（基准试剂）0.1500克于250毫升烧杯中。

加冷沸水100毫升，溶解。

加0.5%酚酞5滴，用0.03N 氢氧化钠标准溶液滴定至红色终点。

浓度计算：V W T 07850.0=式中 T －氢氧化钠标准溶液对硫的滴定度（克／毫升）V －氢氧化钠标准溶液耗量（毫升） W －邻苯二甲酸氢钾用量（克）0.07850－邻苯二甲酸氢钾换算成硫的因素。

2.4 其它 3、分析手续称取试样0.1000（含量小于1%，0.5000；大于20%，0.0500）克于瓷舟中加纯铜片0.2克。

待管式炉升温1250－1300℃，检查密封程度和气流畅通状况。

向吸收杯中注入3%过氧化氢80毫升，加混合指示剂数滴。

调节气流速度（每秒4－5个气泡），滴加0.03N 氢氧化钠标准溶液至亮绿色，停止通气。

将盛有试样的瓷舟推入燃烧管高温处，立即塞紧通气管胶塞，预热10－20秒钟，小心通气5－8分钟，用0.03N 氢氧化钠标准溶液滴定至亮绿色不变为终点。

用相当含量标样同时标定。

计算：100%⨯⨯=G V T S式中 T －氢氧化钠标准溶液对硫的滴定度（克／毫升） V －氢氧化钠标准溶液耗量（毫升）G －试样量（克） 用标样标定时：0%V V B S ⨯=式中 B －标样硫百分含量V0－标样消耗氢氧化钠标准溶液耗量（毫升） V －试样消耗氢氧化钠标准溶液耗量（毫升）。

I2＋Na2S2O3＝2Nal＋Na2S4O6 1.2 仪器与试剂
恒温水浴：
2%醋酸锌镉溶液：称 1 g 醋酸镉与 1 g 醋酸锌溶于 100 ml 水中，加冰醋酸 0.6 ml；0.01 N 碘标准溶 液；0.01 N 硫代硫酸钠标准溶液；1 : 2 盐酸溶液；0.5%淀粉溶液；浓氨水（25%～28%）。
溶液的总碱度、pH 值以及所用催化剂的含量。至于溶液中的悬浮硫、Na2CO3、NaHCO3 以及 Na2S2O3、 Na2SO4 等诸多成分很少分析（在焦化行业表现尤为突出）。像溶液中硫氢根离子含量的定量分析更是少 之又少。下面从理论上阐述脱硫液中硫氢根离子的测定及在生产运行中的重要意义。
1 硫氢化钠的测定（以 Na2CO3 为碱源的脱硫液为例） 1.1 原理
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0.01704 —— 硫化氢的毫克当量，g；
10 —— 取样液的体积，ml。
1.5 注意事项
（1）现场取样时速度要快并取满 1 瓶，不留空间，以防止 HS- 被氧化而损失。
（2）由于是从大量的硫代硫酸盐、多硫化物中分离硫化镉，所以洗涤一定要彻底。
2 硫氢根离子的测定及在生产运行中的重要意义
我们知道脱硫液吸收 H2S 是按照如下化学反应进行的（以 Na2CO3 为碱源为例）：
这些数据分析你会少走许多弯路，且能很快判断出问题的根源，给解决问题带来极大的方面。
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空白试验：
在 80 ml 水中加入 20 ml 碘溶液，5ml 1 : 2 盐酸，3 ml 0.5%淀粉溶液，用 0.01 N 硫代硫酸钠标准溶 液滴定至蓝色消失。
1.4 计算
H 2S(g
/L)ຫໍສະໝຸດ =(V1−
V2
)
×
N × 0.01704 ×103 10

硫化物地下水(特别是温泉水)及生活污水，通常含有硫化物，其中一部分是在厌氧条件下，由于细菌的作用，使硫酸盐还原或由含硫有机物的分解而产生的。

某些工矿企业，如焦化、造气、选矿、造纸、印染和制革等工业废水亦含有硫化物。

水中硫化物包括溶解性的H2S、HS¯、S2¯，存在于悬浮物中的可溶性硫化物、酸可溶性金属硫化物以及末电离的有机、无机类硫化物。

硫化氢易从水中逸散于空气，产生臭味，且毒性很大，它可与人体内细胞色素、氧化酶及该类物质中的二硫键（—S—S—)作用，影响细胞氧化过程，造成细胞组织缺氧，危及人的生命。

硫化氢除自身能腐蚀金属外，还可被污水中的生物氧化成硫酸进而腐蚀下水道等。

因此，硫化物是水体污染的一项重要指标(清洁水中，硫化氢的嗅阀值为0.035µg／L)。

本书所列方法测定的硫化物是指水和废水中溶解性的无机硫化物和酸溶性金属硫化物。

1．方法的选择测定上述硫化物的方法，通常有亚甲蓝比色法和碘量滴定法以及电极电位法。

当水样中硫化物含量小于1mg／L时，采用对氨基二甲基苯胺光度法，样品中硫化物含量大于1mg／L时，采用碘量法。

电极电位法具有较宽的测量范围，它可测定10-6--101mo1／L之间的硫化物。

2．水样保存由于硫离子很容易氧化，硫化氢易从水样中逸出。

因此在采集时应防止曝气，并加入一定量的乙酸锌溶液和适量氢氧化钠溶液，使呈碱性并生成硫化锌沉淀。

通常1L水样中加入2mo1/L[1／2Zn(Ac)2)]的乙酸锌溶液2ml，硫化物含量高时，可酌情多加直至沉淀完全为止。

水样充满瓶后立即密塞保存。

水样的预处理由于还原性物质，例如硫代硫酸盐、亚硫酸盐和各种固体的、溶解的有机物都能与碘起反应，并能阻止亚甲蓝和硫离子的显色反应而干扰测定；悬浮物、水样色度等也对硫化物的测定产生干扰。

若水样中存在上述这些干扰物时，必须根据不同情况，按下述方法进行水样的预处理。

1．乙酸锌沉淀-过滤法当水样中只含有少量硫代硫酸盐、亚硫酸盐等干扰物质时，可将现场采集并已固定的水样，用中速定量滤纸或玻璃纤维滤膜进行过滤，然后按含量高低选择适当方法，直接测定沉淀中的硫化物。