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金银花中绿原酸的提取工艺
金银花是一种常见的中草药，在中药材市场上价格也相对较高。
金银花中含有许多有效成分，其中绿原酸是一种重要的生物活性成分。
绿原酸具有抗病毒、抗氧化、抗炎、降血糖等多种药理作用，因此被
广泛应用于医药、保健品等领域。
提取绿原酸的方法有很多，其中以水提取为主。
具体的提取工艺
如下：
1. 原料处理：选用鲜嫩的金银花作为原料，清洗干净并控制好
水分。
2. 水提取：将处理好的金银花加入适量的水中，进行浸泡提取，一般提取时间为1-2小时。
3. 得液处理：将提取液过滤、浓缩，过滤后可以加入一些活性
炭等杂质吸附剂进行脱色处理。
4. 结晶纯化：将浓缩后的提取液加入乙酸乙酯中，进行结晶分离，再通过烘干、粉碎等步骤得到纯化的绿原酸。
需要注意的是，在提取绿原酸的过程中，要控制好提取温度、时
间等因素，选择合适的工艺参数才能得到高品质的绿原酸。
总之，绿原酸作为金银花中的一种重要成分，具有广泛的应用前景。
通过科学合理的提取工艺，可以获得更好的提取效果和更高的产量，促进金银花及其有效成分的深度开发利用。
高效液相色谱法测定金银花含片中绿原酸含量摘要提供色谱柱为Spherigel C18色谱柱（200mm×4.6mm，5μm）、流动相为乙腈-1.0%醋酸水、检测波长327nm等色谱条件，建立了高效液相色谱法测定金银花含片中绿原酸含量的方法。
在该色谱条件下，绿原酸的含量在1.56~25μg/mL范围内线性关系良好，相关系数r=0.999 2，加样回收率为99.7%，RSD为2.63%（n=5），最低检出限为0.05μg/mL。
结果表明，该方法操作简单，分离度好，适用于金银花含片中绿原酸含量的测定。
关键词高效液相色谱法（HPLC）；绿原酸；金银花含片金银花（Flos lonicerae）为忍冬科（Caprifoaceae）忍冬属（Lonicera）植物[1]。
金银花的活性成分之一为绿原酸（结构式见图1）。
绿原酸为咖啡酰奎尼酸衍生物，由奎尼酸和咖啡酸缩合而成，易溶于甲醇、乙醇、丙酮等极性溶剂，微溶于乙酸乙酯，难溶于三氯甲烷、乙醚、苯等亲脂性溶剂，是一种重要的生理活性物质。
绿原酸为抗菌消炎的主要成分，对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、痢疾球菌、伤寒杆菌、肺炎球菌有显著的抑制作用；有抗病毒、升高白细胞、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基等作用；与人体血小板凝集和凝血因子的生成有关，还具有抗生育作用及对免疫系统的调节作用[2]。
本文采用高效液相色谱法，对金银花含片中绿原酸的含量进行测定，以期提高金银花含片质量标准可控性，为进一步完善其质量标准提供试验依据。
1仪器与试药1.1仪器DionexAT330（美国）高效液相色谱仪：由P680四元泵、UVD170U紫外检测器和AT330恒温箱组成；KQ 3200 B型超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司生产）。
1.2材料与试剂金银花含片（河北省某厂生产）；绿原酸标准品（购自中国药品生物制品检定所）；甲醇、丙酮、无水乙醇、磷酸均为分析纯、乙腈为色谱纯，二次蒸馏水。
金银花绿原酸的提取纯化研究的开题报告
一、研究背景
金银花，又名忍冬、木藤花等，为常见的中药材。
金银花中最具药效的成分是绿原酸，具有抗病毒、抗氧化、解毒、抑菌、降血糖等多种药理作用。
因此，研究金银花绿原酸的提取纯化技术对于发掘其药效具有重要意义。
二、研究目的
本研究旨在探究金银花绿原酸的提取纯化方法，比较不同提取剂、提取时间、提取温度等条件对提取效率的影响，优化提取纯化工艺，进一步提高品质和产量。
三、研究内容
3.1 金银花的提取方法
选取乙醇、水、乙醚等不同提取剂，采用水提法、热提法、超声波辅助提取法等不同提取方法，比较不同条件下的提取效率。
3.2 绿原酸的纯化方法
根据提取物的性质，采用聚合物吸附法、逆流色谱法、溶剂萃取法等不同纯化方法，研究各方法对绿原酸的纯化效果，并结合成本、操作难度等方面进行综合评估。
3.3 研究金银花绿原酸的化学性质
通过理化性质分析，探究金银花绿原酸的结构、分子量、稳定性、pH值等化学性质。
四、研究意义
本研究对于深入了解金银花中绿原酸的提取纯化过程和工艺优化方法具有重要意义，可以提高绿原酸的提取率和纯度，进一步发挥其药理
作用，有利于促进金银花的有效利用和深入开发。
同时，本研究也对于其他类似中药提取纯化研究具有参考意义。
编号:FZD0166 金银花提取物中绿原酸（Chlorogenic acid）含量测定方法
一、色谱条件
色谱柱：Inertsil ODS-3 150mm×4.6mm 5μm
流动相：乙腈：水：0.4%磷酸水溶液（13：87，V/V）
流速：1mL/min
检测波长：327nm
柱温：25℃
进样量：10μL
二、溶液制备
1. 对照品溶液制备精密称取绿原酸对照品约5mg于50mL容量瓶中，加入50%甲醇溶解定容。
2. 样品溶液制备精密称取金银花提取物样品适量，于50mL容量瓶中，加入50%甲醇超声振荡20min后，冷却至室温定容，用0.45μm微孔滤膜过滤即得。
三、样品测定
在上述色谱条件下，待仪器稳定基线平稳后进样测定，绿原酸保留时间约为12min，用外标法计算含量。
金银花中绿原酸和木犀草苷的同时提取及测定研究王海侠;汪玮鑫;时维静;郜尽【摘要】Objective： To optimalize the extracting conditions of chlorogenic acid and galuteolin from Flos lonicerae, and develop one method for the content determination of chlorogenic acid and galuteohn. Methods： Through designing a L9 （34） orthogonal test to screen the best extracting parameters and extract chlorogenic acid and galuteolin in Flos lonicerae of the five different production regions under the condition. Then a HPLC method was dopted to determine the content of those samples. Results： Orthogonal experiment demonstrated that the best extracting conditions included solution of 35mL 50% ethanol and extracting time of one hour at 70~C. HPLC method： the mobile phase was 0.5% acetic acid and methanol, gradient elution separation,and detect at wave- length 350nm. A good linearity of chlorogenic acid and galuteolin was within the range of 0.2 - 1.6 ug and 0.2 -2.2 ug respectively, and the linear equations was y = 1 x 106x - 806 7 and y = 4 x 106x - 119 017, with regression coefficient 0. 999 9 and 0. 999 7. The precision, reproducibility, recovery of the method were all proved perfect. The four content of the chlorogenic acid and galuteolin of the five different production regions are higher than the required standard of Chinese Pharmacopoeia.%目的：优化金银花样品中绿原酸和木犀草苷提取工艺，并建立两者含量同时测定的方法。
金银花中绿原酸含量测定摘要】目的：通过测定金银花中主要特征成分绿原酸含量评价金银花品质。
方法：高效液相色谱法。
采用C185柱（250mm×4.6mm），流动相为乙腈-1.0%冰醋酸溶液，0.45μm滤膜抽滤，流速为1.0ml/min，检测波长为242nm。
结果：绿原酸进样量在0.2～1.0μg范围内与峰面积线性关系良好，精密度RSD为1.13%，平均回收率为101.2%。
结论：高效液相色谱法测定金银花中绿原酸含量操作简便，结果准确，可用于对金银花品质的评价。
【关键词】高效液相色谱法；金银花；绿原酸；含量；测定【中图分类号】R28 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）06-0374-02金银花具有清热解毒之功效，绿原酸是其中的主要特征成分，而且也是目前所发现的金银花中药理活性最强的物质。
绿原酸是植物进行有氧呼吸过程中产生的苯丙素类化合物，经现代药理研究证实，这种化合物不仅能够抗病毒，而且可以止血、利肝利胆、抗氧化。
因此，绿原酸含量是金银花品质评定的重要依据。
通过提取绿原酸，并测定绿原酸含量，将为金银花药物开发与利用提供支持。
本文将探讨采用高效液相色谱法测定金银花中的绿原酸含量。
1．材料与方法1.1 材料与仪器材料：将采摘的金银花放置阴凉处，直至质量稳定。
使用粉碎机将金银花粉碎，过40目筛，以备试验使用。
试剂：绿原酸对照品（批号110753-200413）由中国药品生物制品检定所提供；水为纯化水；乙腈、甲醇为色谱纯；其他试剂均为分析纯。
仪器：采用美国安捷伦公司生产的全自动液相色谱仪系统Aligent1100（四元梯度洗脱泵、二极管检测器、温柱箱等）；昆山市超声波仪器有限公司生产的超声波清洗器；梅特勒-托利多仪器上海有限公司生产的电子分析天平。
1.2 试验方法1.2.1试样制备将金银花粉末精确称取1.0g，放置在100ml量瓶中，加入50%甲醇10ml，放入超声清洗器中震荡，进行减压过滤，然后将滤液放置在25ml量瓶中定容。
金银花中绿原酸提取的研究前景和应用概述作者：赵御锜于方园来源：《食品安全导刊·下旬刊》2019年第02期摘要：绿原酸是金银花中的一种主要提取物。
常用的提取方法有聚酰胺柱层析法、石硫醇法、水提醇析法等。
本文介绍了绿原酸的生理活性及应用。
关键词：绿原酸;抗菌;应用金银花为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或者初开的花，呈棒状，上粗下细，略弯曲，长2～3 cm，表面黄白色或绿白色。
绿原酸是其主要有效成分，广泛存在于植物中，以金银花、杜仲中的含量较高，具有广泛的药理作用。
1 绿原酸的提取绿原酸半水合物为针状结晶（水）。
110 ℃变为无水化合物，熔点208 ℃，25 ℃水中溶解度为4%，热水中溶解度更大。
易溶于乙醇及丙酮，极微溶于醋酸乙酯。
绿原酸是由咖啡酸与奎尼酸生成的缩酚酸，是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物。
绿原酸分子结构中有酯键、不饱和双键及多元酚三个不稳定部分的特殊结构，可以用乙醇等极性溶剂提取。
提取时不能在高温强光下进行，绿原酸通常存放置于棕色瓶、冰箱冷藏下条件保存[1]。
1.1 聚酰胺柱层析法蔡鹰等人用此法研究过分离总黄酮[2]，称取金银花加入10倍量70%的乙醇冷凝回流，再用两次8倍量回流两次，过滤，合并滤液，然后浓缩滤液或者用旋蒸仪旋干滤液至无醇味得到金银花浓缩液，用聚酰胺装柱常压下用乙醇作为洗脱剂收集流分，与标准品对照合并相同流分旋干及为绿原酸。
此方法得到的绿原酸纯度较高。
1.2 硅胶吸附法金银花粉末用乙醇索氏回流4小时，得到残渣和滤液（粗提液），60 ℃进行减压浓缩进行干燥得到粗体物在1∶1硅胶拌样得到提取物。
将拌好的混合样上硅胶柱，用乙酸乙酯、甲醇、水按不同比例洗脱得到含绿原酸的洗脱液。
在氯仿—甲醇梯度进行洗脱得到绿原酸。
1.3 其他方法石硫醇法和水提醇析法也常见。
高海谦曾用酸沉淀法与石硫醇法对比提取黄岑甙[3]，将提取液濃缩用石灰乳调节pH，过滤沉淀物加入乙醇再用浓硫酸调节pH，再过滤滤液用氢氧化钠中和，过滤浓缩干燥得含量一般在20%左右绿原酸粗品[4]。
金银花中绿原酸提取工艺研究作者：赵昕梅远凌威来源：《科技创新导报》 2014年第32期赵昕梅远凌威(信阳师范学院生命科学学院河南信阳 464000）摘要:通过设计正交试验，以HPLC法检测的绿原酸含量为考察指标，对样品颗粒大小、提取溶剂、超声波处理时间和提取次数进行提取工艺优化。
结果为样品颗粒过60目筛，50%甲醇为溶剂，40℃水浴超声处理20 min时，金银花中绿原酸提取量最高，为17.015 mg/g，重复提取2次时绿原酸提取率为95.57%。
该方法简单、快速、准确，可用于金银花中绿原酸的提取。
关键词：金银花绿原酸提取工艺高效液相色谱法中图分类号：R282.2 文献标识码：A 文章编号：1674-098X(2014)11(b)-0042-02金银花为忍冬科植物忍冬（Lonicera japonica Thunb．）的干燥花蕾或带初开的花，具有清热解毒、平肝明目、和抗菌、降压等功效[1]，其主要活性成分之一绿原酸作为金银花中酚酸类化合物，具有抗菌、抗炎、抗内毒素、抗氧化、降血脂、血糖等多种作用[2-3]，在医药、食品和日用化工领域具有广泛的应用价值。
绿原酸含量被用作评价金银花质量的指标，因此，建立简单、快速和准确的绿原酸提取工艺成为检测金银花质量的前提。
该文尝试采用高效液相色谱法测定绿原酸的含量，超声波辅助法对样品颗粒大小、超声波处理时间、提取溶剂和提取次数等因素进行考查，以确定金银花中绿原酸的最佳提取工艺，为金银花质量标准的进一步完善提供参考。
1 仪器与试药高效液相色谱仪（UltiMate3000，戴安），ULUP-Ⅳ优普超纯水制造系统（四川优普)，等。
乙腈为色谱纯（ThermoFisher），金银花购自信阳市美锐大药房。
对照品绿原酸（上海同田，批号：327-97-9）。
2 方法与结果2.1 供试品制备工艺研究该文对绿原酸提取过程中的颗粒大小（A），甲醇体积分数（B），超声波处理时间（C）和抽提次数（D）等4个主要因素分别进行了3个水平正交试验设计。
