大鼠结直肠扩张内脏痛模型的建立与行为学评价

大建中汤通过调节P2X7R 介导胶质细胞活化减轻大鼠肠易激综合征内脏痛*武静1， 田维毅1， 蔡琨1， 李尧锋1， 杨莎莎2△（1贵州中医药大学基础医学院，贵州 贵阳 550025；2贵州中医药大学第一附属医院，贵州 贵阳 550001）［摘要］ 目的：研究肠易激综合征（irritable bowel syndrome ， IBS ）内脏痛大鼠脊髓后角（posterior horn of spi‑nal cord ， PHSC ）和前扣带回皮质（anterior cingulate cortex ， ACC ）星形胶质细胞中胶质细胞原纤维酸性蛋白（glial fi‑brillary acidic protein ， GFAP ）及P2X7受体（P2X7 receptor ， P2X7R ）表达的变化及大建中汤（Dajianzhongtang ， DJZT ）的干预作用。

方法：通过腹腔注射卵清白蛋白、母婴分离、乙酸灌肠等方式制备IBS 内脏痛大鼠模型，将模型大鼠随机分为3组：模型组（灌服等体积生理盐水，每天1次，持续2周）、DJZT 组（10.8 g/kg DJZT 灌胃，每天1次，持续2周）和P2X7R 拮抗剂亮蓝G （brilliant blue G ， BBG ）组（腹腔注射50 mg/kg ，每天1次，持续2周），另设正常组（灌服等体积生理盐水，每天1次，持续2周），共计4组，每组10只。

采用腹部撤离反射（abdominal withdrawal reflex ， AWR ）评估各组大鼠内脏疼痛敏感度；苏木精-伊红（hematoxylin -eosin ， HE ）染色观察大鼠结肠黏膜的病理变化；RT -qPCR 和Western blot 检测大鼠PHSC 和ACC 组织中脑源性神经营养因子（brain -derived neurotrophic factor ， BDNF ）、白细胞介素1β（interleukin -1β， IL -1β）、GFAP 和P2X7R 的mRNA 及蛋白表达水平；免疫荧光双染法观察PHSC 和ACC 组织中GFAP 和P2X7R 的定位情况。

TNBS 诱导的大鼠炎性肠病模型的建立王园园王金凤蔡欣徐涛邹民吉刘深刘中成王旻龙民慧王嘉玺徐东刚摘要目的建立 2, 4, 6-三硝基苯磺酸 (T NBS 诱导的炎性肠病动物模型 , 以用于相关药物评价。

方法雄性 W istar 大鼠50只随机分为 T NBS 造模组、对照组及正常组 , 各组大鼠分别用 2%T NBS 、50%乙醇及生理盐水灌肠。

观察各组大鼠的粪便、精神状态和进食情况 , 并每日称量体重及食重。

分别在造模后第 3、 6和 14天处死大鼠 , 分离结肠组织 , 制作病理切片 , HE 染色后显微镜下观察结肠组织病理变化。

结果 T NBS 造模组在造模后第 1天即表现出明显的肠道稀便和血便 , 并持续约 8天 ; 造模后体重和进食明显下降 , 持续 7~10天后缓解 ; 造模后第 3天可观察到明显的肠道病理改变 , 并逐渐加重 , 至第 6天时可见黏膜的大量炎性细胞浸润以及肠壁的透壁性坏死。

造模对照组大鼠在造模后第 1天部分稀便 , 第 2天即恢复正常 , 造模后第 3天肠道可见轻度病理改变。

正常组大鼠一切均正常。

结论 T NBS 诱导的大鼠造模后表现出明显的炎性肠病症状 , 可作为 I B D 病因及治疗药物研究的有效模型。

关键词 2, 4, 6-三硝基苯磺酸炎性肠病动物模型Est ablishm en t of I nfl am ma tory Bowel D isea se M odels I nduced by 2, 4, 6-Tr i n itrobenzenesulfon i c Ac i W ang J infeng, W ang Yuanyuan, Cai X in, et al . Institute of B asic M edical Sciences, A cade m y of M ilitary ChinaAbstract O bjecti ve To devel op a model of inflammat ory bowel induced 6-trinitr obenzenesulfonic acid (T NBS . M ethods FiftyW istar rats were random ly divided model and nor mal gr oup. 2%T NBS, 50%ethanol and physi ol ogical saline were ad m inistered per t o of gr oup s, res pectively . Feces, p sychosis and appetite wereobserved, body weight and food killed after 3, 6and 14d, and the col ons were is olated and hist ol ogical findingswere exa m the rats in the model gr oup had l oose and bl oody st ools, and the sy mp t om s las 2ted f or about 8days . eaten were markedly decreased for 7-10days . Obvi ous pathol ogical changes in the col on were observed on third day on sixth day, characterized by mucosal necr osis and trans mutable infla mmati on . I n the mock model gr oup, the rats had l oose ools on first day, and recovered on second day . L ight pathol ogical changeswere found on third day . I n the nor 2mal gr oup, no pathol ogical changes were f ound in col on . Conclusi on Rats treated with T NBS showed obvi ous characters of infla mmat ory bowel disease, which could be used as a model in study on eti opathogenesis and evaluati on effects of medicines .Key words 2, 4, 6-trinitr obenzenesulfonic acid; I nflammat ory bowel disease; Ani m al model作者单位 :100850北京 , 军事医学科学院基础医学研究所基因工程研究室通讯作者 :徐东刚 , 电子信箱 :xudg@nic . bm i . ac . cn; 王金凤 , 电子信箱 :jf wangl@ 炎性肠病 (infla mmat ory bowel disease, I B D 是一类病因不明的慢性肠道炎症性疾病 , 由于具有恶变倾向因而对患者造成非常严重的威胁 , 是胃肠道中除恶变外最严重的疾病之一。

肝郁脾虚型肠易激综合征便秘大鼠模型的建立和评价涂星;柴玉娜;唐洪梅;李得堂;丘振文;张庆业【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】2015(23)1【摘要】目的筛选便秘型肠易激综合征动物模型的最佳建立方法,并探讨所建立模型的中医证候属性.方法分别采用母婴分离法、冰水灌胃法、限水法、母婴分离结合冰水灌胃法、母婴分离结合限水法制作便秘大鼠模型,观察大鼠一般行为学变化、体重和24 h进食量,测定4h内排便颗粒数,并对大鼠粪便进行Bristol分型积分和含水量测定,采用直肠扩张实验评价内脏敏感性,观察各组大鼠肠组织形学变化,筛选出符合IBS-C临床特征的动物模型建立方法.并采用复方中药逍遥散进行反证,判定模型的中医证候范畴.结果采用母婴分离结合冰水灌胃法建立的模型具有排便颗粒数减少,粪便含水量降低,Bristol分型积分显示为便秘型的特征,且其肠道敏感性显著升高,结肠组织无形态学改变,符合IBS-C的临床特征.经逍遥散验证,该IBS-C模型属于中医“肝郁脾虚证”范畴.结论母婴分离结合冰水灌胃法能够建立中医肝郁脾虚证IBS-C大鼠模型,能高度拟合IBS-C的临床特征,造模成功率高.【总页数】5页(P30-34)【作者】涂星;柴玉娜;唐洪梅;李得堂;丘振文;张庆业【作者单位】广州中医药大学,广州510405;广州中医药大学第一附属医院,广州510405;广州中医药大学,广州510405;广州中医药大学第一附属医院,广州510405;广州中医药大学第一附属医院,广州510405;广州中医药大学第一附属医院,广州510405;广州中医药大学第一附属医院,广州510405【正文语种】中文【中图分类】Q95-33【相关文献】1.肝郁脾虚型FD大鼠模型的建立及评价 [J], 陈婕;张津玮;杨岩;胡建功;李慧臻;杜潇;王天麟;孔祥茹2.六味顺激胶囊对肝郁脾虚型肠易激综合征模型大鼠内脏敏感性及五羟色胺水平的影响 [J], 邓桂球;张蓓;张喆;陈飞燕;劳梓钊;李耿;吴庆光;程宏辉3.肠乐胶囊对肝郁脾虚型肠易激综合征模型大鼠的影响 [J], 周云;梁万年;唐春萍;王洁;陈艳芬;杨超燕;江涛4.腹泻型肠易激综合征肝郁脾虚型病证结合大鼠模型的研究方法 [J], 任培培;汪龙德;刘俊宏;赵丽;吴亚娜;吴红莉;杨博5.IBS-D肝郁脾虚型病证症结合大鼠模型的建立与评价的初步研究 [J], 赵迎盼;唐旭东;卞兆祥;王凤云;杨俭勤;苏敏;王微因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

肿瘤动物模型的构建——结直肠癌篇导读结直肠癌(colorectal cancer, CRC)属于世界上第三大最常见的恶性肿瘤。

近年来，随着生活水平的提高，国内外结直肠癌的发病率保持着稳定增长的态势，严重威胁着人类的健康。

因此，建立合适、可靠的结直肠癌动物模型，对于其病程机理研究和临床药物治疗都具有重大意义。

首先，让我们了解一下结直肠癌发展过程结直肠癌随着疾病的发展，其遗传学的改变主要包括基因组的不稳定性、癌基因的突变扩增和抑癌基因的突变失活。

如下图所示，主要包括APC、KRAS、SMAD2/4、TP53等基因的突变导致正常结肠组织逐渐转化为结直肠癌肿瘤组织并发生远端转移[1]。

根据结直肠癌突变类型，进一步又分为多种细胞系选择合适的肿瘤细胞系是我们成功构建实验模型和保证研究数据准确的关键。

那么常见的结直肠癌模型有哪些呢？结直肠癌研究中动物模型主要分为3种类型一、诱导结直肠癌模型（化学物质、物理、生物等因素诱导）评价：制作方法简便，重复性较好，广泛应用于肠炎相关性癌症发生和发展的研究。

以应用比较广泛的AOM/DSS诱导结直肠癌模型为例：二、移植结直肠癌模型（CDTX和PDTX）评价：成瘤率高、实验周期短，常用于药物研发，是研究中最常用的结直肠癌模型。

再具体了解一下结直肠癌根据移植部位的分类：1. 皮下荷瘤：实时监测肿瘤的生长情况和评估治疗效果，但不易发生转移。

步骤往期已有描述；2. 尾静脉注射（肺转移）：肺部是结直肠癌常转移器官[2]，主要用于抑制肿瘤肺转移的药物筛选与检测。

步骤和数据监测分析，往期已有描述，不再赘述；3. 脾脏注射（肝转移）：肝脏是结直肠癌最常转移的器官[2]，主要用于抑制肿瘤肝转移的药物筛选与检测。

脾脏注射模型具有造模方法简单，转移率高的优点，能较好地模拟结直肠癌术后肝转移的临床特征[3]；下图所示为脾脏注射大概步骤和视频分析，具体实验步骤细节请参照前文：肿瘤转移动物模型的构建（下）。

右美托咪定对内脏痛的治疗作用及其机制的研究进展2024内脏痛指内脏器官或体腔壁受刺激时所产生的疼痛,全球40%以上的人经历过内脏痛。

机械性牵拉、痉挛、缺血和炎症等刺激是内脏痛发生的主要原因，患者常伴有恶心、呕吐、心血管及呼吸活动改变等症状。

近年来,右美托咪定治疗内脏痛的报道逐渐增加，但目前仍缺乏完整的归纳总结。

本文就近几年右美托咪定对内脏痛的治疗作用及其机制研究进展进行综述。

1内脏痛的发生机制解决内脏痛是提高患者生存质量和生存满意度的关键之一。

正确认识内脏痛的机制对治疗内脏痛具有重要意义。

目前，普遍认为内脏痛的发生机制包括外周敏化、中枢敏化、内脏痛觉调节紊乱，以及近年来热门的肠道菌群影响等。

外周敏化与中枢敏化以增加机体对痛觉的感知为主，导致内脏痛觉超敏。

通常，外周损伤或炎症诱导大量炎症介质释放，引起传入神经末梢致敏和细胞内第二信使释放，如P物质、降钙素相关基因肽和一氧化氮等，增加内脏疼痛信号传入，从而促进外周受体的敏化。

第二信使还参与调节中枢神经系统的可塑性，通过改变神经激肽1受体、酪氨酸受体激酶A、前列腺素受体等改变神经元兴奋性，产生动作电位并传递疼痛信号到脊髓而促进内脏痛。

脊髓背角的神经重塑是中枢敏化的关键，原发性内脏传入纤维释放谷氨酸或疼痛介质激活二级神经元，同时脊髓背角抑制性神经元超极化抑制二级神经元YM基丁酸和甘氨酸的释放，二者分别通过增加兴奋和去除抑制来产生持续性过兴奋状态和慢性疼痛。

此外，交感肾上腺髓质轴等参与内脏痛调节的调控系统或因子可不同程度地调控内脏痛的发生。

最近的研究发现，肠道菌群在内脏痛等多种疼痛中通过产生菌群代谢物、神经递质等信号分子调节外周敏化和中枢敏化，直接或间接作用于初级伤害感受神经元，介导炎症、免疫激活、小胶质细胞活性等功能，是内脏痛研究的新热点。

基础研究中治疗内脏痛的研究丰富，临床实践中除手术解决病灶外，常采用非苗体抗炎药和阿片类药物治疗内脏痛。

即使采用手术治疗，舒适化的术后康复也离不开有效的镇痛措施。

通过醋酸诱导大鼠肛肠黏膜损伤建立痔病模型的效果评价*吴琳琳1，刘朝阳1，田茂生1，张明全1，赵娜1，高记华2△1河北中医学院河北石家庄0500912河北中医学院第一附属医院肛肠科河北石家庄050011［摘要］目的评价通过醋酸诱导大鼠肛肠黏膜损伤建立痔病模型的效果，探讨更符合人类病理改变的肛肠黏膜损伤模型的创建方法。

方法选取SPF 级SD 大鼠40只，按重量随机分成4组，分别标记为空白对照组（每天用蘸注射用水的棉签操作1次，共3天，于第7天处死）、单次造模组（用蘸10%醋酸溶液棉签操作1次，于第3天与D3组同一时间处死）、D3组（每天用蘸10%醋酸溶液的棉签操作1次，共3天，于第3天操作后6h 处死）、D7组（每天用蘸10%醋酸溶液的棉签操作1次，共3天，于第7天与空白对照组同一时间处死），每组各10只。

观察大鼠肛肠黏膜大体形态、肛肠系数、肛肠黏膜病理情况，评估肛肠黏膜损伤情况，从而评价不同造模方法的效果。

结果用10%醋酸溶液诱导大鼠肛肠黏膜损伤的造模方法可使大鼠产生和人类痔病相近的局部症状及和类似的肛肠黏膜损伤病理表现，其中D3组的造模效果最好。

结论用10%醋酸溶液连续操作3天诱导大鼠肛肠黏膜损伤的造模方法可以有效建立接近临床痔病真实表现的肛肠黏膜损伤模型，操作简单、成功率高、稳定性好，可作为研究痔病各种治疗方法的重要基础。

［关键词］痔；肛肠黏膜损伤；动物模型；10%醋酸DOI:10.19668/ki.issn1674-0491.2021.01.005*河北省中医药管理局科研计划项目（2020108）△通信作者，E-mail ：********************Establishment of hemorrhoid model by acetic acid-induced anorectal mucosal inju⁃ry in ratsWu Linlin 1,Liu Zhaoyang 1,Tian Maosheng 1,Zhang Mingquan 1,Zhao Na 1,Gao Jihua 2△1Hebei University of Chinese Medicine,Shijiazhuang 050091,Hebei,China;2Department of Colorectal Surgery,The First Affiliated Hospital of Hebei University of Chinese Medicine,Shijiazhuang 050011,Hebei,China［Abstract ］Objectives To evaluate the feasibility of anorectal mucosal injuries induced by acetic acid to establish hemorrhoid model in rats and the methods to establish anorectal mucosal injury model which is representative of pathological changes in hu⁃mans.Methods Based on the weight,40rats were randomize grouped into four groups,each group have 10rats:control group (received aqua pro injection for 3days,1time per day,were sacrificed on the 7th day),single induction group (received 10%acetic acid for,1time per day,were sacrificed on the 3th day at the same time with D3group),D3group (received 10%acetic acid for 3days,1time per day,were sacrificed on the 3th day 6h after operation),and D7groups (received 10%acetic acid for 3days,1time per day,were sacrificed on the 7th day at the same time with control group).Anorectal mucosa macrostruc⁃ture,anorectal coefficient,pathology,and the severity of injury were evaluated to appraise the effect of different modeling meth⁃ods.Results Using 10%acetic acid-induced anorectal mucosal injury in rats of model establishment could result in local symp⁃toms similar to hemorrhoids in humans and pathological changes in anorectal mucosal injuries.Conclusion Using 10%acetic ac⁃id for 3days is a simple and stable method with high success rates to establish anorectal mucosal injuries model similar to those hemorrhoids in humans.It can be used as a foundation for various research in hemorrhoids,including finding an effective treatment.［Keywords ］hemorrhoids,anorectal mucosal injury,animal model,10%acetic acid痔是人类特有的一种肛肠疾病，常有“十人九痔、十女十痔”等说法，近年来，随着人们饮食习惯、生活习惯、人口老龄化等的改变，痔病愈发成为人们的常见病、多发病，其在急性发作期间可出现大量出血、嵌顿、疼痛等症状，严重影响人们的健康和生活质量[1-2]。

大鼠脊神经选择性结扎镜像痛模型的筛选建立目的：研究行为学观察和热辐射缩足反应潜伏期（PWTL）及机械缩足反应潜伏期（MWT）实验筛选建立脊神经选择性结扎（SNL）镜像痛大鼠模型。

方法：选取100只成年雄性SD大鼠，将其随机分为SNL组90只和假手术组（Sham 组）10只，于术前1 d和术后1、3、7、14、21、28 d进行行为学观察和双足PWTL 及MWT实验检测。

结果：两组术前行为学观察、PWTL及MWT值比较差异均无统计学意义（P>0.05），术后SNL组手术足均出现添足、咬足等行为学现象，且PWTL值和MWT值术后1～28 d均明显低于Sham组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。

SNL组有14只大鼠为手术足，于术后7 d出现添足、咬足等行为学现象，术后14、21、28 d的MWT值均明显低于Sham组，且术后21、28 d 的PWTL值均明显低于Sham组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。

结论：大鼠SNL镜像痛模型筛选和建立成功。

镜像痛是指当躯体某一组织和部位发生损伤后，导致损伤侧和对侧相应部位均出现疼痛和痛敏现象[1]。

临床上一些复杂的区域疼痛综合征及慢性病理性疼痛等均可出现镜像痛[2]。

临床治疗效果不佳，动物实验研究较少。

目前对镜像痛模型的研究多集中在对坐骨神经损伤后建立神经病理性疼痛模型的基础上筛选镜像痛模型，但在筛选方法、筛选标准、筛选成功率方面鲜见报道。

本实验在建立坐骨神经选择性结扎（SNL）神经病理性疼痛模型基础上进行筛选以建立镜像痛模型，为镜像痛的机制研究提供实验依据，现报告如下。

1 材料与方法1.1 实验动物分组选取100只成年SD大鼠（漯河医学高等专科学校实验动物中心），雄性，体重250～300 g，将其随机分为SNL组90只和假手术组（Sham 组）10只，两组大鼠的一般资料比较差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 制作方法1.2.1 坐骨神经选择性结扎模型组（SNL组）SNL组90只，制作方法如下：以氯胺酮10 mg/kg和甲苯噻嗪100 mg/kg腹膜腔注射，大鼠麻醉后取俯卧位，后用聚维酮碘溶液消毒皮肤，于背部脊椎L3～S2节段作正中切口，分离右侧脊柱旁肌肉群，显露脊椎并咬断L4～L6椎骨横突，仔细分离并暴露的L4～L6脊神经，于近脊柱正中处用5-0丝线结扎L5、L6脊神经，并于结扎远端进行神经离断，后分层缝合切口。