浸银法-网状纤维
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浸染法 - GORDON AND SWEET'S METHOD – 网状纤维
目的：浸银技术用于鉴别网状纤维。网状纤维在机体中具有支持功能，并大量存在于肝、脾和肾中。正常肝纤维称为小梁，但在坏死或肝硬化时呈现出间断的模式。网状纤维在某些肿瘤细胞之间也会形态特殊的模式。
原理：组织经氧化，铁明矾激活，银替代，银被甲醛还原成可见的金属银状态。
对照：正常肝。
固定：10%甲醛。
技术：4μ至 5μ石蜡切片。
设备：酸洗玻璃器皿、吸液管。
试剂：
3% 硫酸：
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
硫酸Sulfuric acid 3.0 ml
混合溶解，标签，日期和签名。保存期1年。
警告：腐蚀性，避免接触和吸入。
高猛酸钾：
高猛酸钾Potassium permanganate 0.5
gm
蒸馏水Distilled water 47.5 ml
3%硫酸 Sulfuric acid 2.5 ml
新鲜配制，用后丢弃。
警告：腐蚀性，避免接触和吸入。
1%草酸：
草酸Oxalic acid 1.0 gm
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
混合溶解，标签，日期和签名，保存期1年。
警告：腐蚀性，避免接触和吸入。
2%铁明矾
硫酸铁铵Ferric ammonium sulfate 2.0
gm
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
混合溶解，标签，日期和签名保存期6个月。
10%硝酸银备用液：
硝酸银Silver nitrate 10.0 gm
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
酸洗所有玻璃器皿并冲洗干净。置于棕色瓶中，标签日期和签名。保存在冰箱。保存期6个月。
CAUTION: 腐蚀性可能致癌。 3% 氢氧化钠备用液：
氢氧化钠Sodium hydroxide 1.5 gm
蒸馏水Distilled water 50.0 ml
混合溶解，标签日期和签名。保存在冰箱。保存期3个月。
警告：腐蚀性，避免接触和吸入。
氨银工作液：
10% 硝酸银silver nitrate 5.0 ml
逐滴加入氢氧化铵直至溶液再次澄清。
3% 氢氧化钠sodium hydroxide 5.0 ml
逐滴加入氢氧化铵直至溶液再次澄清。
酸洗所有玻璃器皿，加入氢氧化铵时需边滴边摇动。新鲜配制，用后丢弃。
警告：腐蚀性，避免接触和吸入。
10%甲醛：
甲醛Formaldehyde 5.0 ml
蒸馏水Distilled water 45.0 ml
新鲜配制，用后丢弃。
警告：致癌物质
0.5%氯化金：
氯化金Gold chloride 1.0 gm
蒸馏水Distilled water 200.0 ml
酸洗所有玻璃器皿，标签日期和签名。保存在冰箱。保存期1年。
警告：避免接触和吸入。
5% Hypo
详见备用液
核固红(Kernechtrot)
硫酸铝Aluminum sulfate 25.0 gm
蒸馏水Distilled water 500.0 ml
核固红Nuclear-fast red 0.5 gm
先用水溶解硫酸铝，再加入核固红，加热溶解，过滤，加入少许麝香草酚，保存期1年。 警告：刺激性，避免接触和吸入。
安全：穿戴丁腈手套、护目镜和白大衣，避免接触和吸入。
高猛酸钾：对皮肤和眼睛刺激，摄入可引起严重的胃肠反应。强氧化剂。
草酸：能引起严重的眼睛、皮肤和粘膜灼伤。吸入和摄入毒性。影响靶器官为肾血管和心血管系统，反复接触能引起皮炎。腐蚀性。
硝酸银：剧烈的皮肤和眼睛刺激，氧化剂。摄入将导致严重的胃肠道不适。可能致癌：可疑的肿瘤发生因素。
氨银液：可能引起爆炸，丢弃入下水道时必须用大量的流水稀释。
氢氧化铵：对眼睛有剧烈的刺激性，对呼吸系统有刺激性。影响靶器官为呼吸系统。腐蚀性。在通风橱中操作
氢氧化钠：对皮肤和眼睛有刺激性。腐蚀性。
甲醛：已知的致癌物质。
硫代硫酸钠：摄入毒性，对胃有刺激性，对皮肤、眼睛和呼吸系统有刺激性。
程序：
1. 脱蜡至蒸馏水。
2. 高猛酸钾 5 minutes.
3. 水洗。
4. 5%草酸漂白至透明无色
5. 蒸馏水稍洗。
6. 铁明矾溶液10 minutes.
7. 流水冲洗，蒸馏水稍洗 3次。
8. 氨银液，7浸，甩去多余的液。
9. 蒸馏水稍洗，2次。每次快速浸3下。
10. 10%甲醛还原至背景黑色，30 seconds.
11. 蒸馏水洗。
12. 0.5% 氯化金1 minute.
13. 蒸馏水稍洗。
14. 5% hypo, 1 minute.
15. 水洗。
16. 核固红液 5 minutes.
17. 流水冲洗。
18. 脱水、透明和封固
结果：
网状纤维黑色
核红色
注意：
1. 用酸洗干净玻璃容器，或用蒸馏水洗5次。
2. 配制氨银液时，如果滴氢氧化铵超过30滴沉淀还没有完全溶解，可能氢氧化铵太陈旧。更新氢氧化铵后再配制。
3. 当加入3%氢氧化钠溶液到银液中时溶液应变黑。否则需重新配制氢氧化钠液。 4. 因为溶液的碱度大，可能导致一此组织脱片，可用棉胶液处理(详见备用液)。
5. 在每张切片洗后更新蒸馏水，第9步。
参考文献：
Bancroft J,Stevens A, Theory and Practice of Histological Techniques, 2nd
Ed, 1982, pp142-143, Churchill Livingstone, NY
Carson F, Histotechnology: A Self-Instructional Text,1990,pp154-
155,ASCP,Ill
Crookham,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the Histopathology
Laboratory, 2nd ED, 1991, Anatech 程序卡
浸染法 - GORDON AND SWEET'S METHOD – 网状纤维
对照：正常肝。
技术：4μ至 5μ石蜡切片。
程序：
1. 脱蜡至蒸馏水。
2. 高猛酸钾 5 minutes.
3. 水洗。
4. 5%草酸漂白至透明无色
5. 蒸馏水稍洗。
6. 铁明矾溶液10 minutes.
7. 流水冲洗，蒸馏水稍洗 3次。
8. 氨银液，7浸，甩去多余的液。
9. 蒸馏水稍洗，2次。每次快速浸3下。
10. 10%甲醛还原至背景黑色，30 seconds.
11. 蒸馏水洗。
12. 0.5% 氯化金1 minute.
13. 蒸馏水稍洗。
14. 5% hypo, 1 minute.
15. 水洗。
16. 核固红液 5 minutes.
17. 流水冲洗。
18. 脱水、透明和封固
结果：
网状纤维黑色，核红色
3% 硫酸：
混合溶解，标签，日期和签名。保存期1年。
警告：腐蚀性，避免接触和吸入。
高猛酸钾：
高猛酸钾Potassium permanganate 0.5 gm
蒸馏水Distilled water 47.5 ml
3%硫酸 Sulfuric acid 2.5 ml
新鲜配制，用后丢弃。
警告：腐蚀性，避免接触和吸入。
1%草酸：
混合溶解，标签，日期和签名，保存期1年。
警告：腐蚀性，避免接触和吸入。
2%铁明矾
混合溶解，标签，日期和签名保存期6个月。
10%硝酸银备用液：
硝酸银Silver nitrate 10.0 gm
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
酸洗所有玻璃器皿并冲洗干净。置于棕色瓶中，标签日期和签名。保存在冰箱。保存期6个月。
CAUTION: 腐蚀性可能致癌。
3% 氢氧化钠备用液： 混合溶解，标签日期和签名。保存在冰箱。保存期3个月。
警告：腐蚀性，避免接触和吸入。
氨银工作液：
10% 硝酸银silver nitrate 5.0 ml
逐滴加入氢氧化铵直至溶液再次澄清。
3% 氢氧化钠sodium hydroxide 5.0 ml
逐滴加入氢氧化铵直至溶液再次澄清。
酸洗所有玻璃器皿，加入氢氧化铵时需边滴边摇动。新鲜配制，用后丢弃。
警告：腐蚀性，避免接触和吸入。
10%甲醛：
新鲜配制，用后丢弃。
警告：致癌物质
0.5%氯化金：
酸洗所有玻璃器皿，标签日期和签名。保存在冰箱。保存期1年。
警告：避免接触和吸入。
5% Hypo
详见备用液
核固红：
详见阿尔新蓝程序3% 硫酸：
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
硫酸Sulfuric acid 3.0 ml
混合溶解，标签，日期和签名。保存期1年。
警告：腐蚀性，避免接触和吸入。
日期：
技师：
使用限期：
1%草酸：
草酸Oxalic acid 1.0 gm
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
混合溶解，标签，日期和签名，保存期1年。
警告：腐蚀性，避免接触和吸入。
日期：
技师：
使用限期：
1%草酸：
日期：
技师：
2%铁明矾
硫酸铁铵2.0 gm
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
混合溶解，标签，日期和签名保存期6个月。
日期：
技师：
使用限期：
10%硝酸银备用液：
硝酸银Silver nitrate 10.0 gm
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
酸洗所有玻璃器皿并冲洗干净。置于棕色瓶中，标签日期和签名。保存在冰箱。保存期6个月。
CAUTION: 腐蚀性可能致癌。
日期：
技师：
使用限期： 3% 氢氧化钠备用液：
氢氧化钠Sodium hydroxide 1.5 gm
蒸馏水Distilled water 50.0 ml
混合溶解，标签日期和签名。保存在冰箱。保存期3个月。
警告：腐蚀性，避免接触和吸入。
日期：
技师：
使用限期：
10%甲醛：
甲醛Formaldehyde 5.0 ml
蒸馏水Distilled water 45.0 ml
新鲜配制，用后丢弃。
警告：致癌物质
日期：
技师：
使用限期：
0.5%氯化金：
氯化金Gold chloride 1.0 gm
蒸馏水Distilled water 200.0 ml
酸洗所有玻璃器皿，标签日期和签名。保存在冰箱。保存期1年。
警告：避免接触和吸入。
日期：
技师：
使用限期：
0.5%氯化金：
日期：
技师：
核固红(Kernechtrot)：
硫酸铝Aluminum sulfate 25.0 gm
蒸馏水Distilled water 500.0 ml
核固红Nuclear-fast red 0.5 gm
先用水溶解硫酸铝，再加入核固红，加热溶解，过滤，加入少许麝香草酚，保存期1年。
警告：刺激性，避免接触和吸入。
日期：
技师：
使用限期：
核固红(Kernechtrot)：
日期：
技师：
