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瑞氏-姬姆萨染液使用说明

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瑞氏-姬姆萨染液
编码 名称 规格 单位
北京华越洋生物GT79355 瑞氏-姬姆萨染液 100ml 瓶

瑞氏-姬姆萨染液说明：
华越洋瑞氏-姬姆萨染液是一种复合染液，兼有瑞氏和姬姆萨染液二者优点，主要应用
于血液和骨髓涂片染色。各种细胞及细胞的各种成分由于其化学性质不同，对瑞氏-姬姆萨
染色液中的酸性染料和碱性染料的亲和力也不同，因此，标本涂片经瑞氏-姬姆萨染色液染
色后，相应各类细胞呈现不同的着色，从而达到辨别其形态特征的目的。姬姆萨染色液对胞
浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，着色清晰，色泽纯正，但是对胞核着色偏
深,核结构显示较差。瑞氏染色对细胞核着色程度适中，细胞核结构和色泽清晰艳丽，对核
结构的识别较佳，但对胞浆着色较差，故采用瑞氏姬姆萨混合染色，具有染色效果好，对比
清晰，操作简便等特点。

瑞氏-姬姆萨染液操作说明：
华越洋瑞氏-姬姆萨染液可作为多种组织或细胞的染色使用，不同组织、细胞，不同的
用途可以有不同的使用方法。具体方法请根据自己需求参考既有文献，瑞氏-姬姆萨染液以
涂片为例，仅供参考。
1、取涂片、自然干燥。
2、滴加瑞氏-姬姆萨染液 2-3 滴覆盖整个标本涂片，染 1-2 分钟。
3、滴加等量0.01M磷酸盐缓冲液（pH6.4-6.8），轻轻晃动玻片, 与瑞氏-姬姆萨染色液
充分混匀，染色 3-5 分钟。
4、水洗、吸干、镜检。
5、染色后胞浆和胞核的染色清晰分明，细胞核着色呈深浅不同的紫红色，胞浆呈浅红
色，胞浆中颗粒区分明显。

瑞氏-姬姆萨染液注意事项：
1、涂片厚薄适宜，涂片干透后固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。
2、所加染液不能过少，以免蒸发而使染料沉淀。冲洗时间不能过久，以防脱色。
3、染色对 pH 十分敏感，稀释染液必须用缓冲液，冲洗用水应接近中性，否则可能会
导致细胞染色异常，形态难以识别，甚至错误。
4、染色过淡可以复染，复染时应先加缓冲液，然后加染液。染色过深可用流水冲洗或
浸泡，也可用甲醇脱色。
瑞氏-姬姆萨染液相关染色液：
名称
规格 名称 规格

中性红染色液(0.33%） 500ml 结晶紫水溶液(0.1%) 100ml
中性红染色液(0.5%） 500ml 核固红染色液(0.1%) 100ml
中性红染色液(0.1% 常规染色) 100ml 天狼星红染色试剂盒 2*50mL
TTC染色液（0.4%） 500ml 0.5%伊文斯蓝/埃文斯蓝溶液 100mL
Masson三色染色试剂盒 7×50ml 茜素红S染色液(1%,pH4.2) 100mL
普鲁士蓝染色试剂盒 2*50ml 0.2%核固红染色液 100ml
尼氏染色液(焦油紫法) 2*100ml 改良Lillie-Mayer苏木素染色液 100ml
吕氏碱性美蓝染色液（0.4%） 100ml 改良Lillie-Mayer苏木素染色液 500ml
亮绿SF染色液 100ml Ehrlich苏木素染色液 100ml
溴甲酚绿-甲基红指示剂溶液 100ml Ehrlich苏木素染色液 500ml
饱和油红O染色液 100ml 苏木素伊红混合染色液(一步法) 100ml
Van Gieson 染色液 50ml 苏木素伊红混合染色液(一步法) 500ml
Van Gieson 染色试剂盒 3×50ml 改良Harris苏木素染色液 100ml
Schiff试剂 50ml 改良Harris苏木素染色液 500ml
茜素红S染色液（0.2%） 100ml Mayer苏木素染色液 100ml
煌焦油蓝染色液 100ml Mayer苏木素染色液 500ml
2% TTC染色液 100ml 苏木素伊红(HE)染色液 2×100ml
革兰氏染色液试剂盒 4×10ml 苏木素伊红(HE)染色液 2×500ml
醋酸洋红染色液 100ml Core苏木素染色液 100ml
姬姆萨原液 100ml Core苏木素染色液 500ml
姬姆萨工作液 100ml Carazzi苏木素染色液 100ml
瑞氏-姬姆萨复合染液 100ml Carazzi苏木素染色液 500ml
瑞氏染液 50ml Delafield苏木素染色液 100ml
结晶紫染色液(2.5%) 10ml Delafield苏木素染色液 500ml
结晶紫染色液(1%) 10ml Gill苏木素染色液(Gill No.1) 100ml
结晶紫染色液(0.1%) 10ml Gill苏木素染色液(Gill No.1) 500ml
荚膜染色液（试剂盒） 50ml×2 Gill苏木素染色液(Gill No.2) 100ml
芽孢染色液（试剂盒） 50ml×2 Gill苏木素染色液(Gill No.2) 500ml
鞭毛染色液（试剂盒） 100ml Gill苏木素染色液(Gill No.3) 100ml
石炭酸复红染液(苯酚品红染液) 100ml Gill苏木素染色液(Gill No.3) 500ml
改良型石炭酸复红染液(苯酚品红染液) 100ml Heidenhain铁苏木素染色液 3×100ml
抗酸染色液（试剂盒） 50ml×3 天青石蓝苏木素染色液 2×50ml
吕氏碱性美蓝染色液（0.1%） 100ml 改良MacConaill铅苏木素染色液 140ml
卢戈碘液（革兰氏染色） 10ml 苏木素无水乙醇溶液(5%) 100ml
番红染色液（沙黄） 10ml 苏木素无水乙醇溶液(10%) 100ml
卢戈碘液（标准碘液） 100ml 伊红染色液(进口水溶) 100ml
Mayer'苏木素染液(免疫组化) 10ml 伊红染色液(进口水溶) 500ml
HE染色液(试剂盒) 3×10ml 伊红染色液(水溶) 100ml
Cole氏苏木素染色液(常规染色) 100ml 伊红染色液(水溶) 500ml
Weigert苏木素染色液 2×50ml 伊红染色液(水溶,5%) 100ml
AB-PAS染色试剂盒 50ml*6 伊红染色液(醇溶) 100ml
糖原PAS染色液（过碘酸-雪夫染色液） 50ml×2 伊红染色液(醇溶) 500ml
糖原PAS染色液试剂盒（过碘酸-雪夫染色液） 50ml×4 Scott蓝化液 500ml
伊红染色液 100ml 氨水溶液(0.1%) 500ml
标准阿利新蓝染色液 3×50ml 氨水溶液(0.3%) 500ml
阿利新蓝染色液(pH2.5) 100ml 氨水溶液(0.5%) 500ml
阿利新蓝染色液(pH=1.0)（试剂盒） 3×50ml 氨水溶液(1%) 500ml
碱性品红乙醇溶液(5%) 100ml 天青石蓝B染色液 50ml
碱性品红水溶液(1%) 100ml 天青石蓝B染色液 100ml

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瑞氏染液

瑞氏染液


新离解。 ○缓冲液须保持一定的 pH 使染色稳定，PBS 的 pH 一般在 6.4~6.8， ○偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作用，偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作用，使
pH 定。 缓冲液配制
（pH6.4~6.8，弱酸性）： 配方 1 ： 配方 2： 1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml 1% Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5ml H2O(新鲜) 加至 1000ml 置室温黑暗处，瓶口密封，防止霉菌污染，如有污染则应报废。 姬姆萨（Giemsa's stain；天青-伊红）染色 1．姬姆萨染料是伊红(AzurII Eqsin)和天青（蓝）2 号合成的。 2．姬姆萨染料（ Giemsa, 天青-伊红）染液配制： 姬姆萨染料（粉末） 0.5g 或 7.5g 甲醇（AR） 33ml 或 500ml 甘油（AR） 33ml 或 500ml ●先将姬姆萨染料放入乳钵中，逐渐倒甘油研磨溶于甘油中，置于 56℃水温箱内，90～120 分 钟，然后加入甲醇，摇匀后放置数天，过滤后或不过滤即可使用。此染液放置室温阴暗处，时间越 长越好。 ●使用染液可临时配置）：姬姆萨染液 1ml，加 DDH2O10ml 混匀。即可使用。 染色步骤 （1）先用甲醇固定 2～3 分钟。 （2）将血或骨髓涂片放置姬姆萨使用液 15～30 分钟。 （3）涂片用自来水冲洗，在室温中干燥待查。 染液鉴定 瑞氏或姬姆萨染色液鉴定：刚配好或放置一个月以上的染液可进行下列鉴定： 1．取 1 滴染液于乳白玻板上，自行迅速扩散开，其颜色变紫红色，且有伪足形成。 2．取 1 滴染液加 1 滴缓冲液，染液由深蓝色立即变为紫红色。 3．取血片或骨髓片进行试染检查，观察染色后各类细胞的胞核、胞浆及颗粒着色情况，pH 是 否合适及染色合适时间。如有上述变化，表明染液合格，可供使用。 混合染色 瑞氏染色(Wright's)-姬姆萨（Giemsa's）混合染色： ●瑞氏染色的染料配方浓度对细胞核着色程度适中,细胞核结构和色泽清晰艳丽,对核结构的识 别较佳,但对胞浆着色偏酸,色泽偏红,对细胞浆内颗粒特别是嗜天青颗粒及嗜中性颗粒着色较差。 ●姬姆萨染色对胞浆着色能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别对嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗 粒着色较清晰, 色泽纯正,而对胞核着色偏深,核结构显示较差。 ●故采用以瑞氏染液为主，姬姆萨染液为辅的混合染色。 染色步骤： 1. 先用瑞氏染液将涂膜面充分覆盖； 2. 稍等片刻再加姬姆萨染液 2-3 滴加减(根据涂片上细胞多少及增升程度酌情而定)； 3. 稍等 1-2 分钟后,再加磷酸盐缓冲液,加时应缓慢地一滴一滴加在涂片膜上,直至膜面上染色液 形成表面张力而终止染色液加入； 4. 染色 30-40 分钟； 5. 分色：用自来水缓缓冲洗至少 3 分钟以上,待干，勿用滤纸吸干,以免滤纸纤维污染涂片。
红斑狼疮细胞检查标准操作规程

红斑狼疮细胞检查标准操作规程

红斑狼疮细胞检查标准操作规程目的规范红斑狼疮细胞检查标准操作适用范围适用于红斑狼疮细胞检查检测原理红斑狼疮细胞温浴染色法仪器OLYMPUS显微镜37℃水浴箱试剂瑞氏-姬姆萨复合染色液：①I液：取瑞氏染粉1g、姬姆萨染粉0.3g，置洁净研钵中，加少量甲醇(分析纯)，研磨片刻，吸出上层染液；再加少量甲醇，继续研磨，再吸出上液。

如此连续几次，共用甲醇500ml。

收集于棕色玻璃瓶中，每天早、晚各震荡3min，共5天，之后存放一周即可使用。

②Ⅱ液：pH6.4-6.8磷酸盐缓冲液称取如下比例的试剂：磷酸二氢钾(无水) 6.64g磷酸氢二钠(无水) 2.56g加少量蒸馏水溶解，用磷酸盐调整pH，加水至1000ml。

样本采集抽取静脉血3ml于洁净试管中，及时送检。

6.1 患者准备6.1.1 检验人员必须对患者讲清楚检验目的，安慰患者，努力减轻患者的疑虑和恐惧心理。

6.1.2 标本采集前，应避免跑步、骑自行车、爬楼等剧烈的运动，要求患者休息15分钟后进行。

尽可能保证每次采血都在同样的条件下进行。

操作步骤7.1 抽取患者血液2-3ml，注于干燥洁净试管内，于室温待凝。

7.2 于凝固刚形成时，用竹签将凝块搅碎，并将残余凝块除去。

7.3 以2000rpm/min离心沉淀使白细胞聚集在同一层面，以利于狼疮细胞形成。

7.4 置于37摄氏度温箱内温育2h。

7.5 取出白细胞层及其上下各少许，置红细胞比积管内，以2000r/min离心，沉淀10min。

7.6 吸去上层液，轻轻吸取白细胞层，制成薄片3-4张。

7.7 以瑞氏染液染色、镜检。

生物参考区间阴性变异潜在来源9.1 整个操作时间不能超过3h，时间过短，狼疮细胞形成不佳；时间过长，细胞溶解过多，影响检出。

9.2 注意与果馅细胞鉴别，果馅细胞多为单核细胞吞噬淋巴细胞的核所形成，其核仍保持着染色质结构和染色特性（着紫红色）。

Giemsa染色法

Giemsa染色法

Giemsa染色法1 染色原理编辑本段Giemsa染色法：吉姆萨染液由天青，伊红组成染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。

嗜酸性颗粒碱性蛋白质，与酸性染料伊红结果，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质。

PH对细胞染色有影响。

细胞各成分均不蛋白质，由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液PH而定，在偏酸性环境中下在电荷增，易与伊红结合，染色偏红；在偏三性环境中负电荷增多，易与美蓝或天青结合，染色偏蓝。

因此细胞染色对氢离子浓度十分敏感，染色用正经片必须清洁，无酸碱污染。

配制顼特液必须用优质甲醇，稀释染色必须用缓冲液，冲洗用水应近中性，否则可导致各种细胞染色反应异常，以致识别困难，甚至造成错误。

2 介绍编辑本段MGG由May-Grunwald染料和Giemsa染料组成。

前者化学名为曙红亚甲基蓝Ⅱ，对胞质着色较好；后者对胞核着色较好。

因此MGG染色，可兼两者的优点，常用于细胞涂片染色。

2.1 1．染液配制I液的配制：迈格染料 lg甲醇 100ml在研钵内用少量纯甲醇将染料充分研磨成均匀一致的悬液，倒人烧瓶中，加入其余的甲醇后置入37℃温箱4-6小时，每隔半小时研磨半小时，然后放入深棕色瓶内，在室温下保存，2周后使用。

临用前取上液40ml，加纯甲醇20ml混合用作工作液。

Ⅱ液的配制：姬氏染粉 0.6g甘油 50ml甲醇100ml将姬氏染粉溶于甘油内，在研钵内研磨3-4小时，使之磨匀，加入纯甲醇后搅拌均匀,放入深棕色瓶内，室温下保存，2周后即可使用。

磷酸缓冲液配制：1％磷酸氢二钠20ml，l％磷酸二氢钠30ml，加蒸馏水至1000ml，调整pH 6.4-6.8(用蒸馏水代替缓冲液，效果亦佳)。

2.2 2．染色步骤(1)自然干燥的细胞涂片(预先滴加甲醇固定更好)水平置于染色架上。

吉姆萨染色方法及结果

吉姆萨染色方法及结果

1.材料
1g的姬姆色素染料加入66ml甘油，混匀，60度保温溶解两小时，再加入66ml甲醇混匀，即配成姬姆色素原液，此原液用前用PBS（6.8）稀释十倍左右就可以使用（此为姬姆萨工作液）。

工作液可保存一个月左右，Camon固定液（3体积乙醇+1体积冰乙酸）；
PBS缓冲液配制：在基因工程手册里，网上的不大准确！
2.方法
①涂片的制作与固定：用移液枪吸取10-20μL待检溶液滴在载玻片上,均匀涂布,室温下阴干后,用Camon固定液固定涂片10min。

②染色：置姬姆萨工作液30min。

③洗脱：染色完成后,涂片立即用ddH2O洗脱。

④显微镜观察：用甘油压片,指甲油封固。

在100×油镜下观察。