Agilent 6460 三重串联四级杆液质联用仪的标准操作规程定性分析

Agilent 6460 三重串联四级杆液质联用仪的标准操作规程定量分析——创建定量的批处理和定量方法1.单击菜单项File > New Batch在新的批处理对话框，找到数据文件夹，例如“D:\Masshunter\Demo Data\DrugOfAbuse”，输入批处理文件名例如“qqq”并点击Open 按钮创建一个新的批处理文件：2.软件自动弹出Add Sample 对话框，单击选择Select All 按钮然后单击OK 来添加所有样品：3.单击菜单Method > New > New Method from Acquired MRM Data4.用鼠标选择CMAMCal_L5.d 并点击Open 按钮导入MRM 方法采集信息(此处需要选择最有代表性的谱图，一般选择较高浓度样品数据，这样保留时间，离子比例等比较准确)：5.在左侧Method SetupTasks 选项下自上而下进行，首先点击MRM Compound Setup 检查导入的用于MRM 化合物设置的采集参数是否正确。

6.单击方法设置任务Method Setup Tasks> Retention Time Setup，检查确认导入的参数。

7.单击方法设置任务Method Setup Tasks>ISTD Setup，然后从下拉菜单ISTD CompoundName 为每个目标化合物指定内标化合物(ISTD），ISTD Conc 列输入相应内标化合物的加入浓度。

8.单击方法设置任务Method Setup Tasks >Concentration Setup，9.单击Method 方法菜单选择“Create Levers from Calibration Samples”10.填写各级别校正样品的浓度，11.单击Method 方法菜单选择Copy Calibration Levels To…在复制校正级别对话框，单击选择所有（Select All）对话框，然后单击OK 按钮。

Agilent6460三重串联四级杆液质联用仪的标准操作规程定性
分析
Agilent6460三重串联四级杆液质联用仪的标准操作规程
定性分析
1.打开定性分析软件时会自动弹出Open Data File对话框，选中待分析的数据文件，单击Open按钮，即可打开
2.提取色谱图：右键点击数据导航区选择的数据，或者在色谱图显示区域点击右键，在弹出的菜单选择Extract Chromatograms。

提取质谱图：提取某点的质谱图，直接在该点双击左键即可。

3.在TIC图中使用选择范围工具选择某点或一段背景范围，单击鼠标右键，选择Extract Spectrum to Background，该质谱图被自动加入到背景质谱图(Background Spectra)。

4.在MS Spectrum Results内的某张质谱图上右键点击，在弹出的窗口选择Substract Background Spectrum。

则该质谱图会自动扣除掉上面的背景质谱图，
5.要对色谱图进行积分，在方法浏览区选择Chromatogram功能区，根据不同需要进行积分选择，选择Integrate(MS)等。

选择Agile 积分器。

直接右键点击色谱图，在弹出的菜单选择Integrate Chromatogram进行积分。

6.从File菜单选择Print>Analysis Report…从左侧选择要打印的数据文件，可以选择一个或多个打开的数据。

设定好报告选项后，点击OK按钮生成报告。

一、超高压液相色谱/三重串联四极杆质谱联用仪技术要求1.应用范围：药品中痕量和超痕量农兽药残留及非法添加剂的筛查和定量分析，环境样品中有机污染物的分析，法医毒理学中毒物的筛查和定量分析等。

2.工作条件：2.1工作电压：220±5%V2.2操作温度：15–30︒C2.3湿度：<85%3.技术参数3.1液相色谱部分3.1.1高压混合二元梯度泵* 3.1.1.1串联双柱塞往复泵设计，可自主溶剂压缩因子设置，自动连续可变冲程驱动（20μL-100μL），保证在不同流速及不同流动相组成下的最佳流速稳定性；（提供连续可变冲程的软件截图并加盖生产厂商公章）3.1.1.2为保证仪器寿命，以及长期使用后的性能，要求溶剂泵传动装置采用金属滚珠螺杆，而非皮带轮设计；* 3.1.1.3流量范围：0.001mL/min–4.0mL/min，递增率0.001mL/min；3.1.1.4压力范围：0–18,500psi或更高；3.1.1.5混合精度：＜0.18%RSD；3.1.1.6混合准确度：＜±0.40%；*3.1.1.7延迟体积最小可达20µL；*3.1.1.8耐受pH范围：1-12；3.1.2自动进样器：* 3.1.2.1样品容量：≥130位2mL样品瓶；3.1.2.2压力范围：0–18,500psi或更高；3.1.2.3进样范围：0.1–20μL；3.1.2.4进样精度：<0.20%RSD；*3.1.2.5交叉污染度：<0.0015%（以氯己定为测试对象，而非咖啡因）；3.1.2.6控制：自动洗针程序，柱前自动衍生程序，取样及进样速率；3.1.3柱温箱3.1.3.1柱温范围：室温上5︒C–80︒C；3.1.3.2温度稳定性：±0.05℃3.1.3.3温度准确度：±0.5℃；3.1.3.4柱容量：同时放置2根以上30cm色谱柱。

3.2三重串联四极杆质谱仪部分*3.2.1离子源：独立的ESI源。

Agilent 6460 三重串联四级杆液质联用仪的标准操作规程Ⅰ目的：制定Agilent 6460 三重串联四级杆液质联用仪使用操作规程，确保操作人员能正确规范地操作液质联用。

Ⅱ范围：适用于Agilent 6460 三重串联四级杆液质联用仪的使用。

Ⅲ规程：1.使用条件：使用安捷伦6460质谱仪时，要求使用220V（+5% ~ -10%，50 ~ 60Hz）单相交流电。

注意！因为任何原因造成的断电，请关闭仪器面板左下角的开关，等待供电恢复10分钟以上再开启电源，否则有可能烧毁电路板。

2.气体供应：仪器运行时需提供纯度>99%的氮气作为喷雾与干燥气，输出压力为0.6 ~ 0.7 MPa。

气体一般由液氮罐供应，在仪器开机时，可以将罐体上部的两个绿色阀门开到最大后，向回转半圈。

注意！在仪器开机（即使处于休眠）时如果长时间停止气体供应，会造成真空腔体内部污染。

实验开始前，如果发现液氮罐液体存量不足，请及时联系管理员。

另外，仪器需要高纯氮气作为碰撞气，输出压力为0.1 ~ 0.2 MPa。

注意！过高的碰撞气分压有可能损坏仪器内部的电磁阀。

3.仪器开机：仪器从断电状态开机时，确认电源已经连接而且气振阀处于关闭后，打开仪器左侧板上的总电源，随后将前面板左下方的电源按键按下，真空泵即开始工作。

大约2~3分钟后，仪器内置的系统启动完毕，可以开启Masshunter软件与仪器通讯。

等待四极杆温度达到100℃，高真空达到4 x10-5 Torr之后，即可进行调谐或开始实验。

注意！在仪器开始抽真空时，请不要打开前级泵上的气振阀，否则可能因为回油污染真空腔体内部。

4.仪器调谐：仪器距离上次调谐超过一个月，或者重新开机预热后，建议调谐质谱仪以达到最佳使用状态。

确认调谐液存量，以及管线已经连接到喷雾针之后，选择Masshunter的Tune界面，选择适当的极性，点击Autotune。

系统会自动完成调谐并给出调谐报告。

5.状态确认：质谱仪正常工作时，前级真空1.5 ~ 3Torr；高真空2.5x10-5 ~ 4x10-5Torr（6410），1.5x10-5 ~ 2.5x10-5 Torr（6460）。

液质联用仪本实验室使用的液质联用仪是安捷伦公司6400系列的一款产品，包括超高效液相色谱1290和质谱主机G6460，以及与其配套的计算机和打印机，他们之间通过网络协议通讯，并通过网络交换机连接在一起。

本仪器于2014年年初安装使用，价值两百多万元。

物质只要能溶于液体，均可以被检测。

本实验室主要用于农产品样品的农药残留定性检测，超高效液相色谱1290是整个系统的分离和进样装置，样品在色谱柱中经初步分离，通过接口进入质谱。

质谱以离子源、质量分析器和检测器为核心。

离子源是将分析物中的中性化合物离子化，并将产生的离子在电场的作用下进入离子传输毛细管。

离子传输毛细管是离子的导入通道，它将离子源产生的离子传输进入质谱，同时，隔绝了外部的常压与质谱内部的高真空。

离子通过毛细管后，进入离子光学组件，它包括skimmer1，八极杆以及lens1和lens2，进一步除去了溶剂以及中性分子，也是一个高效的离子传输组件，并聚焦随机运动的离子进入三重四极杆质量分析器。

G6460的质量分析器是三重四级杆，是由三组四极杆空间串联而成，一个质谱就是一个四级杆，所以三重四级杆质谱是空间串联的多级质谱分析，也叫做QQQ质谱。

第一个四级杆根据设定的质合比范围扫描和选择所需的离子。

第二个四级杆，也称碰撞池，用于聚集和传送离子。

在选择离子飞行的途中，引入碰撞气体氮气，第三个四级杆用于分析在碰撞池中产生的碎片离子。

实际上，碰撞池采用了六极杆的设计，拥有更好的聚焦及传输功能，四级杆就被淘汰了，但还沿用三重四级杆的名称。

G6460质谱的检测器包括高能打拿极和电子倍增器，此外，质谱需要在真空环境下工作，它的真空系统由前级真空泵和分子涡轮泵组成，前级真空一般在 1.8-2.5Torr之间，高真空在1.9-2.3*10-5Torr之间。

原理：它以液相色谱作为分离系统，质谱为检测系统。

样品在质谱部分和流动相分离，被离子化后，经质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器得到质谱图。

三重四极杆液质联用仪检定规程1. 引言三重四极杆液质联用仪（Triple Quadrupole Liquid Chromatography Mass Spectrometry，TQ-LC/MS）是一种常用的分析仪器，广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。

为了确保该设备的准确性和可靠性，需要进行定期的检定和校准。

本文将介绍三重四极杆液质联用仪的检定规程。

2. 检定准备2.1 检定设备•标准品：选择适当浓度和组成的标准品，以确保检定结果的准确性。

•校正气体：使用纯度高且稳定的校正气体，如氮气或空气。

•标准工作液：根据实验要求配置合适浓度和组成的标准工作液。

2.2 检定条件•温度：设置合适的柱温和离子源温度，以保证实验条件的稳定性。

•流速：选择适当的流速，使得样品能够在一定时间内通过柱子，并获得良好的色谱分离。

•柱子：选择合适的柱子，根据样品的性质和分析要求进行选择。

2.3 样品处理•样品制备：根据实验要求，选择适当的样品制备方法，如提取、纯化等。

•样品浓度：根据实验要求，调整样品的浓度，使其适用于检定。

3. 检定步骤3.1 系统性能检定1.质谱仪参数设置：–设置离子源参数，如离子化方式、碰撞能量等。

–设置质谱参数，如扫描范围、分辨率等。

2.运行空白样品：–注入纯净溶剂作为空白样品。

–运行质谱仪并记录数据。

3.运行标准物质：–注入标准工作液，并运行质谱仪进行测定。

–记录数据并计算出相应的峰面积或峰高值。

3.2 定量检定1.标准曲线绘制：–使用一系列已知浓度的标准物质制备一组标准溶液。

–分别注射每个标准溶液，并记录相应的峰面积或峰高值。

–绘制标准曲线，以峰面积或峰高值为纵坐标，浓度为横坐标。

2.样品检定：–根据实验要求，选择合适的样品处理方法。

–注射样品并运行质谱仪进行测定。

–根据标准曲线计算出样品中目标物质的浓度。

3.3 精密度和准确度检定1.精密度检定：–选择一组具有不同浓度的样品。

–分别注射每个样品并运行质谱仪进行测定。

三重四级杆液质联用仪原理三重四级杆液质联用仪（Triple Quadrupole Liquid Chromatography-Mass Spectrometry，简称LC-MS/MS）是一种常用的仪器方法，可以用于分析和定量分析复杂的化合物混合物，如药物、环境污染物等。

其原理基于三重四极杆质谱仪和液相色谱的联用。

液相色谱（Liquid Chromatography，LC）是一种基于化合物在液态流动相中的不同亲和力而进行分离的技术。

它包括样品的进样、液相流动、固定相柱和色谱分离等步骤。

在液相色谱中，化合物溶解在流动相中，经过色谱柱的相互作用来实现分离。

质谱（Mass Spectrometry，MS）是一种通过在电离源中将化合物转化为离子，并在质谱仪中按其质荷比（m/z）进行质量分析的技术。

质谱仪由电离源、质量分析器和检测器等组成。

电离源将化合物转化为离子，质量分析器根据离子在磁场中的轨迹进行分析，最后由检测器对离子进行检测。

1.进样：样品通过进样系统进入液相色谱柱进行分离。

进样系统的常用方法有自动进样器和在线连续进样。

2.液相色谱：样品在液相色谱柱中分离，根据不同化合物在固定相柱上的亲和力进行分离。

固定相柱内部有固定相，使得不同化合物有不同的保留时间。

3.电喷雾离子源（Electrospray Ionization，ESI）：在液相色谱柱后端出口处，通过电喷雾采用高压直流电离方法将流出的分离物转化为带电的离子。

4.第一级四极杆：在进入质谱之前，离子首先进入第一级四极杆，通过调节电压和扫描频率等参数，选通质量范围内的一些特定离子。

5.质量分析器：通过在质量分析器中施加电压和磁场以对离子进行分析，根据其质量荷比和相对丰度来确定化合物的质量。

6.碎裂（Collision-induced Dissociation，CID）：在第一级四极杆后，离子进入碰撞池区域，在碰撞池区域中与碰撞气体（通常是气体）发生碰撞，使离子发生断裂，从而形成新的离子片段。

三重串联四极杆液质联用仪品牌：WATERS1、设备名称：液相色谱串联四极杆质谱联用仪2、主要用途：用于多种农、兽药残留、生物毒素残留、食品添加剂的检测，动物及动植物源食品的残留监控工作，特别是对检测结果为阳性的样品，可进行结果确证，并且可以对预期要开展的检测项目进行检测技术储备，以加强对出口食品、农产品安全卫生质量的监管和控制。

3、工件条件:工作电压：230V±10%温度：18-250C湿度：350-85%4、技术指标：1）超高效液相色谱系统技术要求1.1二元或四元泵*1.1.1压力：0-15,000 psi1.1.2流量：0.001-2.000ml/min, 以0.001ml/min 为增量1.1.3精度：≤0.075％RSD1.1.4流速准确度：±1.0%1.1.5延迟体积：<120μL1.1.6溶剂数量：4种1.1.7设定范围：室温上5 –60 °C，1°C 步距1.1.8温度控制精度：±0.1oC温度1.2自动进样器1.2.1精度：< 0.5%1.2.2样品交叉污染度：<0.005%1.2.3进样准确度：±1 μL1.2.4进样体积：0.1 ～50μl1.2.5进样线性度: > 0.9991.3在线真空脱气机1.4二极管阵列检测器1.4.1波长范围：190-800nm1.4.2二极管个数：1024个1.4.3光学分辨率：1.2nm1.4.4狭缝宽度：1，2，4，8，16nm1.4.5实时信号:同时输出8个实时信号1.4.6波长精度：1nm1.4.7基线噪音：±1.0 x 10-5 AU,在254nm和750nm(1mL/min甲醇)1.4.8基线漂移: 2 x 10-3AU/hr , 在254nm(1mL/min甲醇)1.4.9数据采集率：〉80Hz2）质谱部分指标*2.1质量范围m/z: MS1及MS2：30－3,000amu2.2分辨率：?2.5M8H／≤0.1 amu 质量数稳定性：2.3．2.4电喷雾灵敏度指标(相同绝对量，不同浓度下的灵敏度)：1pg利血平，m/z 609-195，信噪比≥500:12.5ESI负离子：2.5pg氯霉素，m/z321-152，信噪比≥100:12.6正、负离子采集切换速率≤20 ms2.7MRM扫描时间≤5 ms,一个采集通道可MRM定量数≥502.8扫描速率：?5000amu/秒6动态范围：?4X102.92.10质量精度：≤0.1 amu2.11离子源：大气压离子源是双正交设计，而且离子源和质谱间有隔断阀，锥孔有N2保护气，可容忍不挥发性的缓冲盐。

1 仪器组成与开机1 . 1 仪器组成本液质联用仪（LC-MS)主要由Agilent 1200系列液相色谱系统、质谱分析系统和仪器控制系统组成。

液相色谱系统包括泵、脱气机、自动进样设备、柱温箱、二极管阵列紫外检测器;质谱分析系统包括气源（高纯氮气）、真空泵、离子源、四极杆质量分析器。

1 .2 开机依次打开液相色谱各部件及电脑的电源开关;打开氮气瓶、液氮罐、真空泵和质谱检测器电源开关。

2 编辑实验方法2. 1 点击桌面Data Acquisition图标，启动MassHunter软件；工作站画面分为仪器状态界面、实时绘图界面、方法编辑界面和工作列表界面。

2 . 2 在方法编辑界面设定HPLC条件：自动进样器参数、泵参数、柱温箱参数、检测器参数。

2 .3 在方法编辑界面设定MS QQQ条件:选择调谐文件、设置扫描段Scan Segment、在MRM扫描段表中，设定母离子、子离子以及每个四极杆的分辨率（unit，wide和widest) 、设置QQQ仪器的电离源参数(ESI、APCI)。

2 . 4 保存方法文件。

2 . 5 运行单个样品：分别于样品栏中输人样品描述，瓶号以及数据文件名等;点击工具栏Start Sample Run图标开始采样。

2 . 6 运行多个样品2 . 6 . 1 添加一个样品：从工作列表菜单选择Add Sample并输人以下样品信息：样品名称、样品位置、方法、数据文件名称、样品类型、注射体积等。

2.6.2 添加多于一个的样品：从工作列表菜单选择Add Multiple Sample。

在Sample Position表格，选择被分析样品的位置；在Sample Information 中设定运行信息，方法路径以及数据文件储存路径。

2 . 6 .3 保存工作列表并开始运行。

3 数据分析分别点击桌面上Agilent Masshunter Qualitative Analysis 和Agilent Masshunter Quantitative Analysis图标，进入数据分析系统，选择各种处理方式对所得到的数据进行定性和定量分析。

6460 三重串联四级杆液质联用仪的标准操作规程Ⅰ目的：制定 6460 三重串联四级杆液质联用仪使用操作规程，确保操作人员能正确规范地操作液质联用。

Ⅱ范围：适用于 6460 三重串联四级杆液质联用仪的使用。

Ⅲ规程：1.使用条件：使用安捷伦6460质谱仪时，要求使用220V（+5% ~-10%，50 ~ 60）单相交流电。

注意！因为任何原因造成的断电，请关闭仪器面板左下角的开关，等待供电恢复10分钟以上再开启电源，否则有可能烧毁电路板。

2.气体供应：仪器运行时需提供纯度>99%的氮气作为喷雾与干燥气，输出压力为0.6 ~ 0.7 。

气体一般由液氮罐供应，在仪器开机时，可以将罐体上部的两个绿色阀门开到最大后，向回转半圈。

注意！在仪器开机（即使处于休眠）时如果长时间停止气体供应，会造成真空腔体内部污染。

实验开始前，如果发现液氮罐液体存量不足，请及时联系管理员。

另外，仪器需要高纯氮气作为碰撞气，输出压力为0.1 ~ 0.2 。

注意！过高的碰撞气分压有可能损坏仪器内部的电磁阀。

3.仪器开机：仪器从断电状态开机时，确认电源已经连接而且气振阀处于关闭后，打开仪器左侧板上的总电源，随后将前面板左下方的电源按键按下，真空泵即开始工作。

大约2~3分钟后，仪器内置的系统启动完毕，可以开启软件与仪器通讯。

等待四极杆温度达到100℃，高真空达到4 x10-5 之后，即可进行调谐或开始实验。

注意！在仪器开始抽真空时，请不要打开前级泵上的气振阀，否则可能因为回油污染真空腔体内部。

4.仪器调谐：仪器距离上次调谐超过一个月，或者重新开机预热后，建议调谐质谱仪以达到最佳使用状态。

确认调谐液存量，以及管线已经连接到喷雾针之后，选择的界面，选择适当的极性，点击。

系统会自动完成调谐并给出调谐报告。

5.状态确认：质谱仪正常工作时，前级真空 1.5 ~ 3；高真空2.5x10-5 ~ 4x10-5 （6410），1.5x10-5 ~ 2.5x10-5 （6460）。

三重四极杆气相色谱串联质谱仪总体性能要求仪器类型为三重四极杆气质联用仪，能对目标化合物进行高灵敏度、高选择性的筛查和对痕量化合物的准确定量，适用于农药、违禁添加物，化学污染物等残留物的准确定量分析，并具有自动的定性确认功能。

1、工作条件1.1.电源电压: 220 V±10%1.2.温度：20±5℃1.3.湿度：40%～70%2、性能指标2.1 气相色谱仪2.1.1 柱温箱2.1.1.1 操作温度范围：室温以上4℃到450℃2.1.1.2 温度设定精度：0.1℃2.1.1.3 控温准确性：0.01℃2.1.1.4 程序升温：等于或者优于20阶／21平台2.1.1.5 冷却速度：从450 降到50℃≤3.4 min（210S）2.1.1.5 最高升温速率：≥±110℃/min（无需升级），以0.01℃/min增加2.1.1.6 温度稳定性：室温每波动1°C ，柱温箱的温度波动<0.01°C；2.1.1.7 气相色谱主机采用彩色触摸屏进行操控2.1.2 分流/不分流进样口2.1.2.1 快速扳转系统，更换衬管无需拆卸螺丝，方便使用和维护，无需降温操作,2.1.2.3 压力范围：0 ～ 1010kPa2.1.2.4 压力控制精度：≤0.001psi2.1.2.5 分流比设定范围：0 ～ 99992.1.2.6 最高温度：≥400℃2.1.3 自动进样器2.1.3.1 盘位：≥150位2.1.3.2 进样量范围：0.1～50ul；2.1.3.3 进样精度：RSD<1%2.1.3.4 交叉污染率<0.001%。

2.2、质谱部分2.2.1 质量数范围：10～1050 m/z 。

2.2.2 灵敏度:★2.2.2.1 EI Scan : 1 pg OFN, S/N ≥ 1500（氦气做载气），以官方数据为依据(仪器验收时需出具现场测试报告)；2.2.2.2 EI（MRM）: 100fg OFN, S/N ≥ 18000 ，以官方数据为依据(仪器验收时需出具现场测试报告)；★2.2.2.3 IDL（MRM）: 10fg OFN 连续8次进样，峰面积RSD≤15%，IDL≤4.5fg，以官方数据为依据(仪器验收时需出具现场测试报告)；2.2.2.4 PCI MRM : 1pg BZP-d10, S/N ≥ 2000，2.2.2.5 NCI SIM : 100fg OFN, S/N ≥ 40002.2.3 分辨率：0.4 ～3.0u，可调2.2.4 质量稳定性：不低于±0.1 u/48h★2.2.5 最大扫描速度：20,000 u/sec2.2.6 最大MRM速度：800通道/sec2.2.7 最小驻留时间(Dwell Time)：0.5ms2.2.8 最大Event数：20002.2.9 扫描功能: 全扫描(Full Scan)、子离子扫描( Product Ion Scan)、母离子扫描(Precursor Ion Scan)、中性丢失扫描(Neutral Loss Scan)、选择离子扫描模式(SIM)、多反应扫描模式（MRM），以任意多种采集模式为组合进行同时扫描。

1目的制定TSQ Quantiva三重四级杆液相色谱质谱联用仪使用操作规程，确保操作人员能正确规范的使用液质联用仪进行检测工作。

2适用范围本操作规程适用于TSQ Quantiva三重四级杆液相色谱质谱联用仪的使用。

3操作规程3.1开机(从Off\停机至就绪\Standby 状态)1.打开氮气与氩气钢瓶的开关，调节分压分别为0.55~0.65MPa 和0.135MPa 左右；2. 打开排风；打开空调，保持实验室温度在(18～25℃)；3.检查洗针溶液和后密封清洗溶液的量以及流动相的量；4.流动相须现配并超声，缓冲盐溶液过0.22μm 微孔滤膜（或者使用色谱纯的盐溶液和酸溶液）；5.打开稳压电源以及UPS 电源开关，检查电源电压输出是否稳定且零地电压是否小于1V；6.检查机械泵油量，油面应该在视窗的1/2 多一些；7.打开质谱右侧（Main power）开关——ON 位置，此时机械泵也会随之启动；真空开关开启约12 小时后(或者隔夜)，打开电子开关（Electronics）在Operational 状态；8.打开计算机（此时液相和质谱内置的CPU 会通过网线与电脑主机建立通讯联系，这个时间大约要1～2 分钟）；9.确认质谱前面板上的power、vacuum、communication 指示灯均为绿色，双击桌面上Tune 图标，进入质谱界面，查看质谱状态，确认前级压（Fore Pump Pressure）TSQ Quantiva 小于4.5 Torr，TSQ Endura 小于2.0 Torr，离子规压力（Ion Gauge Pressure）小于4e-6 Torr（TSQ Endura），9e-6（TSQ Quantiva）；10.打开质谱扫描，打开液相自动进样器和泵以及柱温箱的电源；11.设定质谱及色谱条件参数，平衡色谱柱，准备进样。

3.2质谱操作双击TSQ Quantis 3.0Tune软件看仪器状态Spray V oltage（喷雾电压）Ion Transfer Tube Temp （离子传输管温度）Vaporizer Temp（蒸发温度，辅助气加热温度）Sheath Gas 鞘气Aux Gas 辅助气Sweep Gas 反吹气看真空VacuumSource Pressure 小于1.5Analyzer Pressure 小于6e-63.3液相控制软件双击Tracefinder软件右上角Real time status————Instrument Controls——Thermo Scientific SII for Xcalibur——最下面Direct Control53.4怎样/判断联机Home界面，每个模块左下角connect 前面方框勾上。

Agilent6460三重串联四级杆液质联用仪的标准操作规程开机关机Agilent6460三重串联四级杆液质联用仪的标准操作规程开机关机开机1.打开氮气发生器的电源，待压力输出稳定后，调节输出压力为约0.7MPa（约100psi），并确认前级泵的镇气阀处于关闭状态，打开高纯氮主阀门，调节高纯氮气钢瓶次级减压表输出压力至0.15MPa （最大不要超过0.2MPa）。

2.打开计算机，网络交换机（LAN Switch）电源。

3.打开液相各个模块电源。

4.打开质谱前面左下角的电源开关，这时可以听到质谱里面溶剂切换阀切换的声音。

同时机械泵开始工作，仪器开始自检。

等待大约两分钟，听到第二声溶剂阀切换的声音(表明质谱自检完成)后，表示仪器自检完成，可以联机。

质谱一接通电源，前级真空规就开始工作，监视前级真空值。

但只有当Turbo1和Turbo2（只有G6460C,才有Turbo2）涡轮泵的转速都大于95%之后，四极杆的高真空规才会开始工作，正常读取真空值。

5. 4.在计算机桌面上双击MassHunter采集软件图标Data Aciqisition，进入MassHunter 工作站。

一般来说停机较长时间后的开机，需要抽真空至少6小时后方可分析样品。

关机1.在MassHunter采集软件内点击三级四极杆MS的图标ASJ ESI，依下图所示选择Vent。

2.出现下述提示，如果确认要放空，选择Yes。

3.可以在三重四极杆Parameter Value界面观察涡轮泵转速的下降情况。

4.分子涡轮泵转速和功率基本为0后，等待30分钟，关闭MassHunter软件。

然后关闭质谱及LC各模块，PC电源5.关闭氮气发生器。

三重四极杆液相色谱质谱联用仪技术参数三重四极杆液相色谱质谱联用仪技术参数一、应用范围1、适用于新药研发，药物杂质鉴定、代谢物鉴定、研究与疾病有关的标记物和代谢组学、脂质组学、小分子和生物大分子的快速同步定性、定量分析。

2．适用于蛋白质组学：蛋白质组学研究中的多肽和蛋白质的定量分析。

二．设备名称：三重四极杆质谱仪仪器供应商应具备10年以上串联质谱生产经验，确保仪器技术成熟稳定。

1. 工作条件1.1.1电源电压：230V±10%，50/60Hz，16A1.1.2环境温度：15-27℃（最优：18~21℃）1.1.3相对湿度：20-80%★1.1.4气体需求：雾化气N2：纯（99%纯度）N2，碰撞气Ar：超高纯Ar或N2（99.999%），源区无需额外空气压缩机，简化气体供应降低消耗2. 质谱部分技术性能2.1 离子源2.1.1 离子源:独立的可加热电喷雾离子源和大气压化学电离源，全内置式气路电路接口设计，离子源外部无任何气路电路管路连接，安装离子源时即可实现气路电路连接，自动识别，实现零误操作；2.1.2 ESI与APCI切换只需更换探针，电晕针旋钮式在线调节，快速简便，切换时间小于1min，且整个过程无需拆卸离子源；2.1.3探针采用最优喷雾设计，可在任意位置固定并实现上下、前后直线型、左右圆弧型三维连续调节；2.1.4 内置大面积多边形同轴主动排废气设计，消除废气涡流，降低化学噪音，不锈钢排废管路，实现离子源腔体高温自洁净；2.1.5 具有雾化气、辅助雾化气、可调式吹扫气（0-15L/min可调），进一步提高雾化效率和稳定性；2.1.6 可拆卸的吹扫挡锥，非对称锥面设计，在高灵敏度的情况下确保长期耐用性；2.1.7可加热HESI源，加热温度最高可达550℃，不分流的情况下采用纯水作为溶剂，流速为1ul-2000μl/min；2.1.8APCI：加热温度最高可达550℃，不分流的情况下采用纯水作为溶剂，流速为50ul-2000μl/min；2.1.9双槽位全自动注射泵实现质谱直接进样，自动调谐和校正，既可通过软件也可通过操作面板自动设置；2.1.10质谱配置软件具备实时监控反馈喷雾稳定性功能；。

包一：与液相色谱联用的三重四级杆串联质谱联用仪技术参数一、仪器名称：与液相色谱联用的三重四极杆串联质谱仪二、功能要求：要求为三重四极杆质谱联用仪（MS/MS），可对环境、非法添加剂、有机污染物等定性定量分析以及相关研究工作。

三、系统配置：1.ESI和APCI离子源，串联质谱质量分析器，原装最新版本的串联质谱仪软件及工作站级别电脑，打印机，定量优化和处理软件。

ESI喷针5根，泵油2瓶。

2.10KV A延时1小时UPS电源，液氮罐。

四、主要技术参数▲1.成熟稳定的串联四极杆质谱仪制造生产技术，要求厂家有10年以上串联四极杆质谱仪制造销售历史。

2. 离子源具有主动排放废气装置带动离子源内溶剂气体排放，防止气体在密闭的离子源腔体中的回流，降低离子源的记忆效应和污染，降低机械泵的负荷延长机械泵泵油使用时间，维护试验环境，保障工作人员健康。

★3.离子源接口要求采用带气帘气技术的锥孔结构，非毛细管（半径<1mm）设计装置, 以同时保持高灵敏度和优异的抗污染能力；离子源切换方便、快速，无需放空质谱真空系统；清洗、维护方便；离子源接口具高灵敏度和优异的抗污染能力. （提供证明文件）★4. 任何一种离子化模式下，要求有两路辅助加热雾化气，确保系统有稳定可靠的灵敏度，辅助加热雾化气温度可到700℃。

★5. ESI/APCI离子源流速：液相不分流方式的情况下流速范围5μL～3ml/min ，可以直接移植液相方法到质谱而不损失灵敏度。

★6.采用高纯氮气作为雾化气和碰撞气，无需额外氩气；7.Q0离子引入部分拥有高压离子聚焦技术，压力为8mtorr，以确保最佳的离子聚焦效果和离子传输效率, 有效消除“记忆效应”和“交叉污染”▲8.采用线性加速碰撞池技术，可以使离子快速通过碰撞室，提高分析通量，消除“记忆效应”和“交叉污染”。

Dwell time低至1ms时，灵敏度不损失。

★9.检测器系统：脉冲计数电子倍增器，能够满足长期大量脏样品定量分析的数据可靠性和重复性；（提供证明文件）10.离子源和进样方式：离子源接口适用于100%有机相到100%水相，耐用一定浓度的缓冲液11.检测性能★11.1质量范围m/z：5-3000 amu（提供证明文件）。

1仪器组成与开机1 . 1仪器组成本液质联用仪（LC-MS）主要由Agile nt 1200系列液相色谱系统、质谱分析系统和仪器控制系统组成。

液相色谱系统包括泵、脱气机、自动进样设备、柱温箱、二极管阵列紫外检测器；质谱分析系统包括气源（高纯氮气）、真空泵、离子源、四极杆质量分析器。

1 . 2开机依次打开液相色谱各部件及电脑的电源开关；打开氮气瓶、液氮罐、真空泵和质谱检测器电源开关。

2编辑实验方法2. 1点击桌面Data Acquisition图标，启动MassHunter软件；工作站画面分为仪器状态界面、实时绘图界面、方法编辑界面和工作列表界面。

2.2在方法编辑界面设定HPLC条件：自动进样器参数、泵参数、柱温箱参数、检测器参数。

2.3在方法编辑界面设定MS QQQ条件:选择调谐文件、设置扫描段Scan Segment、在MRM扫描段表中，设定母离子、子离子以及每个四极杆的分辨率（unit，wide和widest）、设置QQQ仪器的电离源参数（ESI、APCI ）。

2.4保存方法文件。

2.5运行单个样品：分别于样品栏中输人样品描述，瓶号以及数据文件名等;点击工具栏Start Sample Run 图标开始采样2 . 6 运行多个样品2 . 6 . 1 添加一个样品：从工作列表菜单选择Add Sample 并输人以下样品信息：样品名称、样品位置、方法、数据文件名称、样品类型、注射体积等。

2.6.2 添加多于一个的样品：从工作列表菜单选择Add Multiple Sample在Sample Positi on表格，选择被分析样品的位置；在Sample In formation 中设定运行信息，方法路径以及数据文件储存路径。

2. 6 . 3 保存工作列表并开始运行。

3数据分析分别点击桌面上Agilent Masshunter Qualitative Analysis 和Agilent Masshunter Quantitative Analysis 图标，进入数据分析系统，选择各种处理方式对所得到的数据进行定性和定量分析。

液相色谱-质谱联用仪的使用（Agilent LC-QQQ6490）文件编号：版次/修订次：编写：日期：审核：批准：批准日期：文件修订记录表修改序号修改章节号修改内容修改申请人批准人批准日期1初稿作成初版制作。

年xx月xx日水溶剂：A1：纯水（避光，常更换，防止细菌滋生）A2：甲酸水、氨水等有机溶剂B1：纯乙腈、纯甲醇、纯异丙醇B2：含0.1%的甲酸乙腈溶液注：流动相越简单越好，避免加入无机盐（如H2SO4）甲醇与乙腈的比较：甲醇：与水相溶会发热；延滞性大，便宜；乙腈：溶解性不佳，乙腈会结晶；极性、溶解性和延滞性极性：水> 甲醇> 乙腈；延滞性（表面张力）：水> 甲醇> 乙腈；洗脱能力：甲醇、乙腈> 水流动相的配置：水相流动相通过0.22μm的膜以达到去除颗粒的目的。

超声（10 ~ 20min）以去除气泡；滤头应定期更换1.2色谱柱保护套（滤头、套管）注：进口：用扳手拧，出口管路应多留出一段），安装柱子时应避免这段管路。

色谱柱的冲洗：先用一定比例的流动相冲洗，再用纯有机溶剂进行冲洗；不用时，一般保存在规定的有机溶剂中。

C18柱（农药、兽药）：吸附中弱极性的物质；亲水性柱：三聚氰胺、PSP柱规格：10 cm × 2.4~3.0 μm，0.2 ~0.3 mL/min ；5 cm ×1.8μ m 0.2 mL/min ，其中柱压一般不超过350 bar.一旦出现：柱压高：堵塞（系统+柱子）；柱压低：漏气（系统+柱子）1.3六通阀1.4梯度洗脱注：从低比例有机溶剂的流动相开始，更改比例，但不要改变流速。

阶段A ：现将柱子里、管路中极性杂质先冲出，如水中的极性物质；阶段B:有机溶剂比例的提升阶段，分离被测液中的各组分，加强被分离组分与流动相的作 用力；对于多组分的分离，更改梯度的斜率，但都是使有机溶剂的比例；阶段C ：稳定阶段：要有足够的时间使众多的弱极性杂质；阶段D ：为下一针做着准备。