实验项目八 双黄连口服液中黄芩苷的含量测定

HPLC法测定双黄连口服液中绿原酸和黄芩苷的含量刘刚;王海涛;赵淼;姜韧;谭生建【期刊名称】《解放军药学学报》【年(卷),期】2007(23)4【摘要】目的建立HPLC法同时测定双黄连口服液中绿原酸和黄芩苷含量的方法.方法色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18,4.6mm×150mm,5Micron).流动相A:甲醇-水-磷酸(50∶950∶5),流动相B∶甲醇.梯度洗脱程序:0～30,A:95%～35%,B:5%～65%;流速:1ml/min,检测波长327nm.结果绿原酸和黄芩苷的保留时间分别约为10.6、24min,与各自相邻峰的分离度均＞1.5.以峰面积(X)对进样浓度(Y)线性回归,绿原酸回归方程:Y=0.03298X-0.093 86,r=0.999 9,线性范围5.040～45.361μg·ml-1.黄芩苷回归方程:Y=0.051 55X-1.28 64,r=0.999 9线性范围:44.88～403.9μg·ml-1.绿原酸、黄芩苷回收率(n=6)分别为99.6%和100.0%、RSD分别为0.32%和1.0%.结论本方法与2005版中国药典法含量测定结果一致,准确度好且操作简便.【总页数】3页(P299-301)【作者】刘刚;王海涛;赵淼;姜韧;谭生建【作者单位】解放军第306医院,药学部,北京,100101;解放军第306医院,药学部,北京,100101;解放军第306医院,药学部,北京,100101;解放军第306医院,药学部,北京,100101;解放军第306医院,药学部,北京,100101【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩苷的含量[J], 黄敬群;杨娟;李红2.梯度洗脱HPLC法同时测定双黄连口服液中绿原酸和黄芩苷含量 [J], 陈长水;杨志芬;桑旭峰3.HPLC法同时测定双黄连口服液中绿原酸连翘苷和黄芩苷的含量 [J], 刘刚;谭生建;张华;王杰松;薛克昌;史宁;谢雅君;魏涵4.高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸和黄芩苷的含量 [J], 方崇波5.HPLC法同时测定双黄连口服液中绿原酸和黄芩苷的含量 [J], 曹红;祝业因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

无糖型双黄连颗粒中黄芩苷的含量测定研究摘要：目的：建立无糖型双黄连颗粒中黄芩苷的含量测定方法。

方法：采用以十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂；流动相为甲醇-水-冰醋酸（50：50：1）；检测波长为274nm。

结果：黄芩苷峰与其他杂质峰分离良好，在0.0000μg～0.0000μg 范围内，黄芩苷线性关系良好（r=0.0000），平均回收率为000.00%（n=0）RSD=0.00%。

结论：该方法简便易行，准确度高，重现性好，可用于无糖型双黄连颗粒的质量控制。

1. 引言无糖型双黄连颗粒是由金银花、黄芩和连翘提取物制成的纯中药复方制剂，收载《中国药典》（2010版一部）中, 具有疏风解表，清热解毒的功效，用于外感风热所致的感冒，发热、咳嗽、咽痛等症状。

而本试验主要采用高效液相色谱法对黄芩苷进行含量测定研究，取得了较好的效果，从而证实可以通过此方法对无糖型双黄连颗粒的质量进行有效控制。

2. 仪器与试药2.1 仪器SHIMADZU 高效液相色谱仪(LC-10ATVP 溶剂输送系统，LC-10AVP 检测器)；TIANHEC18(5μm,150mm×4.6mm) 色谱柱；十万分之一电子天平(Sartorius BP121S)；超声波清洗器（DL-360 ）2.2 试药黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号110715-200514，供含量测定用)，使用前经60℃减压干燥4 小时；甲醇、冰醋酸为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。

3. 方法与结果3.1 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂；流动相为甲醇-水-冰醋酸（50：50：1）；检测波长为274nm。

理论板数按黄芩苷峰计算应不低于1500。

按处方比例配成不含黄芩的阴性对照样品，照供试品溶液的制备方法，制成阴性对照溶液，实验结果表明无干扰。

3.2 对照品溶液的制备精密称取经60℃减压干燥4 小时的黄芩苷对照品12.5mg，置25ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取5ml 置25ml 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

双黄连口服液的质量分析一、实验目的1.掌握对照品对照法和对照药材对照法鉴别复方制剂中药材的方法。

2.掌握双黄连口服液中金银花、黄芩和连翘的质量检验方法。

二、仪器与试药1.仪器美国PE-60型高效液相色谱仪KQ-300E型超声波清洗器Mettler AL204电子天平ZF-2型三用紫外仪HHS型电热恒温干燥箱容量瓶规格：25mL 移液管规格：25mL 滤纸规格：直径10cm研钵硅胶G薄层板聚酰胺薄膜(5cm×7cm)2..试药双黄连口服液规格：每支装10mL黄芩苷、绿原酸对照品连翘对照药材乙醇二氯甲烷甲醇硫酸醋酸三、实验原理采用对照品对照法和对照药材对照法分别鉴别双黄连口服液中的金银花、黄芩和连翘三味主药。

四、实验内容【处方】金银花375g 黄芩375g 连翘750g【制法】以上三味，黄芩切片，加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩并在80℃时加入2mol/L盐酸溶液适量调节PH值至1.0～2.0，保温1小时，静置12小时，滤过，沉淀加6～8倍量水，用40%氢氧化钠溶液调节PH值至7.0，再加等量乙醇，搅拌使溶解，滤过，滤液用2mol/L盐酸溶液调节PH值至2.0，60℃保温30分钟，静置12小时，滤过，沉淀用乙醇洗至PH值7.0，挥尽乙醇备用；金银花、连翘加水温浸半小时后，煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对蜜度为1.20～1.25(70～80℃测)，冷至40℃时缓缓加入乙醇，使含醇量达75%，充分搅拌，静置12小时，滤取上清液，残渣加75%乙醇适量，搅匀，静置12小时，滤过，合并乙醇液，回收乙醇至无醇味，加入黄芩提取物，并加水适量，以40%氢氧化钠溶液调节PH值至7.0，搅匀，冷藏（4～8℃）72小时，滤过，滤液加入蔗糖300g，搅拌使溶解，再加入香精适量并调节PH值至7.0，加水制成1000mL，搅匀，静置12小时，滤过，灌装，灭菌，即得。

xxx大学毕业论文（设计）开题报告毕业论文（设计）题目双黄连口服液质量状况的抽样实验调查选题类型课题来源学院专业指导教师职称姓名年级学号研究课题的目的：1. 了解四个厂家双黄连口服液的质量状况2. 测定双黄连口服液中黄芩苷，绿原酸和连翘苷的含量5. 分析四个厂家双黄连口服液的质量状况6. 分析造成四个厂家双黄连口服液质量差异的原因立题依据双黄连口服液是人们常用于治疗发热咳嗽的OTC药品。

它是由金银花、黄芩、连翘三味中药经过提取制成的纯中药制剂口服液,有清热解毒的功效，主治外感风热所致的发热，咳嗽，痰黄，咽痛，口干。

常用于感冒，上呼吸道感染，咽炎，急性扁桃体炎，肺部感染等疾病的治疗［1］。

该药一直用于临床使用，由于疗效确切，价格低廉，深受感冒发热患者欢迎，是家庭小药箱的抗感冒药之一。

在双黄连口服液中，金银花、黄芩、连翘都起到了重要的作用。

其中金银花清热解毒，凉散风热。

黄芩清热燥湿，泻火解毒。

连翘清热解毒，消肿散结。

对于口服液中金银花,黄芩,连翘的鉴定分别以绿原酸，黄芩苷，连翘苷的测定为标准，采用薄层色谱法进行定性鉴别，使用照高效液相色谱法进行含量的测定。

双黄连口服液是双黄连系列产品中一个全面研究并取得卫生部新药证书的剂型。

现代药理学研究表明双黄连制剂能抗多种病原微生物，具有广谱的杀菌作用；并能降低毛细血管的通透性、减少渗出，具有抗炎、抗过敏作用；还可增强机体产生α-干扰素能力，可显著地增强细胞免疫和体液免疫作用，对病毒也具有较强的抑制作用，并能中和细菌产生的内毒素，同时具抗感染及免疫调节双重作用。

绿原酸是抗菌、止血、消炎、利胆、增高白血球、抗病毒药物的重要原料，具有肾上腺素类似的作用；绿原酸具有降压及抗肿瘤作用，绿原酸还可通过降低致癌物的利用率及其在肝脏中的运输来达到防癌、抗癌的效果；绿原酸还具有补肾、利尿、增强机体免疫作用。

绿原酸对自由基的有效清除，能维持机体细胞正常的结构和功能，防止和延缓诸如肿瘤、突变、衰老等病理生理现象的发生[2]。

双黄连口服液化学成分含量测定及指纹图谱研究目的：测定双黄连口服液化學成分含量，建立化学成分指纹图谱的研究，为双黄连口服液质量标准研究提供理论依据。

方法：采用高效液相色谱法，Agilent C18色谱柱（250mm×46mm，5μm），流动相为甲醇（A）-025%冰乙酸（B），流速为10mL/min；柱温为30℃；进样体积为10μL。

结果：测定双黄连口服液中化学成分含量并建立了指纹图谱，标定12个共有峰，以9号峰（即黄芩苷）为参照。

方法学考察符合规定，RSD均小于30%。

结论：建立了以黄芩苷、连翘苷和绿原酸为参照物，测定不同厂家的双黄连口服液的含量及化学指纹图谱方法，结果显示不同厂家制剂的指纹图谱存在差异性，此方法简便，重现性好，精密度高，可以为双黄连口服液质量标准提供一定的依据。

标签：双黄连口服液；高效液相色谱法；含量测定；指纹图谱双黄连口服液是临床抗菌抗病毒常用药，由金银花、黄芩和连翘三味中药提取精制而成，具有抑菌[1]、抗病毒[2-3]、解热抗炎[4]的作用，用于治疗外感风热所致的感冒，症见发热头痛、咳嗽及咽痛等。

此三味中药主要成分为绿原酸、黄芩苷以及连翘苷，绿原酸具有抗菌、抗病毒、抗炎、免疫调节等作用[5]，黄芩苷具有抗菌抗病毒、解热镇痛抗炎、清除氧自由基等作用[6]，连翘苷具有抗菌抗病毒、抗炎、保肝等作用[7]，这三种化合物是双黄连口服液中主要活性及药效成分。

目前用高效液相色谱法来测定双黄连口服液中的有效成分是主要的检测方式[8-10]，且指纹图谱是国内外公认的鉴别中药品种和评价中药质量的非常有效的手段。

因此有必要对不同厂家及批次的制剂中这三种成分的含量及指纹图谱进行研究，为此建立了本文的研究方案，可能会对控制药品质量、保证人民用药的安全有效起到积极的作用。

1仪器与材料11仪器Agilent 1200高效液相色谱仪（包括四元泵，DAD 检测器，柱温箱，工作站，安捷伦科技有限公司）；AR2140型电子分析天平（上海奥豪斯公司）；METTLER AB135-S十万分之一电子天平（瑞士）；超声提取仪（240W，50-60Hz，上海必能超声仪器公司）。

HPLC法测定双黄连口服液中黄芩苷与连翘苷的含量研究黄小莉【期刊名称】《药学研究》【年(卷),期】2007(026)012【摘要】目的采用高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩苷与连翘苷的含量.方法黄芩苷:色谱柱为Kromasil ODS柱(4.6mm×150mm,5μm);柱温:40 ℃;检测波长280nm;流动相:甲醇-水-磷酸(55∶45∶0.2);流速:1.0 mL·min-1.连翘苷:色谱柱为Kromasil ODS柱(4.6mm×150mm,5μm);检测波长277 nm;流动相:乙腈-水(25∶75);流速:0.8 mL·min-1.结果黄芩苷在24.85～198.8mg·L-1间与峰面积有良好的线性关系,连翘苷进样量在0.496～3.472μg范围内与峰面积呈良好线性关系;加样回收率黄芩苷为101.1%,RSD=1.83%(n=5),连翘苷为98.71%,RSD=1.61% (n=5).结论该方法简单迅速,结果准确,精密度好,对黄芩苷和连翘苷的含量测定能更好的控制双黄连口服液的质量.【总页数】3页(P722-724)【作者】黄小莉【作者单位】张家界市人民医院,湖南,张家界,427000【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩苷的含量[J], 黄敬群;杨娟;李红2.HPLC法同时测定双黄连口服液中绿原酸连翘苷和黄芩苷的含量 [J], 刘刚;谭生建;张华;王杰松;薛克昌;史宁;谢雅君;魏涵3.HPLC法测定双黄连口服液中绿原酸和黄芩苷的含量 [J], 刘刚;王海涛;赵淼;姜韧;谭生建4.RP-HPLC法测定防风通圣丸中芍药苷、栀子苷、黄芩苷和连翘苷的含量 [J], 刘阿静;齐广才;刘珍叶;白梓静5.RP-HPLC法测定双黄连口服液中黄芩苷和连翘苷含量 [J], 雷杨;韩宇;谭洪臣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。