DNA的粗提取与鉴定_实验报告

【实验九】DNA的粗提取与鉴定陈小珺（江西省赣州市第三中学341000）1 教学建议在本实验的教学中，教师应注意以下几点。

1.1 实验材料必须准备充足。

本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得。

每组(2个学生)需用5 mL 鸡血细胞液,则每班(50人)至少需要130 mL,而鸡血细胞液与鸡血的体积比为1:3,这样每班至少需要390 mL 鸡血细胞液。

宰杀1只中等大小的活鸡,一般可得120 mL 左右的鲜血,因此,1个班实验需要买4只活鸡。

也可以到市场售活鸡处去索取鸡血,但所带烧杯中必须提前放入抗凝剂。

（每100ml鸡血加入3g柠檬酸钠）1.2 盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。

因为鸡血细胞破碎后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。

1.3 获取较纯净的DNA的关键步骤。

1.3.1 充分搅拌鸡血细胞液：将鸡血细胞液与蒸馏水混合以后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。

1.3.2沉淀DNA时必须用冷酒精：体积分数为95%的酒精在冰箱中至少存放24 h。

1.3.3正确搅拌含有悬浮物的溶液实验步骤3、5、7,都需要用玻璃棒搅拌。

教师应提醒学生注意,在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直插烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA 分子。

进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动5 min。

2 实验原理的补充介绍2.1 DNA的释放本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因。

一是因为鸡血细胞核的DNA 含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破。

DNA位于鸡血细胞的细胞核中,正常情况下不会释放出来。

为了使DNA从细胞核中释放出来,实验中采用了向鸡血细胞液中加入蒸馏水并且搅拌的方法。

蒸馏水对于鸡血细胞来说,是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞破裂。

dna的粗提取与鉴定dna的粗提取与鉴定实验十一 DNA的粗提取与鉴定教学目的1、初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法2、观察提取出来的DNA物质实验原理1、DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。

当NaCl的物质的量浓度为0.14mOl/L时,DNA的溶解度最低。

利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。

2、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。

利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。

3、DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

注意事项1、步骤3析出含DNA的黏稠物中，蒸馏水要沿烧杯内壁缓缓加入，不能一次快速倒入。

2、实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌，但是在不同的步骤中玻璃棒的用法不同。

实验用具鸡血细胞液(5～10mL);体积分数为95%的冷酒精，蒸馏水，质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液，物质的量浓度分别为2mol/L和0.015mol/L的NaCl溶液，二苯胺试剂;烧杯(100mL，1个， 50mL，500mL，各2个)，漏斗，试管(20mL，2个)，玻璃棒，滴管，量筒(100mL，1个)，纱布，镊子，滤纸，铁架台，铁环，三角架，酒精灯，石棉网，载玻片，试管夹。

课时安排一课时课前准备制备鸡血细胞液，方法是：将质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液100mL，置于500mL烧怀中，注入新鲜的鸡血(约180mL)，用玻璃棒搅拌，使其充分混合，以免凝血。

静置于冰箱内一天，使血细胞自行沉淀。

也可以用离心机离心2 min(转速1000转/分)。

用吸管吸去上清液。

板书实验十一 DNA的粗提取与鉴定实验原理1、析出溶解在NaC1溶液中的DNA。

2、用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。

3、DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。

方法步骤：1、提取鸡血细胞的细胞核物质：顺时针方向搅拌，稍快，稍重。

5 min2、溶解细胞核内的DNA3、析出含DNA的黏稠物：蒸馏水300mL，逆时针方向搅拌，缓慢4、过滤：取黏稠物5、再溶解：顺时针方向搅拌，较慢。

高中生物实验:DNA的粗提取与鉴定
DNA的粗提取与鉴定实验原理
粗提取原理：在NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时，DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而降低;在0.14mol/L时，DNA的溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时，DNA溶解度又增大。

扩展资料
纯化原理：DNA不溶于酒精，但细胞中的.某些蛋白质溶于酒精。

鉴定DNA原理：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

实验材料的选择及处理
(1)不选择猪血等哺乳动物的血液，因为哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。

(2)需要在鸡血中加入抗凝剂——柠檬酸钠溶液，防止血液凝固。

(3)需除去鸡血中的血浆，因为血浆中无DNA。

特别提醒：不同生物的组织中DNA含量不同在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。

D N A粗提取和鉴定实验 Ting Bao was revised on January 6, 20021DNA的粗提取与鉴定实验一、实验原理①DNA主要存在于细胞核②DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。

当NaCl 的物质的量浓度为 mol／L时,DNA的溶解度最低。

利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。

③DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质可以溶于酒精溶液。

利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。

⑷DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

二、实验材料和用具鸡血细胞液（5~10ml）；体积分数为95%的冷酒精溶液（实验前置于冰箱内冷却24h）；蒸馏水；质量浓度为0．１g/ml的柠檬酸纳溶液；质量的浓度分别为2mol/L和0．015mol/L的氯化纳溶液（新教材不要求0、015的浓度了，都是用的2mol/L）；二苯胺试剂；铁架台；镊子；水浴锅；玻璃棒；滤纸；滴管；量筒（100ml，一个）；烧杯；（1000ml，一个，50ml、100 ml 、500ml 各二个）；试管（20ml，二个）；漏斗；试管夹；纱布。

三、课前准备鸡血细胞液取质量浓度为0．1g/ml的柠檬酸纳溶液（抗凝剂）100ml，置于500ml烧杯中。

注入新鲜的鸡血（约180ml），同时用玻璃棒搅拌，使血液与柠檬酸纳溶液充分混合，以免凝血。

将烧杯中的血液置于冰箱内，精置一天，使血细胞自行沉淀。

（也可以将血液倒入离心管内，用1000r/min（转每分）的离心机离心2min，血细胞沉淀于离心管底部。

实验时。

用吸管除去离心管上部的澄清液，就可以得到鸡血细胞液。

四、方法步骤①提取鸡血细胞的细胞核物质将制备好的鸡血细胞液5 mL～10mL，注入到50 mL烧杯中。

向烧杯中加入蒸馏水20 mL，同时用玻璃棒充分搅拌5 min，使血细胞加速破裂。

然后，用放有1-2层纱布的漏斗将血细胞液过滤至1000mL。

dna的粗提取实验报告DNA的粗提取实验报告引言DNA（脱氧核糖核酸）是生物体中负责遗传信息传递的分子，它的提取是进行分子生物学实验的基础步骤之一。

本实验旨在通过简单的方法提取DNA，并观察提取效果。

材料与方法材料：- 植物组织（如洋葱、豆芽等）- 高渗盐溶液（含有盐分的溶液，如食盐溶液）- 咖啡过滤纸- 酒精（酒精浓度为70%）- 水方法：1. 将植物组织切碎，使细胞破裂，释放DNA。

2. 将切碎的植物组织放入一个容器中，加入高渗盐溶液，搅拌均匀。

3. 将搅拌后的溶液过滤，使细胞碎片和其他杂质被滤掉，得到澄清的液体。

4. 将澄清的液体倒入一个试管中，加入等量的酒精，并缓慢倾斜试管，使酒精与液体缓慢混合。

5. 观察酒精与液体的交界面，可以看到白色的DNA沉淀。

6. 使用酒精漂浮在DNA沉淀上方的方法，将DNA转移到另一个容器中。

7. 加入适量的水，溶解DNA。

结果与讨论通过上述方法，我们成功地从植物组织中提取到了DNA。

观察到的白色沉淀物就是DNA，其形状呈线状或颗粒状。

实验过程中，我们注意到以下几个现象：1. 细胞破裂：切碎植物组织的过程中，细胞膜被破坏，使DNA从细胞内释放出来。

这一步骤的重要性在于提供了DNA的来源。

2. 高渗盐溶液：高渗盐溶液的作用是破坏细胞膜和核膜，使DNA从细胞内释放出来。

高渗盐溶液中含有盐分，可以改变细胞内外的渗透压，进而破坏细胞膜和核膜。

3. 过滤：通过过滤，我们可以去除细胞碎片和其他杂质，得到澄清的液体。

这一步骤的目的是减少后续操作中DNA沉淀的杂质。

4. 酒精沉淀：加入酒精后，DNA会从溶液中沉淀出来。

酒精与溶液的混合过程中，DNA会聚集在交界面上形成白色沉淀物。

这是因为DNA在酒精中不溶，而且比较重，所以会沉淀下来。

5. DNA的溶解：将DNA从酒精中转移到水中后，加入适量的水，使DNA溶解。

DNA在水中溶解后，呈现出透明的溶液。

本实验采用的是粗提取方法，所得到的DNA并不纯净。

教学目的1． 初步掌握DNA 粗提取和鉴定的方法。

2． 观察提取出来的DNA 物质。

实验原理1． DNA 在NaCl 溶液中的溶解度是随NaCl 的浓度变化而改变的。

DNA 在0．14mol/L 的NaCl溶液中的溶解度最低，据此可使DNA 充分溶解而使杂质沉淀或DNA 沉淀而杂质溶解。

2． DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中某些物质可以溶于酒精溶液，据此可提取杂质较少的DNA 。

3． DNA 对蛋白酶、高温和洗涤剂（可以溶解细胞的细胞膜，除去脂质和蛋白质，而对DNA 没有影响）都具有较好的耐性。

4． DNA ＋二苯胺−−→−沸水浴蓝色（用于DNA 的鉴定）实验材料：鸡血细胞液（5-10ml ），体积分数为95%的酒精溶液（冷却），蒸馏水，质量浓度为0.1g/ml 的柠檬酸钠溶液(抗凝剂)，物质的量浓度分别为2mol/l 和0.015mol/l 的氯化钠溶液，二苯胺试剂实验步骤1．材料制备0.1g/ml 柠檬酸钠100ml置于500ml 烧杯内→玻璃棒搅拌→1000r/min 离心2min →吸去上清液→即得鸡血细胞液（也可将上述烧杯置于冰箱中，静置一天使鸡血细胞自行沉淀）活鸡血180ml[思考]为什么要除去血液中的上清液？2．方法步骤取血细胞液5-10ml＋20ml蒸馏水，玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使血细胞加速破裂，纱布过滤，滤液中含DNA和其他核物质，如蛋白质（1）提取鸡血细胞的细胞核物质原理：血细胞吸水胀破，玻璃棒快速搅拌机械加速血细胞破裂（2）溶解核内DNA：滤液＋2mol/LNaCl溶液40ml，玻璃棒沿一个方向搅拌（3）析出含DNA的粘稠物：向上述溶液中缓缓加入蒸馏水，并轻轻地沿一个方向搅拌，出现丝状物，当丝状物不再增加时，停止加水（此时NaCl溶液相当于稀释到0．14mol/L）（4）滤取含DNA的粘稠物：用多层纱布过滤，含DNA的粘稠物留在纱布上（5）DNA粘稠物再溶解：在50ml的烧杯中注入20ml 2mol/L的NaCl溶液，缓慢搅拌3 min使上述粘稠物尽量多的溶解在溶液中。

课题1 DNA 的粗提取与鉴定原理解析：1 . DNA 粗提取的实验原理： (1 )本实验用鸡血为实验材料的原因是：鸡血的红细胞有 ____________ ，细胞核中有 DNA 和 蛋白质组成的 _______ 。

因为哺乳动物(如兔子等)血液的红细胞中没有 _____________ ，因此不 能用哺乳动物的血液为本实验的材料。

(2 )提取DNA 的原理是：利用 DNA 在 ___________________ 的氯化钠溶液中溶解度最低，形成 沉淀析出；再利用 DNA 不溶于 ___________ ，但细胞中的其他物质可溶于酒精的特点，进一步 提取出含杂质较少的 DNA 。

(3 )制备鸡血细胞液的原理：用质量浓度为 0.1g /m L 的柠檬酸钠作抗凝剂。

用吸管吸去 上清液的目的是去掉血浆，留下 ________________ ，因为血浆中没有 DNA 。

向含有DNA 的浓度较高的氯化钠溶液中加入 ______________ ，稀释氯化钠溶液，使DNA 的溶 解度下降。

这时，加上不断的搅拌，溶解度下降的 DNA 逐渐呈 __________ 。

再通过过滤， 滤去蛋白质，就可获得DNA 的黏稠物了。

氯化钠溶液的浓度与 DNA 溶解度之间的关系 可用图曲线表示： 2 . DNA 鉴定的原理：鉴定所用的试剂为二苯胺。

DNA 与二苯胺作用而显现 _________ 。

鉴定时溶液颜色的深浅 与溶液中DNA 含量的多少有关。

问题讨论： 1 .提取鸡血中的 DNA 时，为什么要除去血液中的上清液？ 因为上清液是 __________________________________________________ ，不含血细胞，而沉于试管底部的鸡血细胞的 _____________________________________________ 所以提取鸡血细胞中的 DNA 时，要除去血液中的上清液。