微生物检验标本的正确采集及注意事项
正确采集临床微生物标本，直接影响到微生物培养鉴定结果。据相关统计：微生物标本的检测误差来源：80%来源于分析前20%来源于分析中和分析后其它检验样本的检测误差来源：45%分析前10%分析中（仪器））45%分析后.检验标本采集质量控制的重要性,分析前的误差来源所占比例的这个数据是惊人的，在我们的大型医院都存在这个问题，而在我们医院应该不会低于这个数据。
可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗，为临床科学用药和成功的感染控制提供依据，是正确、合理使用抗菌药物，延缓细菌耐药，减少抗菌药物滥用和监测医院感染的第一步，也是最重要的一步。为此应正确采集各种细菌学标本。
一、血液标本的采集
1、采集方法
（1）75%酒精清洁局部皮肤。
（2）待皮肤干后，再用2%—2.5%碘酒从穿刺点中心部位开始消毒，范围不应小于5cm （直径），且不能用手指触摸消毒后的皮肤。
（3）皮肤碘酒干后（约1min），穿刺采集血液，采血量成人5-10ml，婴幼儿1-5ml。
（4）采血后立即在床旁接种培养瓶，并迅速轻摇，充分混匀防止凝固，但又不可剧震以防溶血。
2、注意事项
（1）怀疑菌血症应尽早采血，体温上升（38.5℃）采血可提高阳性率，但也要防止因等待而延误时机。
（2）对已经使用抗菌药物，而又不能停药者，应在抗菌药物浓度最低时采集也即在下次用药前采血。切忌不要在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本，也不能从静脉导管及动脉插管中取血。
（3）培养基与血液之比以10:1为宜，以稀释血液中的抗生素，抗体等杀菌物质；有人主张对接受抗菌药物治疗的病人，培养基与采血量之比可为20:1或大于这个比例。
（4）近年研究表明，将血液注入血培养基前，更换针头反而易导致污染。
（5）每例至少采血两次，间隔0.5-1h，以利于提高阳性率和区分感染菌与污染菌。
（6）疑为细菌性心内膜炎及布鲁氏病的病人，以肘动脉或股动脉采血为宜，除在发热期采血外，并要多次采血（24h 3-4次）和增加采血量（可增加10ml）。
（7）采血后立即送检，如不能立即送检可置室温，而不能放置冰箱。
（8）如临床表现很似败血症，而血培养多次阴性者，提示考虑厌氧菌和真菌感染的可能。
二、呼吸道
1、痰标本
（1）采集方法
①清晨起床后用凉开水漱口多次，以除去口腔内大量杂菌，用力咳出肺深部的脓痰，置于清洁干燥容器中或无菌管中送检。
②痰量极少者可用45℃ 3%-10%的氯化钠溶液约25ml雾化。对于咯痰量少的幼儿，可轻轻压迫胸骨上部的气管，当其咯痰后用无菌棉棒采集标本。
③咳嗽无力或昏迷病人，可用吸痰管经鼻腔或口腔经气管腔内吸引痰液送检。
④气管切开者可以深入透气孔中取痰。
⑤可用支气管镜直接在病灶部位采集高浓度的病原菌。
⑥用无菌导管经鼻腔插入气管镜内，缓慢注入无菌蒸馏水5ml，取出导管。留取患者在3h 内咳出的痰液，放入无菌容器中送检。
⑦胃内采痰法。无自觉症状的结核病人。有时可把痰误咽入胃内，因而可采用胃内溶物做结核菌培养，其阳性结果比咯痰高10%左右，该方法于晨起空腹时，把灭菌的胃管，从鼻腔送入胃内，用20ml注射器抽取胃液。
（2）注意事项
①痰标本的采集以晨痰为准，此时患者痰量较多且含菌量也多。
②标本采集后立即送检，若不能及时送检者，可暂存2-8℃冰箱。若晚1-2h接种，会失去苛氧菌，并使得革兰阴性菌过分生长。
③可接受的标本：痰；支气管灌洗液，支气管刷，支气管活检；肺吸出物和肺活检。不能接受的标本：唾液；24h留的痰（结核杆菌培养除外）；
④痰标本的质量评价：（用显微镜筛选）在低倍镜下，检查鳞状上皮细胞，至少10个视野，集中在有白细胞处，合格标本为白细胞与鳞状上皮细胞比例大于2:1。
2、鼻拭子
（1）用湿的拭子（生理盐水）；
（2）需插两个鼻孔；
（3）深入3.3cm左右，转动4-5次；
（4）以上用于诊断金黄色葡萄球菌暴发时的鼻带菌者。
3、咽拭子、口腔拭子
（1）采集方法（到细菌室取专用拭子）
①患者清水漱口后，由检查者将其舌外拉，用棉拭子将咽后壁或悬雍垂的后侧反复擦拭数次；
②化脓性扁桃体炎、口腔念珠菌病时，直接用棉拭子在病灶部位擦拭；
③采集完后立即送检，防止干燥。
(2)注意事项
①棉拭子应避免触及舌、口腔黏膜和唾液；
②采集标本前数小时不可用消毒药物漱口或接触病灶局部。
三、胃肠道
1、粪便
（1）采集方法
选取脓血、黏液粪便2-3g，液体粪便取絮状物1-2ml。盛于灭菌瓶中或蜡纸盒中及时送检。
（2）注意事项
①标本要采集新鲜的，陈旧标本影响阳性检出率；
②切忌粪尿混合；
③若要分离阿米巴，标本要立即送检并注意保温；
④运送培养基可提高阳性率；
⑤分离难辨梭菌时需选不成形或水样便；
⑥霍乱弧菌、大肠杆菌Ο157感染的腹泻便则为水样便或血性便；
⑦标本在病理早期或治疗前采集；
⑧一般认为用抗菌药三天后，标本培养病原菌阴性。
2、肛拭子
在无法获得粪便的情况下，可用经无菌甘油水或无菌生理盐水湿润的肛拭子插入肛门4-5cm（幼儿2-3cm）处，轻轻旋转擦取直肠表面黏液后取出，置运送培养基中送检。
六、泌尿道
根据卫生部《医学感染诊断标准》（试行）通知，泌尿系统临床诊断为：患者出现尿频、尿急、尿痛等尿路刺激症状，或有下腹触痛、肾区叩痛、伴或不伴发热，并具有下列情况之一：
（1）尿检白细胞男性≥5个/高倍视野，女性≥10个/高倍视野，插导尿管患者应结合尿培养；
（2）临床已诊断为泌尿道感染，或抗菌治疗有效而认定的泌尿道感染。
1、中段尿
（1）采集方法
①女性采样前用肥皂水或0.1%的高锰酸钾溶液冲洗外阴，用手指江阴唇分开排尿，弃其前段尿，不终止排尿，留取中段尿10ml于灭菌容器内。
②男性用肥皂水清洗尿道口，或0.1%的碘伏溶液消毒尿道口，灭菌纱布擦干，上翻包皮，弃其前段尿，不终止排尿，留取中段尿10ml于灭菌容器内。
（2）注意事项
①导尿虽然可以减少污染，但是多次重复导尿可以造成逆行性感染，因此近年来大多采用中段尿。
②女性病人最好采取膀胱截石位由护士采取标本，减少污染。
③采集标本以晨起第一次尿液为佳。
④采集标本后，若不能在1h内送检，暂放4℃冰箱，但不能超过8h。若尿液标本在室温下放置超过2h，即使接种培养结果细菌数≥104 cfu/ml获103cfu/ml,也不能作为诊断依据，应重新留取标本送检。
⑤疑为尿道炎时可将最初3-4ml尿液收集在灭菌容器内。该尿中即使有少数细菌，如反复检查为同一细菌，也应考虑为病原菌。
⑥儿童在多数情况下，仅冲洗外阴是不够的，故采集标本较为困难。如果尿内细菌明显增多，可以高度怀疑为尿路感染，无菌则可否定。
⑦若细菌培养结果为两种或两种以上细菌，需考虑污染可能，建议重新留取标本送检。
⑧尿液中不得加入防腐剂，消毒剂否则影响阳性检出率。
2、膀胱穿刺采集法
避免污染是很困难的，培养结果与病情不符时，或尿厌氧菌培养，或婴幼儿中段尿采集困难时，可以用耻骨上穿刺膀胱内采尿。
