微生物标本采集手册
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1 微生物标本采集手册
目录
第一章 血液及骨髓标本的微生物检验.................2
第二章 痰标本的微生物检验.........................6
第三章 上呼吸道标本的微生物检验...................8
第四章 尿液标本的微生物检验......................9第五章 粪便标本的微生物检验......................11第六章 化脓和创伤标本的微生物检验................13
第七章 脑脊液标本的微生物检验....................15 第八章 胆汁标本的微生物检验......................16
第九章 胸水标本的微生物检验......................18
第十章 腹水标本的微生物检验......................19
第十一章 心包液标本的微生物检验..................20
第十二章 关节液标本的微生物检验..................22
第十三章 鞘膜积液标本的微生物检验................23
第十四章 生殖道标本的微生物检验..................24
第十五章 外眼部标本的微生物检验..................27
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第一章 血液及骨髓标本的微生物检验
一、检查项目
血液、骨髓液的细菌培养
二、标本采集
【标本采集前的注意事项】
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本,如不能停用抗生素,应于下次抗生素应用前采集。
【标本送检指征】
病人出现以下临床表现,或同时具备以下几种临床表现时应采集血培养。
1 发热(≥38℃)或低温(≤36℃)
2 寒战
3 白细胞增多(>10×109/L,特别有“核左移”时)
4 粒细胞减少(成熟的多形核白细胞<1×109/L)
5 血小板减少
6 皮肤、粘膜出血
7 昏迷
8 多器官衰竭
9 血压降低
10 呼吸加快
几种特殊情况:
1 可疑新生儿败血症时,除发热或低温外,很少培养出细菌,应增加尿液和脑脊液培养。
2老年菌血症病人可能不发热或不低温,如伴有身体不适、肌痛或中风,可能是感染性心内膜炎,也应采取血培养。 3 骨髓培养与血液培养的送检指征是基本一致的,临床常规血液感染有指征时以抽取血培养为主。但当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者,抽取骨髓培养阳性率会远高于血培养。
【标本采集的容器】
法国梅里埃公司血培养仪配套血培养瓶(我院)或手工血培养瓶。
【标本的采集方法】
防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题,采血前严格执行消毒程序是十分重要的。
1 皮肤消毒程序:
严格按以下三步法进行:
(1) 75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。
(2) 用一根碘酊或聚维酮碘(碘伏)棉签消毒皮肤,1~2%碘酊作用30s或聚维酮碘作用60s,从穿刺点向外以1.5~2cm直径画圈进行消毒。
(3) 75%酒精脱碘。
对碘过敏的病人只能用75%酒精消毒,消毒60s,待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。
2 培养瓶消毒程序
(1) 用75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子。
(2) 酒精作用60s。
(3) 在血液注入血培养瓶之前,用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精,然后注入血液。
3 培养瓶接种程序
抽取血液后,不要换针头,直接注入血培养瓶中,轻轻颠倒混匀,以防血液凝固。如果同时作需氧和厌氧培养,应先将标本接种到厌氧瓶中,然后再注入需氧瓶,严格防止将空气注入厌氧瓶中。 4 【标本采集注意事项】
1 血培养采集的时间和频率
(1) 采血培养应尽量在抗菌药物使用之前,在24h内采集2~3份血培养(一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养),每次2瓶。因为研究已证实,2~3份血培养足以检测所有的菌血症和真菌血症。
(2) 入院前2周内接受抗菌药物治疗的患者,连续3天,每天采集2份,可选用能中和或吸附抗菌药物的培养基。
(3) 对间歇性寒战或发热的患者,应在寒战或体温高峰到来之前0.5~1h采集血液,或于寒战或发热后1h采集。因为发热时血液中可能没有细菌。
(4) 可疑为急性原发性菌血症、真菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎的患者,应在不同部位采集2~3份血培养。
(5) 不明原因发热,如隐性脓肿、伤寒热和波浪热,先采集2~3份血标本,24~36h后估计体温升高之前,再采集2份以上。
(6) 可疑为菌血症或真菌血症,但血培养持续阴性,应改变血培养方法,选择其它种类的培养瓶,如高渗培养瓶,中和抗生素培养瓶,结核菌培养瓶等,以获得罕见的或苛氧的微生物。
(7) 可疑为细菌性心内膜炎,在1~2h内多部位采集3份血标本,如果24h阴性,再采取3份以上的血标本。
2 采血量
成人:推荐每个血培养瓶应加的血量为5~10ml,血液和肉汤比为1:5~10(体积:体积)。
儿童:因很难获得大量的血液,一般静脉采血1~5ml用于血培养。
血液量太多或太少都不利于细菌的检出,血液的培养量每增加1ml,阳性率增加3~5%。人体血液内包含各种抑制细菌生长的因子或抗生素,注入血液太多可能会抑制细菌的生长。 5 骨髓采血量一般为1~2ml。
【标本的送检地点】
检验科微生物室,非正常上班时间送检验科急诊化验室。
*标本运送过程中必须保证其安全,防止溢出,避免细菌污染。
【标本的保存】
含血样的培养瓶应立即送往实验室;如不能及时送检,应将其放在室温,切忌冰箱存放。因为某些苛氧菌可在冰箱温度中死亡,而使培养阳性率下降。
在运往实验室的途中如果天气寒冷,应采取一定的保温措施。
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第二章 痰标本的微生物检验
一、检查项目
痰液的细菌培养、真菌培养、结核菌培养、真菌涂片、结核菌涂片。
二、标本采集
【标本采集前的注意事项】
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本,如不能停用抗生素,应于下次抗生素应用前采集。
【标本送检指征】
1 咳嗽、咳痰:痰液可为脓性、血性、铁锈色或红棕色胶胨样痰。
2 咯血:肺结核病人常痰中带血。
3 呼吸困难
4 发热
5 胸痛:当炎症病变累及壁层胸膜时,会发生胸痛。
*肺部感染的患者有25~50%可能发生菌血症,应同时作血培养。
【标本采集容器】
一次性无菌留痰盒。 7 【标本采集方法】
1 自然咳痰法:咳痰前,先用清水或漱口液反复漱口(为减少口腔正常菌群污染标本),然后用力自气管中咳出第一口痰于无菌容器内。
对于痰量少或无痰的患者可采用雾化吸入45℃10%NaCL水溶液,使痰液易于排出。
对咳痰少的幼儿,可轻轻压迫胸骨上部的气管,使其咳嗽。
2 气管镜采集法:用支气管镜在肺内病灶附近用导管吸引或用支气管刷直接取得标本。
3 胃内采痰法:无自觉症状的肺结核病人尤其婴幼儿不会咳嗽,有时将痰误咽入胃中,可采集胃内容物做结核分支杆菌培养。
4 管穿刺法:主要用于厌氧菌培养
小儿取痰法:用弯压舌板向后压舌,用棉拭子深入咽部,小儿受到刺激咳嗽时,可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上。
【标本采集注意事项】
1 采集时间:
(1)以晨痰为好。多数病人清晨痰较多,易于采集。且清晨痰含有的病理成分较多。会增加培养的阳性率。
(2)最好在应用抗菌药物之前采集标本。
2 送检
采集后应立即送检,以防止某些细菌在外环境中死亡。做结核分支杆菌和真菌培养的标本如不能及时送检,可放4℃保存,以免杂菌生长。
【标本的送检地点】
检验科微生物室
*标本运送过程中必须保证其安全,防止溢出,避免细菌污染。
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第三章 上呼吸道标本的微生物检验
一、检验项目
上呼吸道标本的细菌培养、真菌培养、结核菌培养、真菌涂片、结核菌涂片。
二、标本采集
【标本采集前的注意事项】
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本,如不能停用抗生素,应于下次抗生素应用前采集。
【标本送检指征】
1病毒性普通感冒伴有明显咽痛时,怀疑为咽部链球菌感染,应做细菌培养。
2细菌性咽-扁桃体炎:明显咽痛、畏寒、发热,体温可达39℃以上。
3 上呼吸道感染易并发鼻窦炎、中耳炎、气管-支气管炎,需送相应部位分泌物或痰液进行细菌培养。 9 【标本采集容器】
咽拭子或鼻咽拭子。
【标本的采集方法】
嘱患者用清水反复漱口,由检查者将舌向外拉,使腭垂尽可能向外牵引,用无菌棉拭子通过舌根到咽后壁或腭垂的后侧,涂抹数次,拭子要避免接触口腔和舌粘膜。
【标本采集注意事项】
1 采集时间:应于抗生素应用之前。时间上可无严格限制,但咽部是呼吸和食物的通路,也应晨起后采集为佳。
2送检:应立即送检。
【标本的送检地点】
检验科微生物室。
*标本运送过程中必须保证其安全,防止溢出,避免细菌污染。
第四章 尿液标本的微生物检验
一、检查项目
尿液的细菌培养,真菌培养、结核菌培养、真菌涂片、结核菌涂片。
二、标本采集
【标本采集前的注意事项】
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本,如不能停用抗生素,应于下次抗生素应用前采集。
【标本送检指征】
1 有典型的尿路感染症状;
2 肉眼脓尿或血尿;