金银花中绿原酸提取法

金银花中绿原酸的分离纯化工艺研究
金银花中绿原酸的分离纯化主要包括以下步骤：
1. 采集金银花：在适当的时间和条件下采集金银花，并进行初步处理如清洗、剪除杂质等。

2. 提取绿原酸：将采集好的金银花进行浸泡提取。

常用的溶剂包括水、乙醇、乙醚等。

可以通过浸渍或者回流提取等方式来提高绿原酸的提取效率。

3. 过滤和浓缩：将提取得到的浸膏进行过滤，去除固体杂质，得到纯净的提取液。

然后将提取液进行浓缩，通常使用旋转蒸发器或萃取器进行浓缩，直至得到较高浓度的绿原酸溶液。

4. 结晶和洗涤：将浓缩得到的绿原酸溶液进行结晶，可以通过降温结晶、溶剂结晶等不同方法来获得结晶产物。

然后将结晶产物进行洗涤，去除杂质。

5. 干燥和粉碎：将洗涤得到的绿原酸结晶产物进行干燥，通常使用真空干燥器或喷雾干燥器等设备进行干燥。

然后将干燥的绿原酸进行粉碎，得到粉末状的绿原酸。

6. 检测和分析：对得到的绿原酸进行质量检测和分析，包括纯度、含量、溶解度等参数的测定，以确保绿原酸的质量达到要求。

需要注意的是，以上步骤仅为一般性的分离纯化工艺，在具体
操作过程中可能根据实际需求进行调整和优化。

此外，根据目标纯化的绿原酸的用途和产量的不同，分离纯化工艺也可能有所差异。

因此，在实际操作中，应根据实际情况进行具体方案设计和实验验证。

⾦银花的提取⼀、⾦银花的化学成分⾦银花除含有绿原酸和异绿原酸外，还含有环烯醚萜甙裂环马钱素、獐⽛菜甙、马钱素、马钱酸、新环烯醚萜甙；常春藤皂甙配基、齐墩果酸；川续断皂甙⼄；黄褐⽑忍冬甙甲、α-常春藤皂甙、⽆患⼦皂甙B、灰毡⽑忍冬皂甙甲、灰毡⽑忍冬皂甙⼄、灰毡⽑忍冬次皂甙甲、灰毡⽑忍冬次皂甙⼄等。

挥发油主要含芳樟醇、双花醇、⾹叶醇、β-苯⼄醇、苯甲醇、异双花醇、α-松油醇、丁⾹油酚等30多种成分。

传统经验及近代药理实验和临床应⽤都证明，⾦银花对于多种致病菌有较强的抗菌作⽤和较好的治疗效果。

⼆、绿原酸的提取⾦银花的主要抗菌有效成绿原酸和异绿原酸。

它们是奎宁酸和咖啡酸的酯。

中药制剂，制备⾦银花提取物多采⽤⽔提、⽔提醇沉和稀醇提取。

也有⽤⽔煎后加⽯灰乳使绿原酸类成分沉淀，然后加稀酸分解得提取物的⽅法。

提取⽅法： 1.稀醇提取法⽣药⽤10倍量和8倍量70%⼄醇提取2次，每次2h。

提取液过滤，减压浓缩，抽⼲。

2.⽔提法⽣药⽤10倍和8倍量⽔煎煮2次，每次2h，合并提取液，过滤浓缩⾄⼲。

3.⽔提醇沉法按⽔提法提取，浓缩⾄1∶1时，加⼄醇⾄含醇量达75%，静置，过滤，减压浓缩抽⼲。

4.超滤⽅法称取⼲燥⾦银花⼀定量，加⼊10倍量⽔沸腾煎煮2次，每次1⼩时，过滤，挤压药渣，合并药液，离⼼，量上清液体积。

取出1克⾦银花的药液，以测量原液中绿原酸含量。

将待超滤溶液倒⼊储液罐，连接超滤器进⾏超滤。

控制⼀定的压⼒，⾄超滤液的体积占原体积的85%左右时，加⼊相当于原体积15%的⽔⾄储液罐中，继续超滤，⾄超滤液与原体积相同时，取样(为等体积超滤液)待测含量。

往储液罐中加⼊相当于原来体积25%的⽔，继续超滤，⾄超滤液相当于加⼊的⽔量时，取样(为1.25倍体积超滤液)待测含量。

同法继续超滤，得到1.5倍、2倍和3倍体积的超滤液。

三、主要有效成分含量的测定⽅法 1.紫外分光光度法 (1)如新鲜植物中含有多元酚氧化酶，则先在100℃加热1⼩时，或浸在1%亚硫酸氢钠溶液中，然后在⽯英砂中磨碎，⽤70%⼄醇提取3次(总体积≈10倍样品)，提取液于40℃-50℃减压浓缩⾄原体积的1/10，再⽤纸层析分离。

超声回流法提取金银花中绿原酸最佳工艺条件探究【摘要】金银花中的绿原酸是一种具有多种药理活性的重要成分，其提取工艺条件的优化对于提高金银花的药用价值具有重要意义。

本研究使用超声回流法提取金银花中的绿原酸，并探究了影响提取效果的因素。

通过实验设计和方法的优化，得到了一组较为理想的实验结果，对实验结果进行了深入分析和讨论。

确定了绿原酸提取的最佳工艺条件，为金银花的高效提取提供了参考。

本研究的结果具有一定的实用价值和研究意义，也为进一步的研究提供了展望。

通过本次研究，有望提高金银花中绿原酸的提取效率，为金银花的开发利用提供科学依据。

【关键词】关键词：超声回流法、金银花、绿原酸、提取、最佳工艺条件、实验设计、实验结果、影响因素、研究意义、展望。

1. 引言1.1 背景介绍金银花，又名金银花、忍冬藤等，是一种具有较高药用价值的中草药材。

金银花含有丰富的生物活性成分，其中绿原酸是一种具有明显药理作用的化合物。

绿原酸具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物活性，对人体健康具有重要作用。

本研究旨在探究超声回流法提取金银花中绿原酸的最佳工艺条件，以提高提取效率，降低成本，为金银花的深加工和利用提供科学依据。

通过实验设计和结果分析，探讨影响绿原酸提取效果的因素，并最终确定最佳工艺条件，为金银花的开发利用提供技术支撑。

1.2 研究意义目前，传统的金银花提取绿原酸的方法主要是采用水提取、乙醇提取等传统工艺，但存在提取效率低、设备复杂、耗时耗能等问题。

采用超声回流法进行绿原酸的提取，不仅可以减少提取时间，提高提取效率，还能保持绿原酸活性，提高产品质量。

本研究旨在探究超声回流法提取金银花中绿原酸的最佳工艺条件，为金银花的深加工利用提供科学依据，实现对金银花资源的充分利用和价值挖掘。

通过本研究的开展，有望为金银花的进一步开发和推广提供技术支持，促进金银花产业的健康发展。

1.3 研究目的研究目的是对超声回流法提取金银花中绿原酸的最佳工艺条件进行探究，以优化绿原酸的提取效果。

编号:FZD0166 金银花提取物中绿原酸（Chlorogenic acid）含量测定方法
一、色谱条件
色谱柱：Inertsil ODS-3 150mm×4.6mm 5μm
流动相：乙腈：水：0.4%磷酸水溶液（13：87，V/V）
流速：1mL/min
检测波长：327nm
柱温：25℃
进样量：10μL
二、溶液制备
1. 对照品溶液制备精密称取绿原酸对照品约5mg于50mL容量瓶中，加入50%甲醇溶解定容。

2. 样品溶液制备精密称取金银花提取物样品适量，于50mL容量瓶中，加入50%甲醇超声振荡20min后，冷却至室温定容，用0.45μm微孔滤膜过滤即得。

三、样品测定
在上述色谱条件下，待仪器稳定基线平稳后进样测定，绿原酸保留时间约为12min，用外标法计算含量。

超声回流法提取金银花中绿原酸最佳工艺条件探究1. 引言1.1 研究背景金银花是一种常见的药用植物，被广泛应用于中医药领域。

其中的绿原酸是金银花中的一种重要成分，具有抗氧化、抗炎和抗菌等多种生物活性。

绿原酸的提取工艺条件对其提取效率和药效具有重要影响。

传统的提取方法存在提取效率低、耗时长等问题，因此寻找一种高效、快速的提取方法具有重要意义。

超声回流法是一种较新的提取方法，通过超声波的机械作用和回流的热力作用，可以有效地破碎细胞壁，加快溶剂渗透，提高提取效率。

将超声回流法应用于金银花中绿原酸的提取，有望提高提取效率，缩短提取时间，降低成本。

目前对金银花中绿原酸的提取工艺条件尚未进行深入探究，因此本研究旨在通过超声回流法提取金银花中绿原酸，并探究最佳工艺条件，为进一步提高绿原酸的提取效率和药效提供理论基础。

这对于深入挖掘金银花的药用价值，推动中药材开发利用具有积极意义。

1.2 研究目的本研究旨在通过超声回流法提取金银花中的绿原酸，探究最佳的工艺条件。

绿原酸是金银花中主要的活性成分之一，具有抗氧化、抗炎和抗菌等多种药理作用，对人体健康具有重要意义。

通过对提取过程中不同因素对绿原酸提取率的影响进行研究，可以确定最佳条件，提高提取效率。

深入探讨超声回流法的原理和特点，对比传统方法，揭示其优势之处，为金银花中活性成分的提取工艺提供新思路。

通过本研究，对金银花中绿原酸的提取工艺进行优化，为金银花的利用提供技术支持，并为相关领域的研究提供参考和借鉴。

1.3 研究意义金银花是一种常见的药用植物，被广泛用于中药材制备中。

其中的绿原酸是一种具有抗氧化、抗炎和抗菌等多种药理活性的化合物，具有重要的药用价值。

研究金银花中绿原酸的提取工艺条件对于充分发挥金银花的药用价值具有重要意义。

本研究意在通过对金银花中绿原酸的提取工艺条件进行探究，结合超声回流法的原理和特点，在实验设计和结果分析的基础上，寻找出最佳的提取工艺条件，为金银花中绿原酸的提取提供技术支持和理论指导。

中药剂学：金银花的提取金银花的提取一、金银花的化学成分金银花除含有绿原酸和异绿原酸外，还含有环烯醚萜甙裂环马钱素、獐牙菜甙、马钱素、马钱酸、新环烯醚萜甙；常春藤皂甙配基、齐墩果酸；川续断皂甙乙；黄褐毛忍冬甙甲、α-常春藤皂甙、无患子皂甙B、灰毡毛忍冬皂甙甲、灰毡毛忍冬皂甙乙、灰毡毛忍冬次皂甙甲、灰毡毛忍冬次皂甙乙等。

挥发油主要含芳樟醇、双花醇、香叶醇、β-苯乙醇、苯甲醇、异双花醇、α-松油醇、丁香油酚等30多种成分。

传统经验及近代药理实验和临床应用都证明，金银花对于多种致病菌有较强的抗菌作用和较好的治疗效果。

二、绿原酸的提取金银花的主要抗菌有效成绿原酸和异绿原酸。

它们是奎宁酸和咖啡酸的酯。

中药制剂，制备金银花提取物多采用水提、水提醇沉和稀醇提取。

也有用水煎后加石灰乳使绿原酸类成分沉淀，然后加稀酸分解得提取物的方法。

提取方法：1.稀醇提取法生药用10倍量和8倍量70%乙醇提取2次，每次2h。

提取液过滤，减压浓缩，抽干。

2.水提法生药用10倍和8倍量水煎煮2次，每次2h，合并提取液，过滤浓缩至干。

3.水提醇沉法按水提法提取，浓缩至1∶1时，加乙醇至含醇量达75%，静置，过滤，减压浓缩抽干。

4.超滤方法称取干燥金银花一定量，加入10倍量水沸腾煎煮2次，每次1小时，过滤，挤压药渣，合并药液，离心，量上清液体积。

取出1克金银花的药液，以测量原液中绿原酸含量。

将待超滤溶液倒入储液罐，连接超滤器进行超滤。

控制一定的压力，至超滤液的体积占原体积的85%左右时，加入相当于原体积15%的水至储液罐中，继续超滤，至超滤液与原体积相同时，取样(为等体积超滤液)待测含量。

往储液罐中加入相当于原来体积25%的水，继续超滤，至超滤液相当于加入的水量时，取样(为1.25倍体积超滤液)待测含量。

同法继续超滤，得到1.5倍、2倍和3倍体积的超滤液。

三、主要有效成分含量的测定方法1.紫外分光光度法(1)如新鲜植物中含有多元酚氧化酶，则先在100℃加热1小时，或浸在1%亚硫酸氢钠溶液中，然后在石英砂中磨碎，用70%乙醇提取3次(总体积≈10倍样品)，提取液于40℃-50℃减压浓缩至原体积的1/10，再用纸层析分离。

超声回流法提取金银花中绿原酸最佳工艺条件探究1. 引言1.1 背景介绍金银花，又名忍冬花，是一种常见的中草药材，被广泛用于中药制剂和保健品中。

其中的绿原酸是金银花中的一种重要有效成分，具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种药理作用。

而提取金银花中的绿原酸通常采用超声波技术，能够提高提取效率，缩短提取时间，并且不易破坏绿原酸的结构。

通过研究金银花中绿原酸的提取工艺条件，可以提高提取效率，降低生产成本，为金银花的开发利用提供科学依据。

本研究旨在探究超声回流法提取金银花中绿原酸的最佳工艺条件，为金银花的加工利用提供技术支持。

绿原酸作为金银花中的主要活性成分，对金银花的药理作用起着至关重要的作用。

研究金银花中绿原酸的提取工艺条件，有利于充分挖掘金银花的药用价值，促进金银花产业的发展。

【背景介绍】至此结束。

1.2 研究目的研究目的是通过超声回流法提取金银花中的绿原酸，探究最佳工艺条件，以提高绿原酸的提取效率和纯度。

绿原酸是金银花中一种重要的活性成分，具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种药理作用，对人体健康具有重要意义。

通过对绿原酸提取过程中影响因素的分析和实验设计，确定最佳工艺条件，提高金银花中绿原酸的提取率和品质，为金银花的深加工利用提供科学依据和技术支持。

该研究旨在优化金银花提取绿原酸的方法，提高金银花的综合利用价值，推动金银花产业的发展，促进民族药材资源的合理开发利用，为金银花的有效利用和产业化提供技术支持和理论指导。

1.3 研究意义绿原酸具有一定的药用价值，其提取工艺的优化也可以为金银花的药用效果提供保障，为金银花及相关产品的质量控制和标准制定提供可靠依据。

本研究旨在探究超声回流法提取金银花中绿原酸的最佳工艺条件，为金银花的深加工和开发提供技术支持，促进金银花产业的健康发展。

2. 正文2.1 超声回流法提取金银花中绿原酸的原理超声回流法是一种将超声波和热循环结合起来的新型提取技术，其可以有效地破坏植物细胞壁，加速药用成分的释放和溶出，提高提取效率。

用酶解法提取金银花中的绿原酸中南大学生物医药化工研究所龚汉祥刘佳佳410083一、金银花简介金银花为忍冬(LonicerajaponicaThunb.)植物的干燥花蕾,属于忍冬科中的(Caprifoliaceae)忍冬属(Lonicera)，半常绿缠绕藤本。

小枝细长，中空，密生柔毛和腺毛，褐色至赤褐色。

单叶对生，卵形至长圆状卵形，全缘。

花成对腋生，花冠2唇形、由白色渐变为黄色，花期5-7月。

浆果黑色，球形，8-10月成熟。

为中医常用药，具有清热解毒﹑凉风散热﹑抗病毒﹑保肝利胆的功能。

1.原产及分布:原产我国。

朝鲜、日本有分布。

多野生在海拔400-1200m之间的溪河两岸、湿润山坡疏林及灌丛中。

2.习性:喜光，稍耐阴。

耐寒，耐湿，耐旱。

不择土壤，但在上层深厚的沙质土壤中生长健壮。

3.化学成分其主要活性成分为绿原酸，近年来，国内外对金银花的化学成分进行了大量的研究，结果表明，其富含挥发油，此外还有黄酮类、有机酸类、三萜类。

3.1挥发油成分(esentialoil)挥发油是金银花的有效成分。

金银花鲜花、干花成分差异较大，鲜花挥发油成分以芳樟醇为主，含量高达14%以上，其他成分多为低沸点的不饱和萜烯类成分，而干花挥发油成分以棕榈酸为主，一般占26%以上，芳樟醇含量仅在0.39%以下.3.2黄酮类化台物(favonoils)中冲太七郎首先从金银花中分得木犀草素，后又分得忍冬苷;高玉敏等首次从金银花中分离出4个黄酮类化合物，分别鉴定为木犀草素-7-0-β-D-葡萄糖苷，木犀草素-7-0-β-D-半乳糖苷，檞皮素-3-0-β-D-葡萄糖苷及金丝桃苷.黄丽琅等从金银花氯仿萃取物中又分得5-羟基-3、4、7-三甲氧基酮和corymbosin。

最近李永梅等对细毡毛忍冬花蕾进行研究，分离得到了木犀草素和檞皮素.3.3有机酸类绿原酸类化合物是金银花的重要有效成分，包括绿原酸和异绿原酸，其他有机酸还有咖啡酸、肉豆蔻酸及棕榈酸，相婷等从西南忍冬中分得了绿原酸乙酯.3.4三萜类娄红样等从金银花水溶性部分中分离得到3种具有保肝活性的三萜皂苷，茅青等从灰毡毛忍冬正丁醇萃取物中分得灰毡毛忍冬皂苷甲、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙.3.5其他成分忍冬花蕾中还含有肌醇，β-谷甾醇，无机元素有:Fe，Mn，Cu，Zn，Ti，Sr，Mo，Ba，Ni，Cr，Pb，V，Co，Li，Ca等。

现代分离技术实验安排一、实验说明1、本课程实验为一次性综合大实验，采取分班进行，每班实验必须在连续两天内完成，各组的实验安排均为周六和周日的上午8点到晚上的8点。

每次实验1个班，每个实验由两个人共同完成，即两人一组，每组一套实验仪器和一张实验台。

每班的班长负责实验室的卫生和安全。

2、课程考核方法采用实验考察形式进行，每人只安排一次实验机会，过期不补，希望各位同学能够按时参加。

若有冲突，学生之间可相互对调。

3、进入实验室后，各组同学首先按照仪器清单检查仪器的数量和完好情况。

若有仪器短缺或破损等问题，请在上课后20分钟内与实验室工作人员及时联系，并要求实验人员进行补充或更换。

4、实验结束后，各组同学应对照仪器清单检查，分别洗净后交实验人员验收。

如有损坏或缺少，应按规定缴纳赔偿金。

因此，希望同学们爱惜仪器，认真操作。

实验期间，应注意保持实验室台面、地面和水槽的卫生，尤其是自己的工作区域。

同时应注意实验室的财产安全和自身安全，不可在实验室喧哗吵闹。

二、实验内容题目：金银花中绿原酸的提取与分离学习内容：固体中有效成分的提取（索氏法）技术；减压浓缩（旋转蒸发）技术；硅胶吸附柱层析；硅胶吸附TLC技术；薄层色谱对产品纯度检测金银花为忍冬科忍冬属植物忍冬及同属多种植物的干燥花蕾，它是一种“药食同源”的绿色植物，是临床常用的中药之一。

具有清热解毒、凉风散热、抗病毒、保肝利胆的功能，主治痈肿疗疮、喉痹、丹毒、热血毒痢、风热感冒、瘟病发热、急性支气管炎、肺炎、腮腺炎、胆道感染、关节炎等，能改善放、化疗所致的白细胞降低，有“中药中的青霉素”的美誉。

另外，金银花还被广泛地应用于保健品、化妆品、卷烟、食品等行业。

近代研究一般认为金银花的主要生物活性有效成分为绿原酸类化合物，并且常以绿原酸含量的高低来评价金银花质量的优劣。

绿原酸结构式HO HOOO2'3'4'5'6'8'9'OHHO OH OHO 1234567'1'三、实验方案 四、方法1、TLC 板的制备与活化在干净的研钵内加入约6g 硅胶GF254，在轻轻研磨的同时缓慢加入15ml 0.5%羧甲基纤维素钠水溶液。

下,随着球磨时间的增加,其剪切应力显著下降。

用幂方程τ=k γm (其中k 为稠度系数;m 为流动特征指数对曲线进行拟合,结果如表2所示。

由拟合结果可知,在不同温度下,相关系数R 2在0.9850~0.9993之间,这说明方程与曲线有较好的相关性。

同一样品的稠度系数k 随着温度的升高而减小,说明温度升高可以减小体系的稠度,增强淀粉糊的流动性。

在同一温度下随着球磨时间的增加,稠度系数k 显著下降,流动指数m 则是呈现增加的趋势,说明球磨后的绿豆淀粉更趋近于牛顿流体。

3结论上述实验结果表明,机械球磨方法可以有效地将绿豆淀粉非晶化,球磨一定时间后淀粉颗粒的偏光十字消失,X -射线衍射曲线的尖峰衍射特征逐渐减弱,绿豆淀粉颗粒的结晶结构受到严重破坏。

球磨处理后绿豆淀粉糊的流变特性在不同浓度和温度下发生了变化,绿豆淀粉糊随着球磨时间的延长稠度系数k 不断减小,而流动特征指数m 则不断增大,说明球磨处理后绿豆淀粉糊趋向于牛顿流体的特征。

参考文献:[1]Shinji Tamaki,Makoto Hismatsu,Katsunori Teranishi,et al.Structural change of maize starch granules by ball-mill treatment[J].S tarch,1998, 50(8:342-348.[2]Shinji Tamaki,Makoto Hisamatsu,Katsunori Teranishi,et al. Structural change of potato starch granules by ball-mill treatment[J].S tarch,1997,49(11:431-438.[3]胡飞,陈玲,李琳.马铃薯淀粉颗粒在微细化过程中结晶结构的变化[J].精细化工,2002,19(2:114-117.[4]Sherman P.Food texture and rheology[M].New York:Aca-demic Press,1979.[5]Prentice J H.Measurements in the rheology of foodstuffs [M].London:Elsevier Applied Science Publishers,1984.[6]胡飞,李平凡,陈玲.微细化马铃薯淀粉流变性质的研究[J].粮食与饲料工业,2002,(7:41-43.[7]二国二郎.淀粉科学手册[M].王微青,等,译.北京:轻工业出版社, 1990.31-43,163-167.[8]Mohd Nurul I Muhd,Azemi B M N,Manan D M A.Rheo-logical b ehaviour o f s ago(Metroxylon s agu s tarch p aste[J].Food Chemistry,1999,64:501-505.收稿日期:2004-07-14*通讯作者基金项目:天津市教委科研项目(20039902作者简介:乌兰(1976-,女,硕士研究生,研究方向为食品科学、天然产物开发。