实验一-实验室环境和人体表面的微生物检查

实验一：实验环境和人体表面微生物检查班级：生命科学院00级姓名：00学号：000000000000同组人：00【实验目的】1.证实实验环境与人体表面有微生物；2.体会无菌操作的重要性；3.观察不同类群微生物的菌落形态特征。

【实验原理】如何使我们周围的微生物从“看不见”变得“看得见”呢？通过放大微生物个体，是我们能看见它们；另一种方法是通过“放大”菌落，是我们看到他们的存在。

即通过培养的方法使肉眼看不见的单个菌聚集在固体培养基上，经过生长繁殖形成几百万个菌聚集在一起的肉眼可见的菌落，来检查实验室环境和人体表面微生物，从而使我们牢固树立无菌概念。

平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源的样品接种于培养基上，在适宜温度下培养，每一菌体可以通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落。

每一种菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小，表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑、边缘整齐或不整齐，菌落透明或半透明，颜色以及质地疏松或紧密等。

因此可以通过平板培养基来检查环境中细菌的数量和类型。

【实验器材】配培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂平板；仪器及其他用品：酒精灯、500ml量筒、500ml锥形瓶、试管2、培养皿20、记号笔、火柴等。

【实验内容】1.灭菌：高温蒸汽灭菌。

将锥形瓶用棉塞塞好、牛皮纸包好，培养皿十个一组包好，两只试管内装半管水，用棉塞塞好并用牛皮纸包好放入指定仪器中灭菌。

2.倒平板右手持盛培养基的锥形瓶置酒精灯火焰旁边，用左手将瓶塞轻轻拔出，瓶口保持对着火焰；左手持培养皿并将皿盖在火焰旁打开，迅速倒入培养基15ml，加盖后轻轻摇动培养皿，然后平置于桌面上，待凝后即为平板。

3.采集微生物左手持试管，用右手手掌边缘及小指拔出试管塞，将棉签浸入无菌水浸湿，在选取的地点擦拭。

左手持培养皿在火焰附近打开，用棉签在平板上涂抹。

完毕后平置于桌面。

空气中6套（3套5分钟，3套10分钟）；桌面上3套；洗手前3套，洗手后3套；自选3套（本组选十元纸币）。

实验二实验室环境和人体表面微生物的检查生科15.2周罡201500181104【实验目的】1.证实实验室环境与人体表面存在微生物。

2.体会无菌操作的重要性。

3.了解高压蒸汽灭菌的原理和应用范围，学习高压蒸汽灭菌的操作技术。

4.观察不同类群微生物的菌落形态特征。

5.比较不同场所与不同条件下细菌的数量和类型。

6.掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术。

【实验原理】通过培养的方法使肉眼看不见的单个菌体在固体培养基上，经过生长繁殖形成几百万个聚集在一起的肉眼可见的菌落。

平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源的样品接种于培养基上，在37℃温度下培养，1—2天内每一菌体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落。

每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点。

因此，可通过平板培养来检查环境中细菌的数量和类型。

每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小，表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑，边缘整齐或不整齐，菌落透明或半透明或不透明，颜色以及质地疏松或紧密等。

因此，可通过平板培养来检查环境中细菌的数量和类。

值得指出的是从微生物群体中经分离、生长在平板上的单个菌落并不一定保证是纯培养。

因此，纯培养的确定除观察其菌落特征外，还要结合显微镜检测个体形态特征等综合考虑。

有些微生物的纯培养要经过一系列的分离与纯化过程和多种鉴定方能得到。

从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为分离与纯化。

【实验器材】1.溶液和试剂牛肉膏、蛋白胨、NaCl、NaOH溶液、HCl溶液2.仪器和其他用品试管，培养皿，500mL锥形瓶，500mL烧杯，500mL量筒、玻璃棒、胶头滴管、电子秤？、药匙、棉花、纱布、牛皮纸、记号笔、橡皮筋、纸绳、高压蒸汽灭菌锅、pH试纸【实验步骤】1.配制300mL牛肉膏培养基（1）在烧杯中加入300mL蒸馏水（2）依次称量0.9g牛肉膏，3.0g蛋白胨，1.5gNaCl放入烧杯中（3）待其溶解后，调节pH，使其pH值达到7.4~7.6（4）向烧杯中加入6.0g琼脂粉，并将配好的培养基倒入锥形瓶中，并塞上棉塞，瓶口及棉塞用牛皮纸包好2.高温蒸汽灭菌在3支试管中加入蒸馏水，用棉塞塞好，3支试管口用牛皮纸包在一起。

实验室环境和人体表面微生物的检查摘要：微生物多种多样，无处不在。

本次试验初次学习了如何配制培养基和灭菌，并接种了实验室环境和人体表面的微生物，经过一周的培养，用肉眼观察处在各种环境下的微生物菌落的形态特征。

证明了实验室环境和人体表面存在多种多样的微生物，让我们意识到“无菌”和灭菌的重要性，建立“无菌概念”和练习掌握一套过硬的“无菌操作技术”。

关键词：微生物环境培养菌落1前言1.1实验目的：1、证实实验室环境与人体表面存在微生物。

2、体会无菌操作的重要性。

3、观察不同类群微生物的菌落形态特征。

4、练习掌握无菌操作技术。

1.2实验原理：通过培养的方法使肉眼看不见的单个菌体在固体培养基上经过培养繁殖形成肉眼可见的菌落。

2材料与方法2.1材料2.1.1溶液及试剂牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂条、无菌水，NaOH溶液及HCl溶液2.1.2仪器和其他用具培样皿、三角瓶、试管、烧杯、接种环、酒精灯、记号笔、牛皮纸、灭菌棉签、试管架、废物缸等。

2.2方法与步骤2.2.1 牛肉膏蛋白胨培养基制备（见表1）。

步骤：称量→熔化→调PH表1：牛肉膏蛋白胨培养基实际用量（注：调PH到 7.0~7.2）试剂牛肉膏蛋白胨NaCl 琼脂水用量 1.5g 5g 2.5g 10g 500ml2.2.2 实验步骤步骤内容备注1高压灭菌：1.将三角瓶与装入5-10ml无菌水的2支试管塞入棉塞并用牛皮纸线绳包扎，将20个培养皿用牛皮纸包好；2.放入灭菌锅开始灭菌。

121℃灭菌20min2琼脂平板制备：1.将培养基冷却后，右手拿三角瓶，左手拿出棉塞，并快速将瓶口靠近火焰。

2.右手拿锥形瓶，左手拇指与食指将培养皿打开一道缝隙，右手将三角瓶的培养基倒入培养皿中，左手立即盖上培养皿盖。

3.冷到培养皿，接种时，三角瓶口和半开的培养皿均要保持在火焰旁，保证无杂菌进入。

却培养皿。

3接种：1.取棉签并用无菌水蘸湿。

2.用湿棉签分别擦拭手掌，桌面，门把手等（详见表2），并将6个培养皿置于空气中不同的时间。

实验一实验室和人体表面微生物的检查一实验目的1 证明实验室环境与体表存在微生物2 比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型3 体会无菌操作的重要性二实验原理平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源的样品接种于培养基上，在适宜温度下培养，1-2d内每一菌体能通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落。

每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小、表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑等。

因此可通过平板培养基来检查环境中微生物的数量和类型。

三、器材1、培养基牛肉膏蛋白胨琼脂平板2、仪器或其他用具无菌水、灭菌棉签（装在试管内），接种环，试管架，酒精灯，记号笔，废物缸。

四、操作步骤1、写标签任何一个实验，在动手操作前均需首先将器皿用记号笔做上记号（包括班级、姓名、日期、样品来源等），字尽量小些，写在皿底的一边，不要写在当中，以免影响观察结果。

注：培养皿的记号一般写在皿底上，如果写在皿盖上，同时观察两个以上培养皿的结果，打开皿盖时容易混淆。

2、实验室细菌检查（1）空气将一个肉膏蛋白胨琼脂平板放在实验台上，移去皿盖，使琼脂培养基表面暴露在空气中，将另一块肉膏蛋白胨琼脂平板放在洁净工作台内或无人走动的实验室中，移去皿盖，1h后盖上两个皿盖。

（2）实验台①用记号笔在皿底外面中央画一直线，再在此线中间处画一垂直线。

②取棉签左手拿含有棉签的试管，在火焰旁用右手的手掌边缘和小指、无名指夹持棉塞，将其取出，将管口很快地通过酒精灯的火焰，烧灼管口；轻轻地倾斜试管，用右手的拇指和食指将棉签小心地取出。

放回棉塞，并将空试管放在试管架上。

③弄湿棉签左手取灭菌水试管，如上法拔出棉塞并烧灼管口，将棉签插入水中，再提出水面，在管壁上挤压一下以除去过多的水分，小心将棉签取出，烧灼管口，放回棉塞，并将灭菌水试管放在试管架上。

④取样将湿棉签在实验台面或门旋钮上擦拭约2cm2的范围。

⑤接种在火焰旁用左手拇指和食指或中指使平皿开启成一缝。

一、实验目的本次实验旨在探究人体皮肤表面的细菌分布情况，了解不同部位的皮肤上细菌的种类和数量，以及不同条件下细菌生长和分布的差异。

二、实验原理皮肤作为人体最大的器官，表面存在着大量的微生物，其中以细菌最为常见。

细菌在皮肤表面的分布受多种因素影响，如皮肤类型、环境条件、个体差异等。

本实验通过取样、培养、观察和计数等方法，分析不同部位的皮肤细菌分布情况。

三、实验材料与仪器1. 材料：- 皮肤样本：手臂、背部、面部、颈部等- 无菌棉签- 无菌生理盐水- M-H琼脂培养基- 血平板- 恒温培养箱- 显微镜- 计数器2. 仪器：- 电子天平- 灭菌锅- 酒精灯- 培养皿- 移液器四、实验方法1. 取样：- 使用无菌棉签分别擦拭手臂、背部、面部、颈部的皮肤表面。

- 将棉签尖端浸入无菌生理盐水中，轻轻摇匀，使细菌悬浮。

2. 制备平板：- 将M-H琼脂培养基和血平板置于37℃恒温培养箱中预热。

- 使用移液器吸取适量悬浮液，均匀涂布于平板表面。

3. 培养：- 将涂布好的平板倒置于37℃恒温培养箱中培养24小时。

4. 观察与计数：- 使用显微镜观察平板上的菌落，记录不同部位的皮肤细菌数量。

- 对菌落进行分类，如革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌等。

五、实验结果1. 细菌分布情况：- 手臂、背部、面部、颈部的皮肤表面均存在细菌。

- 手臂和背部的细菌数量相对较多，面部和颈部的细菌数量相对较少。

2. 菌落分类：- 革兰氏阳性菌：如葡萄球菌、链球菌等。

- 革兰氏阴性菌：如大肠杆菌、变形杆菌等。

六、实验分析1. 皮肤类型：- 皮肤类型对细菌分布有一定影响。

例如，油性皮肤的细菌数量相对较多，而干性皮肤的细菌数量相对较少。

2. 环境条件：- 环境条件如温度、湿度、光照等也会影响细菌生长和分布。

例如，温暖潮湿的环境有利于细菌生长。

3. 个体差异：- 个体差异如年龄、性别、健康状况等也会影响皮肤细菌分布。

例如，儿童和老年人的皮肤细菌数量相对较多。

实验三环境微生物的检测一、实验目的1.了解周围环境中微生物的分布情况;2.懂得无菌操作在微生物实验中的重要性;3.了解四大类微生物的菌落特征;二、实验原理在我们周围的环境中存在着种类繁多的、数量庞大的微生物;土壤、江河湖海、尘埃、空气、各种物体的表面以及人和动物体的口腔、呼吸道、消化道等都存在着各种微生物;由于它们体积微小,人们用肉眼无法观察到它们个体的存在;但是只要稍加留意,我们就可以在发霉的面包、朽木上看到某些微生物群体;这些现象表明,自然界只要有微生物可以利用的物质和环境条件,微生物就可以在其上生长繁殖;据此,我们在实验室里就可以用培养基来培养微生物;培养基是用人工配制的、适合微生物生长繁殖和产生代谢产物用的混合养料;其中含有微生物所需要的六大营养要素：碳源、氮源、无机盐、生长因子、气体和水分;此外,根据不同的微生物的要求,在配制培养基时还需用酸液或碱液调节至适宜的pH;配制好的培养基必须进行灭菌;所谓灭菌是指采用各类的物理或化学因素,使物体内外的所有微生物丧失其生长繁殖能力的措施;经过灭菌后的物体是无菌的;消毒是与灭菌完全不同的概念,它是指用较温和的物理因素杀死物体表面和内部病原微生物的一种常用的卫生措施;灭菌的方法较多,广泛使用的是高温灭菌,其中最常用的是高压蒸汽灭菌法;此法是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的;在cm2的蒸汽压力下,温度可达121℃;一般只要维持15~20min,就可杀死一切微生物的营养体和它们的各种孢子;微生物的接种技术是生物科学研究中的一项最基本操作技术;为了确保纯种不被杂菌污染,在整个接种过程中,必须进行严格的无菌操作;在实验过程中必须牢固树立无菌概念,经常保持实验台及周围环境的清洁,严格无菌操作,避免杂菌的污染,这是保证实验成功的必要条件;如将微生物接种到适合其生长的固体培养基表面,在适宜的温度下一般细菌37℃：霉菌等28℃,培养一段时间一般24~48h后,少量分散的菌体或孢子就可生长繁殖成肉眼可见的细胞群体,此即菌落;如平板上的菌落是由单个细胞或单个孢子生长繁殖而成的,就是一个纯种细胞群或克隆；若培养后大量菌落聚集在一起形成的为菌苔;不同种的微生物可形成大小、形态各异的菌落,根据微生物菌落形态的不同,可初步鉴别出四大类微生物：细菌、放线菌、酵母菌和霉菌;细菌的菌落呈圆形、较小而薄、透明或不透明、质地“细腻”,有的具有色泽,有的边缘不整齐,有的表面湿润、光滑,有的表面干燥有褶皱;此外,细菌常因分解含氮化合物而产生臭味;酵母菌的菌落通常比细菌菌落大,圆形、厚、不透明、色素单一,多为乳白,少数为橙或红色;酵母菌因普遍能发酵含碳有机物产醇,故菌落多伴有酒香味;防线菌菌落小而致密,或坚硬、或呈粉状;不少放线菌还产生特殊的土腥味;霉菌菌落大而疏松、或大而紧密;气生菌丝会发育形成一定形状、构造和色泽的子实器官,所以菌落表面往往有肉眼可见的构造和颜色;三、实验材料人体表和空气中的微生物;四、实验器材与试剂1.器材恒温培养箱、无菌平皿、电炉、酒精灯、火柴、无菌棉签和记号笔;2.试剂牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、酵母膏葡萄糖培养基简称YPD、高氏一号培养基和查氏培养基;五、实验操作I.融化培养基将装有无菌培养基的三角瓶置水浴中煮沸,待培养基融化后取出,当冷至50~60℃左右时,进行下一步;II、倒平板有持皿法和叠皿法,操作要点如下：1.持皿法1将无菌培养皿叠放在酒精灯左侧,以便拿取;2点燃酒精灯;3酒精灯旁,左手握三角瓶底部,倾斜三角瓶,右手旋松棉塞,用右手小指与小尾鱼际即小指边缘夹住棉塞并将其拔出切勿将棉塞放在桌上,随之将瓶口在火焰上过一下不可灼烧,以防爆裂,以杀死可能沾在瓶口的杂菌;然后将三角瓶从左手换至右手用拇指、食指和中指拿住三角瓶的底部;操作中瓶口应保持在火焰2~3cm,瓶口始终向着火焰,以防空气中微生物的污染;左手拿起一套平皿,用无名指和小指托住皿底,用中指和拇指夹住皿盖,食指于皿盖上为支点,在火焰旁,打开皿盖,让三角瓶伸入,随后倒入培养基;一般倒入15ml左右培养基即可铺满整个皿底;盖上皿盖,置水平位置待凝;然后将三角瓶移至左手,瓶口在次过火并塞紧瓶盖;2. 叠皿法此法适于在超干净台上操作,基本步骤同持皿法;不同之处是左手不必持皿,而是将瓶皿叠放在酒精灯的左侧并靠近火焰;按上述方法用右手拿三角瓶,左手打开最上面的皿盖,倒入培养基,盖上皿盖后即移至水平位置待凝;再依次倒下面的平皿;操作中瓶口始终向着火焰,以防空气中微生物的污染;III、贴标签待培养基完全凝固后,在皿底帖上标签,注明检测类型,组别及日期也可用记号笔书写在皿底IV、检测方法环境中微生物种类多样,检测方法也各异,先选几种列举如下：1.空气检测实验室空气中的微生物时,只要打开无菌平板的皿盖,让其暴露在空气中一段时间5~10min然后将皿盖盖上即可;2.桌面检测实验台桌面微生物是,可用一根无菌棉签,先在无菌平板的图4-1 含菌棉签平板划线示意图左：开启皿盖法右：划线示意图一个区域内湿润和试划几下,然后用其擦抹桌面等物体表面,在以此棉签在平板的另一区域作来回划线接种如图4-1;本操作应以无菌操作要求进行,即在火焰旁用左手拿起平板,用中指无名指和小指托住皿底部,用食指和大拇指夹住皿盖并开成一缝,右手持棉签在培养基表面划线接种,无菌棉签湿润和试剂区可作为无菌对照;3.头发移去放在桌面上的无菌平板的皿盖,是头发部位位于平板的上方,并用手指拨动头发数次,在盖上皿盖即可;4.手指可用未洗的手指先在无菌平板的培养基一侧约一半的面积作划线接种,并在皿底作好标记;然后用肥皂、流水洗手,用洗净的手指于平板培养基的另一侧作同样的划线接种,盖好皿盖;待培养后比较两杂菌生长的情况;5.口腔打开无菌平板培养基的皿盖,使口对着平板培养基的表面,以咳嗽或打喷嚏的方式接种,然后盖上皿盖;V、培养将以上各种检测平板倒置于28℃培养箱中培养,至下周实验时观察并计数各平板上的菌落数;VI、观察注意观察不同类型菌落的大小、外形和颜色等特征,将观察结果记录在实验报告上;VII、清洗观察记录完毕后,将含菌平板放在沸水中煮30min以上,杀死培养基表面生长的各种微生物,然后清洗并晾干培养皿;六、思考题1.通过本实验后,谈谈你对微生物的分布以及数量的认识;2.本实验中那些步骤属无菌操作为什么3.如何描述菌落的形态特征。

实验室环境和人体表面的微生物检查作者：郭森地址：山东大学生命科学学院微生物楼341微生物实验室摘要：这次我们在实验室里进行了培养基的制作和一些简单的微生物接种，目的是熟悉微生物实验的操作并了解无菌操作的重要性。

首先我们组一共制作了十二个肉膏蛋白胨琼脂平板培养基，对微生物实验的基本操作有了一定的接触和掌握；之后，分别对制作的平板培养基作了保留空白、放置空气和用棉棒沾取环境获取微生物等处理；经过大约两天左右的恒温培养，可以观察到除了空白对照以外，其他十一个培养基都生长着各式各样的菌落。

该现象表明，在空气、地面等环境和人体表面环境中存在着大量的微生物。

所以，无菌操作是微生物实验中极其重要的一个环节。

关键词：实验室环境；人体表面：肉膏蛋白胨琼脂平板；微生物接种；恒温培养前言：这次实验要确定我们周围环境和人身体表面的确存在着大量的微生物，并对其进行初步的观察，同时熟悉一下微生物实验的操作。

众所周知，微生物无处不在，从看似很脏的地面到透明无色的空气再到我们的身体上都分布着数不清的各种各样的微生物，因此我们从环境获取微生物，希望从这些环境中微生物的数量和形态观察出实验室环境中微生物的大体情况，体会无菌操作的重要性。

这次实验我们是采取将看不见的微生物“放大”成子细胞群体即菌落的方法确认和观察微生物的，即使用牛肉膏蛋白胨平板培养基，其中四个分别暴露在空气中保持不同的时间，其他是使用消毒后的棉棒分别在地面、实验台、手指、空腔内壁、无菌水、自来水和纸币上沾取后，在酒精灯旁按压到培养基平板上，之后将所有培养基放到恒温培养箱中恒温培养大约两天的时间。

本实验报告先介绍了本次实验的实验材料与方法，然后是对实验的结果与分析进行描述，最后是总结性的小结部分。

1材料与方法1、1 材料1、1、1 培养基肉膏蛋白胨琼脂平板。

1、1、2 溶液和试剂无菌水。

1、1、3 仪器和其他用品灭菌棉签（装在试管内），试管架，煤气灯或酒精灯，记号笔和废物缸等。

一、目的要求1．证明实验室环境与体表存在微生物。

2．比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型。

3．体会无菌操作的重要性。

二、基本原理平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源的样品接种于培养基上，在37℃温度下培养，1—2天内每一菌体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落。

每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小，表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑，边缘整齐或不整齐，菌落透明或半透明或不透明，颜色以及质地疏松或紧密等。

因此，可通过平板培养来检查环境中细菌的数量和类型。

三、器材肉膏蛋白胨琼脂平板，无菌水，灭菌棉签（装在试管内），接种环，试管架，酒精灯或煤气灯，记号笔（或蜡笔），废物缸。

四、操作步骤每组在“实验室”和“人体”两大部分中各选择一个内容做实验，或由教师指定分配，最后结果供全班讨论。

1．写标签任何一个实验，在动手操作前均需首先将器皿用记号笔做上记号，培养皿的记号一般写在皿底上。

如果写在皿盖上，同时观察两个以上培养皿的结果，打开皿盖时，容易混淆。

用记号笔写上班级、姓名、日期，本次实验还要写上样品来源（如实验室空气或无菌室空气或头发等），字尽量小些，写在皿底的一边，不要写在当中，以免影响观察结果。

2．实验室细菌检查（1）空气将一个肉膏蛋白胨琼脂平板放在当时做实验的实验室，移去皿盖，使琼脂培养基表面暴露在空气中；将另一肉膏蛋白胨琼脂平板放在无菌室或无人走动的其他实验室，移去皿盖。

一小时后盖上两个皿盖。

（2）实验台和门的旋钮（a）用记号笔在皿底外面中央画一直线，再在此线中间处画一垂直线，如图Ⅱ-1。

（b）取棉签左手拿含有棉签的试管，在火焰旁用右手的手掌边缘和小指、无名指夹持棉塞（或试管帽），将其取出（图Ⅱ-2，B），将管口很快地通过煤气灯（或酒精灯）的火焰，烧灼管口；轻轻地倾斜试管，用右手的拇指和食指将棉签小心地取出（图Ⅱ-2，C）。

环境细菌检测实验报告1. 引言细菌是一类微生物，广泛存在于自然界的水、土壤、空气以及人体内。

一些细菌对人类有益，如帮助消化食物和产生某些药物。

然而，某些细菌也会引发疾病，因此对环境中细菌的检测和监测显得尤为重要。

本实验旨在利用培养基和分析方法检测环境中的细菌。

2. 实验步骤2.1 样品收集我们在实验室附近的公共区域收集了5个环境样品：地面上的灰尘、树木表面的叶片、餐厅的桌面、洗手间的水龙头和室外的空气。

为了避免污染，在收集样品时我们使用消毒过的玻璃器皿，并戴上一次性手套。

2.2 细菌培养将每个样品均匀地涂抹在培养基上，然后将其封闭并放入恒温培养箱。

我们选择了三种常用的培养基：营养琼脂、大肠杆菌选择琼脂和青霉素抗生素琼脂。

这样可以检测出不同类型的细菌。

2.3 培养基分析在培养基上观察细菌的生长情况，并记录下培养基上出现的菌落数量和形态。

我们使用显微镜观察了一部分菌落，并进行了染色处理，以便进一步观察细菌的形态特征。

2.4 细菌鉴定通过比对已有的细菌数据和形态特征描述，我们尝试对鉴定出的细菌进行分类和命名。

这一步需要进行详细的实验室测试和专业知识的支持。

2.5 数据分析我们将不同类型的细菌数量进行比较，并计算出每个样品中的平均细菌数。

同时，我们还进行了细菌的相对丰度分析，以了解不同样本中主要细菌的种类。

3. 结果与讨论3.1 细菌培养结果在营养琼脂培养基上，我们观察到灰尘和叶片样品上有大量的菌落形成，而餐厅桌面、洗手间水龙头和室外空气样品上的菌落较少。

在大肠杆菌选择琼脂培养基上，我们只在灰尘样品上观察到了大肠杆菌的菌落。

而在青霉素抗生素琼脂培养基上，我们没有观察到任何菌落。

3.2 细菌鉴定结果通过对菌落的形态特征进行比对，我们初步鉴定了一些细菌的类型。

例如，在灰尘样品上的细菌有圆形、白色的菌落。

然而，对于一些未知特征的细菌，我们将需要进一步的实验和鉴定。

3.3 数据分析结果根据数量和相对丰度数据的分析，我们发现灰尘样品中的细菌数量最多，占总菌落数的60%，并且主要是常见的环境细菌。

实验2 实验室环境和人体表面的微生物检查13生物基地刘洋201300140059一、实验目的1.证实实验室环境与人体表面存在微生物2.体会无菌操作的重要性3.观察不同类群微生物的菌落形态特征4.掌握生理生化反应培养基的配置原理和一般方法步骤5.巩固无菌操作技术二、实验器材1.肉膏蛋白胨琼脂平板牛肉膏1.05g、蛋白胨3.5g、NaCl 1.75g、琼脂7g、水350ml、pH 7.0~7.2、121 ℃灭菌20min。

2.溶液和试剂无菌水3.仪器和其他用品灭菌棉签（装在试管内）、试管架、煤气灯或酒精灯、记号笔和废物缸等。

三、实验原理通过培养的方法使肉眼看不见的单个菌体在固体培养基上，经过生长繁殖形成几百万个菌聚集在一起的肉眼可见的菌落。

四、实验内容及步骤1.在标签纸上做好标记并贴在培养皿侧面。

2.牛肉膏蛋白胨培养基的制备：（1）称量：准确称取牛肉膏1.05g、蛋白胨3.5g、NaCl 1.75g放入烧杯中。

（2）熔化：在上述烧杯中加入少于所需的水量（所需水量为350ml），用玻璃棒搅匀，补充水到所需的总体积350ml。

（3）调pH：用1mol/L NaOH和1mol/L HCl进行调节，直至溶液pH达到7.0~7.2。

（4）分装：将其中200ml溶液装入500ml三角瓶中，向三角瓶中加入4.0克琼脂，向烧杯剩余液体中加入3.0克琼脂，在石棉网上加热烧杯，使琼脂溶解，将烧杯中溶液分装到10支试管中，每支试管中加入体积为试管总体积的1/5左右。

（5）加塞：在三角瓶口上塞上棉塞，防止外界微生物进入造成污染。

（6）包扎：加塞后，在棉塞外包一层牛皮纸，将全部试管用麻绳捆好（还有一支装有无菌水的试管），同样的方法把三角瓶包好，扎好。

用记号笔注明培养及名称、组别、配制日期。

（7）灭菌：将上述培养基以0.1MPa，121℃，90min高压蒸汽灭菌。

（8）搁置斜面：将灭菌的试管培养基冷却至50℃左右，将试管口端搁在玻璃棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管的总长的一般为宜。

微生物学实验实验一实验室环境和人体表面微生物的检查实验二油镜的使用和细菌的简单染色实验三细菌的革兰氏染色和芽孢染色实验四微生物大小的测定和酵母菌死活细胞的鉴定实验五培养基的配制与消毒灭菌实验六土壤微生物的分离纯化与鉴定实验七食品微生物检验 (一)细菌总数测定实验八食品微生物检验（二）大肠菌群数测定实验九大肠杆菌生长曲线的测定实验十IMViC与硫化氢试验实验一、实验室环境和人体表微生物的检查1.一、目的：1.比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量与类型；2.观察不同类型微生物的菌落形态特征；3.体会无菌操作的重要性。

2.二、原理：1.微生物无孔不入，无处不在。

2.微生物→营养琼脂平板→菌落或菌苔。

（37 ℃倒置培养24 h）3.描述：菌落的大小、表面光滑或粗糙、干燥或湿润、隆起或扁平、边缘整齐或锯齿状、菌落透明或不透明、颜色以及质地均匀与否、疏松或紧密等，以便检查环境中细菌的类?秃褪 俊?4.细胞、放线菌、酵母菌和霉菌四大类型都可能存在，本实验重点观察细菌。

3.三、器材：1.培养基：营养琼脂平板（牛肉膏蛋白胨培养基）2.器具：无菌水、灭菌棉签、接种环（针）、酒精灯等。

4.四、步骤：1.标记。

组号/姓名、日期、样品来源。

2.接种。

3.倒置培养，37℃ 24 h4.观察结果。

5.五、结果6.样品来源菌落数菌落类型特征描写本实验室（流动空气30 min）1 大小形态干湿扁/隆透明度颜色边缘23接种室（不流动空气30min）洗手前洗手后头发屑指甲垢实验台门把1.六、思考题：1.人多的实验室与少人走动的实验室比较，平板上的菌落数和菌落类型有区别吗？试解释。

2.通过本实验，在防止培养物的污染和防止细菌的扩散方面，你有何体会？3.4.实验二油镜的使用和细菌的简单染色一、实验目的1、学习和掌握油镜的原理和使用技术。

2、学习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的简单染色法。

二、实验原理1．油镜使用原理：光镜的几种物镜中以油镜的放大倍数最大，尤其适用于微生物学研究。

实验室环境和人体表面的微生物检查注意事项嘿，小伙伴们！今天咱们来唠唠《 实验室环境和人体表面的微生物检查注意事项》这事儿呀。

首先呢，咱们说说实验室环境微生物检查的注意事项哇。

一、采样方面呀。

在采集实验室环境的微生物样本时，哎呀呀，可一定要选对地方呢！像那些经常被触碰的实验台表面、仪器的操作按钮周围呀，这些地方可是微生物容易藏身的地方哟！采样工具呢，必须是经过严格消毒的呀，不然采到的样本就不准啦，这可不行呢！还有哇，采样的面积和数量也要有个规划呀，不能随便采采就算了呢，不然怎么能准确反映整个实验室环境的微生物情况呢？二、培养过程呢。

在培养采集到的微生物样本时，哇，温度和湿度的控制超级重要呀！这就像是照顾小婴儿一样，稍微有点差错，可能就得不到准确的结果啦！而且呀，用于培养的培养基要选择合适的哟，不同的微生物可能需要不同的营养成分才能茁壮成长呢，这可不能马虎呀！在培养过程中，要时刻观察有没有污染的情况呀，如果有杂菌混入了，那可就前功尽弃了呢，这多让人沮丧呀！三、鉴定环节。

鉴定微生物的时候，哎呀，各种鉴定方法要准确无误呢！无论是通过生化反应还是基因测序之类的手段呀，操作人员一定要经过专业的培训呀，不然把微生物的种类搞错了可就麻烦大了呢！接下来再聊聊人体表面微生物检查的注意事项吧。

一、采样的位置。

人体表面微生物可不一样呢，要根据检查的目的选择采样的部位呀。

如果是想检查手上的微生物，那就要把手的各个部位都采到样呢，像手指缝呀，手掌心呀之类的。

要是检查皮肤表面的，那也不能只采一个地方呀，不同的皮肤区域微生物的种类和数量可能有很大差异呢，这是不是很神奇呀？二、避免干扰。

在采样的时候呀，要尽量避免外界微生物的干扰呢。

比如说，采样之前不要用有消毒功能的洗手液过度清洗呀，不然把原本的微生物都杀死了，还怎么检查呢？还有哇，采样的动作要轻柔呢，不要把皮肤弄破了，要是弄破了，那可能会有血液里的微生物混进来，这样结果就不准啦，哎呀！三、个人卫生情况。