5）β—半乳糖苷酶基因（lacZ 和lacZα）
β—半乳糖苷酶基因有1021 AAs，基因产物不具酶活性， 装配为四聚体后才有酶活。该蛋白质可分为两部分：α链和 β链。前者负责四聚体装配，后者具β—半乳糖苷酶活性； 只有当两者都存在时，才会表现出酶活性，该作用称之为 α-互补作用。这两个部分可独立存在， 分别由两个基因编 码。为α链编码的基因称之为lacZα(编码145 AAs)。这两个 基因（LacZ和LacZα）均可作为标记基因。
3）生化标记基因
其表达产物可催化某些易检测的生化反应，如lacZ,
GUS, CAT
4） 噬菌斑
3. 使用标记基因注意要点
1）标记基因与宿主细胞 2）标记基因产物的作用机制: Apr 3）标记基因的结构与适用范围: 基因启动子, 翻译起始
序列, 密码子偏爱性
4）标记基因的结构变化对功能的影响与种类
1. 复制起点的种类
1) 核内复制起点 a. 染色体复制起点—原核生物(环状)和真核生物(线 状)染色体 b. 染色体外复制起点 i. 质粒—DNA,RNA,线状,环状,单链,双链 原核与真核生物 ii. 病毒—同上, 细胞内和病毒颗粒内
第一节
分子克隆载体的特点
一、发展概况
1. 第一阶段（1977年前）：天然质粒和重组质粒的
利用，如pSC101, colE1, pCR, pBR313和pBR322 (1977, Bolivar et al)
2. 第二阶段：增大载体容量（降低载体长度），建
立多克隆位点区和新的遗传标记基因。如pUC系列 载体。
2. 标记基因的种类
1）抗性标记基因（可直接用于选择转化子）
a. 抗生素抗性基因: Apr ，Tcr ，Cmr，Kanr，G418r， Hygr ，Neor
