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皂苷元提取皂苷元是一种天然产物，广泛存在于多种植物中，如苦瓜、葫芦瓜、绿豆等。
它是一种具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物活性的化合物。
本文将从不同角度探讨皂苷元的提取方法、生物活性以及应用前景。
一、皂苷元提取方法常用的皂苷元提取方法主要有以下几种：1. 水提法：将植物材料加入水中煮沸，使皂苷元溶于水中，然后通过蒸馏或浓缩得到纯化的皂苷元。
2. 乙醇提法：将植物材料浸泡在乙醇中，通过搅拌或超声波处理使皂苷元溶解在乙醇中，然后通过蒸馏或浓缩得到纯化的皂苷元。
3. 超临界流体萃取法：利用超临界流体（如二氧化碳）的溶解性和渗透性，将植物材料与超临界流体进行反应，从而提取皂苷元。
4. 生物发酵法：通过利用微生物发酵代谢产生的酶解作用，将植物中的皂苷元转化为更容易提取的形式。
二、皂苷元的生物活性皂苷元具有多种生物活性，下面将分别介绍：1. 抗氧化活性：皂苷元具有较强的自由基清除能力，可以减少氧化应激对细胞的损伤，具有抗衰老、抗癌等作用。
2. 抗炎活性：皂苷元可以抑制炎症反应的发生，减轻炎症症状，对于治疗炎症性疾病具有一定疗效。
3. 抗菌活性：皂苷元对多种细菌、真菌和病毒具有明显的抑制作用，可以用于治疗感染性疾病。
4. 抗肿瘤活性：皂苷元可以阻断肿瘤细胞的增殖和转移，诱导肿瘤细胞凋亡，对于肿瘤的治疗具有潜在的作用。
三、皂苷元的应用前景由于其多种生物活性，皂苷元具有广阔的应用前景，下面将列举几个应用领域：1. 医药领域：皂苷元可以作为药物的原料，用于制备抗氧化剂、抗炎剂、抗菌剂、抗肿瘤药物等，对于治疗多种疾病具有潜在的疗效。
2. 化妆品领域：皂苷元具有抗氧化和抗衰老的作用，可以用于制备护肤品和化妆品，延缓皮肤衰老，改善皮肤质量。
3. 食品领域：皂苷元可以作为食品添加剂，增加食品的营养价值和功能性，例如可以用于制备保健食品、功能性饮料等。
4. 农业领域：皂苷元具有一定的杀虫活性，可以用于制备农药，对于农作物的保护具有重要意义。
穿破石、石见穿、穿山龙研究概况李勇华，杨勤中药穿破石、石见穿、穿山龙从药名看均有“穿”字，均有活血、疏筋、通络、散结功效，常用于治疗痹证、癞瘕、积聚等病证。
现对三药的研究概况综述如下。
1 传统认识穿破石为桑科植物小柘树或柘树的根。
味淡、微苦，性凉，人心、肝二经，功能止咳化痰、祛风清热、利湿通络、活血通经、散瘀止痛、解毒消肿。
主治风湿关节疼痛、黄疸、淋浊、蛊胀、闭经、劳伤咳血、跌打损伤、疔疮痈肿及用于晚期消化道癌肿、恶性葡萄胎、绒毛膜上皮癌、鼻咽癌、肺癌、晚期恶性肿瘤等。
内服煎汤9 30g，鲜者可用至120g，或浸酒，外用适量捣敷。
石见穿，为唇形科植物华鼠尾草的全草。
味辛、苦，性微寒，归肝、脾经，功能活血化瘀镇痛、清热利湿解毒、化痰散结消肿、平喘。
主治月经不调、痛经、经闭、崩漏、带下、乳痈、湿热黄疸、便血、热毒血痢、淋痛、噎膈、痰喘、风湿骨痛、瘰疬、疮肿、带状疱疹、麻风、跌打伤肿等。
内服煎汤15 ~30g，或捣汁和服，外用适量捣敷。
穿山龙即薯蓣科薯蓣属植物穿龙薯蓣，以根状茎入药。
性温，味甘、苦，归肝、肾、肺经，功能舒筋活血、止咳化痰、祛风止痛。
主治腰腿疼痛、风湿痛、筋骨麻木、大骨节病、跌打损伤、咳嗽喘息等。
内服煎汤干品6 ~9g、鲜品30 45g，或浸酒，外用适量鲜品捣敷。
化学成分梁云贞等-t 从穿破石挥发性挥发油成分中鉴定出成分20种，其中正十六烷酸含量最高( 28.41% ) ，l 、2一苯二羧基丁基2一乙基已基酯含量次之( 14.06%) ，其他成分由高到低依次为蒿脑、胡椒基胺、二十六烷、枯茗醛和二丁基邻苯二甲酸酯。
刘建华等在穿破石挥发性成分的研究中，共提取出94个化合物，检测出64个，其中含量较高的是L一芳樟醇( 9.85% ) ，其次是石竹烯氧化物( 6.32% ) ，A 一草烯( 5.50%) ，1一辛醇( 5.06% ) ，草烯环氧化物( 4.23% ) ，橙花醇乙酸酯( 3.69% ) ，B一石竹烯( 3.68% ) 。
穿山龙ChuanshanlongDIOSCOREAE NIPPONICAE RHIZOMA 本品为薯蓣植物穿龙薯蓣Dioscorea nipponica Makino的干燥根茎。
春、秋二季采挖，洗净，除去须根及外皮，晒干。
【性状】根茎呈类圆柱形，稍弯曲，长15~20cm，直径1.0~1.5cm。
表面黄白色或棕黄色，有不规则纵沟、刺状残根及偏于一侧的突起茎痕。
质坚硬，断面平坦，白色或黄白色，散有淡棕色维管束小点。
气微，味苦涩。
【鉴别】(1)本品粉末淡黄色。
淀粉粒单粒椭圆形、类三角形、圆锥形或不规则形，直径3～17μm，长至33μm，脐点长缝状。
草酸钙针晶散在，或成束存在于黏液细胞中，长约至110μm。
木化薄壁细胞淡黄色或黄色，呈长椭圆形、长方形或棱形，纹孔较小而稀疏，具缘纹孔导管直径17～56μm，纹孔细密，椭圆形。
(2)取本品粉末0.5g，加甲醇25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加3mol/L 盐酸溶液20ml使溶解，置水浴中加热水解30分钟，放冷，再加入三氯甲烷30ml，加热回流15分钟，滤过，取三氯甲烷液蒸干，残渣加三氯甲烷-甲醇（1：1）的混合溶液2ml使溶解，作为供试品溶液。
另取薯蓣皂苷元对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取[含量测定]项下供试品溶液及上述两种溶液各3μl,分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以三氯甲烷－甲醇(20:0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热10分钟。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【检查】水分不得过12.0%（附录ⅨH第一法）。
总灰分不得过5.0%（附录ⅨK）。
【浸出物】照醇溶性浸出物测定法（附录X A）项下的热浸法测定，用65%乙醇作溶剂，不得少于20.0%。
【含量测定】照高效液相色谱法（附录ⅥD）测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-水（55:45）为流动相，检测波长为203nm。
收稿日期:2003 10 15修订日期:2003 11 20薯蓣皂苷元测定方法的研究概况彭晓英1,周朴华1,裴 刚2,蒋道松1(1.湖南农业大学,湖南长沙 410128; 2.湖南中医学院,湖南长沙 410007)摘 要:薯蓣皂苷元是薯蓣皂苷的水解产物,它是许多重要甾体激素的重要前体物质。
本文主要介绍近年来薯蓣皂苷元的分析测定方法。
薯蓣皂苷水解为薯蓣皂苷元的方法有常规酸水解法和两相溶剂法等,当前含量测定常用的方法有重量法、分光光度法、高效液相色谱法、气相色谱法、薄层色谱法等方法。
关键词:薯蓣皂苷元;甾体激素;高效液相色谱法;气相色谱法;薄层色谱法中图分类号:Q 949.71+8.27 文献标识码:A 文章编号:1003 5710(2004)01 0027 03 薯蓣皂苷元(Diosgenin)是多种薯蓣科薯蓣属植物根状茎中所含主要皂苷成分的水解产物,化学名为 5 20 E ,22 E ,25 F 螺甾烯 3 醇,简称为 5 异螺甾烯 3 醇,是异螺甾烷的衍生物。
由于薯蓣皂苷元A/B 环处5-烯3-醇结构很易转变成为4 烯 3 酮结构,故常用来作为甾体抗炎药(如地塞米松等)、性激素类药物(如黄体酮、睾酮等)、避孕药(如炔诺酮、炔雌醇等)的重要前体物质。
由于薯蓣属植物的根状茎中除含少量的薯蓣皂苷元外,还含有大量的淀粉、纤维素及其它成分,所以如何将它们进行有效分离并快速、准确的进行薯蓣皂苷元的含量测定,已成为薯蓣皂苷元生产加工单位和相关研究院所关注的焦点。
本文将就近年来薯蓣皂苷元测定方法研究进展作一概述,以便为更好的开发利用薯蓣属资源和加速甾体激素工业的发展提供技术理论参考。
1 薯蓣皂苷元的提取薯蓣属植物根状茎中的薯蓣皂苷是以皂苷元与糖基相结合的形式存在,所以需要将皂苷进行水解才能得到薯蓣皂苷元。
已报道的常用提取方法有:常规酸水解法、自然发酵法、酶酵解法及两相溶剂水解法。
1.1 常规酸水解法常规酸水解法通常是将含有薯蓣皂苷元的根状茎鲜样适量置于烘箱(60 )鼓风干燥至恒重后研磨成粉末,称取适量置圆底烧瓶内,加稀硫酸或盐酸于电热套中加热(80~90 )回流数小时,倾出、抽滤,并将滤渣洗至中性,在索氏抽提器中用石油醚回流进行提取数小时,浓缩回收,60 下真空干燥,可得薯蓣皂苷元粗提物。
·189·穿山龙ChuanshanlongRHIZOMA DIOSCOREAE NIPPONICAE本品为薯蓣科植物穿龙薯蓣Dioscorea nipponica Makino的干燥根茎。
春、秋二季采挖，洗净，除去须根及外皮，晒干。
【性状】根茎呈类圆柱形，稍弯曲，长15～20cm，直径0.0～0.5cm。
表面黄白色或棕黄色，有不规则纵沟、刺状残根及偏于一侧的突起茎痕。
质坚硬，断面平坦，白色或黄白色，散有淡棕色维管束小点。
气微，味苦涩。
【鉴别】(1)本品粉末淡黄色。
淀粉粒单粒椭圆形、类三角形、圆锥形或不规则形，直径3～17µm，长至33µm，脐点长缝状。
草酸钙针晶散在，或成束存在于黏液细胞中，长约至110µm。
木化薄壁细胞淡黄色或黄色，呈长椭圆形、长方形或棱形，纹孔较小而稀疏。
具缘纹孔导管直径17～56µm，纹孔细密，椭圆形。
(2)取薯蓣皂苷元对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取〔含量测定〕项下供试品溶液及上述对照品溶液各3µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(20：0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【检查】水分照水分测定法(附录Ⅸ H第一法)测定，不得过9.0％。
总灰分不得过5.0％(附录Ⅸ K)。
酸不溶性灰分不得过0.0％(附录Ⅸ K)。
【含量测定】照高效液相色谱法(附录Ⅵ D)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(84：16)为流动相；检测波长为203nm。
理论板数以薯蓣皂苷元计算应不低于4000。
对照品溶液的制备精密称取薯蓣皂苷元对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg溶液，即得。
供试品溶液的制备取本品粉末(过四号筛)约1g，精密称定，置锥形瓶中，加甲醇50ral，超声处理(功率250W，频率33kHz)30分钟，滤过，滤渣用甲醇20ml洗涤，合并甲醇液，回收甲醇蒸干，残渣加3mol ／L盐酸溶液20ml(10ml，5ml，5m1)溶解，依次转移至锥形瓶中，水浴中加热水解30分钟。
穿山龙提取物中薯蓣皂苷的大鼠在体肠吸收柏希慧;刘诗雨;王晶;王昌利;宋逍【摘要】目的考察穿山龙提取物中薯蓣皂苷的在体肠吸收特性.方法运用大鼠在体单向灌流模型,采用高效液相色谱法测定灌流液中薯蓣皂苷含量,分别考察不同肠段、药物浓度和P-糖蛋白(P-gp)抑制剂对薯蓣皂苷吸收的影响.结果穿山龙提取物中薯蓣皂苷在大鼠全肠段均有吸收,其在不同肠段的吸收速率常数(Ka)和表观吸收系数(Papp)从大到小依次为回肠>十二指肠=空肠>结肠;不同质量浓度的薯蓣皂苷(40,80,120 mg·L-1),其Ka和Papp无显著性影响(P>0.05);含P-gp抑制剂组和不含P-gp抑制剂组比较,薯蓣皂苷的Ka和Papp差异有统计学意义(P<0.05).结论在实验浓度范围内,穿山龙提取物中薯蓣皂苷的吸收没有浓度依赖性,吸收机制可能为被动扩散;穿山龙提取物中薯蓣皂苷可能是P-gp 底物.%Objective To study absorption characteristic of dioscin from Dioscorea nipponica Makino extract in rat intestine.Methods Single-pass intestinal perfusion (SPIP) model was used for rat in situ and HPLC was used to determine the concentrations of dioscin.The effects of different intestinal segments,drug concentration and P-glycoprotein (P-gp) inhibitor on intestinal absorption were investigated.Results Dioscin could be absorbed in the whole intestine,the absorption rate constant (Ka) and the apparent coefficient (Papp) of dioscin decreased following the sequence of ileum > duodenum =jejunum > colon.Absorption parameters of dioscin had no significant difference at different concentrations (40,80,120 mg·L-1).There were significant differences in Ka and Papp values between P-gp inhibitor group and no P-gp inhibitor group(P<0.05).Conclusion The saturate phenomenawas not observed under the test range of drug concentration,and the absorption mechanism may be passive diffusion transport.Dioscin in Dioscorea nipponica Makino extract may be the substrate of P-gp.【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2017(036)006【总页数】4页(P610-613)【关键词】穿山龙提取物;薯蓣皂苷;单向灌流模型;P-糖蛋白【作者】柏希慧;刘诗雨;王晶;王昌利;宋逍【作者单位】陕西中医药大学药学院,咸阳 712046;陕西中医药大学药学院,咸阳712046;陕西中医药大学药学院,咸阳 712046;陕西中医药大学药学院,咸阳712046;陕西中医药大学药学院,咸阳 712046【正文语种】中文【中图分类】R965穿山龙为薯蓣科植物穿龙薯蓣(Dioscorea nipponica Makino)的干燥根茎，味甘、苦，性温，归肝、肾、肺经，具有祛风除湿、舒筋通络、活血止痛、止咳平喘的功效，用于风湿痹病、关节肿胀、疼痛麻木、跌扑损伤、闪腰岔气、咳嗽气喘［1］。
穿山龙中薯蓣皂苷元的提取、分离、鉴定
薯蓣皂苷元俗称薯蓣皂素，存在于薯蓣科（Dioscoreaceae）植物中，一般含量约为1～3%，
我国薯蓣科植物资源丰富，种类亦多，分布南北各地，其中作为薯蓣皂甙元生产原料的植物，
主要有盾叶薯蓣（Dioscorea zingiberesis C.H.Wright）俗称黄姜、穿龙薯蓣（D.nipponica
Makino）俗称穿山龙，用其根茎提取薯蓣皂甙元。
薯蓣皂甙属甾体皂甙，水解可得薯蓣皂甙元，这种甾体皂甙元，是近代制药工业中合成甾体
激素和甾体避孕药的重要原料。
本实验以穿山龙为原料，穿山龙中含有多种甾体皂甙，有水溶性皂甙和水不溶性皂甙，结构
多数不详，总皂甙水解可得薯蓣皂甙元，其含量可达1.5～2.6%。
一 主要成分理化性质
薯蓣皂甙（dioscin）为无定形粉末或针状结晶，mp288℃。可溶于乙醇、甲醇、乙酸，难溶
于乙醚等弱极性有机溶剂，不溶于水。
薯蓣皂甙元（diosgenin） 为白色结晶性粉末，mp204～207℃，[α]25D-129 o（C=1.4氯仿）。
可溶于常用有机溶剂及醋酸中，不溶于水。
二 目的要求
1.掌握亲脂性中性成分（甾体皂甙元）的提取方法。
2.掌握薯蓣皂甙及薯蓣皂甙元的性质和检识方法。
三 实验原理
薯蓣皂甙元在植物体内与糖结合成甙，但经水解可得薯蓣皂甙元和单糖，利用薯蓣皂甙元不
溶于水，易溶于有机溶剂的性质，可用石油醚连续回流将其提取出来。
四 实验方法及注意事项
1.预实验
取穿山龙粗粉5g，加水浸泡（1:10）1小时或置80℃水浴上温浸30分钟，过滤得滤液供以
下试验。
（1）泡沫试验：取供试液2ml于试管中，紧塞试管口后猛力振摇，试管内液体则产生大量
的持久性的似蜂窝状泡沫（示有皂甙）。（皂苷有降低水溶液表面张力的作用，它的水溶液
经强烈振摇能产生持久性的泡沫，不因加热而消失。皂苷具有乳化剂的作用，所以它可以代
替肥皂用作清洁剂、去垢剂。皂苷之所以具有表面活性，能产生泡沫和能作为乳化剂，是由
于其分子中亲脂性的皂苷元部分和亲水性强的多糖部分能否达到适当的配比，当这两部分的
配比适当时就能表现出表面活性。若配比不恰当，亲水性部分强于亲脂性，或亲脂性强于亲
水性，分子内部失去平衡，表面活性作用就不易表现出来。所以有不少皂苷没有起泡性或起
泡性很弱，如甘草酸的起泡性很弱，薯蓣皂苷、纤细薯蓣皂苷等难溶于水或不溶于水，混水
振摇时自然不易产生泡沫。
）
（2）溶血试验：取2%血球悬浮液1ml，加生理盐水8ml，再加上述供试液1 ml，混合均匀
后放置，几分钟内则溶液由红色混浊变成红色透明，产生溶血现象（示有皂甙）。
（注：此试验可同时作空白对照以兹比较现象更为明显。操作方法相同，只以生理盐水1ml
代替供试液即可。）
2.薯蓣皂甙元的提取、分离
穿山龙粗粉（40g）
置园底烧瓶中，加水200ml，浓H2SO4 20ml ，室温浸泡
24小时，文火加热回流4～6小时，放冷，倾出酸水液
酸性药渣
用清水漂洗三次，然后将药渣倒入乳钵中，加Na2CO3粉末 ，反复研磨调PH至中性、
水洗、抽干
中性药渣
低温（80℃）干燥12小时
干燥药渣
置乳钵中研成细粉，置索氏提取器中，以石油醚（60～90℃沸程）为溶剂连续回流提
取4～5小时。
石油醚提取液
回收石油醚至剩10～15ml时，迅速倾入小三角瓶中、放置使充分冷却，过滤
滤液 沉淀
用少量冷石油醚洗二次，抽干
薯蓣皂甙元粗品
无水 EtOH或CHCl3：MeOH（1:3）重结晶
薯蓣皂甙元精制品
干燥、称重、计算收率
薯蓣皂甙元纯品
3.薯蓣皂甙元的鉴定
（1）物理常数的测定：mp：204～207℃[α]25D -129 o（C=1.4氯仿）。
（2）化学检识：
① 醋酐-浓硫酸反应（Liebermann-Burchard反应）
取样品少许，置白瓷皿中，加冰醋酸0.5ml使溶解，续加醋酐0.5ml
搅匀，再于溶液的边沿滴加1滴浓硫酸，液体则呈现紫红色，最后变
为乌绿色。
② 氯仿-浓硫酸反应（Salkowski反应）：
取样品少许，用1ml氯仿溶解，加入1ml浓硫酸后，在氯仿层出现红
或蓝色，硫酸层有绿色荧光出现。
（3）UV鉴定
UV λH2SO4 max nm(logε)：334（3.68）412（4.1） 512（3.52）
（4）薄层层析
吸附剂：硅胶-CMC薄层板
样 品：5%自制薯蓣皂甙元的乙醇液
对照品：5%薯蓣皂甙元标准品的乙醇液
展开剂：苯：乙酸乙酯（8:2）
显色剂：25%磷钼酸的乙醇溶液（喷洒后110℃加热5分钟）
〖注〗1.原料经酸水解后应充分洗涤呈中性，以免烘干时炭化。
2.在干燥水解原料的过程中，应注意压散团块和勤翻动，以利 快干。
3.在连续回流提取过程中，由于使用的石油醚极易挥发损失，故水浴温度不宜过高，能使石
油醚微沸即可。此外可加快冷凝水的流速，以增加冷凝效果。
4.回收石油醚的蒸馏操作，不必另换蒸馏装置。只将索氏提取器中的滤纸筒取出，再照原样
装好，继续加热回收烧瓶中的溶剂，待溶剂液面增高至虹吸管顶部弯曲处1cm处，暂停回
收，取下抽提器，将其中石油醚移置另外容器中。如此反复操作，即可完成回收石油醚的操
作。
5.在连续提取过程中，欲检查有效成分是否提取完全，可取抽提器中
提取液数滴，滴于白瓷皿中，挥散溶剂、观察有无残留物。然后进行
醋酐-浓硫酸反应。若反应呈阴性，示已提取尽。
6.所得薯蓣皂甙元粗品可作溶点测定，若测定不合格时再进行重结晶处理。
五 实验指导
1.实验安排：（需16学时）
2.思考题
（1）甾体皂甙可用哪些反应进行鉴定？
（2）试设计一种从穿山龙中提取薯蓣皂甙的工艺流程，并说明提取、分离原理。
（3）使用石油醚作提取溶剂时，操作中应注意哪些事项?
