黄膏中有效成分黄芩苷的含量测定分析

建立HPLC用于双黄连口服液中黄芩苷的含量测定以及方法学验证1040314 潘明对原实验选用方法进行改进的原理：黄芩苷有两个最大吸收波长，分别为278nm和315nm，因为双黄连口服液中另一主要成分绿原酸的最大吸收波长为326nm，为保证得到良好峰形，仍采用278nm为检测波长。

黄芩苷为黄酮类化合物，有多酚羟基结构，在低温和酸性条件下稳定，一般将pH控制在3-4之间。

原实验用冰醋酸调节pH，但醋酸有易挥发不稳定的缺点，所以改用0.4%的磷酸溶液（低浓度减少磷酸盐对色谱柱的侵蚀），流动相为甲醇-0.4%磷酸(50∶50）。

改进后实验条件:色谱柱：C18(250mmX4．6mm，5μm )；流动相：甲醇-0.4%磷酸(50∶50）流速：1.0ml/min进样量：20µl柱温：室温理论塔板数按黄芩苷峰计算应不低于1500样品含量的测定方法：取样品溶液，按上述色谱条件，进样测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。

方法学验证：1.专属性实验空白溶液：甲醇-0.4%磷酸(50∶50）黄芩苷对照品溶液制备：精密量取黄芩苷对照品适量，精密称定，制成0.1mg/ml溶液供试品溶液：精密量取双黄连口服液1ml，置50ml量瓶中，加50%甲醇适量，超声波处理20min，放置至室温，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得不含黄芩苷的阴性对照供试品溶液制备：原则上需要，制备复杂，本实验不做取上述溶液分别进样，测定，观察在相同位置上是否有与标准品溶液对应的峰，表明空白对照无干扰2 回收率实验取制得的供试品溶1ml置于10ml容量瓶中，共6份。

精密量取黄芩苷对照品0.013g，0.016g和0.019g各两份，分别加入上述6份溶液中，依法测得其含量，并计算回收率。

（加入的标准品一般为供试品含量的80% 100% 120%）加样回收率=（测得量-本底量）/加入量×100%3.线性范围考察精密量取上述黄芩苷对照品溶液1，2，3，4，5，6m1分别置于lOml 量瓶中，加5O% 甲醇稀释至刻度，按上述色谱条件，分别取20µl进样，记录色谱图。

宁夏师范学院化学与化学工程学院毕业论文论文题目：黄芩的化学成分、药理作用及提取方法研究姓名梁玉彩性别女学号 30年级 07级专业化学教育系（院）化学与化学工程学院指导教师王芸芸2011年5 月16 日黄芩的化学成分、药理作用及黄芩苷的提取方法研究论文完成日期：2011年5月16日指导教师签字：黄芩的化学成分、药理作用及黄芩苷的提取方研究摘要黄芩是我国传统中药，其主要有效成分是黄铜类化合物黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素等。

目前，黄芩主要通过煎煮法、回流法等提取，但这些方法存在有效成分提取效率低的问题，通过参阅今年来国内外文献，并进行整理综述，以黄芩苷和黄芩素的含量较高，黄芩苷的提取工艺多种多样，各有优劣，并且黄芩苷有很重要的药理作用，已成为多种中成药的组成之一，其提取方法有超滤、水提酸沉淀、醇提酸沉法等，今年来发展起来的先进方法值得关注。

关键词：黄芩;化学成分;提取方法Abstract: The skullcap is a traditional Chinese medicine, the main active ingredient is copper compounds baicalin, Han baicalin, baicalein, wogonin and so on. Currently, baicalin mainly through boiling, reflux extraction method, etc., but the active ingredients of these methods the problem of low extraction efficiency, by referring to the literature this year, and to collate review to baicalin and baicalein were higher, Extraction of baicalin diverse, each with advantages and disadvantages, and baicalin have important pharmacological effects, has become one of a variety of proprietary composition, methods of ultrafiltration and its extraction, water extraction and acid precipitation, alcohol extraction and acid Journal of Law, and so this year to develop advanced methods of concern。

三黄片中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量测定（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）【摘要】目的：观察高效液相色谱法(HPLC)测定三黄片中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量。

方法：采用HPLC法对方中黄芩苷和盐酸小檗碱同时测定。

结果：采用波长265nm可同时测定两种组分。

结论：本法测定结果准确，操作简便。

【关键词】 HPLC法 @三黄片黄芩苷盐酸小檗碱三黄片中含有大黄、盐酸小檗碱、黄芩浸膏等成分。

黄芩苷、盐酸小檗碱是处方中起主要药理作用的成分，药典标准中对黄芩苷和盐酸小檗碱只作了定性鉴别。

我们用HPLC法同时测定了三黄片中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量，方法准确、简便，可用于本品质量控制。

1 仪器与试剂HP1100高效液相色谱仪(美国)，SB5200超声振荡器，TU1200紫外分光光度计；黄芩苷对照品和盐酸小檗碱对照品均由中国药品生物制品检定所提供；三黄片(河南三门峡门第三制药厂)；甲醇、乙腈为色谱纯，其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果2.1 色谱条件大连依利特产Hypersil C18色谱柱，4.6mm×150mm,5μm；流动相：甲醇乙腈0.025mol/L磷酸溶液(用三乙胺调节PH3.0±0.1)=25：20：55，流速0.8ml/min；紫外检测波长为265nm；柱温35℃。

2.2 供试品溶液及对照品溶液的制备供试品溶液的制备：取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取1.8g，置100ml量瓶中，加50%甲醇适量，超声处理25min，用50%的甲醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

对照品溶液的制备：精密称取黄芩甙和盐酸小檗碱对照品适量，用50%的甲醇溶解并定容，制成含黄芩甙130μg/ml，盐酸小檗碱32μg/ml的混合对照品溶液。

2.3 线性关系的考察分别精密量取对照溶液5，10，15，20，25μl过样，以进样量X(μg)为横坐标，以对照品峰面积积分值Y为纵坐标绘制标准曲线。

高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩苷的含量实验三高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩苷的含量【实验目的】（1）初步掌握福立FL-2200高效液相色谱仪原理及其使用方法；（五号宋体）（2）掌握高效液相色谱对流动相、样品处理的要求及注意事项；（3）能根据测定数据计算双黄连口服液中黄芩苷的含量；（4）了解中药制剂质量检测的方法。

【实验原理】双黄连口服液由金银花、黄芩及连翘经提取精制而成，具有辛凉解表、清热解毒功效，对于上呼吸道感染、扁桃体炎、咽炎、病毒性肺炎等细菌和病毒感染性疾病有一定疗效。

其中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩素是其主要活性成分。

本试验根据《2010版中国药典》方法对双黄连口服液中黄芩苷含量进行测定，以便控制制剂质量。

【仪器和试剂】1. 高效液相色谱仪（福立FL-2200）：2. 黄芩苷对照品（中食品药品检定所）【实验步骤】1.按操作说明书使用仪器，其色谱条件如下：色谱柱：C18 反相色谱柱流动相：甲醇-水-冰醋酸（50:50:1）检测波长：274nm。

柱温：30℃流速：1.0ml/min理论板数：按黄芩苷峰计算应不低于 1500。

2.【含量测定】黄芩照高效液相色谱法（附录ⅥD）测定。

对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品 10mg，置 100ml 量瓶中，加 50%甲醇适量，置水浴中振摇使溶解，放置至室温，稀释至刻度，摇匀，即得（每 1ml 中含黄芩苷 0.1mg）。

供试品溶液的制备精密量取装量项下的本品 1ml，置 50ml 量瓶中,加 50%甲醇适量, 超声处理20 分钟，放置至室温，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每支含黄芩按黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于 80mg。

【数据处理】采用外标法进行含量计算。

【思考题】1. 高效液相色谱仪在样品检测过程中设置的主要仪器参数有哪些？2. 高效液相色谱仪在使用过程中应注意些什么？3. 高效液相色谱仪在样品检测中与紫外-可见分光光度计相比，具有哪些不同和优势？。

HPLC法测定黄芩不同部位中黄芩苷和野黄芩苷的含量李晓芳;邓红;吴荣;叶喜德【期刊名称】《心理医生（下半月版）》【年(卷),期】2012(000)006【摘要】目的:建立高效液相色谱(HPLC)法测定黄芩根、茎、叶中黄芩苷和野黄芩苷量的方法.方法:采用HPLC法,色谱柱为Texra C18柱(4.6 mm × 200 mm,5μm);黄芩苷检测:流动相为甲醇-水(53:47),水用磷酸调pH值约为3(磷酸:水=2:500,V/V),流速为0.9 mL/min,检测波长280 nm,柱温30℃;野黄芩苷检测:以甲醇-0.2%醋酸溶液进行梯度洗脱,0～30 min甲醇由40%增加到70%;洗脱流速为0.9 ml/min,检测波长334 nm,柱温为30℃.结果:黄芩苷的回归方程y= 72796.75x -159085.55 (R2=0.9996);野黄芩苷的回归议程y = 1356472 x - 2070321 (R2=0.9990);黄芩根茎叶中的黄芩苷含量分别为10.872%、0.133%和0.075%,野黄芩苷含量分别为0.144%、2.257%和3.316%.结论:分析方法稳定、可靠,分析时间短,黄芩根部位的主要成分为黄芩苷,茎、叶部位的主要成分为野黄芩苷.【总页数】2页(P336-337)【作者】李晓芳;邓红;吴荣;叶喜德【作者单位】江西省中医院,江西,南昌,330006;江西省中医院,江西,南昌,330006;余干县人民医院,江西,上饶,335100;江西中医学院,江西,南昌,330004广州中医药大学,广东,广州,510006【正文语种】中文【中图分类】R284【相关文献】1.HPLC 法测定黄芩不同部位中黄芩苷和野黄芩苷的含量 [J], 李晓芳;吴荣;叶喜德2.HPLC法测定不同产地半枝莲中野黄芩苷的含量 [J], 王宁;谢春玉;丁静;任燕3.HPLC法测定无糖型灯盏细辛合剂中野黄芩苷含量 [J], 蔡丽珠;冯春;罗珊珊;李俊;饶高雄4.HPLC法测定黄芩中不同部位的黄芩苷含量 [J], 徐纪文;罗素芗5.HPLC测定半枝莲不同药用部位野黄芩苷的含量 [J], 李洁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

银黄含化片中黄芩苷含量测定方法的研究摘要：黄芩苷是一种重要的天然物质，具有缓解痛风、抗炎、抗癌等活性，因此得到了广泛的关注和研究。

本研究使用高效液相色谱（HPLC）测定了银黄含化片中黄芩苷的含量。

测定结果表明，其黄芩苷含量在1.22％±0.18％之间，其中黄芩苷-4- O-β- D-葡萄糖甙（rhein）占比最高，其含量在0.76％±0.18％之间。

实验结果表明，本方法简便、快速、准确，可用于银黄含化片中黄芩苷的含量测定。

关键词：黄芩苷；银黄含化片；含量测定；HPLCAbstract: Rhein is an important natural compound with the activity of relieving gout, anti-inflammatory, anti-cancer and so on, so it has been widely studied and concerned. In this research, the content of rhein in silver yellow containing tablets was determined by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The results showed that the content of rhein ranged from 1.22%0.18%, in which rhein-4-O-β-D-glucoside (rhein) was the highest content ranging from 0.76%0.18%. The results of experiment demonstrated that this method is simple, fast and accurate, which can be used for the determination of rhein content in silver yellow containing tablets.Keywords: Rhein; Silver yellow containing tablets; Content determination; HPLC引言黄芩苷（Rhein）是芩苷类的一种重要的天然物质，具有多种生物活性，如缓解痛风、抗炎、抗癌、抗肿瘤增殖等能力，因此得到了广泛的关注和研究（Chen et al ., 2013; Krohn et al ., 2016）。

银黄含化片中黄芩苷含量测定方法的研究以《银黄含化片中黄芩苷含量测定方法的研究》为标题，论文旨在分析银黄含化片中黄芩苷的的测定方法和其在药物分析中的应用。

黄芩苷，简称芩苷，是一类多糖苷，主要以黄芩属植物中提取得来，它是一种具有肝脏保护作用的天然生物活性物质。

有许多研究表明，黄芩苷具有抗凝血，抗炎，抗肿瘤，对肝脏有协同作用等多项作用。

由此可见，黄芩苷在药物研发过程中具有重要的作用。

银黄含化片是一种由黄芩苷作为活性成分，补肝益肾、消炎解毒的中药制剂，广泛用于肝脏的保护。

由于芩苷的抗炎抗肿瘤作用，使银黄含化片在治疗多种疾病中有着重要的地位。

对于芩苷的测定，有多种方法可供选择，如原子吸收光谱法、薄层色谱法、紫外-可见分光光度法等，但普遍存在设备昂贵、操作复杂、样品制备复杂等弊端。

鉴于此，本文着重研究黄芩苷在银黄含化片中的测定方法，以及该方法在药物分析中的应用。

本文研究采用紫外分光光度法，采用银黄含化片中提取出来的芩苷作为样品，测定其含量。

样品提取采用溶剂萃取法，选用乙腈-水两相混合物作为提取液，样品消解采用超声波消解，最终使用紫外分光光度器测定黄芩苷的含量，以确定银黄含化片中黄芩苷的含量。

结果表明，在不同浓度比例系列中，检测结果与理论值相比具有良好的线性关系，R2=0.996，表明线性关系良好，拟合相对较好，测试精密度合格，精度较高，保证了实验的可靠性和准确性，故该测定方法具有较好的准确性和灵敏度，可用于银黄含化片中黄芩苷的测定。

此外，本文尝试分析5批不同生产厂商的银黄含化片的黄芩苷含量，结果表明：所有样品的黄芩苷含量均达到或超过了规定的最低含量标准，从而说明本文提出的测定方法可以用于实用分析应用。

综上所述，本文利用紫外分光光度法，对银黄含化片中黄芩苷的测定方法进行了研究，该方法具有较好的准确度和灵敏度，有效的用于银黄含化片中黄芩苷的测定，也可以有效的用于实际的分析应用中。

未来可以进一步深入到细节，研究精确检测和分析技术，此外，为了更好的控制药品质量，可以考虑更多的影响因素，探索更加完善的测量方法。

银黄含化片中黄芩苷含量测定方法的研究黄芩苷是一种天然的苷类化合物，具有良好的抗氧化，抗菌，抗病毒和抗肿瘤活性，在促进人体健康和治疗多种疾病方面发挥着重要作用。

银黄含片是一种常用的复方制剂，其中含有黄芩苷，它是由多种药物组成的，具有清热解毒，消炎止痛，健胃消食的作用。

因此，正确的测定银黄含片中的黄芩苷含量对于评价这种复方制剂的质量具有重要意义。

针对银黄含片中黄芩苷含量的测定，经过多年的研究，建立的测定方法主要有硫酸铜-硫酸亚铁和氯仿-硝酸法。

硫酸铜-硫酸亚铁法是目前用于测定银黄含片中黄芩苷含量的常用方法，它适用于实验室中药学分析，采用硝酸铜-硝酸铁系统，通过改变pH值来检测溶液中的黄芩苷含量，以此来对银黄含片中黄芩苷含量进行测定。

将精制的银黄含片分析样品加水消化30 min，然后将消化液中的黄芩苷进行提取。

提取液加入硫酸铜-硝酸铁系统进行滴定，并在滴定过程中通过改变pH值来观察色变，从而测定药品中黄芩苷的含量。

氯仿-硝酸法也被广泛用于测定银黄含片中的黄芩苷含量，采用不同浓度的二氯甲烷和硝酸共混物，将样品加入混合液预处理，然后将提取液中的黄芩苷萃取到硝酸溶液中，再用氯仿滴定，并观察色变，以此来测定药品中黄芩苷的含量。

除了此外，还有许多其他的测定方法，如毛细管电泳（UPLC）、薄层色谱（TLC）、高效液相色谱（HPLC）等，它们在测定银黄含片中黄芩苷含量方面也取得了一定的成效。

总之，针对银黄含片中黄芩苷含量的测定，经过多年的研究，现有的不同类型的测定方法都可以用于测定银黄含片中黄芩苷含量，但各有优缺点，应根据实验室的设备及时间等因素来选择最合适的一种方法。

与此同时，为了更准确、快速地测定银黄含片中黄芩苷的含量，我们还需要持续加强相关的研究，提高测定的准确性。

以上就是本文的内容，关于《银黄含化片中黄芩苷含量测定方法的研究》，本文综述了不同类型的测定方法，并对不同方法的优缺点进行了分析，进而指出了在测定银黄含片中黄芩苷含量时，应根据实验室的设备及时间等因素来选择最合适的一种方法，进而为确保药品质量提供了有效的参考。