实验六、 植物组织DNA的提取
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人教版教学教案生物:专题六-植物有效成分的提取(新课标选修一) 法。
植物芳香油不仅
,而且易溶于
,如石油醚、酒精、乙醚和戊烷等。不适于用水蒸气蒸馏的原料,可以考虑使用 法。萃取法是将
的方法。芳香油溶解于有机溶剂后,只需蒸发出有机溶剂,就可以获得纯净的 了。但是,用于萃取的有机溶剂必须 , ,否则会影响芳香油的质量。
3、玫瑰精油的提取
玫瑰精油是制作 的主要成分,能使人产生愉悦感。由于玫瑰精油化学性质 ,难溶于 ,易溶于 ,能随
一同蒸馏, 通常采用 法中的
法。 提取玫瑰精油的实验流程 、 、 、
、 、 。
思考:在提取过程中,如何对乳浊液的处理和玫瑰液的回收?
4、橘皮精油的提取
从橘皮中提取的
,主要成分为
,具有很高的经济价值。橘皮精油主要储藏在
部分,由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解,使用水中蒸馏法又会产生原料焦糊的问题,所以一般采用 法。
具体的流程是 、 、 、
、 、 、
。
【疑难点拨】
1、 植物芳香油的提取技术
提取植物芳香油有三种基本方法:蒸馏、压榨和萃取
(1)、水蒸气蒸馏是常用的方法,原理:水和芳香油沸点不同,利用水蒸气将挥发性强的芳香油携带出来,形成油水混合物,再冷却分离。根据原料放置的位置,可分为水中蒸馏、水上蒸馏、水气蒸馏。
第1篇
一、实验目的
本实验旨在通过基因工程技术,将外源基因导入番茄植株,实现特定性状的表达,并研究转基因番茄的生长发育、生理特性和抗病性等方面的变化。
二、实验材料
1. 番茄植株:品种为“中蔬5号”。
2. 外源基因:目的基因(如抗病基因、抗虫基因等)。
3. 载体:pGEM-T载体。
4. 工具酶:限制性内切酶、DNA连接酶等。
5. 试剂:植物细胞培养试剂、抗生素等。
三、实验方法
1. 目的基因的克隆
(1)设计引物,针对目的基因进行PCR扩增。
(2)将PCR产物与pGEM-T载体连接,转化大肠杆菌感受态细胞。
(3)挑选阳性克隆,进行测序鉴定。
2. 番茄植株的转化
(1)将目的基因与载体构建成重组质粒。
(2)采用农杆菌介导法将重组质粒导入番茄植株。
(3)筛选阳性植株,进行PCR和Southern blot检测。
3. 转基因植株的筛选与鉴定
(1)采用PCR和Southern blot方法检测转基因植株。
(2)对转基因植株进行抗性筛选,如抗病、抗虫等。
4. 转基因植株的表型分析
(1)观察转基因植株的生长发育、生理特性和抗病性等方面的变化。 (2)对转基因植株进行产量、品质等指标测定。
四、实验结果
1. 目的基因的克隆
成功克隆了目的基因,并进行了测序鉴定。
2. 番茄植株的转化
成功将重组质粒导入番茄植株,获得了转基因植株。
3. 转基因植株的筛选与鉴定
通过PCR和Southern blot检测,证实了转基因植株的存在。
4. 转基因植株的表型分析
(1)转基因植株的生长发育与对照植株无明显差异。
(2)转基因植株在抗病性、抗虫性等方面表现出显著的优势。
(3)转基因植株的产量和品质与对照植株相当。
五、讨论与分析
1. 本实验成功将目的基因导入番茄植株,并获得了转基因植株,为研究转基因番茄的性状表达提供了基础。
分 子 生 物 学 实 验 指 导
主编:于冰 马春泉 高传军 杨峰山 主审:李海英
黑龙江大学生命科学学院
2006 年 3月
目 录
绪论 分子生物学实验安全注意事项及分子生物学实验室所需 要的仪器设备 …………………………………………… 1 实验一 植物基因组 DNA 的分离 ……………………………… 6 实验二 RNA 的分离 …………………………………………… 11 实验三 DNA/RNA的琼脂糖凝胶检测………………………… 15 实验四 DNA/RNA浓度、纯度的测定及浓度的调整………… 21 实验五 聚合酶链式反应(PCR ……………………………… 24 实验六
随机扩增多态性 DNA 反应(RAPD ………………… 28实验七 甜菜 M14品系 AFLP
分析……………………………… 32 实验八 生物信息学……………………………………………… 49
前 言
黑龙江大学生命科学学院自成立以来,相继成立了生物工程专 业,生物技术专业,生物制药专业和食品科学与工程专业。分子生 物学是一门二十一世纪的前沿学科,而实验操作是分子生物学的一 个重要组成部分。我们结合了我院现有的仪器设备及材料情况,为 本科生设立了八个分子生物学实验项目(包括一个综合性实验项 目 ,以使学生掌握分子生物学领域中最基本的实验技能。本书编 写充分考虑了实验的系列操作性,比如从基因组 DNA 、总 RNA 的 提取到琼脂糖凝胶检测,从 DNA 浓度的调整到 PCR 技术,从分子 标记技术到生物信息学分析等,完全贯穿了分子生物学的基本实验 技术。对生命科学学院的本科生来说是一本很好的实验教材。
绪论 分子生物学实验安全注意事项及分子生物学
实验室所需要的仪器设备
一、安全事项
在实验室中安全是最重要的,分子生物学实验经常与毒性强,甚至致癌的试剂接触, 所以进入分子生物学实验室的人员,必须了解所有的安全措施,并将实验室的操作置于最 安全的条件下。下面提到的几点须特别注意:
第 1 页 共 8 页 低温诱导植物染色体数目的变化
一、实验目的:
1.学习低温诱导植物染色体数目变化的方法
2.理解低温诱导植物细胞染色体数目变化的作用机制
二、实验原理:
进行正常有丝分裂的植物分生组织细胞,在有丝分裂后 期,染色体的着丝点分裂,子染色体在纺锤丝的作用下,分别移向两极,最终被平均分配到两个子细胞中去。
用低温处理植物分生组织细胞,能够抑制纺锤体的形成,以致影响染色体被拉向两极,使细胞也不能分裂成两个子细胞.结果,植物细胞染色体数目发生变化。
三、材料用具:
洋葱或大葱、蒜均为二倍体,体细胞中染色体数为16,培养皿、滤纸、纱布、烧杯、镊子、剪刀、显微镜,载玻片、盖玻片、冰箱,卡诺氏液,改良苯酚品红染液,体积分数为15%的盐酸溶液,体积分数为95%的酒精溶液
四、实验步骤:
试剂及用途:
(1)卡诺氏液:固定细胞形态.
(2)95%酒精:冲洗附着在根尖表面的卡诺氏液。
(3)解离液:(质量分数为15%HCI和体积分数为95%酒精1:1混合)使组织中的细胞分离开
(4)清水:洗去解离液,防止解离过度,便于染色。
(5)改良苯酚品红染液:使染色体着色。
五、注意事项:造成看不到染色体数加倍且无仿锤体的细胞原因较多,常见原因有:
1)没有培养出分生区或没有剪取到分生区
2)低温诱导时间不足
3)解离不充分或漂洗不干净造成染色不足
4)染色时间控制不当,看不清染色体
5)没有低倍镜寻找过程
六、实验结论:
_________________________________________________________________________
第 2 页 共 8 页 如没有观察到染色体加倍,分析可能原因。
七、秋水仙素与低温都能诱导染色体数目加倍,两者在原理上有什么相似之处?
八、课后作业
导与练 课后作业,P116,9
九、作业拓展—-—--—实验能力考查例题
考试说明要求的实验与探究能力