测定食品中甲醛含量时所用三种萃取剂比较

摘要：探讨不同甲醛含量检测方法对测定结果的影响，并对实验条件进行了选择，为建立食品中甲醛检测方法提供实验依据。

关键词：甲醛；食品测定；；乙酰丙酮法；盐酸苯肼法近几年来,发现个别不法商贩在加工食品过程中,用甲醛(或者甲醛次硫酸钠)来改善食品的外观和延长保存时间。

例如在米粉(湿切粉)、腐竹等食品的加工过程中加入甲醛次硫酸钠(俗称吊白快)来漂白；水发食品中加人甲醛，可使水发食品较久保存，且色泽美观。

但甲醛进人人体，轻者导致头晕头痛腹泻，重者致畸和致癌，严重影响人们的身体健康。

所以，必须加强对食品中甲醛的检测。

甲醛测定，卫生部推荐的乙酰丙酮法，这种方法受干扰因素较多灵敏度一般不高。

经过比较,盐酸苯肼法是目前测定食品中甲醛较好的方法,可用于定性及定量分析。

1乙酰丙酮法1.1原理试样经沉淀蛋白质后，甲醛在PH5.5-7.0条件下与乙酰丙酮及铵离子反应生成黄色物质，在波长415nm处有吸收峰，与标准系列比较定量。

1.2仪器与试剂722型可见光分光光度计；冰醋酸；亚铁氰化钾(106g/L)；乙酸锌(220g/L)；乙酰丙酮溶液：在100ml蒸馏水中加人醋酸按25g、冰醋酸3ml和乙酰丙酮0.40ml，振摇促溶，储备于棕色瓶中，此液可保存1个月；甲醛标准储备液:精密称取甲醛1g放人盛有5ml水的100ml容量瓶中，加水至刻度，从该溶液中吸取10.0ml放人碘量瓶中加0.1mol/L碘溶液50ml、1mol/LKOH 溶液20ml，在室温放置20min后，加H2SO415ml，用0.1mol/LNa2S2O3滴定(以1ml新配制的淀粉溶液为指示剂)。

另取水10ml同样操作进行空白实验。

甲醛标准使用液:吸取标定后的甲醛标准储备液适量用水稀释至10μg/ml。

1.3分析步骤1.3.1样品处理称取10-20g水发鱿鱼，加50ml水后用掏碎机打成匀浆。

称取相当于原样重量5-10g的匀浆样于50ml烧杯中，用50℃纯水约100ml将试样洗人250ml容量瓶中，加10ml冰醋酸，摇匀，于85℃水浴中加热1h，取出后冷却至室温，然后一面转动，一面加人2.5ml亚铁氰化钾，摇匀，再加人2.5ml乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。

气相色谱-质谱法检测食品中的甲醛随着我国市场经济的不断发展，我国的化学检验科学检验技术得到了最大程度的进步与发展，尤其是利用气相色谱—质谱法检测食品中甲醛含量的相关工作，更是取得了深远的发展与不菲的成绩，尤其是用分光光度法测定食品中的甲醛与离子检验法，更是取得了空前的发展。

1 食品中存在甲醛的危害性探析甲醛作为21世纪人们自知的有机化合物，其不仅会与人体内的细胞原浆读物影响人体系统的功能，还对刺激人体的多种机能，使得人们的身心健康遭到了破坏。

尤其是人们在食用了含有众多甲醛事物的情况下，事物中的甲醛会随着人类的消耗系统进入人体的小肠，从而使得整个小肠的粘膜遭到刺激，长期食用含有甲醛食物的产品，甚至会造成整个人体的部分肝脏出现严重的水肿现象发生，如若任其发展，就会造成癌变。

除此之外，人体过多的摄入甲醛，不但会导致整个人体内的SOD（超氧化物岐化酶）严重下降，使得整个人体的免疫力下降，引起整体组织细胞损伤，还会使得整个人体的大脑皮层活动机能遭到抑制，使得人们的整体感知能力、记忆力以及注意力大大下降。

2 气相色谱—质谱法检测食品甲醛方法探析从上文中不难出，如若在人们的事物中一旦摄入了过多的甲醛，势必会造成整个人体机能的下降，使得人们的身心健康遭到破坏与损伤。

众所周知：在人们的日常生活中，次硫酸氢钠甲醛能够释放出一定质量的甲醛，而甲醛在食品中的适当应用，不仅能够改善食品的口感与外观形态，还具备一定的漂白与防腐作用，这就导致了生活中的一些不法商贩为了能够取得更为广阔的经济利益，就在自身的食品中人为的加入了次硫酸氢钠甲醛或者是甲醛，来提高食物的外观色泽与防腐性，尤其是在一些面食、水发海才产品以及饮料中的添加，更是危害了人们的身心健康。

而传统的甲醛测定的方法就是采用监测中常用的分光广度法以及GC 与LC的方法，进行甲醛含量的测定。

检测中常用的分光光度法是实验室中常用的甲醛检测方法之一，但是由于在其自身的检测中易受到其他外界环境的影响，使得其自身的检测结果相对较差，因此，笔者在这里不建议在检测食品中甲醛使用，而GC、LC在检测的过程中，由于其波峰出现较快以及甲醛极性太大而与溶剂峰同时流出，不易被检测出而也被排除在外。

实验五香菇中甲醛的测定一、目的1. 掌握甲醛含量测定的方法；2. 学会使用高效液相色谱仪。

二、原理试样经40℃水浴萃取，从食品中萃取的甲醛被水吸收，萃取液在酸性条件下，与2，4－二硝基苯肼于室温避光下过夜进行衍生化。

衍生物经提取净化后，进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。

三、试剂乙腈：色谱纯；乙酸锌（219g/L）：称取21.90g乙酸锌，加3mL冰乙酸，加水溶解定容至100mL；2，4－二硝基苯肼溶液（C6H6N4O4）（2.5g/L）：称取300mg 2，4－二硝基苯肼用乙腈溶解并定容至100mL；甲醛标准溶液（100mg/L）：吸取0.3mL含量为36%-38%甲醛溶液于100mL容量瓶中，定容为标准贮备液，冷藏保存两周。

四、仪器高效液相色谱仪（附紫外检测器）；捣碎机；水浴锅。

五、实验步骤1. 甲醛溶液的标定精密吸取甲醛标准溶液10.00mL于250mL的碘量瓶中，加入25mL碘溶液，7.50mL 1mol/L 氢氧化钠溶液，放置15min，再加入10mL（1+9）硫酸，放置15min，用0.1mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定至淡黄色，加入淀粉指示剂，滴定至蓝色消失，计算甲醛溶液的浓度。

2. 甲醛标准溶液的配制甲醛标准使用液（5 mg/L）：临用前将甲醛标准溶液用水经逐级稀释至需要浓度。

3. 样品处理将采集的样品去除其中杂物，取可食部分。

混匀后用四分法缩分至约50g（经验证明50g太多，建议缩减到10g），经粉碎混匀后贮于玻璃瓶中备用。

对食用菌类样品：称取5g粉碎的均匀试样（精确到1mg）于50mL容量瓶中，加入约25mL水，慢慢加入10mL乙酸锌溶液，混匀并定容，静置30min。

塞紧塞子，于60℃水浴中加热40min，取出后于冰水浴中快速冷却。

然后于3000r/min离心5min，取上清液。

4. 衍生化样品衍生：移取5.0mL 上清液于10mL 具塞试管中，加入2.0mL 2，4－二硝基苯肼，3.0mL 乙腈，60℃加热20min ，冷却后经滤膜（0.45μm ）过滤后待测。

EN 1541-2001 与食物有接触的纸张和纸板的水萃取物中甲醛的测定1. 范围本标准适用于与食物有接触的纸张和纸板的水萃取物中甲醛的测定。

检出限为1 mg/kg，对应于每平方100 g的纸张，检出限为0.001 mg/dm²（毫克/平方分米）2. 相关标准2.1 EN 645：与食物有接触的纸张和纸板—冷水萃取2.2 EN 647：与食物有接触的纸张和纸板—热水萃取3. 术语3.1 冷水萃取：参见EN 6453.2 热水萃取：参见EN 6474. 原理萃取液与显色剂反应，显色后的溶液用分光光度计在410nm测定吸光度。

注：甲醛含量超过限值时，必须用UV进行确认测试。

（参见10）5. 试剂所有试剂均为分析纯或以上；水为蒸馏水或三级水。

5.1 无水乙酸铵5.2 冰乙酸(99%，d = 1.05)5.3 乙酰丙酮5.4 甲醛（370 g/L～400 g/L）5.5 乙酰丙酮试剂(纳氏试剂)：在100mL 容量瓶中加入15g 乙酸铵，用25mL 水溶解，然后加0.3mL 冰乙酸和0.2mL 乙酰丙酮，用水稀释至刻度，用棕色瓶储存。

注：储存开始至12h 试剂颜色逐渐变深，为此，用前必须储存12h，试剂6～8 个星期内有效，经长期储存后其灵敏度会略有变化，故每星期应作一校正曲线与标准曲线核校为妥。

5.6 参比试剂：除不加入0.2mL 乙酰丙酮外，与5.5同。

5.7 甲醛标准储备液标定，略。

5.8 甲醛标准稀溶液：用水将甲醛标准储备液稀释成1.0 mg/L。

5.9 其余标定甲醛试剂，略。

6. 仪器和装置6.1 常用器皿6.2 分光光度计：波长410nm，配备10mm吸收池。

6.3 紫外分光光度计：波长范围至少300nm～500nm（仅用于确认测试）6.4 恒温水浴槽：能维持(60 ± 2)℃。

7. 样品准备样品萃取参照EN 645 或EN 647；至少2次平行试验；样品萃取后应在24小时内测试。

蒸馏法提取白菜中甲醛及测定方法赵明;刘慧;王秀娟;赵艳荣【摘要】以浓硫酸蒸馏法提取白菜中的甲醛,利用分光光度法测定白菜中的甲醛含量,结果显示本方法甲醛含量在0~50μg/25mL范围内线性良好,相关系数为0.9999,该方法检出限为0.2mg/kg.对样品进行5次平行测定,RSD为1.68%,加标回收率为92.47%~97.48%,表明该方法快速,精确,重现性好,适用于测定白菜中甲醛含量测定.【期刊名称】《中国果菜》【年(卷),期】2016(036)010【总页数】3页(P34-36)【关键词】蒸馏法;甲醛;白菜;分光光度法【作者】赵明;刘慧;王秀娟;赵艳荣【作者单位】山东省分析测定中心,山东济南250014;山东省分析测定中心,山东济南250014;山东省分析测定中心,山东济南250014;山东省分析测定中心,山东济南250014【正文语种】中文【中图分类】TS207.3甲醛具有一定的消毒、防腐和保鲜的作用，并且还可以使某些蔬菜变得更加鲜亮，因此，甲醛常被用作农药、消毒剂和保鲜防腐剂。

有报道显示我国鲜活水产品中甲醛含量高达1227mg/kg，在黄瓜、南瓜、茄子和白菜中均有甲醛检出。

但是，甲醛被世界卫生组织认定为具有致癌、致畸性的物质［1-3］。

甲醛会对人体口腔、食道、咽喉和胃黏膜造成伤害，长期接触或使用可造成嗅觉、神经系统、肝肺功能和免疫系统异常。

我国《农产品质量安全法》规定：“农产品在包装、保鲜、贮存、运输中所使用的保鲜剂、防腐剂、添加剂等材料，应当符合国家有关强制性的技术规范。

”《食品添加剂使用标准》（GB 2760-2011）规定，甲醛等23种物质不得作为食品用加工助剂生产经营和使用。

近年来，在白菜运输过程中喷洒甲醛溶液保鲜的新闻屡见不鲜，但是有关白菜中甲醛含量的测定方法却鲜有报道。

本研究以高纯水加浓硫酸蒸馏法提取白菜中的甲醛，利用分光光法测定白菜中的甲醛含量，利用平行实验，加标回收实验验证了该方法的可行性。

高效液相色谱测定大蒜中甲醛的含量李云龙1，杨　莉1，谢凤梅1，干小燕1，伏　华2，杨延康2*（1.四川敏恩检测技术有限公司，四川成都 610000；2.成都圣恩生物科技股份有限公司，四川成都 610000）摘　要：建立了柱前衍生-高效液相色谱法测定大蒜中甲醛含量的分析方法。

样品经水提取，在酸性条件下与衍生剂2,4-二硝基苯肼反应生成2,4-二硝基苯腙，用二氯甲烷萃取、浓缩后，采用Agilent1 260高效液相色谱仪，C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相为乙腈-水（1∶1），在355 nm波长处测定，外标法定量。

结果表明，甲醛在0.1～5.0 μg·mL-1线性关系良好，相关系数在0.999以上，在0.2～2.0 μg·mL-1浓度添加水平下，样品回收率在91.18%～99.62%，相对标准偏差在 0.313%～1.438%。

该方法具有良好的精密度、准确度和定量限，适用于大蒜中甲醛含量的检测。

关键词：甲醛；高效液相色谱；大蒜；衍生Determination of Formaldehyde in Garlic by HighPerformance Liquid ChromatographyLI Yunlong1, YANG Li1, XIE Fengmei1, GAN Xiaoyan1, FU Hua2, YANG Yankang2*(1.Sichuan Minen Testing Technology Co., Ltd., Chengdu 610000, China; 2.Chengdu Shengen Biotechnology Co.,Ltd., Chengdu 610000, China)Abstract: A liquid chromatography method has been established for the determination of formaldehyde content in garlic. The sample was extracted with water and reacted with the derivative 2,4-dinitrophenylhydrazine under acidic conditions to generate 2,4-dinitrophenylhydrazone. After extraction and concentration with dichloromethane, the sample was subjected to Agilent 1260 high-performance liquid chromatography on a C18 column (4.6 mm×250 mm，5 μm). The mobile phase is acetonitrile water (1∶1), measured at a wavelength of 355 nm, and quantified using external standard method. The results indicate that formaldehyde has a good linear relationship at 0.1～5.0 μg·mL-1, with a correlation coefficient above 0.999. At the addition level of 0.2～2.0 μg·mL-1 concentration, the sample recovery rate ranges from 91.18% to 99.62%, and the relative standard deviation ranges from 0.313% to 1.438%. This method has good precision, accuracy, and quantitative limit, but the containers require special treatment and rigorous operation, making it suitable for the detection of formaldehyde content in garlic.Keywords: formaldehyde; high performance liquid chromatography; garlic; derivative甲醛是一种可以直接作用于氨基、羟基和羧基等多种官能团的原生质毒物，能够作用生成次甲基衍生物，破坏生物细胞蛋白质和机体酶，对人体皮肤、肝脏、肾脏造成危害，还会影响消化功能[1]。