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高脂血症动物模型的研究概况标签：高脂血症;动物模型;综述高脂血症(hyperlipidemia)又称脂质代谢紊乱或异常,是导致脂肪肝、动脉粥样硬化等多种疾病的重要因素,随着发病率的持续增加,高脂血症的病因学、预防和治疗依然是医学界研究的热点。
然而至今药物治疗尚未取得明显突破,究其原因,除了其它因素而外,高脂血症动物模型的制备也可能是影响该类药物发展的重要原因之一,因此,选择理想的高脂血症动物模型是推进高脂血症研究进程的关键。
本文就近年来高脂血症动物模型的研究概况作一综述,为该领域的研究者正确合理选择高脂血症动物模型提供依据。
1常见高脂血症模型动物的种类及特点1.1 大鼠建立大鼠高脂血症模型,方法简单,成本适中,采血量较大,可以满足一次做多种指标,且模型建立的方法最多。
更重要的是大鼠的食性与人类相似,所形成的病变与人类早期病理改变相似,且适应性较强,是目前国内研究脂质代谢最多的实验动物。
但大鼠有对抗动脉粥样硬化形成的能力,不宜作为抗动脉粥样硬化药物的筛选。
1.2 小鼠小鼠模型的制造成本很低,采样较方便,可作为降脂药初筛的模型,但是采血量少,限制了指标的检测。
在高血脂和动脉粥样硬化的转基因动物模型的研究中,小鼠占有重要地位,其主要原因是由于小鼠除了有遗传学上明确的野生品外,尚有多种突变型和重组型的品种以及日渐成熟的基因定位技术。
1.3兔作为高脂血症的模型动物,其优点在于极易形成高脂血症模型,特别是高胆固醇血症,柳玉霞等报道,采用高脂饲料喂养法,家兔2～3周可形成高脂血症,而大鼠需要4周,且家兔TC值增长幅度比大鼠要大,但家兔是草食动物,和人类的胆固醇代谢不完全一致,且耗费饲料,灌胃给药操作不便,易造成死亡。
1.4 金黄地鼠和豚鼠在胆固醇合成、代谢方面,受体、非受体转运途径的比例与人类较为相近,对食物中脂质和调节血脂功效成分的反应更接近于人,又具成本较低、造模时间较短的优点,因此目前国际上在血脂代谢的研究中趋向于采用豚鼠和(或)金黄地鼠来建立高脂模型,但金黄地鼠血量少,尾部采血困难,性情凶猛等给实验造成困难。
高血脂大鼠模型饲料特点与选择
高血脂症通常选取大鼠来作为造模对象，下面简述几点大鼠高血脂造模要点：
1、大鼠高血脂症分为三个类型
① 高甘油三酯血症。
即血脂各项指标中，血浆(血清）甘油三酯（TG）升高，而胆固醇没有明显升高。
② 高胆固醇血症。
即血脂各项指标中，血浆(血清）总胆固醇（TC）升高，而甘油三酯没有明显升高。
③ 混合型高脂血症。
即血脂各项指标中，甘油三酯和胆固醇都升高。
2、大鼠高血脂症模型造模周期
不同模型饲料需要的喂养时间是有差别的。
对于其中任何一种模型饲料，其喂养时间取决于血脂的改变过程、动物的具体情况以及所需要的血脂相关指标改变的程度等因素综合决定的。
3、大鼠高血脂症模型复制对血样和测定的要求
① 取血时间
应当是在空腹状态取血，就是大鼠应当在撤除饲料后16-24小时。
上午取血
③ 血样测定时间
取血样后应当对新鲜血样标本即时或当天测定，不能冷藏保存后测定。
4、高血脂症模型饲料的选择
① 如用于研究药物、保健食品或某种功能因子作用效果的观察，应注意避免选择血脂升高幅度过大、升高过快的模型饲料，否则，可能不容易发现功效。
② 如果是复制与高血脂症并发症相关联的高血脂症模型
应当了解高血脂症并发症模型（如，动脉粥样硬化模型，脂肪肝模型，胰腺炎模型等等）复制的模型饲料，尽可能用这样的模型饲料来复制高血脂症，通过控制喂养周期来开展高血脂症的研究。
高脂血症动物模型的制作及详细方法造模机制长期喂饲高脂饮食，增加胆固醇和甘油三酯的摄入量，增加血浆富含胆固醇和富含甘油三酯脂蛋白，是高脂血症模型的造模机制。
还有一些特殊的高脂血症模型，如:静脉注射TritonWR-1339可以抑制IPL活性，形成-过性高甘油三酯血症;橄榄油灌胃或脂肪乳静脉注射,也能形成一过性高甘油三酯血症。
诱导糖尿病后，一般也伴有高甘油三酯血症。
[造模方法]1.高脂饮食喂饲法高脂饮食的组成和制作工艺，及喂饲方法在制备高脂血症模型时起到了关键作用。
目前主要有两种饲料:合成饲料和混合饲料。
因为天然物质混合饲料无法完全具备动物所需全部营养成分和能量需求，质量无法控制，合成饲料已经成为上公认和通用的诱导高脂血症的饲料。
合成饲料通过能量比添加各种营养成分,不同配方能够提供动物不同能量需求，使得实验对照更加严格，如ResearchDietsIne.标准“西方饮食”(胆固醇0.15%，脂肪21%）国内主要以混合饲料的基础饲料为主,再添加猪油和胆固醇来诱导高脂血症,混合后直接眼饲粉料排除了加工过程的不确定因素,效果较好。
由于进食量以及能量消耗对饮食诱导的动物模型影响非常大,所以造模和实验过程中这两方面的严格控制都是必要的，需要保持饲养环境的一致性，需要代谢笼来测定动物的代谢指标。
2. Triton WR-1339尾静脉注射法此法-般用于小鼠、大鼠和地鼠.Triton WR-1339是表面活性剂，给予- - 次性尾静脉注射800mng/kg,血浆甘油三酯线性上升，至2小时达到高峰。
该方法对动物本身损伤较大，一般诱导后不再用于别的实验。
3.橄榄油灌胃法和脂肪乳静脉注射法一般根据动物种类，如小鼠和大鼠，这两种方法均可使用。
家兔一般用静脉注射脂肪乳，小型猪一般用橄榄油灌胃，而地鼠灌胃比较方便，静脉注射需要特殊部位。
橄榄油一般根据动物的胃容量，适当给子灌胃,不同动物血浆甘油三酯水平高峰时间基本都在3~5小时。
高脂血症模型的建立和降血脂作用的研究1.1、材料SD大白鼠（120-200g）、降血脂药物。
1.2、仪器与试剂离心沉淀器（4000r/min）、高速离心机（6000~12000r/min）、752紫外可见光分光光度计、盘称、注射器（5mL），大鼠灌胃器。
NaOH试液、10%AlCl3、5%NaHNO2、FeC13贮存液、显色剂、胆固醇标准贮存液，胆固醇标准应用液。
1.3、试剂的配制1.3.1、5%亚硝酸钠溶液取2.5 g亚硝酸钠，加水使溶解成50mL，即得。
1.3.2、氢氧化钠试液称取氢氧化钠4.3 g，加水使溶解成100mL，即得。
1.3.3、FeC13贮存液取FeC13 2.5 g，研碎后溶于87%浓磷酸，加至100mL，盛棕色瓶中，放室温下暗处保存。
1.3.4、胆固醇标准贮存液精确称取胆固醇（重结晶）200.8mg，溶于无水乙醇稀释至100mL，贮冰箱内备用。
1.3.5、胆固醇标准应用液准确吸取上述贮存液2mL，用无水乙醇稀释至100mL，贮存冰箱内，用时预温至室温。
1.3.6、显色剂取胆固醇标准用液8mL，加浓硫酸至100mL混合，放暗处保存，有沉淀，需重配。
1.4、方法1.4.1、胆固醇的测定方法乙醇提取，高铁-硫酸显色法。
1.4.2、血清的制备方法取轻微麻醉过的大白鼠，从眼眶后静脉丛用毛细管采血0.5mL，放入用肝素处理过的离心管中，用6000r/min高速离心机离心3min，灰黄色的上清液为血清。
1.4.3、基本原理用无水乙醇沉淀血清蛋白质，再加显色剂使胆固醇与浓硫酸及高铁离子反应生成稳定的紫红色物质，该物质在550nm处有最大的吸收，与同样处理的标准液对照比色，计算胆固醇含量。
1.4.4、测定液配制取带塞离心管一只，准确加入血清0.1 mL，再对血清吹入无水乙醇4.9 mL，使蛋白质分散成微细的颗粒沉淀，加塞，用力振摇0.5min，放置10min后再振摇混合，以2000 r/min离心10 min，取上清液备用。
大鼠高脂血症的造模成功依据
1. 实验设计，在进行大鼠高脂血症的造模实验时，首先需要设计合理的实验方案。
这包括选择合适的大鼠品系和数量、确定高脂饮食的成分和摄入量、以及确定实验的时间点和观察指标等。
2. 高脂饮食的制备，高脂饮食是诱导大鼠高脂血症的关键因素之一。
通常包括高脂肪、高胆固醇和高糖等成分，通过饲喂这种饮食可以模拟人类高脂血症的发生过程。
3. 生化指标的检测，造模成功的关键是观察大鼠体内的生化指标是否符合高脂血症的特征。
这些指标包括血清中的总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇等血脂水平，以及血糖、胰岛素、C 反应蛋白等相关指标。
4. 组织病理学检测，除了生化指标，还需要对大鼠的组织进行病理学检测，观察其动脉粥样硬化的形成情况，包括动脉壁厚度、斑块形成等情况，以验证高脂血症的病理生理学变化。
5. 实验重复和统计学分析，为了确保实验结果的可靠性，通常需要重复进行多次实验，并对数据进行统计学分析，以确保模型的
稳定性和可重复性。
综上所述，大鼠高脂血症的造模成功依据需要从实验设计、饮食制备、生化指标检测、组织病理学检测以及实验重复和统计学分析等多个方面进行综合评估，确保模型的可靠性和稳定性。
畜 牧 兽 医农业开发与装备 2013年第10期目前国内外科学家研究人类的高脂血症及脂质代谢时，最常实验大鼠建立模型动物[1]。
科研工作者通过建立相关的实验动物模型可以简便的从病因、病程发展等方面研究疾病。
本次实验采用大鼠摄食高脂饲料的方法以建立高血脂大鼠模型，与陈育尧等[2]报道的各项数据相比较，为新疆建立大鼠高血脂模型提供可靠科学数据。
1 实验材料1.1 实验动物新疆实验动物研究中心提供SD大鼠，30只全部雄性，体重约为180至220g。
1.2 实验试剂①胆固醇：山东泰山生化原料，批号130814。
②丙硫氧嘧啶片：辽宁康博士制药有限公司，批号120125。
③猪胆酸钠：山东泰山生化原料，批号131230。
④10%中性福尔马林。
⑤10%的乌拉坦。
1.3 实验仪器光学显微镜，全自动生化分析仪，电子天平。
2 实验方法2.1 高脂饲料的制备高脂饲料配方胆固醇（2%），猪油（12%），丙基硫氧嘧啶（0.2%），猪胆酸钠（0.5%），基础鼠料（85.3%）[1]（新疆实验动物研究中心）。
将原料充分搅拌混匀，压制成颗粒，经60CO辐照消毒备用。
2.2 实验动物分组将30只大鼠随机分为对照组及高脂饲料组。
对照组大鼠饲喂普通大鼠鼠料，高脂模型组则饲喂制作好的高脂饲料，两组均自由摄食，自由饮用纯净水。
动物造模3周，实验结束前1天晚上禁食不禁水，次日上午腹腔注射10%的乌拉坦，麻醉后采血，血样送新疆维吾尔自治区传染病医院检验科检测血脂基本项目。
2.3 实验大鼠肝脏病理学检查光镜观察取血后立即处死大鼠，先用肉眼观察肝脏，后称肝湿重，切片，固定，染色，利用光学显微镜（400倍）观察肝脏细胞变化。
2.4 数据处理采用SPSS 11.0，两组比较采用多个样本资料的单因素方差分析，检验水准α=0.05。
3 实验结果3.1 两组实验动物血清生化指标变化比较实验前两组动物血清TC、TG、HDL－c、LDL－c之间差异无统计学意义（P＞0.05）。
实验性高脂血症动物模型比较分析高脂血症是诱发脂肪肝、动脉粥样硬化、高血黏、冠心病及脑卒中等病的重要危险因素。
近年来，随着高脂血症的发病率逐年升高和低龄化趋势增加及其心脑血管并发症等日益明显。
高脂血症的病因病机、预防治疗及降脂新药的研究开发成为了医药学界的研究热点。
为了有效寻找高脂血症的发病机制和防治措施及中药治疗药物，选择理想的高脂血症动物模型复制方法、制备适合能展示中药特色优势的动物模型尤为重要。
然而高脂血症动物模型的复制成功与否是实验性高脂血症研究的关键之一。
理想的高脂血症动物模型应该是与人类疾病接近，在高脂血症发病过程中的生理、生化反应也尽可能与人类相一致，模型复制可重复，且试验操作简单、实验成本相对较低、易于推广；模型复制成功与否直接影响整个实验过程的准确性和结果的可靠性。
该文就实验性高脂血症动物模型复制方法的研究进行比较分析，为降血脂中药新药研发者合理有效的选择高脂血症动物模型复制方法提供参考和依据。
标签：高脂血症；动物模型；复制方法[Abstract]Hyperlipidemia is a major risk factor for fatty liver，atherosclerosis，hyperviscosily，coronary artery disease and acute myocardial infarction. In recent years，the incidence of hyperlipidemia was gradually increased and showed younger trend. It has been a research hot point to study the etiology and pathogenesis of hyperlipidemia and develop a new drug reduced blood lipid. It is very important to prepare the animal model of hyperlipidemia for displaying the advantage of traditional Chinese medicine characteristic. However，the success of replicating animal model of hyperlipidemia is one of the key of research in experimental hyperlipidemia. The ideal animal model of hyperlipidemia should be similar to human disease，high repeatability，simple and high generalization. It will affect the reliability of the results and the accuracy of the whole experiment process to copy successfully animal models of hyperlipidemia. This review focused on the recent research progress on copying methods of animal models of experimental hyperlipidemia，which will provide reference and basis for the hypolipidemic developers who choose rationally and effectively replication methods of hyperlipidemia animal models.[Key words]hyperlipidemia；animal models；replication methodsdoi：10.4268/cjcmm20162002高脂血症又称为血脂异常或脂代谢紊乱，是指血清中胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）过高和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）过低，它是引起心脑血管发病的重要危险因素之一[1-2]。
高脂血症大鼠模型几种造模方法的比较孙赫;李文雄【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2014(000)003【摘要】通过4种具有代表性的造模方法诱导高脂血症大鼠模型，筛选出理想的高脂血症造模方法。
将健康SPF级雄性SD大鼠50只随机平均分为空白组、模型组Ⅰ～Ⅳ。
空白组正常基础饲料喂养；各模型组分别采用高脂饲料喂养和高脂乳剂灌胃法诱导造模，模型组Ⅰ：基础饲料59％＋食用油15％＋蛋黄粉10％＋蔗糖10％＋胆固醇6％；模型组Ⅱ：基础饲料56．8％＋食用油15％＋蛋黄粉10％＋蔗糖10％＋胆固醇6％＋胆酸钠2％＋丙基硫氧嘧啶0．2％；模型组Ⅲ：正常饲料喂养配合高脂乳剂灌胃（高脂乳剂配方：吐温60％＋食用油15％＋胆固醇6％＋胆酸钠2％＋丙基硫氧嘧啶0．2％）；模型组Ⅳ：一次性腹腔注射维生素D360万单位/kg后，饲养与灌胃方法同模型组Ⅲ。
在造模10、20、40 d时经大鼠眼眶静脉丛取血，提取血清，检测血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）并计算肝指数水平。
其中模型组Ⅱ、模型组Ⅲ和模型组Ⅳ均出现血脂代谢紊乱，肝指数明显升高（P ＜0．05），提示高脂血症模型构建成功，且模型组Ⅳ造模周期明显较模型组Ⅱ、Ⅲ缩短。
%To screenr an ideal method which can build hyperlipidemia rat model out of different modeling methods,we divided 50 rats stochastically as the blank group,the model groupⅠ,the modelgroupⅡ,the model groupⅢ and the model groupⅣ,10 rats in each group.Except the blank group,four different mod-eling methods were usedto build hyperlipidemia rat models.GroupⅠ:basal diet(5 9%)+ edible oil(1 5%)+ yolk powder(10%)+ sucrose (10%)+ cholesterol(6%);Group Ⅱ:basal diet(56.8%)+ edible oil (15%)+ yolk powder(10%)+ sucrose (10%)+ cholesterol(6%)+ sodium cholate(2%)+ propyl-thiouracil(0.2%);Group Ⅲ:normal diet respectively with intragastric administration of fat emulsion (fat emulsion formulation:Tween(60%)+ edible oil(15%)+ cholesterol(6%)+ sodium cholate(2%)+propylthiouracil(0.2%));Group Ⅳ:before in tragastric administration of fat emulsion-the same as model group Ⅲ,give an intraperitoneal injection of vitamin D3 60 000 U/kg.We took the orbital venous plexus blood of all the rats in 10 d,20 d and 40 d,isolated sera then detected the levels of TC,TG,HDL-C and LDL-C by ELISA,and detected the levels of body weights and the liver indexes of rats in each group.The results showed that rats became hyperlipoidemic in groups Ⅱ,ⅢandⅣ,and the hyperlipidemia model was formed pared with model group Ⅱ and group Ⅲ ,the modeling time of group Ⅳ was sig-nificantly reduced.【总页数】5页(P78-82)【作者】孙赫;李文雄【作者单位】广州中医药大学第三临床医学院，广东广州 510405;广州中医药大学第三临床医学院，广东广州 510405【正文语种】中文【中图分类】R332【相关文献】1.大鼠实验性高脂血症两种造模方法的比较 [J], 张智;闪增郁;向丽华;陈燕萍;李爽姿;张雪亮2.大鼠实验性高脂血症五种造模方法的比较 [J], 张东;武海军;陈士萍;应康;杨玉梅3.大鼠与家兔高脂血症模型造模方法及特点的比较 [J], 柳玉霞;王学林;李树良;杨旭丽4.高脂血症大鼠模型几种造模方法的筛选及优化 [J], 孙赫;梁桂洪;林勇凯;黄宇新5.高脂血症大鼠模型4种造模方法的筛选及优化 [J], 吴栩;韦伟标;刘少斌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
