气相色谱法快速测定食品中的油酸_亚油酸_亚麻酸的含量
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动植物油脂脂肪酸甲酯的气相色谱分析----花生油大豆油芝麻油菜籽油棉籽油调和油质量检测GC5890气相色谱系统是南京科捷分析应用研究所推出的一款专用色谱分析系统,主要用于植物油油品的分析、用于植物油鉴别及其各种油品掺兑的气相色谱检测。
传统食用植物油有花生油、大豆油、芝麻油、菜籽油和棉籽油等;而近年来市场上可见的新型食用油有红花油、葵花籽油、油茶籽油、玉米胚油、芥菜籽油、橄榄油和调和油等,其中调和油又根据混合在一起的油的品种不同分为多种。
植物油主要由棕榈酸等脂肪酸组成的甘油酯,不同油品的植物油脂肪酸组成与含量不同,掺伪后必然会改变其脂肪酸组成与含量,用气相色谱法分析脂肪酸的构成比, 仪器可用于快速鉴别常见植物油的种类,对常见植物油是否掺伪可作出快速判别,同时对掺伪植物油可作定性、定量分析。
关键词气相色谱法检测花生油大豆油芝麻油菜籽油棉籽油葵花籽油油茶籽油玉米胚油芥菜籽油橄榄油调和油脂肪酸本方法引用标准及应用范围本方法完全满足GB/T17377-2008《动植物油脂脂肪酸甲酯的气相色谱分析》以及GB/T17376-2008《动植物油脂脂肪酸甲酯制备》中的规定。
本方法可以检测下列各种植物油品种1)豆油,主要脂肪酸组成是亚油酸50%-55%,油酸22%-25%,棕榈酸10%-12%,亚麻酸7%-9%。
亚油酸和α-亚麻酸是两种人体必需的脂肪酸。
精炼豆油中维生素E的含量为60-110mg/100g。
2)菜籽油,其脂肪酸的组成受气候、品种等的影响较大。
菜籽油中含有较多可能对健康不利的芥酸,其主要脂肪酸组成是亚油酸10%-20%,油酸10%-35%,棕榈酸2%-5%,亚麻酸5%-15%,芥酸25%-55%,花生四烯酸7%-14%。
3)花生油,具有独特的花生气味和风味,可直接用于制造起酥油、人造奶油、蛋黄酱,也是良好的煎炸油。
花生油的脂肪酸组成比较独特,含有6%-7%的长链脂肪酸,因此,花生油具有良好的氧化稳定性。
收稿日期:2017-12-27基金项目:国家农产品质量安全风险评估项目(GJFP201701514)作者简介:席斌(1981-),男,陕西商洛人,助理研究员,硕士,主要从事畜产品安全评估及相关研究工作,(电话)189********(电子信箱)xibin0707@;通信作者,高雅琴(1964-),女,研究员,主要从事畜产品质量评价研究工作,(电子信箱)136********@。
脂肪酸含量及组成是评定营养价值的重要指标之一[1,2],人体必需脂肪酸只有两种,亚麻酸名列首位。
亚麻酸作为人体必需不饱和脂肪酸,在医药、保健、食品市场需求量巨大。
当人体摄入亚麻酸后,在酶的作用下,经过肝脏代谢生成EPA 和DHA [3-5]。
EPA 和DHA 对促进胎儿和婴幼儿的大脑神经细胞发育有不可替代的作用,此外,亚麻酸还具有降血压、降血脂、抑制过敏反应、抗血栓、抗癌以及对视觉功能和学习行为活动的促进作用等功效,是一种营养性和功能性极高的食用油脂[6-8]。
人们通过食物中获取亚麻酸的主要途径有两种:一是植物源性的,如核桃、花生等干果;二是动物源性的,如含有丰富的亚麻酸代谢物的深海鱼类等肉制品[9-12],但是深海鱼类资源贫乏且价格昂贵。
20世纪70年代,国内外才开始认知并接受亚麻酸的功能性营养价值,并逐渐开始进行研究。
中国在2002年以后才逐步认识到亚麻酸对人体健康的重要性[13-16]。
目前,对亚麻酸的研究主要集中在植物油脂中的脂肪酸,对动物中尤其是西北牛种肉制品中功能性营养物质亚麻酸的研究较少,尤其是肉制气相色谱法测定牛肉中的亚麻酸含量席斌,陈效威,高雅琴,李维红,郭天芬,杜天庆,杨晓玲(中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业部畜产品质量安全风险评估实验室/农业部动物毛皮及制品质量监督检验测试中心,兰州730050)摘要:研究建立了肉制品中亚麻酸的气相色谱检测方法,样品经氢氧化钾-甲醇溶液甲酯化后用GC 法分析,通过比对亚麻酸甲酯标准品气相色谱,其保留时间为26.212min ,采用外标法进行定量。
亚麻籽在我国的产地主要有6个,分别为:甘肃、内蒙古、青海、新疆、黑龙江和云南。
我国研究人员为了对不同产地亚麻籽药材进行质量评价,以α-亚麻酸、亚油酸为测定指标,采用气相色谱法测定了6个产地亚麻籽中两者的含量,以确定亚麻籽的最佳产地。
结果在6个产地的样品中,α-亚麻酸和亚油酸的平均含量分别为45.17%和21.19%,其中以甘肃亚麻籽中的α-亚麻酸和亚油酸含量最高,分别达到53.20%、25.70%。
亚麻籽油对孕妇和婴幼儿特别有益,因此亚麻籽油也俗称月子油和聪明油。
营养分析亚麻籽中不饱和脂肪酸中ω‐3系列(α‐亚麻酸)和ω‐6系列(γ-亚麻酸)之比接近(4-6):1。
亚麻籽油含有18种氨基酸,其中含量超过蛋白含量5%的氨基酸从多到少,依次为谷氨酸(26.3%)、天门冬氨酸(12.5%)、精氨酸(11.8%)、甘氨酸(7%)、亮氨酸(6.8%)、色氨酸(5.8%)、丙氨酸(5.4%)、苯丙氨酸(5.3%)、异亮氨酸(5.2%)。
对孕产妇的重要影响冷榨亚麻籽油内富含Ω-3,Ω-3属于“必需不饱和脂肪酸”,就是对人体极其重要,但自身又无法合成,必须通过体外摄取才能满足人体所需的重要物质。
Ω-3在海豹、深海冷水鱼、海藻等海洋动植物、亚麻植物和核桃类坚果中含量比较丰富。
其中亚麻籽油是陆地上Ω-3含量最高的植物油,由于对身体的重要性,被称为“液体黄金”。
吃核桃能补脑,正是因为核桃中富含Ω-3及其代谢物。
依靠吃核桃补充Ω-3,远不足专家提议的孕妇所需Ω-3的数量。
世界卫生组织建议孕产妇日补充1300毫克为宜。
补足1300毫克Ω-3相当于每天吃掉17斤核桃!而亚麻籽油只需要每天20毫升就可以补充足够量的Ω-3!鱼油里的功效成分主要是DHA和EPA,也起到健脑、明目的功效,但不同的是亚麻籽油内的Ω-3是在我们体内按自身需求代谢出适量的DHA和EPA,满足身体需要,单一补充鱼油是达不到Ω-3的平衡效果。
此外,鱼油中还含有大量对我们的身体有害的胆固醇。
食用油脂气相色谱指纹图谱分析喻凤香【摘要】为了对近年来国内外市场的食用油脂进行营养评价,对掺假油脂进行科学的定性定量检测,采用毛细管气相色谱法对米糠油、茶籽油、棕榈油、花生油、大豆油、棉籽油、菜籽油、反复油炸菜籽油、泔水油、劣质动物油等进行分析.建立了各类油脂的色谱指纹图谱,得出了油脂的指纹图谱相似度,各油脂其脂肪酸C10∶0、C14∶0、C16∶0、C16∶1、C17∶0、C18∶0、C18∶1、C18∶2、C18∶3、C20∶0、C 20∶1、C22∶0、22∶1含量及比例特性明显,可以利用油脂脂肪酸特点及指纹图谱相似度进行油脂的掺伪甄别检测.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2016(037)002【总页数】4页(P120-123)【关键词】食用油;指纹图谱;脂肪酸;气相色谱【作者】喻凤香【作者单位】湖南生物机电职业技术学院食品科技系,湖南长沙 410127【正文语种】中文脂肪酸的种类、含量和比例是衡量食用植物油质量的主要指标,近年来国内外油脂市场上出现的食用油主要有菜籽油、大豆油、花生油、茶籽油、葵花籽油、玉米胚芽油、米糠油等。
米糠油也叫稻米油,国内金龙鱼、北大荒、中粮集团等都有米糠油生产和销售,在国内外越来越受到欢迎[1]。
劣质油脂和有毒有害油脂如地沟油等常混入油脂市场。
广义的地沟油包括泔水油、反复油炸油脂、劣质动物下脚料提炼油,若被当做正常油脂或掺入正常油脂中食用,会给人体健康造成极大的伤害。
同时,油脂的营养价值和生产成本差异导致食用油价格相差明显,不法生产者常采用低价油脂如棕榈油掺入高级油脂中,导致脂肪酸成分发生改变,甚至对消费者健康造成不利影响[2]。
我国对食用植物油非常重视,先后修订了多种食用植物油国家标准。
目前食用植物油的掺伪方法采用定性试验与特征指标检验进行识别[3]。
我国GB/T 5539-2008《粮油检验油脂定性试验》[4]中列出了多种油脂的检出方法,包括桐油、蓖麻油、亚麻油、矿物油、大豆油(不适合一、二级大豆油)、花生油、蓖麻油、芝麻油、棉籽油、菜籽油、猪油、油茶籽油、大麻籽油。
·检验技术·气相色谱法快速测定食品中的油酸、亚油酸、亚麻酸的含量黄湘东,黄伟雄,梁春穗 【摘要】 目的 建立用气相色谱法快速测定食品中油酸(C18∶1)、亚油酸(C18∶2)、亚麻酸(C18∶3)含量的方法。
方法 采用外标法,将样品用氢氧化钾-甲醇溶液甲脂化后进行气相色谱法测定,通过对不同极性毛细管柱的分离效果比较,同时对三种物质的分离条件进行优化。
并在所选最佳分离效果的毛细管柱及优化条件下进行回收率、精密度及线性关系的试验。
结果 使用S UPE LC OW AX T M210柱建立的检测方法在较短时间内能将三种物质完全分离,目标物出峰时间由原来的110min缩短到10min内。
该方法对油酸、亚油酸、亚麻酸三个不同浓度(即C18∶1为8315、24517和36815mg/L,C18∶2为15215、64817和97310mg/L,C18∶3为5519、12913和19410mg/L)的平均回收范围在9510%~10211%之间;精密度RSD%范围在210~612之间;最低检出限均为015mg/L。
结论 使用S UPE LC OW AX T M210柱建立的检测方法能快速、准确地测定食品中油酸、亚油酸、亚麻酸的含量。
【关键词】 油酸; 亚油酸; α亚麻酸; 色谱法,气相 中图分类号:O657.71;TS201.2 文献标识码:B 文章编号:1671-5039(2004)03-0057-03 油酸、亚油酸、亚麻酸是人体所必须的不饱和脂肪酸[1,2],主要存在于小麦胚芽油中,具有降低胆固醇、调节血脂、预防心脑血管疾病等作用,亚麻酸对视网膜还具有较高营养生理作用[3],由于这三种物质的结构和相对密度近似,相对分子质量彼此仅相差2个H,要将它们分离并不容易,本方法通过采用不同长度和不同极性毛细管柱进行分析,找出了最佳的测定方法。
1 材料和方法111 仪器与试剂 惠普HP25890(Ⅱ)气相色谱仪,氢火焰离子化检测器FI D,载气N2,燃气H2,助燃气空气,标准品均为美国Singma公司产品,甲醇为色谱醇,氢氧化钾为分析纯,混合液(石油醚和苯1+1,石油醚、苯均为重蒸馏液)。
气相色谱法检测海南花生种质中脂肪酸的含量及分析作者:王玉杰冯素萍齐丹来源:《湖北农业科学》2017年第22期摘要:采用气相色谱法对收集到的56个海南花生(Arachis hypogaea Linn.)样品中的棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸以及亚麻酸等5种脂肪酸的含量进行检测。
结果表明,56个花生样品中,油酸含量为36.859%~67.093%,亚油酸含量为14.122%~61.025%,棕榈酸含量为8.583%~20.286%,硬脂酸含量为2.442%~8.971%,亚麻酸含量为0.028%~0.093%。
其中9304、9355、9353号花生油酸和亚油酸比值较高,数值分别为4.751、3.623和3.049,9337号花生油酸和亚油酸比值最低,其数值为0.899。
关键词:花生(Arachis hypogaea Linn.);脂肪酸;气相色谱法中图分类号:S565.2 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2017)22-4348-03DOI:10.14088/ki.issn0439-8114.2017.22.035Abstract: In this study,fatty acids from 56 kinds of peanut varieties in Hainan were detected by the use of gas chromatography. The results showed that oleic acid percentage content was between 36.859% to 67.093%,linoleic acid percentage content was between 14.122% to 61.025%,palmitic acid percentage content was between 8.583% to 20.286%, stearic acid percentage content was between 2.442% and 8.971%,linolenic acid percentage content was between 0.025%~0.095%. The number 9304,9355,9353 oleic acid and linoleic acid ratio was relatively high,they were 4.751、3.623 and 3.049,9337 oleic acid and linoleic acid ratio was minimum, it was 0.899.Key words: peanuts(Arachis hypogaea Linn.); fatty acid; Gas Chromatography花生(Arachis hypogaea Linn.)种子中的脂肪酸组分是评价花生品质优劣的重要标准,包括不饱和脂肪酸、饱和脂肪酸和少量特殊酸,其中不饱和脂肪酸是花生脂肪酸的主体,油酸和亚油酸占其80%[1-3]。
气相色谱法测定油菜籽中的七种脂肪酸王昌伦[1]【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】1983(000)003【摘要】本文介绍了油菜籽和菜油中棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、花生大稀酸、芥酸等七种脂肪酸的气相色谱分离测定方法。
着重对难分离物质对的分析条件进行了选择,确定了最佳工作参数:固定液配比为5%DEGS,柱温195℃,汽化室温度为250℃,载气流速为25ml/min。
方法简便、快速、精度高。
各种脂肪酸测定结果的变动系数分别为1.1%~13.4%,本法可为油菜籽选种、育种和加工利用提供可靠科学依据。
长期以来,菜油一直是我国人民的主要食用油之一,特别是南方各省,作为理想的食用油,从其脂肪酸成分而言,总是希望亚油酸含量要高,亚麻酸要尽可能低,而芥酸则越低越好,在国际上还规定了一定的含量指标。
亚油酸是人体必须的脂肪酸,它能起降低胆固醇和软化血管的作用。
亚麻酸是高度不饱和酸,很容易发生氧化分解而使油脂变质。
芥酸对动物生长有阻碍作用,对心脏亦有损害。
国外从五十年代起曾通过动物生理实验证实高芥酸菜油不宜食用。
但是,高芥酸菜油在工业上却有着重要的用途,在炼钢工业和纺织工业上可作润滑剂使用。
因此,研究油脂中各种脂肪酸的含量组成,对于了解油脂的营养价值和是否适用于工业,有着极其重要的作用。
六十年代初期,加拿大等国开始使用气相色谱法测定油菜油脂的脂肪酸组成。
后来,为适应大量杂种后代的筛选、瑞典法国、加拿大,都采用纸层析法。
为满足单项脂肪酸的选育需要,建立了纸带层析法,芥酸冷冻法等半定量速测法与全定量的气相色谱法配合使用。
我省是全国油菜主要产区之一,近儿年来油菜成倍增长。
为了解我省油菜品种资源,并为今后油菜选育、加工和利用提供科学依据,我们用日本日立1 63型气相色谱仪对油菜籽和菜油中的脂肪酸组成进行了测定,方法简便、快速、精度高,各种脂肪酸测定结果的变动系数分别1.1%~13.4%。
【总页数】6页(P56-61)【作者】王昌伦[1]【作者单位】[1]贵州省理化测试分析研究中心【正文语种】中文【中图分类】R28【相关文献】1.气相色谱法测定乳粉中的总脂肪、饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸 [J], 胡凤杨2.油菜籽中脂肪酸含量的气相色谱分析 [J], 王宁惠3.气相色谱法测定乳粉中的总脂肪、饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸 [J], 胡凤杨;4.浅析气相色谱法测定乳粉中的总脂肪、饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸 [J], 陈炜萍5.气相色谱-质谱联用法测定婴幼儿奶粉中37种脂肪酸和12种反式脂肪酸 [J], 田春霞;王远远;吴苏妙;朱炳祺;金绍强因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
亚油酸的测定方法(气相色谱法)A1.1方法提要样品经三氟化硼甲醇甲酯化后,用正己烷提取,经DEGS 气相色谱柱分离,并附氢火焰离子化检测器测定,用相对保留时间定性,与标准系列的峰高比较定量。
A1.2 仪器A1.2.1 气相色谱仪;附氢火焰离子化检测器。
A1.2.2 超级恒温水浴:精度(±0.1℃)。
A1.2.3 Eppendorf 管(mP 管):0.5-1.0mL 。
A1.3 试剂所用试剂除注明者外,均为分析纯;水为重蒸馏水。
A1.3.1 0.5mol/L 氢氧化钠甲醇溶液:称取2.0g 氢氧化钠溶于少量无水甲醇中,并稀释定容至100mL 。
A1.3.2 饱和氯化钠溶液:称取72g 氯化钠溶解于200ml 蒸馏水中。
A1.3.3 三氟化硼甲醇溶液:量取浓度约为47%三氟化硼乙醚溶液30mL ,加入到75mL 无水甲醇中,混匀。
A1.3.4 正己烷。
A1.3.5 甲醇:优级纯。
A1.3.6 标准储备液:准确称取0.050g 亚油酸标准品,用正己烷溶解,并定容于10mL 容量瓶,此标准储备液亚油酸浓度为5.0mg/mL 。
A1.3.7 标准使用液:将标准储备液用正己烷稀释成亚油酸浓度为1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mg/mL 。
A1.4 测定步骤A1.4.1 样品处理:准确吸取10-20μL 样品于10mL 具塞比色管中,加入0.5mol/L 氢氧化钠甲醇溶液2mL ,充氮气,加塞,于60℃水浴中(约10min )至小油滴完全消失。
加入三氟化硼甲醇溶液2mL ,混匀,于60℃水浴中放置30min ,取出冷却至室温,加入饱和氯化钠2mL 和正己烷0.5mL ,充分振荡萃取,静置分层。
取上层正己烷液于EP 管中,加少量无水硫酸钠,充氮气,于4℃冰箱中保存,备色谱分析。
A1.4.2色谱参考条件:色谱柱:玻璃柱或不锈钢柱,内径3mm ,长2m 。
内充填涂以8%(质量分数)DEGS +1%(质量分数)H 3PO 4固定液的60-80目Chromosorb W.AW.DMCS 。
气相色谱方法定量检测大豆5种脂肪酸佚名【摘要】为建立大豆脂肪酸组分的绝对定量方法,采用加热甲酯化提取法和气相色谱分析法( GC),以5种脂肪酸甲酯(棕榈酸甲酯、硬脂酸甲酯、油酸甲酯、亚油酸甲酯和亚麻酸甲酯)为标准样品,在制定5种脂肪酸甲酯组分的标准曲线( R2﹥0.99)和回归方程的基础上,建立了大豆脂肪酸组分的定量测定方法。
该方法可以准确检测大豆籽粒中脂肪酸组分的绝对含量。
通过对4个油份含量不同的大豆品种脂肪酸含量测定以及与粗脂肪含量的比较分析发现,该方法可显著提高籽粒中的脂肪酸提取率和检测效率,其检测的总脂肪酸含量占总油脂含量的94%以上。
该方法不仅能检测样品中5种脂肪酸组分的相对百分比含量,还可以准确计算出籽粒中各个脂肪酸组分的绝对含量,对大豆脂肪酸检测及育种具有重要意义。
%To develop an absolute quantitative method for fatty acid determination,a quantitative method for fatty acid determination was established through heated -methylation extraction method and gas chromatography ( GC)analysis. Five individual fatty acid methyl esters( i. e. methyl palmitate,methyl stearate,methyl oleate, methyl linoleate and methyl linolenate)were used as the standard samples. According to the standard curves( R2 ﹥0. 99)and the regression equations of five kinds of fatty acid methyl esters,the absolute concentration of fatty acid of soybean seeds could be determined accurately. Through determination of fatty acids in four soybean varieties with different oil content and comparison of the total fatty acid contents with the total fat contents of them,we suggested the extraction efficiency and detection reproducibility of fattyacid could be significantly improved. In addition,the total concentration of five fatty acid detected by this method accounted for more than 94% of total fat content in soy-bean seeds. It concluded that this method could be used to detect not only the relative percentage content but also the absolute concentration of individual fatty acids in soybean seeds,which could play an important role in soybean fatty acid determination and breeding.【期刊名称】《中国油料作物学报》【年(卷),期】2015(000)004【总页数】6页(P548-553)【关键词】大豆;脂肪酸;定量测定;气相色谱( GC)【正文语种】中文【中图分类】S565.1;O657.63大豆是世界植物油的主要原料。
·检验技术·气相色谱法快速测定食品中的油酸、亚油酸、亚麻酸的含量黄湘东,黄伟雄,梁春穗 【摘要】 目的 建立用气相色谱法快速测定食品中油酸(C18∶1)、亚油酸(C18∶2)、亚麻酸(C18∶3)含量的方法。
方法 采用外标法,将样品用氢氧化钾-甲醇溶液甲脂化后进行气相色谱法测定,通过对不同极性毛细管柱的分离效果比较,同时对三种物质的分离条件进行优化。
并在所选最佳分离效果的毛细管柱及优化条件下进行回收率、精密度及线性关系的试验。
结果 使用S UPE LC OW AX T M210柱建立的检测方法在较短时间内能将三种物质完全分离,目标物出峰时间由原来的110min缩短到10min内。
该方法对油酸、亚油酸、亚麻酸三个不同浓度(即C18∶1为8315、24517和36815mg/L,C18∶2为15215、64817和97310mg/L,C18∶3为5519、12913和19410mg/L)的平均回收范围在9510%~10211%之间;精密度RSD%范围在210~612之间;最低检出限均为015mg/L。
结论 使用S UPE LC OW AX T M210柱建立的检测方法能快速、准确地测定食品中油酸、亚油酸、亚麻酸的含量。
【关键词】 油酸; 亚油酸; α亚麻酸; 色谱法,气相 中图分类号:O657.71;TS201.2 文献标识码:B 文章编号:1671-5039(2004)03-0057-03 油酸、亚油酸、亚麻酸是人体所必须的不饱和脂肪酸[1,2],主要存在于小麦胚芽油中,具有降低胆固醇、调节血脂、预防心脑血管疾病等作用,亚麻酸对视网膜还具有较高营养生理作用[3],由于这三种物质的结构和相对密度近似,相对分子质量彼此仅相差2个H,要将它们分离并不容易,本方法通过采用不同长度和不同极性毛细管柱进行分析,找出了最佳的测定方法。
1 材料和方法111 仪器与试剂 惠普HP25890(Ⅱ)气相色谱仪,氢火焰离子化检测器FI D,载气N2,燃气H2,助燃气空气,标准品均为美国Singma公司产品,甲醇为色谱醇,氢氧化钾为分析纯,混合液(石油醚和苯1+1,石油醚、苯均为重蒸馏液)。
112 色谱条件 毛细管柱:A柱,HP2101(50m×0132mm×0125μm);B柱,HP2101(100m×0132mm×0125μm);C 柱,S UPE LC OW AX T M210(30m×0153mm×110μm);D 柱,FFAP(50m×0132mm×215μm);柱流量,120 kPa;不分流。
113 C柱程序升温条件 进样器温度250℃;检测器温度280℃;炉温180℃保持5min,以10℃/min升至205℃,保持10min;进样量110μl。
114 样品 小麦胚芽油胶囊:准确称取约1g样品至25ml 容量瓶内,加入混合液溶解后定容至25ml,吸取210 ml的溶解液于25ml容量瓶内,加入混合液稀释后定容至25ml,然后吸取310ml于10ml试管中,加入015m ol/L的氢氧化钾甲醇溶液2ml,震摇2min,放置15min后加入蒸馏水将液体分层,取上层液做气相色谱分析,同时做空白对照。
2 结果与分析211 三种脂肪酸甲脂化后在不同毛细管柱及分离条件下的分离效果 分离效果见图1~4。
从A、B柱(非极性)的分离结果显示,亚麻酸在油酸和亚油酸之间,三种物质不能完全分离,对于含量较小的亚麻酸来说,易被含量较大的其他两种物质所掩盖,对其检测结果影响较大,造成结果偏低;D柱(极性)同样不能将三种物质完全分离;而C柱(中性)中三种脂肪酸之间则可完全分离,说明该方法的分离效果比A、B、D柱好,三种脂肪酸的测定值互相干扰的机会也少,测定结果更加准确可靠。
由于C柱中的色谱柱长只有30m,而A、B、D柱则分别为50、100和50m,C柱所需的测定时间(10min)也远比A、B、C柱(60、110、45 作者单位:广东省疾病预防控制中心,广东广州510300min )短,因此,利用C 柱所建立的测定方法具有准确、快速等优点,值得推广应用。
图1 A 柱:HP 2101(50m)图2 B 柱:HP 2101(100m) 图3 C 柱:SUPE LCOWAX TM 210(30m)图4 D 柱:FFAP(50m)212 三种脂肪酸回收率及精密度检测试验 通过上述选择试验,确定以C 柱建立的检测方法对油酸、亚油酸、亚麻酸的分离效果最佳,在所选条件下做三种脂肪酸的回收率及精密度试验,用检测的样品作本底,各加入三个不同浓度的标准做回收实验,每个水平测试6次,结果C 18∶1、C 18∶2、C 18∶3的三个不同浓度的回收率和精密度RSD %见表1。
表1 回收率与精密度测定结果 (n =6)测定物质本底值(mg/g )加标量(mg/L )测定值( x )(mg/L )平均回收率(%)RSD(%)油酸62.383.5144.298.0 2.0141.2368.5365.199.1 6.2188.3245.7233.795.0 5.5亚油酸135.7152.5283.997.1 2.2482.5973.0993.6102.1 6.1643.3648.7648.7100.0 5.6亚麻酸19.955.975.199.0 2.458.6194.0197.0101.6 5.478.1129.3128.399.35.2213 三种脂肪酸线性关系试验 在选定条件下三种脂肪酸检测浓度,油酸在11484~463618mg/L 、亚油酸在11491~466018mg/L 、亚麻酸在11627~508418mg/L 之间选择9个成比例的相关点作测试,结果表明检测浓度与峰面积成正比,线性相关系数均达01999以上。
本方法三种脂肪酸的检出限均为015mg/L 。
测定结果见表2。
表2 测定物质的标准曲线及相关系数测定结果测定物质线性范围(mg/L )线性方程相关系数r油酸 1.484~4636.8Y =2.49×106x -190240.9999亚油酸 1.491~4660.8Y =2.37×106x -149030.9999亚麻酸1.627~5084.8Y =1.81×106x -444960.99963 讨论三种不饱和脂肪酸在小麦胚芽油基本组成为:C 18∶1(8%~30%)、C 18∶2(44%~65%)、C 18∶3(4%~10%),亚麻酸的含量相对于其他物质来说少得多,要将这三种物质完全分离除了要考虑色谱柱的长短、极性等因素外,还要考虑分离目标峰所需的时间。
而油酸(C 18∶1)、亚油酸(C 18∶2)、亚麻酸(C 18∶3)相对分子质量相差2个H ,结构中分别含1、2、3个不饱和双键,相对密度近似,均为极性物质,用氢氧化钾-甲醇溶液甲酯化后变成几乎没有极性的物质,HP 2101(50、100m )是非极性色谱柱,在分离过程中,相对分子质量大的物质含不饱和双键的多少对分离效果的影响不大,因此,A 、B 柱的分离效果不理想(见图1、图2),所以采用长的色谱柱和延长出峰的保留时间两种方法仍然不能将三种物质较好地分离;FFAP 是极性色谱柱,虽然能将三种物质基本分离,但所需时间过长,而且在本试验条件下,其峰形、分离效果不如C 柱(见图3、图4);S UPE LC OW AX T M 210柱是中等极性的色谱柱,双键对极性相似的不饱和脂肪酸分离效果影响较大[4],含双键多的物质在色谱柱内停留时间较长,因而能够将三种物质完全分离。
由于组成脂肪酸的物质较复杂,采用毛细管柱代替填充柱检测食品中的油酸、亚油酸、亚麻酸[5],可大大地弥补填充柱分离能力差的弱点。
本方法具有检测速度快、分离效果好的优点。
该实验由于检测的脂肪酸含不饱和双键,极易氧化,所以样品甲酯化后应尽快进样检测。
综上所述,使用S UPE LC OW AX T M 210柱(C 柱)建立的检测方法对食品中油酸、亚油酸、亚麻酸含量分析具有分离效果好、检测速度快、结果准确性高等优点,值得推广应用。
参考文献:[1] 凌关庭.保健食品原料手册[M].北京:化学工业出版社精细化工出版中心,2002.73-85.[2] 李静.人体营养与社会营养学[M].北京:中国轻工业出版社,1993.76-77.[3] 徐章化,邵玉芬.α2亚麻酸对大鼠行为、视网膜及大脑脂肪酸构成影响[J ].中国公共卫生,2002,18(3):301-304.[4] 许国旺.气相色谱法讲义[M].大连:中国科学院大连化学物理研究所,国家色谱研究分析中心,2002.74-81.[5] 王光亚.保健食品功效成分检测方法[M].北京:中国轻工业出版社,2002.122-125.(收稿日期:2003-11-09)(本文编辑:刘惠玲) 作者单位:江门市疾病预防控制中心,广东江门529000高效液相色谱法测定人发中的锌和铜汤建春 中图分类号:O657.7 文献标识码:B 文章编号:1671-5039(2004)03-0059-02 液相色谱因其具有很高的选择性,若与光度法结合,便可建立痕量金属离子的高选择性和高灵敏度的分离分析法,可同时分离离子型、分子型及其混合物[1]。
用二甲酚橙(X O )光度法单独测定锌离子、铜离子已有报道[2],由于它们的络合物吸收峰相近,测定时会造成干扰;用甲醇—水作流动相,离子交换色谱法分离镍离子、锌离子也已有报道[3]。
本法以乙腈—水(10∶90)作流动相,六次甲基四胺(H MT A )作为离子对试剂,缓冲溶液pH 值控制为516,X O 作柱前衍生剂,建立了反相高效液相色谱快速分离分析人发中痕量锌和铜的方法,加标回收率铜平均为9819%,锌平均为9715%。
1 材料和方法111 主要仪器和试剂 日本岛津高效液相色谱仪LC 210A ,配备2台高压泵,紫外检测器(SPD 210A );pH 数字式酸度计;紫外可见分光光度计:岛津UV 2160A 。
Zn 2+,Cu 2+标准溶液:10μg/ml ,X O 溶液(分析纯):5×10-4m ol/L H MT A (分析纯):加盐酸使之成为0130mm ol/L ,pH5.6的水溶液。
乙腈为优级纯,水为二次蒸馏水。
112 色谱条件 色谱柱:(迪马公司)ODS 2C18色谱柱(416mm ×150mm ,315μm )。
流动相:乙腈∶水(含2815mm ol/L H MT A )=10∶90,流速018ml/min 紫外检测器的检测波长575nm 。
113 样品处理方法 将人发样品用洗涤剂清洗,水漂洗数次,最后用甲醇洗数次。