第 1 页 共 21 页 安捷伦液相色谱仪安装及操作使用 液相色谱操作规程
安捷伦液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分构成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键；也是液相色谱工获得正确牢靠的试验数据的必经之路。
*：安捷伦液相色谱仪安装条件
一、环境要求：
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1、温度：15～30℃
2、日温差：3℃
3、相对湿度：20%～85%
4、地面：平滑、不易起尘
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5、安装场所： 无震动、四周无腐蚀性介质、无电磁场干扰，操作台纵深尺寸60cm以上，避开空调直吹风，避开直射阳光。
6、推举液相色谱仪工作台：长2米、宽0.8米，承重点于80公斤。建议离墙距离0.3米以上。
一般在安装的实际空间上，还要考虑：
与其它仪器间距大于60cm，仪器后面板应留有不小于50cm的空间，前面板至操作台边缘距离不小10cm；仪器安装平稳坚固，接入了UPS电源，仪器外壳与地线连接。
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二、电源要求：
1、单相交流220V，（+5%～—10%），50～60Hz，有单独的良好接地。
2、若电压不稳，需配置稳压电源，功率大于2.5千瓦。
3、准备1个合格的万用接线板，总数不小于5个扁平三角接线插座。
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4、断电续电本领：断电情形，设备能持续运行1小时以上。
5、接地：安装场所应有牢靠接地线装置
三、溶剂要求：
1、二次重蒸馏水，1000毫升以上（建议用0.45微米水相滤膜过滤）。
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2、乙腈或甲醇（色谱纯或优级纯），1500毫升以上（建议用0.45微米有机相滤膜过滤）。
四、操作系统：Windows XP 操作系统
硬件要求：内存不低于2G；硬盘不低于160G；配有网络适配器（2个网卡）；带光区驱动
第二、安捷伦液相色谱仪安装方法：
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安捷伦液相1260高效液相色谱
操作规程
1.前期工作
查找资料（最佳是外文文献）理解别人做该样品时惯用流动相和固定相。如果还不清晰样品是什么物质，最起码也应当对其极性进行理解，为选取适当流动相和固定相打好基本。
流动相选取注意事项：
① 避免使用高粘度溶剂作为流动相；
② 所选用流动相一定要与样品相溶；
③ 各流动相之间可以较好相溶；
固定相选取注意事项：
a. 正相色谱
正相色谱用固定相普通为硅胶（Silica）以及其她具备极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）键合相填料。由于硅胶表面硅羟基（SiOH）或其她极性基团极性较强，因而，分离顺序是根据样品中各组分极性大小，即极性较弱组份最先被冲洗出众谱柱。正相色谱使用流动相极性相对比固定相低，如正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。
b. 反向色谱
反向色谱用填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相
对较弱官能团键合相。反向色谱所使用流动相极性较强，普通为水、缓冲液与甲醇、乙腈等混合物。样品流出众谱柱顺序是极性较强组分最先被冲洗出，而极性弱组分会在色谱柱上有更强保存。 惯用反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等。
2.准备工作
① 用于液相色谱分析样品溶液使用前要通过0.15µm过滤器过滤，必要达到均匀而无颗粒状态；
② 流动相一定要选用色谱级别（最佳是默克、飞世尔、时联等牌子），并且在使用之前一定要使用0.4µm过滤器过滤，再用超声波清洗仪脱气解决20-30min；
③ 在连接柱子和色谱仪之前，阀件或管路一定要清洗干净，（普通用异丙醇将管路清洗）
3.仪器操作
（一）将所选取流动相加入相应试剂瓶中：棕色瓶相应A泵，该瓶中只能加双蒸水或娃哈哈纯净水；B、C、D泵依照需要添加。
第 1 页 共 21 页 安捷伦液相色谱仪安装及使用方法 液相色谱操作规程
安捷伦液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分构成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键；也是液相色谱工获得正确牢靠的试验
安捷伦液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分构成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键；也是液相色谱工获得正确牢靠的试验数据的必经之路。
第一：色谱仪安装条件：
一、环境要求：
1、温度：15～30℃
2、日温差：±3℃ 第 2 页 共 21 页
3、相对湿度：20%～85%
4、地面：平滑、不易起尘
5、安装场所：无震动、四周无腐蚀性介质、无电磁场干扰，操作台纵深尺寸60cm以上，避开空调直吹风，避开直射阳光。
6、推举液相色谱仪工作台：长2米、宽0.8米，承重点于80公斤。建议离墙距离0.3米以上。
一般在安装的实际空间上，还要考虑：
与其它仪器间距大于60cm，仪器后面板应留有不小于50cm的空间，前面板至操作台边缘距离不小10cm；仪器安装平稳坚固，接入了UPS电源，仪器外壳与地线连接。 第 3 页 共 21 页
二、电源要求：
1、单相交流220V，（+5%～—10%），50～60Hz，有单独的良好接地。
2、若电压不稳，需配置稳压电源，功率大于2.5千瓦。
3、准备1个合格的万用接线板，总数不小于5个扁平三角接线插座。
4、断电续电本领：断电情形，设备能持续运行1小时以上。
5、接地：安装场所应有牢靠接地线装置
第 4 页 共 21 页 三、溶剂要求：
1、二次重蒸馏水，1000毫升以上（建议用0.45微米水相滤膜过滤）。
2、乙腈或甲醇（色谱纯或优级纯），1500毫升以上（建议用0.45微米有机相滤膜过滤）。
四、操作系统：WindowsXP操作系统
硬件要求：内存不低于2G；硬盘不低于160G；配有网络适配器（2个网卡）；带光区驱动
液质联用仪
本实验室使用的液质联用仪是安捷伦公司6400系列的一款产品，包括超高效液相色谱1290和质谱主机G6460，以及与其配套的计算机和打印机，他们之间通过网络协议通讯，并通过网络交换机连接在一起。本仪器于2014年年初安装使用，价值两百多万元。物质只要能溶于液体，均可以被检测。本实验室主要用于农产品样品的农药残留定性检测，
超高效液相色谱1290是整个系统的分离和进样装置，样品在色谱柱中经初步分离，通过接口进入质谱。质谱以离子源、质量分析器和检测器为核心。离子源是将分析物中的中性化合物离子化，并将产生的离子在电场的作用下进入离子传输毛细管。
离子传输毛细管是离子的导入通道，它将离子源产生的离子传输进入质谱，同时，隔绝了外部的常压与质谱内部的高真空。离子通过毛细管后，进入离子光学组件，它包括skimmer1，八极杆以及lens1和lens2，进一步除去了溶剂以及中性分子，也是一个高效的离子传输组件，并聚焦随机运动的离子进入三重四极杆质量分析器。
G6460的质量分析器是三重四级杆，是由三组四极杆空间串联而成，一个质谱就是一个四级杆，所以三重四级杆质谱是空间串联的多级质谱分析，也叫做QQQ质谱。第一个四级杆根据设定的质合比范围扫描和选择所需的离子。第二个四级杆，也称碰撞池，用于聚集和传送离子。在选择离子飞行的途中，引入碰撞气体氮气，第三个四级杆用于分析在碰撞池中产生的碎片离子。实际上，碰撞池采用了六极杆的设计，拥有更好的聚焦及传输功能，四级杆就被淘汰了，但还沿用三重四级杆的名称。G6460质谱的检测器包括高能打拿极和电子倍增器，此外，质谱需要在真空环境下工作，它的真空系统由前级真空泵和分子涡轮泵组成，前级真空一般在1.8-2.5Torr之间，高真空在1.9-2.3*10-5Torr之间。
原理：它以液相色谱作为分离系统，质谱为检测系统。样品在质谱部分和流动相分离，被离子化后，经质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器得到质谱图。
