荔枝和龙眼部分珍稀种质的染色体观察_张永福
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利用流式细胞术对29份火龙果种质染色体的倍性鉴定作者:黄黎芳武志江梁桂东陆贵锋黄凤珠刘朝安邓海燕来源:《热带作物学报》2021年第04期摘要:火龙果为仙人掌科量天尺属和蛇鞭柱属植物,不同类型火龙果种质的染色体倍性尚不明确。
为明确所收集的种质资源以及创制的新材料的染色体倍性,利用流式细胞技术对29份火龙果材料进行了倍性鉴定。
结果显示,供试的18份种质资源中共鉴定出二倍体火龙果14份,四倍体4份,无三倍体材料。
通过不同倍性亲本杂交和秋水仙素诱变所创制的8份后代材料经鉴定发现有二倍体材料1份,三倍体材料3份,四倍体材料4份,这表明火龙果属间杂交和化学诱变可获得多倍体材料。
研究结果对火龙果资源的遗传学评价以及开展倍性杂交育种提供重要的参考依据。
关键词:流式细胞术;火龙果;种质资源;染色体;倍性分析中图分类号:S667文献标识码:APloidy Determination of 29 Pitaya Germplasms Using Flow CytometryHUANG Lifang, WU Zhijiang, LIANG Guidong, LU Guifeng, HUANG Fengzhu, LIU Chaoan,DENG Haiyan*Horticultural Research Institute, Guangxi Academy of Agricultural Sciences, Nanning,Guangxi 530007, ChinaAbstract:Pitaya which belongs to the cactus family includes two genus,Hylocereus and Seleniereus, the ploidy levels of different pitaya germplasms are still not clear. In order to clarify the ploidy of germplasm resources and the hybrids or mutants, the ploidy of 29 pitaya materials were identified by flow cytometry. 14 of 18 germplasm materials were diploid and others were tetraploid while no triploids were available. The 8 interploid hybrids and colchicine-induced mutants were identified as 3 triploids, 4 tetraploids and 1 diploid, which showed that polyploid materials could be obtained by intergeneric hybridization and chemical mutagenesis of pitaya. The results would provide an important reference basis for genetic evaluation and ploidy cross breeding of pitaya resources.Keywords:flow cytometry; pitaya; germplasm resources; chromosome; ploidy analysisDOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2021.04.008火龍果为仙人掌科(Cactaceae)量天尺属(Hylocereus)和蛇鞭柱属(Seleniereus)攀援性多年生植物,原产于中南美洲热带地区,因其果实丰富的营养价值和功能作用广受消费者欢迎。
利用RAPD标记研究荔枝品种的亲缘关系丁晓东;吕柳新;陈晓静;关雄【期刊名称】《热带亚热带植物学报》【年(卷),期】2000(008)001【摘要】采用改进的CTAB方法提取34个荔枝品种的基因组DNA为模板,从50个10碱基的随机引物中获得了37个多态性RAPD标记,聚类分析结果表明这34个荔枝品种可以分成4组,第一组有"状元红"、"元红"、"桂林"、"宋家香"、"台湾荔","下番枝"、"东刘一号"、"妃子笑"、"白糖罂"、"香丸"、"绿沙";第二组有"无栗子"、"水东"、"乌叶"、"蔡家肉丸"、"青壳糯米糍"、"糯米糍";第三组有"桂味"、"光明"、"白荔枝"、"陈紫"、"兰竹"、"及第"、"踏死牛";第四组有"回头降"、"葡萄本"、"淮枝"、"南海荔"、"大造"、"早红"、"火烧荔"、"乌叶舅"、"密丁香"、"绿荷包".【总页数】6页(P49-54)【作者】丁晓东;吕柳新;陈晓静;关雄【作者单位】东北农业大学园艺系,黑龙江,哈尔滨,150030;福建农业大学园艺系,福建,福州,350002;福建农业大学园艺系,福建,福州,350002;福建农业大学生物技术中心,福建,福州,350002【正文语种】中文【中图分类】Q94-336【相关文献】1.基于RAPD分子标记芹菜品种亲缘关系分析研究 [J], 刘庞源;张宝海;何伟明;赵泓;王慧杰2.利用RAPD标记分析柞蚕品种资源的亲缘关系 [J], 刘彦群;鲁成;秦利;向仲怀3.利用RAPD标记研究桂林桂花品种间的亲缘关系(英文) [J], 伊艳杰;黄莹;尚富德4.用RAPD标记研究多花水仙若干品种类型的亲缘关系 [J], 吴菁华;吕柳新;张志忠5.利用RAPD标记研究部分葡萄品种的亲缘关系 [J], 吴红;常永义;郝燕;吴玉霞因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
热带作物学报2021, 42(5): 1290 1296 Chinese Journal of Tropical Crops收稿日期 2020-06-09;修回日期 2020-07-21基金项目 长江师范学院校级科研项目(No. 2016KYQD19,No. 2016KYQD20,No. 2016XJQN07)。
作者简介 杜丽娜(1987—),女,博士,副教授,研究方向:园艺植物生物技术。
*通信作者(Corresponding author ):赖 彪(LAI Biao ),E-mail :*******************。
荔枝LcMYB1异源表达促进矮牵牛和番茄花色苷的积累杜丽娜1,2,陈春帆1,苏 睿1,谭春艳1,赖 彪1,2*1. 长江师范学院现代农业与生物工程学院,重庆涪陵 408100;2. 长江师范学院武陵山片区绿色发展协同创新中心,重庆涪陵 408100摘 要:为分析荔枝LcMYB1的功能,以白色‘W115’矮牵牛和‘Micro-Tom ’番茄为材料,利用农杆菌介导法将LcMYB1在矮牵牛和番茄中异源表达,观测转基因植株表型。
结果表明:与‘W115’相比,转基因矮牵牛的叶片和花瓣中积累了花色苷,且矮牵牛花色苷生物合成结构基因PhCHS 和PhDFR 、调控基因PhAN1的表达显著上调;与野生型‘Micro-Tom ’番茄相比,转基因番茄的叶片和花药中积累了花色苷,且相应组织花色苷生物合成结构基因SlDFR 、调控基因SlAN1和SlJAF13的表达显著上调,虽然果实中没有积累花色苷,但SlAN1和SlJAF13表达也显著上调。
LcMYB1在矮牵牛和番茄中异源表达时通过上调花色苷生物合成关键结构基因和调控基因bHLH 的表达诱导花色苷积累。
因此,荔枝LcMYB1是花色苷生物合成中的关键转录因子,具备异源转化利用的潜力。
关键词:LcMYB1;矮牵牛;番茄;花色苷 中图分类号:S667.1 文献标识码:AEctopic Expressed LcMYB1 Induced Anthocyanin Biosynthesis in Petunia and TomatoDU Lina 1, CHEN Chunfan 1, SU Rui 1, TAN Chunyan 1, LAI Biao 1,2*1. School of Advanced Agriculture, Bioengineering, Yangtze Normal University, Fuling, Chongqing 408100, China;2.Correlative Innovation Centre for Green Development in Wulingshan Region, Yangtze Normal University, Fuling, Chongqing 408100, ChinaAbstract: In order to better understand the function of LcMYB1 and provide theoretical support for further utilization, LcMYB1 was transformed into both petunia and tomato. White flower ‘W115’ petunia and ‘Micro-Tom’ tomato were used as materials in LcMYB1 ectopic expressed assays. Anthocyanin contents and related gene expressions were ana-lyzed in transgenic plants. Ectopic expression of LcMYB1 in ‘W115’ resulted in anthocyanin production in vegetative and floral tissues such as leaves and petals, probably by transcriptional activation of anthocyanin biosynthetic genes such as PhCHS and PhDFR and endogenous anthocyanin regulatory gene PhAN1. However, the transgenic tomato only produced anthocyanin in anthers and leaves but not in tomato fruits and petals. The results suggested that LcMYB1 could enhance anthocyanin production in vegetative and floral tissues of both petunia and tomato by activating anthocyanin biosynthesis and regulatory genes. LcMYB1 is an important transcriptional regulatory factor in anthocyanin biosynthesis of plants and is potentially used in ectopic transformation. Keywords: LcMYB1; petunia; tomato; anthocyanin DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2021.05.013色泽是花卉和果蔬的重要品质组成之一。
《茶树育种学》习题及答案一、填空题1.茶树染色体以x=(15)为基数,在体细胞中为(30)条,在性细胞中为(15)条。
2.作为核型分析的染色体,一般以体细胞有丝分裂(中期)的染色体为基本形态。
3.茶树有丝分裂标本常以种子用沙培1周长出的(幼根)为材料。
4.茶树树型分为(乔木)、(小乔木)和(灌木)三种。
5.茶树学名是用(属名)、(种加词)和(命名人姓名的缩写)组成。
茶树品种福鼎大白茶的植物学拉丁文全名是(Camellia sinensis cv. Fuding-dabaicha)6.茶树的表现型是(基因型)与环境共同作用的结果。
7.以无性繁殖方法生产树苗,其后代个体基因是杂合的,品种内个体之间基因型是(相同的)。
8.气温(低)的地区向气温(高)的地区引种茶树,一般能够适应。
9.云南等省的一些大叶种引种到安徽北部等地区,难以种植成功,主要是(冬季极限最低气温)比原产地低得多。
10.南方茶树品种北引后,其最低分枝部位(降低)。
11.南方茶树品种北引后,新梢茶多酚含量(减少)。
12.茶苗移栽通常在(春初)或(秋末冬初)进行。
13.选择的实质就是造成有(差别)的生殖率和成活率,从而定向地改变群体的遗传组成。
14.(基因重组)是茶树有性群体中造成不同个体遗传组成差别的主要来源。
15.(基因突变)是茶树无性系品种产生变异的主要因素。
16.(自然选择)是按茶树适应自然环境条件的方向进行的,选择的结果使茶树更适应自然环境条件。
17.(人工选择)是根据社会的经济要求或人类的喜好,从自然界混杂的茶树群体中或人工创造的原始材料中,选择需要的类型和个体。
18.表型方差可以分为遗传方差和(环境)方差两部分。
19.遗传力是介于(0~1)之间的数值。
20.通过与产量因子密切相关地一些性状,如(树高)、(树幅)、(叶片光合强度)、(幼年茶树定型修剪枝叶重量)、(单株芽叶数)、(新梢着叶数)、(百芽重)、(发芽密度)、(扦插苗发根数)、(根干重)和(抽梢率)等,可间接判断某品种的产量。
40个龙眼品种(品系)DNA指纹图谱构建及遗传关系分析郑姗;张小艳;张立杰;谢丽雪;李韬【期刊名称】《中国农学通报》【年(卷),期】2016(32)1【摘要】有效鉴别龙眼新品种(品系),为龙眼种质资源研究和新品种保护提供理论基础。
利用ISSR分子标记分析‘冬宝9号’、‘高宝’等4个龙眼新品种(品系)与36个龙眼品种的遗传关系,并建立其DNA指纹图谱。
从80个ISSR引物中筛选出11个多态性好、扩增清晰的引物。
结果显示,11个引物共获得146个位点,有125个多态性位点,多态性百分率为85.7%。
40个龙眼品种(品系)的遗传相似系数在0.58-0.88之间。
UPGMA聚类结果表明,40个龙眼品种(品系)在遗传相似系数为0.64的水平处划分为3组。
引物UBC810/UBC818组合可将40个龙眼品种(品系)全部区分开,并依此建立了数字化的DNA指纹图谱,为龙眼新品种的鉴别、分类、示范及推广等方面提供依据。
【总页数】6页(P107-112)【关键词】龙眼;ISSR;指纹图谱;遗传关系【作者】郑姗;张小艳;张立杰;谢丽雪;李韬【作者单位】福建省农业科学院果树研究所【正文语种】中文【中图分类】S667.2【相关文献】1.粤选系列匍匐翦股颖新品系DNA指纹图谱构建与遗传多样性分析 [J], 石秀兰;陈平;于得水;郭微2.内蒙古地区绿豆品种遗传多样性SSR分析及DNA指纹图谱构建 [J], 赵雅楠;王颖;张东杰;王丽侠;佐兆杭3.黄淮麦区主要推广小麦品种(系)DNA指纹图谱构建及遗传多样性分析 [J], 杨艳红;尹华燕;高雨;赵金晓;马信;王宏伟;李安飞;孔令让;李宪彬4.利用SSR标记构建我国亚麻品种DNA指纹图谱及遗传多样性分析 [J], 潘根;邓勇;李德芳;张义;赵立宁;陈安国;李建军;黄思齐;唐慧娟;常丽;张翠萍5.软枣猕猴桃栽培品种DNA指纹图谱的构建及遗传多样性分析 [J], 王丹丹;张彦文因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
细胞生物学实验教学指导书有丝分裂实验一、实验目的学习植物根尖压片方法的基本技术。
熟悉细胞有丝分裂各个时期的形态特征及染色体的变化,并学会染色体简易永久片的制片技术。
二、实验原理有丝分裂是体细胞分裂的主要方式,一般发生在植物根尖或茎尖的分生组织中。
在有丝分裂时,细胞核与细胞质有很大的变化,但以细胞核内染色体的变化最为明显,而且是有规律地进行。
各种生物染色体在数目上和形态上是相对恒定的,并随科属种的不同而具有一定的特征。
洋葱体细胞中有8对共16条染色体,在有丝分裂过程中,每个染色体能复制一份,然后分配到两个子细胞中,所以两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上都是相同的。
在细胞遗传学研究中,人们常常需要了解某一物种的染色体数目,而最有效的方法就是观察细胞有丝分裂的中期,这样能得到较为准确的结果。
三、实验材料洋葱(Aillum cepa)根尖蚕豆(Vicia faba)根尖四、实验器具和药品试剂显微镜、培养箱、恒温水浴锅、温度计、镊子、解剖针、刀片、载玻片、盖玻片、烧杯、量筒、滴瓶、切片架、切片盒、凹面玻片、青霉素瓶、大培养皿、纱布、吸水纸、铅笔、吸管。
卡诺氏固定液(甲醇或95%乙醇3份,冰醋酸1份)、改良苯酚品红染色液(见附录:实验试剂的配制)、0.002M8-羟基喹啉水溶液、0.05—0.2%秋水仙素溶液、对二氯苯饱和水溶液、1N HCl、95%乙醇、正丁醇、加拿大树胶。
五、实验方法和步骤(一)材料准备选取蚕豆(或小麦、玉米等)种子放在烧杯中,放清水浸泡过夜,使种子吸水胀大后倒出,再用清水洗几次,用多层纱布包好种子,放进20,25?培养箱内培养。
当根尖长1,3cm 时,即可以进行预处理。
(二)预处理为了有利于对有丝分裂中染色体的观察和计数,在固定之前应用理化因素进行预处理,这样可以改变细胞质的粘度,抑制或破坏纺锤丝的形成,促使染色体缩短和分散等。
一般是在分裂高峰前处理1.5小时以上。
处理的方法如下: 1(秋水仙素水溶液常用浓度为0.05,0.2%,室温下处理2,4小时。
荔枝雌雄花器官发育过程的扫描电镜观察
徐是雄
【期刊名称】《植物学报:英文版》
【年(卷),期】1990(032)012
【摘要】本文用扫描电镜研究了荔枝(Litchi chinensis Sonn.)花的雌蕊和雄蕊的发育过程。
雌蕊的发育出现在靠近花原基中央部位。
首先在这部位见到两至三个突起,然后每一突起再向上和横向延伸靠拢形成子房。
在子房合拢的中央部位又再分化形成花柱和柱头。
柱头在成熟时二裂和向下卷曲。
在柱头的上表面有许多乳头状细胞,当柱头完全成熟时,乳头状细胞上有粘液覆盖着。
雄蕊的发育较雌蕊稍早些,最初在萼片的内侧形成多个突起。
在正常的两性花内,每一个突起进一步分化成花丝和花药。
荔枝除了形成正常的两性花外,还形成许多单性花,即雄蕊发育不良的雌花和雌蕊发育不良的雄花。
【总页数】4页(P905-908)
【作者】徐是雄
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】S667.101
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⽣态学实验实验⽬录实验⼀光强度的测定※实验⼆温湿度测定※实验三种群空间分布格局的调查※实验四植物群落数量特征的调查※实验五植物群落中种的多样性测定※实验六⼈体内微⽣物菌群分布的测定※实验七⽜乳在⾃然发酵与酸败过程中细菌的⽣态演变※实验⼋种间关系分析实验九饮料和⽔的卫⽣检测实验⼗污染胁迫对⽣物的影响实验⼗⼀等位酶技术实验⼀光强度的测定⼀、⽬的1、了解测定光强度的⼏种途径,并掌握照度计的原理及使⽤⽅法;2、通过不同树冠内及不同群落中光强度的测定,认识植物和光的相互影响。
⼆、仪器ZDS-10型照度计、钢卷尺、⽪卷尺、记录纸。
事先选好被测树⽊及测试群落。
三、原理地球上所有⽣命的维持,均依靠来⾃太阳的辐射能。
⽣物圈所接受的太阳辐射,其波长范围在290纳⽶到3000纳⽶之间,其中,波长380纳⽶到720纳⽶的可见光谱区的能量约占全部辐射的40~45%。
绿⾊植物仅吸收波长380纳⽶到740纳⽶的辐射。
测定太阳辐射有两种途径,第⼀是测定辐射量,即⼊射到接收表⾯上的总辐射量以热量单位、能量单位或功率单位表⽰,如卡.厘⽶-2.分-1;⽡.厘⽶-2等。
所⽤测定仪器为各种辐射仪和⽇射仪,前者是以热电偶为基础的热电装置,后者以双⾦属的变形对⽐做基础。
这⼀途径对研究植物的能量平衡和⽣态系统中的能流过程是必要的。
第⼆种途径是测定照度或光强度,即物体表⾯所获得的光能量,以照度单位⽶烛光(lx)或千⽶烛光(klx)表⽰(100klx=1.5卡.厘⽶-2.分-1)。
由于植物⽣理有效辐射⼤致与可见光谱相吻合,所以这⼀⽅法也常被⽣态学或⽣理学⼯作者所采⽤。
所有测定仪器通常以光电原理为基础,如各种照度计。
照度计通常由光电变换器(光探头)、放⼤器、显⽰器等部件构成,关键部件为光探头。
光探头的⼤⼩、形状可以不同,但其⼯作原理是相拟的。
四、实验步骤(分组进⾏)1、仪器使⽤⽅法:⑴取照度计,将电池放⼊主机箱内,然后放在测量环境位置进⾏测量;⑵将开关拔向“ON”位置;⑶打开按收器遮光罩,则仪表显⽰出被测点的照度读数。
第十三章生物实验的基本技术第一节细胞学实验技术【知识概要】一、玻片标本的制作技术制作玻片标本对认识生物体的形态结构具有重要意义。
玻片标本有临时玻片标本(如涂片、压片、临时装片)和永久玻片标本(如永久装片、切片)。
1.涂片法涂片法是将材料均匀地涂布在载玻片上的一种制片方法。
涂片材料有单细胞生物、小型藻类、血液、细菌培养液、动植物的疏松组织、精巢、花药等。
涂片时应注意:(1)载玻片必须清洁。
(2)载玻片要持平。
(3)涂层须均匀。
涂抹液滴在载玻片中间偏右,用解剖刀刃或牙签等涂匀。
(4)涂层要薄。
用另一载玻片作推片,沿滴有涂抹液的载玻片面(二载玻片夹角应为30°~45°)由右向左轻轻推动,涂成均匀一薄层。
(5)固定。
如需固定可用化学固定剂或干燥法(细菌)固定。
(6)染色。
细菌用亚甲基蓝,血液用瑞氏染液。
染色液要盖住全部涂面。
(7)冲洗。
用吸水纸吸干或烤干。
(8)封片。
长期保存用加拿大的树胶片片。
2.压片法压片法是将生物材料置于载玻片和盖片之间,施加一定压力,将组织细胞压散的一种制片方法。
压片法的一般过程:(1)取材。
观察细胞分裂,应选取细胞分裂旺盛、新鲜的组织细胞为材料。
如根尖、茎尖分生组织、骨髓细胞、花药(花粉母细胞)。
精巢(精母细胞)等。
(2)固定。
材料固定可根据需要而定,取材后立即压片观察,可不作单独固定处理(与染色同步进行);取材后不立即视察,可将材料用固定液(一般用醋酸酒精固定液)固定。
固定2~24小时(因材料而异)后用95%乙醇清洗,保存于70%乙醇中,备用。
(3)离析。
对细胞不易散开材料用水解分离液(如1N HCl或盐酸一酒精液)处理,一般处理6~20min,解离后经水漂洗后方能染色。
(4)染色。
染色剂种类很多。
观察染色体常用醋酸洋红染色液染色。
(5)压片。
将材料放在载玻片上,加一滴清水或染液,盖上盖玻片用拇指轻轻压片。
(6)观察。
压片后,即可在显微镜下观察。
3.装片法装片法是将生物材料采取整体封固制成玻片标本的方法,用此法可制成临时或永久装片。
园艺学报 2010,37(12):1991–1994Acta Horticulturae Sinica荔枝和龙眼部分珍稀种质的染色体观察张永福,卢博彬*,王 英,潘丽佳,胡又厘,周 佳,赵海燕,刘成明**(华南农业大学园艺学院,广州510642)摘 要:以荔枝和龙眼部分种质幼叶为材料,采用等体积饱和对二氯苯和2 mmol · L-18–羟基喹啉混合水溶液预处理,卡诺固定液固定,酸解与酶解相结合,改良卡宝品红染色,观察了体细胞染色体数。
结果表明,‘裂叶’龙眼为单倍体(2n = x = 15),且生长表现良好;用以创建荔枝遗传图谱的作图群体母本‘马贵荔’和父本‘焦核三月红’及用以构建龙眼遗传图谱的两个作图群体母本‘凤梨朵’和‘石硖’,父本‘大乌圆’和‘中秋一号’均为二倍体(2n = 2x = 30),通过远缘杂交得到的2株荔枝和龙眼的属间杂种A和B也为二倍体,且生长良好;一些性状独特的荔枝,如‘紫娘喜’、‘无核荔’、‘MS-07’、‘SGA’、‘YA1’、‘YN4’,以及龙眼‘双季’也均为二倍体。
关键词:荔枝;龙眼;幼叶;染色体;单倍体中图分类号:S 667.1;S 667.2 文献标识码:A 文章编号:0513-353X(2010)12-1991-04 The Chromosomes Observation of Several Rare Germplasm in Litchi and LonganZHANG Yong-fu,LU Bo-bin*,WANG Ying,PAN Li-jia,HU You-li,ZHOU Jia,ZHAO Hai-yan,and LIU Cheng-ming**(College of Horticulture,South China Agricultural University,Guangzhou 510642,China)Abstract:Young leaves of several rare germlasm resources in litchi and longan were used to observe chromosome numbers and identify their ploidy after pretreated with the mixture of 1︰1 aqueous solution of saturated paradichlorobenzene and 2 mmol · L-1 8-hydroxyquinoline,fixed by Carnoy’s fixative,hydrolyzed with HCl and enzymes,and stained in improved Carbol-fuchsin. The results showed that ‘Lieye’longan was a haploid(2n = x = 15)and grew normally. The parents used to create three mapping groups,including litchi parent ‘Maguili’ and paternal ‘Jiaohesanyuehong’,and longan parent‘Fengliduo’,‘Shixia’and paternal‘Dawuyuan’,‘Zhongqiu 1’were all diploids(2n = 2x = 30). The intergeneric hybrids(A and B)between Litchi and Dimocarpus were also diploids and could grow normally. Moreover,several germplasm resources with distinct trait including litchi‘Ziniangxi’,‘Wuheli’,‘MS-07’,‘SGA’,‘YA1’and‘YN4’as well as a longan‘Shuangji’were all diploids.Key words:litchi;longan;young leaf;chromosome;haploid收稿日期:2010–04–01;修回日期:2010–10–08基金项目:国家自然科学基金项目(30270922,30771498);国家自然科学基金国际(地区)合作交流项目(30510103125);国家科技支撑计划子课题(5300-A07050);中国博士后科学基金项目(20070410837,20080440763);广东省国际合作项目(2009B050300004);广东省科技计划项目(2009B020200010);华南农业大学国际合作交流基金项目(2007K055);现代农业产业技术体系建设专项 * 并列为第一作者** 通信作者Author for correspondence(E-mail:cmliu@)1992 园艺学报37卷荔枝属有两个种,其中只有荔枝(Litchi chinensis Sonn.)有栽培价值;龙眼属约有20个种,只有龙眼(Dimocarpus longana Lour.)为栽培种(刘玉壶等,1985;李建国,2008)。
它们在长期的自然演化和栽培过程中,各自形成了众多品种品系,甚至还存在疑似属间杂种。
有关荔枝和龙眼细胞学的研究并不多见,1940年Chaudhuri报道荔枝体细胞染色体数为2n = 28,之后Darlington和Wylie(1955)报道为2n = 30。
Parthasarathy 等(2001)在“Biotechnology of Horticultural Crops(Volume 1)”一书中提到龙眼染色体为2n = 2x = 20,其依据不得而知。
国内的研究报道都认为荔枝和龙眼体细胞染色体均为2n = 30(陈瑞阳等,1985;吕柳新等,1987,1994;林国阳和柯冠武,1989),可惜涉及的品种甚少。
20世纪90年代后期以来,为构建荔枝和龙眼的分子遗传图谱,华南农业大学选用了一些特殊的品种品系,先后创建了荔枝作图群体和龙眼作图群体,并通过人工杂交获得了‘紫娘喜’ב石硖’的属间杂种苗(赵玉辉等,2008),加上收集的珍稀种质如‘裂叶’龙眼和‘双季’龙眼等。
其中‘裂叶’龙眼果实小,且无核,但引种栽培多年都不开花;‘双季’龙眼一年多次开花结果,花果并存现象比较普遍。
因此,要弄清楚这些作图群体的亲本品种是否为二倍体及其体细胞染色体数,用以确定所构建图谱的应用价值,并且能够解释部分材料的不孕性,为染色体工程育种提供参考依据。
荔枝、龙眼均采用嫁接繁殖,其种子为顽拗型,不耐贮藏,且杂合性极高,研究品种的染色体特性不宜采用根尖作为材料,因此,首先摸索了荔枝和龙眼幼叶染色体观察的相关技术,然后对以下种质资源进行了体细胞染色体数的观察。
1 材料与方法供试材料:第1类为荔枝,包括‘YA1’(矮化种质)、‘无核荔’、‘马贵荔’(特晚熟种质)、‘SGA’(抗寒种质)、‘紫娘喜’(大果型品种)、‘YN4’(特早熟种质)、‘焦核三月红’(三月红的焦核突变体)和‘MS-07’(马贵荔 × 焦核三月红的F1单株,叶片特别大)等;第2类为龙眼,包括‘凤梨朵’、‘中秋一号’、‘石硖’、‘双季’龙眼、‘大乌圆’和‘裂叶’龙眼等;第3类包括‘紫娘喜’ב石硖’的属间真杂种苗A和B(图版,A ~ C)。
材料均采自华南农业大学荔枝、龙眼种质圃。
叶芽萌发后,小叶还未完全伸展时,用镊子夹取装入样品瓶中带回实验室。
取样时间为2009年5月,早上8:00—10:00或下午4:00—5:00幼叶处于细胞分裂的高峰时期;取样后把材料置于等体积的饱和对二氯苯和2 mmol · L-1 8–羟基喹啉混合水溶液中10 ~ 20 ℃预处理3 ~ 4 h,之后用70%酒精漂洗2次并用蒸馏水冲洗数次后,用卡诺固定液25 ℃左右固定12 ~ 24 h;1mol · L-1 HCl 60 ℃解离1 h,再用0.25%果胶酶和0.25%纤维素酶混合溶液37 ℃酶解1 h;改良卡宝品红染色;常规制片,每个供试材料至少取50个不同的幼叶分别制成50个片。
镜检用Olympus生物显微镜(放大倍数:10 × 100)对处于分裂中期且分散良好、清晰可数的染色体拍照,每份试材拍照总数不少于50张。
2 结果与分析选用16个珍稀荔枝和龙眼种质进行染色体数观察,发现‘裂叶’龙眼为单倍体(2n = x = 15,图版,L);荔枝种质‘马贵荔’、‘紫娘喜’、‘无核荔’、‘MS-07’、‘焦核三月红’、‘YA1’、‘SGA’、‘YN4’和龙眼种质‘凤梨朵’、‘石硖’、‘大乌圆’、‘中秋一号’、‘双季’,及属间杂种(A和B)均为二倍体(2n = 2x = 30,图版,D ~ K,M ~ S)。
另外,荔枝的染色体普遍比龙眼大,可能是这两个属在细胞学水平上的差异,其利用价值有待探讨。
12期张永福等:荔枝和龙眼部分珍稀种质的染色体观察 1993图版说明:A.杂种A;B.杂种B;C.由左到右为紫娘喜、杂种A、杂种B和石硖;D ~ K. 荔枝体细胞染色体。
D.马贵荔;E.紫娘喜;F.MS-07;G.无核荔;H.焦核三月红;I.SGA;J.YA1;K.YN4;L ~ S. 龙眼体细胞染色体。
L.裂叶(2n = x = 15);M.凤梨朵;N.石硖;O.双季;P.大乌圆;Q.中秋一号;R.杂种A;S.杂种B。
除‘裂叶’外,染色体数均为2n = 2x = 30。
Explantation of plates:A.Hybrid A;B. Hybrid B;C. From left to right:Ziniangxi,Hybrid A,Hybrid B,Shixia;D ~ K.Somatic cells chromosome in litchi. D. Maguili;E. Ziniangxi;F. MS-07;G. Wuheli;H. Jiaohesanyuehong;I. SGA;J. YA1;K. YN4;L ~ Q. Somatic cells chromosome in longan. L. Lieye(2n = x = 15);M. Fengliduo;N. Shixia;O. Shuangji;P. Dawuyuan;Q. Zhongqiu 1;R. Hybrid A;S. Hybrid B. 2n = 2x = 30 except for‘Lieye’longan.1994 园艺学报37卷 3 讨论荔枝和龙眼由于地理分布的局限性及组织器官的易褐变性,导致染色体观察研究较为滞后。