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【实验九】DNA的粗提取与鉴定陈小珺（江西省赣州市第三中学341000）1 教学建议在本实验的教学中，教师应注意以下几点。
1.1 实验材料必须准备充足。
本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得。
每组(2个学生)需用5 mL 鸡血细胞液,则每班(50人)至少需要130 mL,而鸡血细胞液与鸡血的体积比为1:3,这样每班至少需要390 mL 鸡血细胞液。
宰杀1只中等大小的活鸡,一般可得120 mL 左右的鲜血,因此,1个班实验需要买4只活鸡。
也可以到市场售活鸡处去索取鸡血,但所带烧杯中必须提前放入抗凝剂。
（每100ml鸡血加入3g柠檬酸钠）1.2 盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。
因为鸡血细胞破碎后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。
1.3 获取较纯净的DNA的关键步骤。
1.3.1 充分搅拌鸡血细胞液：将鸡血细胞液与蒸馏水混合以后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。
1.3.2沉淀DNA时必须用冷酒精：体积分数为95%的酒精在冰箱中至少存放24 h。
1.3.3正确搅拌含有悬浮物的溶液实验步骤3、5、7,都需要用玻璃棒搅拌。
教师应提醒学生注意,在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直插烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA 分子。
进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动5 min。
2 实验原理的补充介绍2.1 DNA的释放本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因。
一是因为鸡血细胞核的DNA 含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破。
DNA位于鸡血细胞的细胞核中,正常情况下不会释放出来。
为了使DNA从细胞核中释放出来,实验中采用了向鸡血细胞液中加入蒸馏水并且搅拌的方法。
蒸馏水对于鸡血细胞来说,是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞破裂。
高中生物实验:DNA的粗提取与鉴定
DNA的粗提取与鉴定实验原理
粗提取原理：在NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时，DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而降低;在0.14mol/L时，DNA的溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时，DNA溶解度又增大。
扩展资料
纯化原理：DNA不溶于酒精，但细胞中的.某些蛋白质溶于酒精。
鉴定DNA原理：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
实验材料的选择及处理
(1)不选择猪血等哺乳动物的血液，因为哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。
(2)需要在鸡血中加入抗凝剂——柠檬酸钠溶液，防止血液凝固。
(3)需除去鸡血中的血浆，因为血浆中无DNA。
特别提醒：不同生物的组织中DNA含量不同在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。
高中生物实验DNA的粗提取和鉴定实验中应注意的问题⑴充分搅拌鸡血细胞液。
DNA存在于鸡血细胞的细胞核中。
将鸡血细胞液与蒸馏水混合后，必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使鸡血细胞加速破裂，并释放出DNA。
⑵沉淀DNA时必须用冷酒精。
实验前必须准备好大量的体积分数为95%的酒精，并在冰箱中至少存放24h。
⑶正确搅拌含有悬浮物的溶液。
实验步骤3、5、7都需要用玻璃棒搅拌。
在进行步骤3、5时，玻璃棒不要直接接触烧杯底部，而且搅拌要轻缓，以便获得较完整的DNA分子。
进行步骤7时，要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间，用手缓慢转动5min〜10min。
本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法。
如果在没有二苯胺的情况下也可以用以下几种方法。
典例解析下列关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验原理中，说法错误的是A.DNA在氯化钠溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变 B.利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC.DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂D.DNA溶液中加入二苯胺试剂经沸水浴后会出现蓝色反应答案：C下列关于实验操作的说法中，有误的是()A.该实验中有两次加入蒸馏水，均是为了析出DNAB.该实验学生操作中多次用到搅拌，除最后一步未强调方向外，其余均要求单向搅拌C.该实验中有3次过滤，过滤时使用纱布层数与需用滤液或黏稠物有关D.实验三次加入NaCl溶液，无论浓度是2mol/L，还是0.015mol/L，均是为了溶解DNA解析：对照比较表可知，除A说法有误外，其余各项均正确。
两次加蒸馏水，第一次是为了使细胞吸水破裂释放出核物质（DNA），第二次是为了降低NaCl溶液的浓度从而析出DNA。
⑷DNA粘稠物的再溶解：；⑸提取杂质较少的DNA白色乳状丝状物：；⑹鉴定DNA是否存在可用试剂:。
解析：⑹鉴定DNA是否存在常用：二苯胺试剂沸水浴为蓝色反应;也可选用甲基绿试剂，其颜色反应为蓝绿色。
DNA的粗提取和鉴定分析DNA(脱氧核糖核酸)是构成生物体遗传信息的重要分子。
DNA的提取和鉴定分析是分子生物学和遗传学等领域中的一项基础技术和研究方法。
DNA的提取过程旨在从生物样品中纯化和提取出DNA分子，而DNA的鉴定分析则旨在确认提取的DNA是否符合特定的特征。
DNA的提取过程通常包括以下几个主要步骤：样品处理、细胞破碎、DNA纯化和DNA溶解。
首先，对于涉及到固体样品的提取，如动物组织样品或植物组织样品，必须先将样品粉碎，通常使用刀片或研钵研磨的方法。
然后，样品细胞被破碎，通常通过各种化学方法或机械方法。
常用的细胞破碎方法包括裂解酶、超声波、热冲击等。
细胞破碎后，通过使用盐水溶解细胞内其他组分，将纯化的DNA从其他细胞组分中分离出来。
这通常涉及到一系列的溶剂溶解步骤以及DNA的沉淀和洗涤。
DNA的纯化过程中，一些常用的技术包括酚/氯仿法、硅胶柱法和离心管法等。
其中，酚/氯仿法是最常用和最早的纯化方法之一、该方法通过将DNA溶解于酚-氯仿混合物中，形成有机相和水相的界面，然后通过离心分离DNA和其他组分。
硅胶柱法则利用硅胶效应，在高盐浓度条件下，DNA吸附在硅胶柱上，然后通过洗脱形成纯净的DNA样品。
离心管法是通过盐溶解和酶处理等步骤，使DNA从细胞中提取并纯化。
DNA提取完成后，可以进行进一步的鉴定分析。
常用的DNA鉴定方法包括聚合酶链式反应(PCR)、限制性酶切和电泳等。
PCR是一种常用的扩增DNA的方法，利用特定的引物和聚合酶在体外模拟自然界中的DNA扩增过程，从而产生大量的特定DNA序列。
限制性酶切是通过使用限制性内切酶切割DNA，然后通过电泳检测DNA片段的大小和形状来鉴定DNA。
电泳是一种将DNA样品通过电场在凝胶中进行分离的方法，通过测量DNA片段的迁移距离和大小来分析和鉴定DNA。
DNA的提取和鉴定分析在许多领域中都具有重要意义。
在法医学中，可以通过DNA分析来确定犯罪嫌疑人和受害者之间的关联；在遗传学中，可以通过DNA分析来确定遗传疾病的相关基因等。
2023高中生物人教版DNA的粗提取与鉴定实验教案一、实验目的通过本实验，学生将了解到DNA的结构和提取方法，并学会进行DNA的粗提取与鉴定实验。
二、实验原理DNA是一种复杂的分子，存在于细胞核中。
DNA的提取是将细胞溶解，分离出DNA分子的过程。
本实验采用CTAB法进行DNA的提取。
CTAB（正十六烷基三甲基溴化铵）可与DNA中的脂质结合，使其在酒精中沉淀出来，然后进行纯化。
三、实验材料1. 鸽子肌肉组织2. CTAB提取液（含CTAB、EDTA等）3. 去离子水4. 洗涤溶液（含乙醇、酒精等）5. 漂白粉溶液6. 碘酒溶液7. NB试剂液（含甲酚、硫酸等）8. DNA鉴定试剂盒9. 细胞破碎管10. 离心管11. 显微镜四、实验步骤1. 取适量鸽子肌肉组织，用漂白粉溶液清洗约5分钟，然后用去离子水洗净。
2. 将清洗后的组织切成小块，加入细胞破碎管中。
3. 加入适量的CTAB提取液，轻轻颠倒破碎管，使其均匀混合。
4. 将混合液放入水浴中加热，温度控制在60℃，保持30分钟。
5. 在水浴中加热过程中，制备NB试剂液。
取一定体积的NB试剂液加入离心管中。
6. 完成加热后，将破碎管置于冷水中快速降温。
7. 按顺序加入等体积的NB试剂液和酒精，轻轻摇晃离心管。
8. 静置一段时间后，观察管内是否有白色物质沉淀，即DNA。
9. 使用显微镜观察提取的DNA样品，并拍照记录。
五、实验结果与分析通过上述实验步骤，我们成功从鸽子肌肉组织中提取到了DNA。
观察显微镜下的DNA样品，可以观察到DNA的纤维状结构，证明DNA成功提取。
通过DNA鉴定试剂盒，可以进一步鉴定DNA的质量和纯度。
六、实验扩展1. 不同来源的细胞组织是否存在DNA含量差异？2. 不同提取方法对DNA的效果有何不同？3. 通过PCR技术对提取的DNA进行进一步分析。
七、实验注意事项1. 实验过程中需注意个人安全，避免接触有害物质。
2. 实验器材需干净无污染，避免杂质对实验结果的影响。
实验十一 DNA的粗提取与鉴定教学目的1．初步掌握DNA粗提取和鉴定的方法。
2．观察提取出来的DNA物质。
实验原理1．DNA在NaCl溶液中的溶解度是随NaCl的浓度变化而改变的。
DNA在0．14mol/L的NaCl 溶液中的溶解度最低，据此可使溶解于NaCl溶液中的DNA析出。
2．DNA不溶于酒精溶液，但细胞中某些物质可以溶于酒精溶液，据此可提取杂质较少的DNA。
3．DNA＋二苯胺−−沸水浴蓝色（用于DNA的鉴定）−→实验步骤1．材料制备0.1G/ml柠檬酸钠100ml500ml烧杯→玻璃棒搅拌→1000r/min离心2min→吸去上清液→活鸡血180ml即得鸡血细胞液（也可将上述烧杯臵于冰箱中，静臵一天使鸡血细胞自行沉淀）2．方法步骤取血细胞液5-10ml＋20ml蒸馏水，玻璃棒沿一个方向快速搅拌（1）提取血细胞核物质纱布过滤，滤液中含DNA和其他核物质，如蛋白质原理：血细胞的细胞膜、核膜吸水胀破，玻璃棒快速搅拌机械加速血细胞破裂（2）溶解核内DNA：滤液＋2mol/L NaCl溶液40ml，玻璃棒沿一个方向搅拌（3）析出含DNA的粘稠物：向上述溶液中缓缓加入蒸馏水，并轻轻地沿一个方向搅拌，出现丝状物，当丝状物不再增加时，停止加水（此时NaCl溶液相当于稀释到0．14mol/L）（4）滤取含DNA的粘稠物：用多层纱布过滤，含DNA的粘稠物留在纱布上（5）（纱布上的）DNA粘稠物再溶解： 20ml2mol/L NaCl溶液 50ml烧杯，上述粘稠物缓慢搅拌3 min（6）过滤含DNA的2mol/L NaCl溶液：用2层纱布过滤，滤液中含DNA（7DNA：上述溶液＋95%酒精，缓慢搅拌，出现乳白色丝状物，用玻璃棒将丝装物卷起。
（8）DNA鉴定：实验关键：本实验成功的关键是获取较纯净的DNA，因此应注意：1．充分搅拌鸡血细胞液。
DNA存在于鸡血细胞核中。
将鸡血细胞与蒸馏水混合以后，应用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使血细胞加速破裂，并释放出DNA 2．沉淀DNA必须用冷酒精。
⾼中⽣物选修⼀教案：课题1DNA的粗提取与鉴定课题1DNA的粗提取与鉴定教材内容解读要点1提取DNA的⽅法（1）分离选⽤⼀定的物理或化学⽅法分离具有不同物理或化学性质的⽣物⼤分⼦。
（2）DNA的溶解性DNA和蛋⽩质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl的浓度变化，在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。
选择适当的盐溶液就能使DNA充分溶解，⽽使杂质沉淀，在0.14mol/L的NaCl溶液中DNA会析出。
DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋⽩质则溶于酒精。
利⽤这⼀原理，可以将DNA 与蛋⽩质进⼀步分离。
（3）DNA对酶、⾼温和洗涤剂的耐受性蛋⽩酶能⽔解蛋⽩质，但是对DNA没有影响。
⼤多数蛋⽩质不能忍受60～80℃的⾼温，⽽DNA在80℃以上才会变性。
洗涤剂能够⽡解细胞膜，但对DNA没有影响。
（4）DNA的鉴定在沸⽔浴的条件下，DNA遇⼆苯胺会被染成蓝⾊。
⼆苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
要点2实验设计（1）实验材料的选取选⽤DNA含量相对较⾼的⽣物组织，如鸡⾎。
（2）破碎细胞，获取含DNA的滤液动物细胞以鸡⾎为例，在鸡⾎细胞液中加⼊⼀定量的蒸馏⽔，同时⽤玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。
植物细胞需要先⽤洗涤剂溶解细胞膜。
（3）去除滤液中的杂质⽅法有三种：①在滤液中加⼊NaCl，使NaCl溶液浓度为2mol/L，过滤除去不溶的杂质，再调节NaCl溶液浓度为0.14mol/L，析出DNA过滤去除溶液中的杂质，再⽤2mol/L的NaCl溶液溶解DNA。
②直接在滤液中加⼊嫩⾁粉反应10～15分钟，嫩⾁粉中的⽊⽠蛋⽩质酶能够分解蛋⽩质。
③将滤液放在60～75℃的恒温⽔浴箱中保温10～15分钟。
（4）DNA的析出与鉴定①析出较纯净的DNA将处理后的溶液过滤，加⼊与溶液体积相等的、冷却的酒精溶液（体积分数为95%），静置2～3分钟，溶液中会出现⽩⾊丝状物，并⽤滤纸吸去上⾯的⽔分。
高中生物实验DNA的粗提取和鉴定实验中应注意的问题⑴充分搅拌鸡血细胞液。
DNA存在于鸡血细胞的细胞核中。
将鸡血细胞液与蒸馏水混合后，必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使鸡血细胞加速破裂，并释放出DNA。
⑵沉淀DNA时必须用冷酒精。
实验前必须准备好大量的体积分数为95%的酒精，并在冰箱中至少存放24h。
⑶正确搅拌含有悬浮物的溶液。
实验步骤3、5、7都需要用玻璃棒搅拌。
在进行步骤3、5时，玻璃棒不要直接接触烧杯底部，而且搅拌要轻缓，以便获得较完整的DNA分子。
进行步骤7时，要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间，用手缓慢转动5min～10min。
本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法。
如果在没有二苯胺的情况下也可以用以下几种方法。
典例解析下列关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验原理中，说法错误的是A.DNA在氯化钠溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变B.利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC.DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂D.DNA溶液中加入二苯胺试剂经沸水浴后会出现蓝色反应答案：C下列关于实验操作的说法中，有误的是()A.该实验中有两次加入蒸馏水，均是为了析出DNAB.该实验学生操作中多次用到搅拌，除最后一步未强调方向外，其余均要求单向搅拌C.该实验中有3次过滤，过滤时使用纱布层数与需用滤液或黏稠物有关D.实验三次加入NaCl溶液，无论浓度是2mol/L，还是0.015mol/L，均是为了溶解DNA解析：对照比较表可知，除A说法有误外，其余各项均正确。
两次加蒸馏水，第一次是为了使细胞吸水破裂释放出核物质(DNA)，第二次是为了降低NaCl溶液的浓度从而析出DNA。
⑷DNA粘稠物的再溶解：;⑸提取杂质较少的DNA白色乳状丝状物：;⑹鉴定DNA是否存在可用试剂：。
解析：⑹鉴定DNA是否存在常用：二苯胺试剂沸水浴为蓝色反应;也可选用甲基绿试剂，其颜色反应为蓝绿色。
(其它略) 答案：⑴蒸馏水⑵2mol/L NaCl溶液⑶蒸馏水⑷2mol/L NaCl溶液⑸冷却的体积分数为95%的酒精⑹二苯胺试剂或甲基绿试剂(带*的为重点实验)实验一：生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定**实验材料的选择：1.可溶性还原糖的鉴定：生物组织中的糖类有还原糖和非还原糖两类。
dna的粗提取与鉴定实验报告DNA 的粗提取与鉴定实验报告一、实验目的1、了解 DNA 粗提取的原理和方法。
2、学习并掌握 DNA 鉴定的基本技术。
二、实验原理1、 DNA 在氯化钠溶液中的溶解度随氯化钠浓度的变化而改变。
在014mol/L 的氯化钠溶液中，DNA 的溶解度最低。
2、 DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质（如蛋白质）则溶于酒精。
3、 DNA 与二苯胺试剂在沸水浴条件下会呈现蓝色反应，从而可以鉴定 DNA 的存在。
三、实验材料和用具1、材料新鲜的鸡血细胞液（抗凝剂处理）2、用具（1）烧杯、玻璃棒、滴管、量筒、离心机、纱布、漏斗、铁架台、酒精灯、石棉网、三角架、火柴。
（2）体积分数为95%的酒精溶液、2mol/L 的氯化钠溶液、蒸馏水、二苯胺试剂。
四、实验步骤1、制备鸡血细胞液将新鲜的鸡血加入抗凝剂，静置一段时间后，离心处理，去除上清液，留下鸡血细胞液。
2、提取细胞核物质向鸡血细胞液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液，搅拌均匀，使血细胞破裂，释放出细胞核物质。
3、溶解 DNA沿烧杯壁缓缓加入蒸馏水，并不断搅拌，直到溶液中氯化钠浓度降至 014mol/L 时，DNA 溶解度最小，此时会有白色丝状物析出。
4、过滤含 DNA 的黏性物用多层纱布过滤上述溶液，滤去杂质，留下含 DNA 的黏性物。
5、进一步提纯 DNA将上述黏性物再溶解于 2mol/L 的氯化钠溶液中，然后过滤，除去不溶的杂质。
6、析出 DNA向滤液中缓缓加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为 95%的酒精溶液，并用玻璃棒搅拌，溶液中会出现白色的丝状 DNA。
7、 DNA 的鉴定取两支洁净的试管，分别编号为 1、2。
向 1 号试管中加入 2mol/L的氯化钠溶液 2mL，向 2 号试管中加入 DNA 丝状物和 2mol/L 的氯化钠溶液 2mL。
然后向两支试管中各加入 4mL 二苯胺试剂，混合均匀后，将试管置于沸水浴中加热 5 分钟，观察颜色变化。
高中生物实验知识：DNA的粗提取与鉴定实验【】查字典生物网高中频道的编辑就为您准备了高中生物实验知识：DNA的粗提取与鉴定实验一、不同试剂用途及原理比较二、方法步骤比较三、DNA的粗提取和鉴定实验中应注意的问题1.盛放鸡血细胞液的容器，最好是塑料容器。
因为鸡血细胞破碎后释放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，细胞内DNA的含量比较少，如果被玻璃窖吸附却一部分，提取的DNA就会更少。
因此，实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管，这样可以减少提取过程中DNA的损失。
2.获取较纯净的DNA的关键步骤。
⑴充分搅拌鸡血细胞液。
DNA存在于鸡血细胞的细胞核中。
将鸡血细胞液与蒸馏水混合后，必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使鸡血细胞加速破裂，并释放出DNA。
⑵沉淀DNA时必须用冷酒精。
实验前必须准备好大量的体积分数为95%的酒精，并在冰箱中至少存放24h。
⑶正确搅拌含有悬浮物的溶液。
实验步骤3、5、7都需要用玻璃棒搅拌。
在进行步骤3、5时，玻璃棒不要直接接触烧杯底部，而且搅拌要轻缓，以便获得较完整的DNA分子。
进行步骤7时，要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间，用手缓慢转动5min～10min。
3.本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法。
如果在没有二苯胺的情况下也可以用以下几种方法。
⑴配制染色剂。
用蒸馏水配制0.05%的溴化乙锭(EB)溶液。
⑵将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上，再滴1滴EB 溶液染色。
⑶将蜡纸放在紫外灯(260nm)下照射(暗室中)，可见橙红色的荧光(DNA的紫外吸收高峰在260nm处)。
4.典例解析1.下列关于DNA的粗提取与鉴定的实验原理中，说法错误的是A.DNA在氯化钠溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变B.利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC.DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂D.DNA溶液中加入二苯胺试剂经沸水浴后会出现蓝色反应解析：该实验依据的原理是A、B、D，DNA不溶于酒精(属有机溶剂)，C说法错误。
