微生物标本的采集方法.
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微生物检验标本的正确采集及注意事项正确采集临床微生物标本,直接影响到微生物培养鉴定结果。
可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗,为临床科学用药和成功的感染控制提供依据,是正确、合理使用抗菌药物,延缓细菌耐药,减少抗菌药物滥用和监测医院感染的第一步,也是最重要的一步。
为此应正确采集各种细菌学标本。
一、血液标本的采集1、采集方法(1)75%酒精清洁局部皮肤。
(2)待皮肤干后,再用2%—2.5%碘酒从穿刺点中心部位开始消毒,范围不应小于5cm(直径),且不能用手指触摸消毒后的皮肤。
(3)皮肤碘酒干后(约1min),穿刺采集血液,采血量成人5-10ml,婴幼儿1-5ml。
(4)采血后立即在床旁接种培养瓶,并迅速轻摇,充分混匀防止凝固,但又不可剧震以防溶血。
2、注意事项(1)怀疑菌血症应尽早采血,体温上升(38.5℃)采血可提高阳性率,但也要防止因等待而延误时机。
(2)对已经使用抗菌药物,而又不能停药者,也应在下次用药前采血。
切忌不要在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本,也不能从静脉导管及动脉插管中取血。
(3)培养基与血液之比以10:1为宜,以稀释血液中的抗生素,抗体等杀菌物质;有人主张对接受抗菌药物治疗的病人,培养基与采血量之比可为20:1或大于这个比例。
(4)近年研究表明,将血液注入血培养基前,更换针头反而易导致污染。
(5)每例至少采血两次,间隔0.5-1h,以利于提高阳性率和区分感染菌与污染菌。
(6)疑为细菌性心内膜炎及布鲁氏病的病人,以肘动脉或股动脉采血为宜,除在发热期采血外,并要多次采血(24h 3-4次)和增加采血量(可增加10ml)。
(7)采血后立即送检,如不能立即送检可置室温,而不能放置冰箱。
(8)如临床表现很似败血症,而血培养多次阴性者,提示考虑厌氧菌和真菌感染的可能。
二、骨髓的采集1、采集方法在病灶部位或髂前(后)上脊处严格消毒后抽取骨髓1ml,注入血培养瓶内。
2、注意事项(1)骨髓内含有大量的单核巨噬细胞系统的细胞,因而骨髓培养对伤寒病人的诊断较血培养优越。
微生物标本的正确采集正确采集微生物标本是进行病原学检查的关键步骤,因为只有采集到合适的标本,才能够准确、客观地检测出病原菌,为诊断和治疗提供科学依据。
以下是一些采集微生物标本的正确方法:一、注意清洁和消毒在采集标本前,必须对手部进行清洁和消毒,以减少污染的可能性。
使用肥皂和水清洁手部,或者使用酒精消毒剂消毒手部。
同时,还需要对采集标本所使用的器械进行消毒,确保无菌操作。
二、选择正确的标本类型不同的微生物感染会有不同的症状和体征,因此需要根据患者的具体情况选择正确的标本类型。
例如,对于呼吸道感染,可以使用鼻咽拭子、痰液等;对于胃肠道感染,可以使用大便标本等。
三、正确采集标本1.采集前准备:了解患者的病史和症状,确定需要采集的标本类型,准备好采集所需的器械和消毒用品。
2.采集方法:根据不同的标本类型,采用正确的采集方法。
例如,对于痰液标本,需要让患者用力咳嗽,将痰液咳出并放入收集器中;对于大便标本,需要让患者取适量的大便放入收集器中。
3.采集量:采集的标本量应该足够,以便进行实验室检测和分析。
一般来说,采集的标本量应该不少于检测所需量的两倍。
4.采集时间:采集标本的时间也有讲究。
例如,对于呼吸道病毒的检测,最好在患者发病的早期采集标本;对于肠道病毒的检测,最好在患者发病后一周内采集标本。
5.保存方式:采集完标本后,需要妥善保存。
一般来说,应该将标本保存在适当的介质中,如保存液或培养基中,以保持标本的活性和完整性。
同时,还需要注意温度和湿度等环境因素对标本的影响。
四、避免污染和交叉感染在采集标本的过程中,必须严格遵守无菌操作原则,避免污染和交叉感染。
例如,在采集痰液标本时,应该让患者先用清水漱口,再用无菌棉签擦拭咽部,以减少口腔和咽部的细菌污染。
同时,还需要注意实验室内的清洁卫生和消毒工作,确保实验室内的空气和环境符合要求。
五、及时送检采集完标本后,需要及时送检。
一般来说,应该将标本尽快送到实验室进行检测和分析。
微生物学标本采集与处理程序1. 引言微生物学标本的采集和处理是微生物学研究中至关重要的一环。
正确的采集和处理程序能够保证标本的质量和准确性,从而确保后续的实验和分析的可靠性。
本文档旨在介绍一套标准的微生物学标本采集与处理程序,以帮助研究人员在实验室中进行规范的操作。
2. 标本采集2.1 选择合适的采集根据所研究的微生物类型和标本特点,选择合适的采集。
常用的采集包括离心管、培养皿、尿液收集等。
确保采集清洁无污染,并在使用前进行灭菌处理。
2.2 标本采集技巧在采集标本前,确保双手清洁并穿戴好防护手套。
根据标本类型,采取适当的采集方法,例如:- 血液标本:通过静脉采血或采用穿刺器采集足跟血。
- 粪便标本:采用干燥的收集新鲜便样,并确保不混入尿液、水或其他污染物。
- 尿液标本:清洁外阴部,使用无菌尿杯收集中段尿液。
- 喉拭子标本:使用标本采集棒轻轻刮取喉部后壁表面。
- 污水标本:根据采样点不同,采用合适的和采集方法。
2.3 标本标识标本采集完成后,将标本上贴上标识标签,标明采集日期、采集者姓名、标本类型等关键信息。
确保标识清晰、不易脱落。
3. 标本处理3.1 标本转运采集完成后,及时将标本转运至实验室。
对于需要特殊处理的标本,应按照相应的要求进行转运,确保样本稳定和安全。
3.2 标本处理前的准备在处理标本前,仔细阅读实验操作指南,准备必要的试剂和材料。
同时,确保实验室工作台面清洁无菌。
3.3 标本处理步骤根据实验要求,进行标本处理的步骤。
可能的步骤包括标本培养、PCR扩增、生物化学检测等。
根据具体情况,确保每一步骤的操作规范和无菌。
3.4 标本处理后的处理标本处理完成后,将废弃物正确处理,如进行灭菌消毒或遵守实验室废物管理规定。
4. 结论微生物学标本采集和处理程序的规范操作对于研究可靠性和实验结果的准确性至关重要。
研究人员应遵循本文档中的程序和指南,确保标本采集和处理的质量和准确性,从而提升微生物学研究的可信度和可靠性。
微生物检验标本的正确采集及注意事项正确采集临床微生物标本,直接影响到微生物培养鉴定结果。
据相关统计:微生物标本的检测误差来源:80%来源于分析前20%来源于分析中和分析后其它检验样本的检测误差来源:45%分析前10%分析中(仪器))45%分析后.检验标本采集质量控制的重要性,分析前的误差来源所占比例的这个数据是惊人的,在我们的大型医院都存在这个问题,而在我们医院应该不会低于这个数据。
可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗,为临床科学用药和成功的感染控制提供依据,是正确、合理使用抗菌药物,延缓细菌耐药,减少抗菌药物滥用和监测医院感染的第一步,也是最重要的一步。
为此应正确采集各种细菌学标本。
一、血液标本的采集1、采集方法(1)75%酒精清洁局部皮肤。
(2)待皮肤干后,再用2%—2.5%碘酒从穿刺点中心部位开始消毒,范围不应小于5cm (直径),且不能用手指触摸消毒后的皮肤。
(3)皮肤碘酒干后(约1min),穿刺采集血液,采血量成人5-10ml,婴幼儿1-5ml。
(4)采血后立即在床旁接种培养瓶,并迅速轻摇,充分混匀防止凝固,但又不可剧震以防溶血。
2、注意事项(1)怀疑菌血症应尽早采血,体温上升(38.5℃)采血可提高阳性率,但也要防止因等待而延误时机。
(2)对已经使用抗菌药物,而又不能停药者,应在抗菌药物浓度最低时采集也即在下次用药前采血。
切忌不要在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本,也不能从静脉导管及动脉插管中取血。
(3)培养基与血液之比以10:1为宜,以稀释血液中的抗生素,抗体等杀菌物质;有人主张对接受抗菌药物治疗的病人,培养基与采血量之比可为20:1或大于这个比例。
(4)近年研究表明,将血液注入血培养基前,更换针头反而易导致污染。
(5)每例至少采血两次,间隔0.5-1h,以利于提高阳性率和区分感染菌与污染菌。
(6)疑为细菌性心内膜炎及布鲁氏病的病人,以肘动脉或股动脉采血为宜,除在发热期采血外,并要多次采血(24h 3-4次)和增加采血量(可增加10ml)。
实验动物病原微生物检测中的标本采集技术实验动物的病原菌和寄生虫多定植于身体的特定部位,检测时需从相应部位采样以提高检出率,因此实验动物的细菌学、真菌学和寄生虫学检测涉及的标本种类众多,且采样方法和样品的制备各不相同。
一、细菌和真菌检测时的标本采集(一)皮毛、鳞屑标本将动物进行吸入麻醉(乙醚等)后适当保定,待检部位用75%乙醇消毒,直接用灭菌接种刀、镊刮取皮毛、鳞屑少许。
(二)呼吸道分泌物标本将动物麻醉后仰卧保定,并使四肢舒展固定。
用75%乙醇从腹股沟到颈部进行逆毛涂刷消毒,沿腹正中线从腹部以下至下颌剪开皮肤,使腹部、胸部以及颈部肌肉全部暴露,无菌分离颈部肌肉暴露气管,于咽部以下5mm左右气管上剪一“V”形口,插入无菌接种针由下至上直达咽部轻轻转动数下,沾取气管分泌物。
如分泌物过少,可将咽部及部分气管剪下增菌培养。
(三)回盲部内容物标本将动物麻醉后仰卧保定,并使四肢舒展固定。
用75%乙醇从腹股沟到颈部进行逆毛涂刷消毒,沿腹正中线从腹部以下至下颌剪开皮肤,使腹部、胸部以及颈部肌肉全部暴露,无菌剪开腹部肌肉暴露回盲部,在回盲部剪一小口,用接种环伸入直接挑取适量内容物。
如内容物过少,可剪下包括回盲部在内的一段肠组织适当剪碎后作增菌培养。
(四)粪便标本将粪便前段弃去,取中段粪便,加适量PBS或培养液匀浆后接种,如为稀软便可直接接种。
(五)肛拭标本将灭菌棉签用生理盐水或培养液浸润后,轻轻插入动物肛门深处3~4cm,缓缓转动后取出。
(六)病灶组织分泌物及浓汁标本标本用于直接接种时,保定动物并对病灶周围用75%乙醇消毒,用接种环直接沾取分泌物或脓汁进行接种,或取下少量病变组织(对已死亡动物)于培养基表面接触后再划线接种;标本用于制备涂片时,可于载玻片上滴加适量灭菌生理盐水,挑取少量脓汁与之混匀且风干,火焰上固定,或取适量病灶分泌物与生理盐水混匀涂抹成相对较浓的涂片。
二、检测体内寄生虫的标本采集和制备体内寄生虫寄生于肠道、血液和组织内,检测时须根据不同的寄生部位采集相应标本。
微生物标本采集在医学和生物学领域,微生物标本采集是一项至关重要的工作。
它是准确诊断疾病、开展科学研究以及监测环境微生物状况的基础。
正确的标本采集方法和流程能够确保所采集的样本具有代表性和可靠性,从而为后续的检验和分析提供有力的支持。
微生物标本的种类繁多,包括血液、尿液、痰液、粪便、脑脊液、脓液、拭子等。
不同类型的标本采集方法和注意事项各有不同。
首先,我们来谈谈血液标本的采集。
这通常需要在严格的无菌条件下进行。
采血部位一般选择肘正中静脉,采血前要对皮肤进行彻底的消毒。
采血过程中,要注意避免溶血,因为溶血可能会影响检测结果的准确性。
采血的量也需要根据具体的检测项目来确定。
比如,进行血常规检查时,通常采集 2 毫升左右的血液;而进行血培养时,则需要采集更多的血液,一般为 10 毫升左右。
尿液标本的采集也有讲究。
对于常规的尿液检查,一般采用中段尿采集法。
患者需要先清洁尿道口周围的皮肤,然后开始排尿,将前段尿弃去,收集中段尿。
如果是进行 24 小时尿蛋白定量检测,则需要患者在规定的 24 小时内将所有尿液收集到一个干净的容器中,并加入防腐剂。
痰液标本对于呼吸系统疾病的诊断具有重要意义。
患者需要在清晨起床后,先用清水漱口,然后用力咳出深部的痰液,避免混入唾液。
对于无法自主咳痰的患者,可以通过吸痰的方式获取痰液标本。
粪便标本的采集相对简单,但也需要注意一些细节。
患者应尽量选取含有黏液、脓血或异常部分的粪便,如果进行寄生虫卵检查,需要在不同部位多点取样。
脑脊液标本的采集则是一项较为复杂和危险的操作,通常需要由专业的医生在严格的无菌条件下进行腰椎穿刺来获取。
脓液标本采集时,要先对局部皮肤进行消毒,然后用无菌注射器抽取脓液。
在进行微生物标本采集时,有一些通用的原则和注意事项。
首先,采集的时间要恰当。
例如,对于发热患者,在发热初期或发热高峰时采集血液标本,更容易检测到病原体。
其次,采集的部位要准确。
要根据感染的可能部位和疾病的特点选择合适的采集部位,以提高检测的阳性率。
伤口微生物标本采集法(一)——表面伤口微生物标本的采集
慢创中心吴帅
在压疮的整个治疗中,创面分泌物的培养是其中不可或缺的一个环节,下面具体介绍分泌物培养的留取方法及注意事项。
采集方法:
(1)用无菌生理盐水充分冲洗,以去除表面的渗出物、坏死组织和残留的敷料纤维,确保伤口是干净的。
(2)用无菌棉拭子擦涂创面的边缘和基底,应用10点取材法沿数字走“之”字形涂抹,拭子要不停转动,并以一定压力擦拭创面,确保拭子吸收足够的伤口渗液。
(3)拭子放在运送培养基中立即送检。
注意事项:
(1)采样时为了减少定植菌的混入,建议先轻轻擦去创面处皮肤表面的脓液,擦拭时如使用棉球容易使棉絮遗留在伤口内,因此建议使用完整的无菌方纱。
(2)为了不混入消毒液影响细菌生长,应该采用无菌生理盐水充分冲洗,避免使用消毒液擦拭伤口表面。
(3)焦痂不应用于细菌培养,要去除坏死和失活的组织,再做培养,因为细菌最多在坏死和正常组织之间。
(4)采集压疮边缘的脓性分泌物,不要采集创口周围的渗液。
(5)如果渗液较多,能抽出液体来,就尽量使用穿刺的方法采集标本,棉拭子对细菌有一定的抑菌作用。
微⽣物取样⽅法⼤全随着⾼通量技术的发展,我们对微⽣物的认识逐步深⼊,微⽣物在临床以及科研上的应⽤越来越多,⽽微⽣物采样的正确与否直接关系到微⽣物数据的准确性。
因此,微⽣物的采样⽅法就显得格外重要。
⾸先,我们需要在取样的过程中,注意以下⼏个⽅⾯:(1) 所有实验⽤到的取样⽤具必须是经过灭菌的(如样品袋、取样器、采⾎管、试管、铲⼦、匙、⼑类⼯具等)。
(2) 收集样品信息,取样前或取样后应在盛装样品的容器或样品袋上⽴即贴上标签,每件样品必须标记清楚(例如品名、来源、数量、取样地点、取样⼈及取样⽇期等)。
(3) 请尽量将样本分装 3-5 份备份;建议每组取 6 个及以上重复较为合适,⾄少 3 个重复。
(4) ⽤到⾕⽲取样管的实验样品,可以常温运输;如果不⽤取样管,则必须低温-80℃保存,保存期间切忌反复冻融;低温寄送时请将样品置于泡沫箱中,⽤⼲冰寄送。
然⽽样品种类繁多,不同的样品取样有不同的⽅案,下⾯详细介绍每类样品对应的取样⽅案。
环境微⽣物普通⼟壤(1) 去除表⾯浮⼟、凋落物等,根据⼟壤情况,选择是否过2mm筛⽹,每个样品从3个及以上采样点采集并混合⽽成,建议将样本分装 3-5 份备份;注:采样时需注意每个采样点的取⼟深度及采样量应均匀⼀致,⼟样上层与下层的⽐例要相同。
(2) 保存于⽆菌离⼼管中,置于泡沫箱(冰袋或⼲冰)中,0°C以下运回实验室;(3) 如果条件不允许⽴即提DNA,可将样品置于-80°C冰箱中保存,并通过⼲冰寄送⾄公司后提取样品总 DNA。
根际⼟壤根际,是指受植物根系活动影响,在物理、化学和⽣物学性质上不同于⼟体的那部分微域环境。
部分研究是针对⼟壤微⽣物与植物之间的相互关系,因此需要对根际⼟进⾏取样。
(1) 采集植株,去除根周较松散的⼟,仍附着在根系表⾯的视为根际⼟。
将植物置于装有冰袋或⼲冰的保温箱中,避光条件,0℃以下运回实验室;(2) 准备⽆菌容器,将植物根系部分置于缓冲液(PBS或⽣理盐⽔)中震荡,震荡时间和强度依据样本实际情况调整,洗下根际⼟;(3) 将洗涤液进⾏⾼速离⼼,收集⼟壤沉淀,若沉淀较少,也可过滤膜,同⼀样⽅取样的样本进⾏多点等量混合;(4) 将样本分装⾄离⼼管中,密封,标记样本信息后液氮速冻,置于-80℃冰箱保存,⼲冰寄送。