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实验动物学1.实验动物及其分类实验动物指经人工培育和人工改造，对其携带微生物、遗传、营养、环境因子实行控制，来源清楚，遗传背景明确，用于科学研究、教学、生产、检验以及其它科学实验的动物。
实验动物的三大特点：从遗传控制角度：来源清楚、人工培育、遗传背景明确；分为近交系、封闭群、杂交群。
从微生物和寄生虫控制角度：分为普通级动物(CV)、清洁级动物(CL)、无特定病原体动物(SPF)、无菌动物和悉生动物(GA) 从应用角度：用于科学实验2.近交系实验动物的特征近交系：近交系动物也叫纯系动物，是相同基因类型动物中最主要的一种。
它是经连续20代以上的全同胞兄妹或亲子交配培育而成，且品系内所有个体都可追溯到起源于20代或以上的一对共同祖先的遗传群体。
近交指任何血缘相近的个体间进行的交配。
从遗传上来说，近交系的培育是从群体多态杂合的遗传组成中，选择保留一小部分，淘汰其它大部分的一个过程。
经过20代近交后，近交系的个体有98.6%的遗传位点是纯合的，因此个体间的遗传差异很小（近交系数应大于99%）。
然而，不同近交系之间由于近交而固定的基因不同，遗传差异很大。
近交系的主要缺点在于近交形成的近交衰退现象，表现在其生活力和生育力降低，对外界环境的变化较为敏感，抗病和适应环境等能力减退。
这就增加了近交系动物饲养繁殖的难度。
当饲养环境改变，或对动物进行某些技术性处理时，也有可能对近交系的某些生物学特征产生影响，这些特征可能是遗传性的，也可能是非遗传性的。
如：代乳、受精卵或胚胎移植、卵巢移植、冷冻保存和人工哺乳等。
这些处理在某些实验中会影响实验结果，因此有必要对同一品系或亚系进行区分，这些经过处理的动物可视为这些近交系或亚系的支系。
近交系动物由于基因纯合程度高，遗传具有长期的稳定性，不容易发生杂合基因分离，不受近交、选择和遗传漂变的影响。
纯和性（homozygosity) 通过连续20代以上的近亲繁殖，在一个近交系内所有动物的所有基因位点都应该是纯合的，基因是一致的，遗传组成是相同的。
实验动物测试题（含参考答案）一、单选题（共48题，每题1分，共48分）1.20克体重小鼠灌胃一次给药耐受的最大容量______。
()A、0.8mlB、0.4mlC、1.5mlD、2.5ml正确答案：A2.猫的饲料中应重点补充________。
()A、蛋白B、粗纤维C、维生素D、糖类正确答案：C3.犬大量连续采血时，常采用______。
()A、小隐静脉采血B、心脏采血C、皮下头静脉采血D、颈静脉采血正确答案：D4.适宜实验外科学研究的实验动物______。
()A、猴B、犬C、兔D、大鼠正确答案：B5.低压蒸汽加甲醛灭菌法70-80℃需要保持________。
()A、2hB、15minC、5hD、30min正确答案：A6.小鼠和大鼠的尿液采集适宜采用______。
()A、穿刺法B、代谢笼法C、压迫膀胱法D、导尿法正确答案：B7.______是目前国内科研标准实验动物，适用于大多数科研实验。
()A、无菌动物B、清洁动物C、普通动物D、SPF动物正确答案：B8.环境中________浓度过高可促进支原体的生长，继而促进肺炎和中耳炎的发生。
()A、二氧化硫B、二氧化碳C、氧D、氨正确答案：D9.下面不属于非牛物性传播媒介的是()A、空气、飞沫、尘埃B、饲料和垫料C、饮水和水瓶以及笼具等其他器具D、苍蝇蚊子正确答案：D10.生化标记基因检测法是近交系动物遗传纯度常规检测中的常规方法。
近交系小鼠选择哪些作为遗传检测的生化标记？______()A、位于9个染色体上的13个生化位点B、位于10个染色体上的13个生化位点C、位于9个染色体上的15个生化位点D、位于13个染色体上的15个生化位点正确答案：B11.实验动物中的小鼠、________、仓鼠、兔、猫和猕猴等均可患泰泽氏病。
()A、犬B、大鼠C、地鼠D、豚鼠正确答案：B12.细菌的细胞壁和细胞浆均参与________的调节。
()A、舒张压B、大气压C、渗透压D、比重正确答案：C13.豚鼠的哺乳期为______天。
实验动物国家标准实验动物国家标准实验动物哺乳类实验动物的遗传质量控制GB14923-20011 范围本标准规定了哺乳类实验动物的遗传分类及命名原则、繁殖交配方法和近交系动物的遗传质量标准。
本标准适用于哺乳类实验动物的遗传分类、命名、繁殖及近交系小鼠、大鼠的遗传纯度检测。
2 实验动物的遗传分类及命名根据遗传特点的不同，实验动物分为近交系、封闭群和杂交群。
2.1 近交系 inbred strain2.1.1 定义近交系：经至少连续20代的全同胞兄妹交配培育而成，品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先。
经连续20代以上亲代与子代交配与全同胞兄妹交配有等同效果。
近交系的近交系数(inbreeding coefficient)应大于99％。
2.1.2 命名近交系一般以大写英文字母命名，亦可以用大写英文字母加阿拉伯数字命名，符号应尽量简短。
如A系、TAl系等。
2.1.3 近交代数近交系的近交代数用大写英文字母F表示。
例如当一个近交系的近交代数为87代时，写成(F87)。
2.1.4 亚系 substrain2.1.4.1 亚系的形成近交系的亚系分化是指一个近交系内各个分支的动物之间，已经发现或十分可能存在遗传差异。
通常下述三种情况会发生亚系分化。
a)在兄妹交配代数达40代以前形成的分支(即分支发生于F20到F40之间)；b)一个分支与其他分支分开繁殖超过100代；c)已发现一个分支与其他分支存在遗传差异。
产生这种差异的原因可能是残留杂合、突变或遗传污染(genetic contamination)(即一个近交系与非本品系动物之间杂交引起遗传改变)。
由于遗传污染形成的亚系，通常与原品系之间遗传差异较大，因此对这样形成的亚系应重新命名。
例如由GLaxo保持的A近交系在发生遗传污染后，重新命名为A2G。
2.1.4.2 亚系的命名亚系的命名方法是在原品系的名称后加一道斜线，斜线后标明亚系的符号。
实验动物测试题与答案一、单选题（共48题，每题1分，共48分）1.仙台病毒感染动物解剖时，可见鼠肺呈________，切开时有泡沫状血性液体 ( )A、猪肝色B、杨梅色C、灰白色D、血红色正确答案：B2.《实验动物管理条例》是年经国务院批准，由国家科技部颁布的第 2号令，这是我国政府颁布的一部实验动物管理法规，是全国实验动物工作的法律依据和管理准则。
( )A、1981年B、1983年C、1986年D、1988年正确答案：D3.猫、犬皮下注射部位 ______。
( )A、腹部B、颈部C、背部D、大腿外侧正确答案：D4.检查血液内的原虫多采用__________，制作血片标本，经染色、镜检来发现血浆或细胞内的虫体。
( )A、病理剖检B、刮去皮屑检查C、动脉采血D、静脉采血正确答案：D5.中国地鼠的寿命为________天。
( )A、4-5B、3-4C、4-5D、2-2.5正确答案：D6.仙台病毒感染妊娠大鼠后，其生殖繁育也会被严重干扰，易造成胚胎________。
( )A、死亡B、畸形C、过大D、过小正确答案：A7.大鼠的正常体温为______℃。
( )A、38.5B、39.5C、37.5D、36.5正确答案：C8.鱼的饲料中蛋白质的含量应大于______%。
( )A、40B、20C、10D、30正确答案：A9.若发生危害性大的疫病，如鼠痘、流行性出血热等应采取________综合性措施，淘汰、焚烧全部动物，对场地进行彻底消毒、空厩后，方可解除隔离封锁。
( )A、淘汰患病动物等B、封锁消息等C、检查饲养和实验人员职责等D、隔离封锁等正确答案：D10._______的主要组织相容性抗原（RHLA）同人的HLA抗原相似，有高度的多态性。
( )A、豚鼠B、犬C、猕猴D、猫正确答案：C11.小型猪的妊娠期为________ 天左右。
( )A、114B、104C、134D、124正确答案：A12.______与其它动物不同，能按照光线的强弱灵敏地调节瞳孔。
2004年4月第14卷 第2期中国比较医学杂志CHINESE J OURNAL OF COMPAR ATIVE MEDICINE April ,2004Vol .14 No .2研究报告微卫星DNA 多态性在十种近交系小鼠遗传监测中的应用研究欧阳兆和1,陈振文1,李瑞生1,战大伟1,王承利2(1.军事医学科学院实验动物中心,北京 100071;2.沈阳军区总医院实验动物中心) 【摘要】 目的 研究微卫星DNA 多态性在近交系小鼠遗传监测中的应用。
方法 选取小鼠不同染色体上的16个微卫星位点,应用PCR 技术对常用的10个近交系小鼠进行了微卫星DNA 多态性分析。
结果 14个微卫星DNA 具有稳定扩增效果,在同一品系不同个体之间表现单态性;在不同品系之间表现多态性。
结论 运用所筛选的14个位点进行微卫星多态性分析,能够快速、经济地对近交系小鼠进行遗传监测。
【关键词】 遗传监测;小鼠,近交系;微卫星DNA【中图分类号】Q311+.8 【文献标识码】A 【文章编号】1671-7856(2004)02-0071-04Analysis of Microsatellite DNA Polymorphisms andGenetic Monitoring of Ten In bred Mouse StrainsOUYANG Zhao -he 1,C HE N Zhen -wen 1,LI Rui -sheng 1,ZHAN Da -wei 1,WANG Chen g -li 2(boratory Ani mal Center ,Academy of Military M edical Sciences ,Beijing 100071,China ;boratory Animal Center ,General Hospital of Shenyang Command of PLA )【Abstract 】 Objective To analyse microsatellite DNA polymorphisms and genetic monitoring of ten inbred mouse strains .Metheds 16microsatellites DNA loci on different chromosomes in ten inbred mouse strains were investigated by PCR analysis .Results Fourteen microsatellites DNA could be amplified efficiently ,and displayed polymorphis m among the various strains ,and no pol ymorphism in the same mouse strains .Conclusion Analysis of microsatellites DNA polymorphisms by the fourteen microsa -tellites DNA is a fast and economical way for genetic monitoring among ten in bred mouse strains .【Key words 】 Genetic monitoring ;Mice ,Inbred strains ;Microsatellite DNA[基金项目]总后卫生部基金课题资助(98M 116)[作者简介]欧阳兆和(1972-),男,硕士研究生,专业方向:实验动物遗传监测。
实验动物按遗传特点分类近交系(Inbred Strain ) 封闭群(Closed Colony or Outbred Stock ) 杂交群(Hybrids) 1909年，莱托最早培育的近交系小鼠有DBA，DBA的名称取自淡化（dilute，d）、褐色化（Brown，b）、去杂色化（nonagouti, a)三种变异毛色的缩写。
C57 、C58,分别从编号为57、58的雌鼠培育而来。
1911年育成远交Wistar大鼠1918年以后，SD大鼠、Lewis大鼠、Long-Evans大鼠近交系( inbred strain)定义经至少连续20代的全同胞兄妹交配或亲子交配，近交系数(inbreeding coefficient)达到99%，品系内所有个体都可追溯到第20代或以后代数的一对共同祖先。
近交系数：群体中某个体通过遗传携带两个同源等位基因的概率。
近交系命名：一般以大写英文字母或大写英文字母加阿拉伯数字命名。
BALB ,DBA,TA1, C3H等。
一些历史较长，已经广泛使用并获得认可的品系除外，如129等。
亚系（Substrain)定义由同一个近交系分离出来的有不同特性的分支，这些分支间有遗传差异，称为该品系的亚系。
形成㈠在兄妹交配20-40代时形成的分支；主要原因是残留杂合（Residual heterozygosity）；㈡某分支与其它分支分开繁殖超过100代。
主要原因是突变㈢发现一个分支与其它分支的差异。
原因为残留杂合、突变或遗传污染（Genetic contamination）。
命名在品系名称后加一道斜线（/），斜线后标明亚系的符号，亚系的符号可以是以下三种a) 数字，如DBA/1、DBA/2等b) 培育或产生亚系单位或人的缩写英文名称，第一个字母用大写，以后的字母用小写。
使用缩写文名称应注意不要和已公布过的名称重复。
例如：A/He，表示A近交系的Heston 亚系；CBA/J，表示由Jackson保持的CBA近交系的亚系c) 当一个保持者保持的一个近交系具有两个以上的亚系时，可在数字后再加保持者的缩写英文名称来表示亚系。
实验动物学试题（含答案）一、单选题（共60题，每题1分，共60分）1、( )有季节性换毛现象。
A、兔B、豚鼠C、大鼠D、地鼠正确答案：A2、下列描述,错误的是。
A、不同种类的动物对空间的要求是不同的B、动物也需要有一定的活动空间C、根据不同的营养要求满足动物各自的营养要求D、为保证营养,可随时调整饲料配方正确答案：D3、长爪沙鼠属于( )。
A、灵长目B、爬行纲C、啮齿目D、食肉目正确答案：C4、检疫就是利用各种动物传染病的诊断方法,对( )进行疫病检查,检疫步骤与时间视各动物设施的需求而定。
A、实验动物及其产品B、实验动物脏器C、实验动物脑组织D、实验动物的血液正确答案：A5、在生物医学研究中使用量最大的动物为( )。
A、豚鼠B、大鼠C、犬D、小鼠正确答案：D6、大动物手术常用的去除动物被毛的方法是( )。
A、先麻醉后除毛B、剪毛法C、剃毛法D、拔毛法正确答案：C7、关于实验动物种子的管理,下列哪一项是错误的( )。
A、其他单位如有必要,可直接向国外引进国内没有的实验动物品种、品系作为实验动物种子向用户提供B、国家实验动物种子中心统一负责实验动物的国外引种和为用户提供实验动物种子C、国家实验动物种子中心是一个网络体系,由各具体品种或品系的实验动物中心共同组D、国家实验动物种子中心,可以是依托于高校科研院所的相对独立实体,也可以是独立法人正确答案：A8、( ) 作为基因改造动物的材料可以真实的模拟人类,因此其基因组的改造和操纵对于功能基因与基因信息学的研究具有不可替代的作用。
A、犬B、猴C、大鼠D、小鼠正确答案：D9、省级实验动物质量检测机构的主要任务,不包括( )。
A、承担对本省实验动物许可证年检的技术检测和实验动物质量的不定期检测B、引进、收集和保存实验动物品种、品系C、按上级管理部门的要求提供检测统计报表及有关资料D、承担实验动物及其相关产品的生产和使用单位所申请的质量检测正确答案：B10、鼠肉螨的宿主是( )。
过氧化氢酶值的测定实验报告一、实验目的过氧化氢酶（CAT）广泛存在于生物体内，能催化过氧化氢分解为水和氧气，从而避免过氧化氢对细胞的毒害作用。
本次实验旨在掌握测定过氧化氢酶值的方法和原理，了解不同样品中过氧化氢酶的活性差异。
二、实验原理过氧化氢酶催化过氧化氢分解的反应式为：2H₂O₂ → 2H₂O ＋ O₂在一定条件下，反应速度与酶浓度成正比。
通过测量单位时间内过氧化氢的减少量或氧气的生成量，可以计算出过氧化氢酶的活性。
本次实验采用碘量法测定过氧化氢酶值。
在酸性条件下，过氧化氢与碘化钾反应生成碘，然后用硫代硫酸钠标准溶液滴定碘，根据硫代硫酸钠的用量计算过氧化氢的剩余量，从而间接求出过氧化氢酶分解的过氧化氢量，进而计算出过氧化氢酶值。
三、实验材料与仪器1、材料新鲜的植物叶片（如菠菜叶）、动物肝脏（如猪肝）、过氧化氢溶液（3%）、碘化钾溶液（10%）、硫酸溶液（2mol/L）、淀粉溶液（05%）、硫代硫酸钠标准溶液（001mol/L）。
2、仪器研钵、离心机、移液管、容量瓶、滴定管、锥形瓶、恒温水浴锅。
四、实验步骤1、酶液提取（1）植物叶片：称取5g 新鲜的植物叶片，洗净剪碎后放入研钵中，加入少量石英砂和 10mL 磷酸缓冲液（pH70），研磨成匀浆。
将匀浆倒入离心管中，在 4000r/min 下离心 15min，上清液即为酶液。
（2）动物肝脏：称取5g 新鲜的动物肝脏，用生理盐水洗净后剪碎，放入研钵中，加入少量石英砂和 10mL 磷酸缓冲液（pH70），研磨成匀浆。
将匀浆倒入离心管中，在 4000r/min 下离心 15min，上清液即为酶液。
2、反应取 3 个锥形瓶，分别标记为空白对照（A）、样品 1（B）和样品 2（C）。
（1）空白对照（A）：加入 2mL 磷酸缓冲液（pH70）、2mL 过氧化氢溶液（3%）和 2mL 碘化钾溶液（10%），摇匀后立即放入 25℃恒温水浴锅中保温 5min。
（2）样品 1（B）：加入 2mL 酶液（植物叶片提取液）、2mL 过氧化氢溶液（3%）和 2mL 碘化钾溶液（10%），摇匀后立即放入 25℃恒温水浴锅中保温 5min。
