广义地讲,除柱色谱外,薄层色谱(液—固色谱)和纸色谱(液—液 色谱)也属于LC。
狭义的LC指柱色谱。按分离机理,柱色谱法可分为液—固吸附色谱、 液—液分配色谱、键合相色谱、离子色谱等。
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6.1.1液—固吸附色谱法
液---固吸附色谱是以固体吸附剂作为固定相,吸附剂通常是些多 孔的固体颗粒物质(如硅胶、氧化铝等),在它们的表面存在吸附中 心。液固色谱实质是根据物质在固定相上的吸附作用不同来进行分离 的。 1.分离原理
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液液分配色谱
正相色谱法
1.极性固定相 聚乙二醇、氨基与腈基键合相 2.相对非极性流动相 正已烷、环已烷 3.极性调节剂 乙醇、四氢呋喃、三氯甲烷 4.分离中等极性和极性较强化合物. 酚类、胺类、羰基类及氨基酸类 5.组分流出顺序 极性小先洗出
(3)气相色谱一般都在较高温度下进行的,而高效液相色谱法则经常可 在室温条件下工作。P296
从色谱分析的发展来看,HPLC比GC更为有用、更具发展前途
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3.HPLC的特点
1、样品不必气化 2、分离温度低 3、选择性好 4、样品回收容易 5、分离效果好 塔板数达到104 ~105/m 6、采用高压输液泵,高效微粒固定相和高灵敏度检测器 7、仪器设备费用昂贵,操作严格。
是流动相尽可能不与固定相互溶,而且流动相与固定相的极性差别越 显著越好。
根据所使用的流动相和固定相的极性程度,将其分为正相分配色谱 和反相分配色谱。
如果采用流动相的极性小于固定相的极性,称为正相分配色谱, 它适用于极性化合物的分离。其流出顺序是极性小的先流出,极性大 的后流出。
如果采用流动相的极性大于固定相的极性,称为反相分配色谱,它 适用于非极性化合物的分离,其流出顺序与正相色谱恰好相反。