分子诊断策略与常用技术PPT课件( 23页)

第23 章 基因治疗
Gene therapy
李 凌
第一军医大学分子生物学研究所
传统治疗方法
1. 2. 3. 4. 药物治疗 手术治疗 放射治疗 理疗
• 新的生物治疗： • 基因治疗(gene therapy)
基因治疗
一、概念
二、策略
三、基本流程 四、应用与展望
一、基因治疗的概念
• Gene therapy is a medical intervention
(1) 自杀基因疗法
• 将一些来源于病毒或细菌的基因导入肿瘤细胞
• 该基因表达产生的酶可催化无毒性的药物前体 转变为细胞毒性物质，从而杀死肿瘤细胞； • 同时通过“旁观者效应”（bystander effect） 杀死邻近未导入该基因的分裂细胞而显著扩大 杀伤效应。 • 由于携带该基因的受体细胞本身也被杀死，所 以这类基因被称为“自杀基因”。
反义基因疗法
Targeted inhibition of gene expression
反义技术
• 导入特定的反义核酸 • • 反义RNA 核酶（ribozyme）
• 使RNA失活 • 转录和翻译水平
核 酶
催化RNA切割和RNA剪接
Recognition sequences
“hammerhead” ribozymes
胞内，使其在体内有效表达，最终达到治疗 疾病目的的方法，均称之为基因治疗。
二、基因治疗的策略
(一) 直接策略：
• 针对致病基因
(二) 间接策略：
• 导入与致病基因无直接联系的治疗基因
(一)直接策略
1. 基因矫正（gene correction）
2. 基因置换（gene replacement）

are most frequently used: resctriction
enzyme analysis, the heteroduplex
analysis, ARMS, reverse hybridization
and OLA.
Cystic fibrosis：囊胞性纤维症
heteroduplex：异源双链核酸分子
simultaneously：同时地；
deletion：缺失
2012-3-7 Wednesday
Chengdu Medical College
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4. Phenylketonuria is an inborn error of metabolism resulting from a deficiency of phenylalanine hydroxylase. There are many techniques that can be used to mutation screening, such as PCR-STR, PCR-SSCP, PCR-RFLP, PCR-DGCE, and so on.
2012-3-7 Wednesday
Chengdu Medical College
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评估基因的存在和缺 陷通常以DNA为材料
评估基因的表达量则 以基因转录或翻译 RNA/蛋白质为对象
2012-3-7 Wednesday
Chengdu Medical College
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Section 1 遗传性疾病分子诊断的策略
4p16.3. HD can be accurately confirmed or excluded by PCR-based assay. Huntington’s disease(HD) ：亨廷顿病

• 已发现多种癌症，如结直肠癌（10－32%）、 乳腺癌、非小细胞肺癌等存在PIK3CA基因突变。
• PIK3CA存在两个热点突变区： 9号外显子（E542K、E545K、E545G突变）； 20号外显子（H1047R、H1047L突变）；
PIK3CA基因突变导 致PI3K/Akt信号通 路持续性活化， PI3K作为EGFR下游 信号分子被激活， 导致肿瘤细胞对 EGFR-TKI等药物的 耐药。
• 耐药 最有效的是E19/E21突变，占总突变90%，E20为耐药突变。
EGFR突变患者使用吉非替尼反应率可达到71. 与遗传有关的DNA结构是由硷基连接而成的双股双螺旋结构。
原发耐药：KRAS 已发现多种癌症，如结直肠癌（10－32%）、乳腺癌、非小细胞肺癌等存在PIK3CA基因突变。
突变热点均能增强PI3K的脂质激酶活性。 9号外显子（E542K、E545K、E545G突变）；
• 5、T790M突变：AZD9291(阿斯利康)，Rociletinib
EGFR信号通路及靶向治疗机制
EGFR基因突变状态是EGFR酪氨酸酶抑制剂(EGFR-TKI)治疗晚期NSCLC 最重要的疗效预测因子。
4.肺癌EGF1R通.E路G靶FR向分子病理检测
EGFR突变较易发生于亚洲人、女性、腺癌、 不吸烟患者。
• ALK激酶抑制剂：克唑替尼、色瑞替尼
EML4-ALK融合基因可见于多种肿瘤，如间变性大细胞淋巴 瘤、炎性成肌纤维细胞瘤、成神经细胞瘤和NSCLC等；
在NSCLC人群中，EML4-ALK阳性率约为3%～7%左右；主 要存在于腺癌中、轻度吸烟、年轻男性；33%非EGFR、KRAS 突变的NSCLC患者出现EML-4-ALK突变，排他性强；
K-RAS蛋白是EGFR信号传导 中关键下游调节因子。

《肿瘤的分子诊断》ppt课件
汇报人：可编辑 2024-01-11
目 录
• 肿瘤分子诊断概述 • 肿瘤分子诊断的应用 • 肿瘤分子诊断的挑战与前景 • 肿瘤分子诊断的实际案例
01
肿瘤分子诊断概述
肿瘤分子诊断的定义
01
肿瘤分子诊断是指通过检测肿瘤 细胞或组织中的分子异常，对肿 瘤进行早期发现、诊断、治疗和 预后评估的方法。
的不断发展，卵巢癌的分子诊断将有望实现更精准、更个性化的治疗策略。
THANKS
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免疫治疗
通过调节患者的免疫系统 来攻击肿瘤细胞的治疗方 法，具有较好的疗效和较 低的副作用。
03
肿瘤分子诊断的挑战与前景
肿瘤分子诊断的挑战
技术限制
目前肿瘤分子诊断技术仍存在 一定的局限性，如检测灵敏度
、特异性等方面的问题。
肿瘤异质性
肿瘤内部的异质性导致不同部 位肿瘤细胞的分子特征存在差 异，给分子诊断带来困难。
基因突变和甲基化
检测
基因突变和甲基化是肿瘤发生发 展的重要机制，通过检测这些变 化，有助于发现早期肿瘤。
肿瘤的分类与分型
肿瘤的分类与分型
根据分子标志物的差异，可以将 肿瘤分为不同的亚型，有助于制
定个性化的治疗方案。
基因表达谱分析
通过分析肿瘤组织的基因表达谱， 可以将肿瘤分为不同的亚型，有助 于了解肿瘤的生物学特征和预后。
免疫组化分析
免疫组化分析是一种常用的肿瘤分 类方法，通过检测肿瘤细胞的免疫 反应，有助于确定肿瘤的性质和分 化程度。
肿瘤的预后评估
01
肿瘤的预后评估
通过检测分子标志物，可以预测 肿瘤的发展趋势和患者的预后情 况。
生存分析
02