杀菌剂毒力测定

黄瓜白粉病（Erysiphe cichoracearum）又称白毛病、白霉病，具有分布广、潜伏期短、流行性强、传播快的特点，在全国各地都有发生，是保护地黄瓜的重要病害之一，主要阻碍叶片的光合作用，对黄瓜后期造成严重的影响。

苗期至成株期均可发生，主要侵害叶片，亦为害茎部和叶柄，一般不为害果实。

温室大棚内一旦发病，发展迅速，严重时可造成叶片干枯甚至提早拉秧，严重影响黄瓜产量和品质。

除为害黄瓜外，还能为害西葫芦、甜瓜、南瓜、西瓜、冬瓜、丝瓜等。

近年来，白粉病有加重趋势，而且一年四季均可发病，尤其在感病品种上为害程度甚至超过霜霉病，加之一定抗药性的产生，给防治带来一定难度。

目前化学防治起着非常重要的作用，在保护地栽培条件下占有不可替代的地位。

为解决上述问题，有效控制黄瓜白粉病发生和发展的速度，2018年进行室内毒力和田间药效试验，筛选防治黄瓜白粉病的有效药剂，本研究为有效防治黄瓜白粉病提供试验数据。

材料与法供试作物供试作物为黄瓜，品种为新泰密刺。

试验病原菌：黄瓜白粉病病菌[Sphaerotheca fuliginea(Schlecht)Poll.]。

大棚宽度10 m，黄瓜株距10 cm，行距100 cm，试验地肥力中等。

供试药剂25%乙嘧酚SC，深圳诺普信农化股份有限公司；4%四氟醚唑EW，陕西韦尔奇作物保护有限公司；10%醚菌酯EW，天津汉邦植物保护剂有限责任公司；40%苯醚甲环唑·嘧菌酯SC、20%四氟醚唑·醚菌酯SE，青岛瀚生生物科技股份有限公司。

室内毒力测定采用盆栽测定法进行室内毒力测定。

（1）育苗塑料营养钵育苗，基质为营养土（花卉土∶蛭石为2∶1），钵体上层覆盖约2 mm的营养土，每钵留2株苗，黄瓜2片真叶展开时开始试验。

（2）接种方法采集新鲜白粉病叶，配制孢子悬浮液，将新鲜孢子悬浮液喷施于接种叶片上，人工接种24 h后喷药，施药器械容量1 L、喷口直径1.0 mm的小型喷雾器。

29种常用杀菌剂对番茄枯萎病菌和青枯病菌的室内毒力测定摘要：在实验室内，采用菌丝生长速率法测定了29种杀菌剂对番茄枯萎病菌的抑菌效果，采用纸碟法测定了29种杀菌剂对番茄青枯病菌的抑菌效果。

结果表明，有10种杀菌剂对番茄枯萎病菌的毒力较强（Ec50值相对抑制率计算公式如下：抑菌率=对照菌落直径-处理菌落直径对照菌落直径-菌饼直径×100%。

1.2.2杀菌剂对番茄青枯病菌的毒力测定方法菌液的制备：将番茄青枯病菌在LB斜面上活化，移入50mLLB培养液中，在28℃下振荡（150r/min）培养过夜。

用无菌水将番茄青枯病菌菌液稀释至浓度约为106cFU/mL，备用。

纸碟测定方法参照文献[12-15]：将29种杀菌剂分别制成浓度为1000、100、10、1mg/L，吸取20μL在LB平板中央，每处理重复3皿。

设清水对照。

用上述番茄青枯病菌稀释液（106cFU/mL）喷雾后，28℃培养过夜，调查抑菌圈直径，计算相对抑制率。

应用Excel软件处理系统求出各单剂毒力回归方程、Ec50值及相关系数。

2结果与分析2.1杀菌剂对番茄枯萎病菌的毒力测定采用菌丝生长速率法测定了29种杀菌剂对番茄枯萎病菌的抑菌效果。

2.2杀菌剂对番茄青枯病菌的毒力测定采用纸碟法测定了29种杀菌剂对番茄青枯病菌的抑菌效果。

结果表明，有3种杀菌剂对番茄青枯病菌有较强的毒力，其Ec50值均小于10mg/L（表3、图2），其中3%中生菌素的毒力最强，Ec50值为3.3742mg/L。

其余26种杀菌剂对番茄青枯病菌不表现毒力。

表33种杀菌剂对番茄青枯病菌的室内毒力测定结果药剂名称毒力回归方程相关系数（r）Ec50（mg/L）3%中生菌素y=7.10x+1.250.96823.374280%代森锰锌y=5.58x+0.830.97565.58872%春雷霉素y=4.11x+1.210.94198.35873结论与讨论番茄具有较高的营养价值，深受广大消费者的喜爱。

五种杀菌剂对草坪弯孢霉菌毒力测定摘要：通过室内毒力测定，研究了5种杀菌剂对草坪弯孢霉菌菌丝的抑制作用，结果为25%三唑酮wp毒力回归方程为y=8.7589-0.0372x，50%福美双wp 毒力回归方程为y=8.9247-0.028x，25%敌力脱ec毒力回归方程为y=9.3337-0.0380x，70%代森锰锌wp毒力回归方程为y=9.6948-0.0361x，5%速保利wp毒力回归方程为y=10.1063-0.0331x。

表明5种杀菌剂浓度与菌丝生长抵制率间具有高度的相关性；5%速保利wp抑制效果高于25%敌力脱ec、70%代森锰锌wp抑制效果；在防治草坪弯孢霉叶枯病时首先选用的药剂为5%速保利wp，其次为25%敌力脱ec、70%代森锰锌wp。

关键词：草坪弯孢霉菌；不同杀菌剂；抑制率；回归方程中图分类号：s481 文献标识码：a草坪弯孢霉叶枯病是由弯孢霉属（curvularia spp.）引起的真菌性病害[1-5]，是大连市绿化草坪上发生较严重的草坪病害之一，该病降低了草坪的实用价值及观赏价值等，致使禾草早衰和草坪毁坏，该病发生于高温高湿季节，病菌随风雨传播，容易流行[6-9]，为筛选高效的杀菌剂应用于生产中，笔者在室内进行了毒力测定，现将结果整理如下。

1 材料与方法1.1供试药剂25%三唑酮wp （河南省中原农药化工有限责任公司），50%福美双wp（山东利邦农化有限公司），25%敌力脱ec（先正达（中国）投资有限公司），70%代森锰锌wp（鹤壁陶英陶生物科技有限公司），5%速保利wp（日本住友化学工业株式会社）1.2试验方法在无菌条件下，扩繁草坪弯孢霉叶枯病病菌5盘，培养7d备用。

本试验设置26个处理，重复3次，以无菌水为对照。

在无菌条件下用无菌水将25%三唑酮wp稀释成100，400，800，1600，3200倍液；50%福美双wp、25%敌力脱ec、5%速保利wp分别释成250，500，1000，2000，4000倍液； 70%代森锰锌wp释成500，1000，2000，4000，8000倍液，待用。

14种杀菌剂对玉米藤仓镰孢菌室内毒力测定作者：马金慧杨克泽吴之涛崔凌霄任宝仓杨成德高正睿陈志国来源：《山东农业科学》2020年第03期摘要：近年来，由藤仓镰孢菌（Fusarium fujikuroi）引起的玉米茎腐病在甘肃发生危害，造成部分品种植株枯死，严重减产。

为筛选防治玉米藤仓镰孢茎腐病的高效低毒杀菌剂，本研究采用菌丝生长速率法测定14种杀菌剂对藤仓镰孢菌的毒力。

结果表明：10%苯醚甲环唑WG、12.5%戊唑醇EW、75%肟菌·戊唑醇WG和70%丙森锌WP对藤仓镰孢菌菌丝的生长均有较好的抑制作用。

对该菌毒力最强的杀菌剂是12.5%戊唑醇EW，其EC50值为0.0831μg/mL;较强的是10%苯醚甲环唑WG和75%肟菌·戊唑醇WG，其EC50值分别为0.2927μg/mL和0.3914 μg/mL;70%丙森锌WP和75%百菌清WP的毒力相对较强，EC50值分别为0.6404 μg/mL和0.7487 μg/mL;2%春雷霉素AS毒力最弱，EC50 值为45.6161 μg/mL。

玉米藤仓镰孢菌菌丝生长对75%肟菌·戊唑醇WG、0.3%四霉素AS、80%代森锰锌WP和2%春雷霉素AS的敏感性相对较强，对75%百菌清WP、77%氢氧化铜WP和50%烯酰吗啉WG的敏感性较弱。

关键词：玉米茎腐病;藤仓镰孢菌（F.fujikuroi）;生长速率法;毒力测定中图分类号：S482文献标识号：A文章编号：1001-4942（2020）03-0102-05AbstractIn recent years， corn stalk rot caused by Fusarium fujikuroi occurred seriously in Gansu Province， causing some varieties to die and yield-reduction seriously. In order to screen out the high-efficiency and low-toxicity fungicides for field control of corn stalk rot， the toxicity of 14 fungicides to F. fujikuroi was determined by mycelium growth rate method. The results showed that 10% methyloxazole WG， 12.5% tebuconazole EW， 75% oxime bacteria·tebuconazole WG and 70% propineb WP had better inhibitory effects on mycelium growth of F. fujiana，in which，12.5% tebuconazole EW had the strongest toxicity to F.fujikuroi with the EC50 value as 0.0831μg/mL. The toxicity of 10% methyloxazole WG and 75% oxime bacteria·tebuconazole WG was stronger，and the corresponding EC50 values were 0.2927，0.3914 μg/mL， respectively. 70% propineb WP and 75% chlorothalonil WP had relatively stronger toxicity with the EC50 values as 0.6404 and 0.7487μg/mL， respectively，While that of 2% kasugamycin AS was the weakest with the EC50 value as 45.6161 μg/mL. The mycelial growth of F.fujikuroi was relatively sensitive to 75% oxime bacteria·tebuconazole WG， 0.3% tetramycin AS， 80% carmazine WP and 2% kasugamycin AS，but less sensitive to 75% chlorothalonil WP， 77% copper hydroxide WP and 50% dimethomorph WG.KeywordsCorn stalk rot;Fusarium fujikuroi;Growth rate method;Toxicity test玉米是重要的粮饲兼用型作物和工业原料、能源植物[1]，种植范围广，在农业生产和国民经济中占有重要地位。

七种杀菌剂对番茄早疫病病原菌室内毒力测定方案，为番茄早疫病的防治提供科学依据，制定出切实可行的防治措施。

1 材料与方法1.1材料1.1.1供试菌株番茄早疫病病原菌株采集于豫北地区番茄种植大棚中的病果，经组织分离、纯化获得病原菌［10］。

1.1.2试验药剂50%异菌脲（病可丹）可湿性粉剂为山东鑫星农药有限公司生产，50%氯溴异氰尿酸（比秀）可湿性粉剂为以色列海法作用保护有限公司生产，80%丙森锌（好锌泰）水分散粒剂为陕西美邦农药有限公司生产，10%苯醚甲环唑（病可丹）水分散粒剂为山东鑫星农药有限公司生产，50%醚菌酯（信赖）可湿性粉剂为陕西美邦农药有限公司生产，32.8%烷基腈氧基醌（凯银）水分散粒剂、35%腐霉利悬浮剂为宜宾川安高科农药有限责任公司生产。

1.2方法1.2.1杀菌剂单剂毒力测定将7种杀菌剂单剂与PDA培养基充分混匀，配制成0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、5.00mg/L系列浓度的平板。

采用菌丝生长速率法测定，用5mm打孔器在培养6d后的番茄早疫病菌平板上打孔，用镊子取菌丝面向下接种在含药PDA培养基上，每皿1个菌碟，28℃倒置培养，以去离子水作为对照组，每个处理设3次重复，于接种后第3天检查菌丝生长情况并用十字交叉法测量菌落生长直径，通过菌丝生长抑制率值和各药剂浓度对数值间的线性回归性进行分析，求出各菌株EC50并计算相对抑菌率。

抑菌率计算方法为每个菌落使用十字交叉法测量2次，取其平均数作为菌落的大小。

计算7种杀菌剂对菌丝生长的抑制百分率，公式如下：菌落增长直径=菌落测量直径-菌盘直径抑菌率=（对照菌落增长直径-含药培养基上菌落增长直径）/对照增长菌落直径x100%[11]以浓度对数为横坐标（x）,相对抑制率几率值为纵坐标（丫），求出各药剂对供试菌株的毒力回归曲线方程y=a+bx、相关系数r与有效抑制浓度（EC50）。

根据EC50分析比较不同杀菌剂对供试病菌菌丝生长的影响[12]。

中国园艺文摘 2018年第3期5种杀菌剂对桃炭疽病菌的毒力测定胡晓颖，赵 杰（上海市浦东新区农业技术推广中心，上海 201201）摘 要：以桃炭疽病菌为试验菌，采用生长速率法，测定5种杀菌剂对病菌的毒力，结果表明：咪鲜胺锰盐、氟啶胺、多菌灵、苯醚甲环唑和吡唑醚菌酯5种杀菌剂都具有较高的毒力。

咪鲜胺锰盐与氟啶胺的联合毒力测定结果表明：咪鲜胺锰盐和氟啶胺按3∶1和6∶1复配表现为增效作用，咪鲜胺锰盐和氟啶胺按1∶6、1∶3和1∶1复配表现为相加作用。

关键词：杀菌剂；桃炭疽病菌；毒力测定水蜜桃是我国的主要果品之一，也是上海市浦东新区的主要果树，常年种植面积0.2…万余hm2。

桃炭疽病是水蜜桃的主要病害，能侵染桃树枝梢、叶片和果实[1]，在上海市浦东新区以秋季叶片受害最重，造成叶片穿孔或枯焦，严重时导致大量叶片枯死和早落，影响花芽和结果枝充实，从而影响翌年结果产量。

科技工作者在桃树炭疽病菌生物学特性和防治方面开展大量工作[2-5]，但不同地区和寄主存在差异。

本文以当地桃炭疽病菌为试验材料，通过开展杀菌剂的毒力测定，筛选出高效低毒药剂，为防治该病害提供技术参考。

1 材料与方法1.1 供试病菌从浦东新区盛果期桃树病叶上分离获得桃炭疽病菌[Colletotrichum gloeosporioides…(Penz.)…Sacc.]，病菌于PDA培养基上25℃培养5…d后用于毒力测定。

1.2 供试药剂50%咪鲜胺锰盐可湿性粉剂(江苏辉丰农化股份有限公司)、50…g/L氟啶胺悬浮剂(浙江石原金牛农药有限公司)、50%多菌灵悬浮剂（江苏龙灯化学有限公司）、30%吡唑醚菌酯悬浮剂(深圳诺普信农化股份有限公司)、10%苯醚甲环唑水分散粒剂(江苏丰登农药有限公司)。

1.3 试验方法1.3.1 毒力测定方法…采用生长速率法[6]：将以上第一作者简介：胡晓颖(1979-)，女，农艺师；从事作物栽培研究。

通讯作者：赵 杰，硕士，高级农艺师。

第一单元：农药生物测定与田间药效试验1.杀菌剂生物测定（Bioassay of fungicides）利用病原菌或感菌生物体对杀菌剂的反应，来确定杀菌剂效力（毒力，药效）的农药生物测定。

2.杀菌剂的毒力测定方法（1）基于离体平板培养的毒力测定方法（2）活体测定法（3）组织筛选测定法（1）基于离体平板培养的毒力测定方法①孢子萌发测定法原理：在载玻片或平板上，通过滴加、喷施等方法将药液施于其上，然后滴加一定浓度的孢子悬浮液，经过一定时间培育后在显微镜下观察孢子的萌发率。

一般在低倍镜下，每处理随机检查200个孢子。

毒力越大的药剂，孢子萌发抑制率也越大。

%100⨯=检查孢子数萌发孢子数孢子萌发率%100-⨯=对照萌发率处理萌发率对照萌发率孢子萌发抑制率（1）基于离体平板培养的毒力测定方法②抑菌圈法此法先将病原菌孢子或菌丝的悬浮液与培养基混匀，待混合物冷却后，在培养基表面利用各种方法（管碟法、滤纸片法、孔碟法）使药液和培养基接触，培养一定时间后，由于药剂的渗透扩散作用，施药部位周围的病原菌被杀死或生长受到抑制，从而产生抑菌圈。

毒力越大的药剂，抑菌圈也越大。

该方法所用药剂需有较好的水溶性。

（1）基于离体平板培养的毒力测定方法③生长速率测定法此法的原理是趁热在培养基中加入药液，混合均匀后冷却，然后在无菌条件下将病原菌接入装有培养基的培养皿中央，经过一定时间培育后观察病原菌菌丝的生长情况。

毒力越大的药剂，菌丝的生长越缓慢。

此法多用于不产孢子或产孢子量少而菌丝较密的真菌。

病原菌生长速率的表示方法有2种：①菌落达到一定大小所需的时间；②单位时间内菌落的直径大小。

该方法的优点是操作简便，适用范围广，重复性好。

但对病原菌要求严格，病菌易于培养，生长较快且边缘整齐，产孢子缓慢；供试药剂遇热不易分解。

（1）基于离体平板培养的毒力测定方法④对峙培养法将天然提取物及病原菌同时放在同一个有培养基的培养皿的两边，经过一定时间培育后观察菌丝生长的情况。