DNA的粗提取
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DNA的粗提取与鉴定教案第一章:DNA的简介1.1 课程目标:了解DNA的定义和结构理解DNA在生物体内的功能和重要性1.2 教学内容:DNA的定义和组成DNA的双螺旋结构DNA的复制和遗传信息的传递1.3 教学活动:引入话题:通过播放一个关于DNA的科普视频或进行一个简短的讨论来引起学生对DNA的兴趣。
讲解DNA的定义和组成:使用PPT或板书来展示DNA的基本结构和组成单位。
讲解DNA的双螺旋结构:使用模型或动画来展示DNA的双螺旋结构。
讲解DNA的复制和遗传信息的传递:使用示例或图解来说明DNA的复制过程和遗传信息的传递方式。
1.4 作业与评估:给学生发放相关的阅读材料或布置相关的阅读作业,以加深对DNA的理解。
进行小组讨论或小测验,以评估学生对DNA的掌握程度。
第二章:DNA的粗提取2.1 课程目标:学习DNA的粗提取方法理解DNA在不同溶液中的溶解度特性2.2 教学内容:DNA的溶解度特性:介绍DNA在不同溶液中的溶解度变化。
DNA的粗提取方法:介绍使用不同的溶液和离心方法来粗提取DNA。
2.3 教学活动:讲解DNA的溶解度特性:使用PPT或板书来展示DNA在不同溶液中的溶解度变化。
讲解DNA的粗提取方法:使用PPT或板书来展示使用不同的溶液和离心方法来粗提取DNA的步骤。
进行实验演示:演示如何使用不同的溶液和离心方法来粗提取DNA。
2.4 作业与评估:给学生发放实验指导书或布置相关的实验作业,以指导学生进行DNA的粗提取实验。
进行小组讨论或小测验,以评估学生对DNA的粗提取方法的掌握程度。
第三章:DNA的鉴定3.1 课程目标:学习DNA的鉴定方法理解DNA的电泳迁移和光谱特性3.2 教学内容:DNA的电泳迁移:介绍使用琼脂糖凝胶电泳来鉴定DNA的迁移速度。
DNA的光谱特性:介绍使用紫外光谱仪来鉴定DNA的吸收光谱。
3.3 教学活动:讲解DNA的电泳迁移:使用PPT或板书来展示琼脂糖凝胶电泳的原理和步骤。
DNA粗提取步骤一、目的要求本实验旨在使学生掌握DNA粗提取的基本原理和操作步骤,了解DNA的物理、化学性质以及其在生物科学研究中的应用。
通过实验,要求学生能够独立完成DNA的粗提取,并对实验结果进行分析和解释。
二、实验原理DNA粗提取的原理基于DNA在不同物理和化学环境中的稳定性。
在一定浓度的盐溶液和适当的温度条件下,DNA的溶解度会发生变化,从而实现DNA 的分离和提取。
本实验采用盐析法进行DNA粗提取,具体操作步骤如下:1.细胞破碎:通过物理或化学方法破碎细胞,释放出细胞内的DNA。
常用的破碎方法包括机械破碎(如研磨、匀浆等)、化学破碎(如用酸、碱或酶处理)和冷冻破碎等。
2.去除杂质:通过离心、过滤等方法去除细胞碎片、蛋白质和其他杂质,使DNA充分溶解在溶液中。
3.调节盐浓度:通过调节盐浓度,使DNA在盐溶液中的溶解度发生变化,从而实现DNA的分离和提取。
常用的盐溶液包括氯化钠、氯化钾、氯化钙等。
4.沉淀DNA:通过降低pH值、加入乙醇或异丙醇等方法,使DNA从溶液中沉淀析出。
5.洗涤与干燥:用70%乙醇或无水乙醇洗涤DNA沉淀,去除残留的盐分和杂质,然后干燥得到粗提取的DNA。
三、实验步骤1.准备实验材料与试剂(1)实验材料:鸡血细胞;(2)试剂:氯化钠、柠檬酸钠、蒸馏水、95%乙醇、70%乙醇;(3)仪器与器皿:离心管、离心机、滴管、玻璃棒、烧杯。
2.操作步骤(1)制备鸡血细胞溶液:取适量鸡血细胞,加入等体积的柠檬酸钠溶液,混合均匀后离心,去除上清液,得到鸡血细胞沉淀。
(2)破碎细胞:将鸡血细胞沉淀重新悬浮于适量蒸馏水中,加入适量的玻璃珠或石英砂,搅拌破碎细胞。
也可以采用匀浆、超声破碎等方法破碎细胞。
(3)去除杂质:将破碎后的溶液离心,去除上清液,得到的沉淀物为富含DNA的细胞碎片。
可以进一步用蒸馏水冲洗沉淀物,去除残留的蛋白质和其他杂质。
(4)调节盐浓度:向沉淀物中加入适量的氯化钠溶液,搅拌均匀,使DNA充分溶解在盐溶液中。
香蕉DNA的粗提取实验广州市第一一三中学马敏贤一、实验目的1、学习DNA的粗提取方法2、学习DNA的化学鉴定方法二、实验原理1、研磨能够破坏细胞结构,释放其中含有的DNA,清洁剂中含有的SDS(十二烷基磺酸钠)具有使蛋白质变性,与DNA分离的作用。
2、DNA可以溶解在一定浓度的NaCl溶液中,3、DNA在酒精中不溶解,所以加酒精后DNA可以析出4、甲基绿为碱性染料,它易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。
三、材料器具器具:研钵、纱布、漏斗、烧杯、玻璃棒、量筒(10ml 一支)、滴管、试管(20ml两支)材料:香蕉、洗洁精、95%酒精、蒸馏水、0.015mol/L的NaCl溶液、2mol/l的NaCl溶液、甲基绿试剂四、方法步骤1、制备材料切取一段2厘米长的香蕉,切碎,置于研钵内加入2毫升洗洁精,充分研磨加入10毫升2mol/l的氯化钠溶液,继续研磨2、过滤将研钵内的香蕉糊用漏斗和纱布过滤到烧杯中。
3、提取DNA往上述液体中加入到约两倍体积的95%的酒精,轻轻摇动或用玻璃棒轻轻搅拌,很快就会看到白色纤维状粘稠物质从滤液中析出来,这就DNA粗提取物。
4、鉴定方法一:取两支试管,分别编为1号、2号,各加入0.015mol/L的NaCl溶液2ml,将所得的白色絮状物质取出一部分放入1号试管,搅拌使其溶解,然后向两支试管中分别加入两滴甲基绿试剂,1号试管呈现绿色,则说明白色絮状物是DNA。
方法二:用玻璃棒卷起白色絮状物,并在白色絮状物中直接滴加甲基绿染液,用蒸馏水洗去浮色,絮状物呈现绿色,说明该白色絮状沉淀为DNA。
五、实验结构与结论研磨能够破坏细胞结构,释放其中含有的DNA,清洁剂中含有的SDS(十二烷基磺酸钠)具有使蛋白质变性,与DNA分离的作用。
DNA在氯化钠溶液中的溶解度在2mol/L时最大,因而在香蕉碎的研磨过程中加入洗洁精和2mol/L的氯化钠溶液,主要目的是让香蕉的DNA 与蛋白质分离并溶解。