实验一实验室环境和人体表面的微生物检查

实验一：实验环境和人体表面微生物检查班级：生命科学院00级姓名：00学号：000000000000同组人：00【实验目的】1.证实实验环境与人体表面有微生物；2.体会无菌操作的重要性；3.观察不同类群微生物的菌落形态特征。

【实验原理】如何使我们周围的微生物从“看不见”变得“看得见”呢？通过放大微生物个体，是我们能看见它们；另一种方法是通过“放大”菌落，是我们看到他们的存在。

即通过培养的方法使肉眼看不见的单个菌聚集在固体培养基上，经过生长繁殖形成几百万个菌聚集在一起的肉眼可见的菌落，来检查实验室环境和人体表面微生物，从而使我们牢固树立无菌概念。

平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源的样品接种于培养基上，在适宜温度下培养，每一菌体可以通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落。

每一种菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小，表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑、边缘整齐或不整齐，菌落透明或半透明，颜色以及质地疏松或紧密等。

因此可以通过平板培养基来检查环境中细菌的数量和类型。

【实验器材】配培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂平板；仪器及其他用品：酒精灯、500ml量筒、500ml锥形瓶、试管2、培养皿20、记号笔、火柴等。

【实验内容】1.灭菌：高温蒸汽灭菌。

将锥形瓶用棉塞塞好、牛皮纸包好，培养皿十个一组包好，两只试管内装半管水，用棉塞塞好并用牛皮纸包好放入指定仪器中灭菌。

2.倒平板右手持盛培养基的锥形瓶置酒精灯火焰旁边，用左手将瓶塞轻轻拔出，瓶口保持对着火焰；左手持培养皿并将皿盖在火焰旁打开，迅速倒入培养基15ml，加盖后轻轻摇动培养皿，然后平置于桌面上，待凝后即为平板。

3.采集微生物左手持试管，用右手手掌边缘及小指拔出试管塞，将棉签浸入无菌水浸湿，在选取的地点擦拭。

左手持培养皿在火焰附近打开，用棉签在平板上涂抹。

完毕后平置于桌面。

空气中6套（3套5分钟，3套10分钟）；桌面上3套；洗手前3套，洗手后3套；自选3套（本组选十元纸币）。

实验室环境和人体表面微生物的检查摘要：微生物多种多样，无处不在。

本次试验初次学习了如何配制培养基和灭菌，并接种了实验室环境和人体表面的微生物，经过一周的培养，用肉眼观察处在各种环境下的微生物菌落的形态特征。

证明了实验室环境和人体表面存在多种多样的微生物，让我们意识到“无菌”和灭菌的重要性，建立“无菌概念”和练习掌握一套过硬的“无菌操作技术”。

关键词：微生物环境培养菌落1前言1.1实验目的：1、证实实验室环境与人体表面存在微生物。

2、体会无菌操作的重要性。

3、观察不同类群微生物的菌落形态特征。

4、练习掌握无菌操作技术。

1.2实验原理：通过培养的方法使肉眼看不见的单个菌体在固体培养基上经过培养繁殖形成肉眼可见的菌落。

2材料与方法2.1材料2.1.1溶液及试剂牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂条、无菌水，NaOH溶液及HCl溶液2.1.2仪器和其他用具培样皿、三角瓶、试管、烧杯、接种环、酒精灯、记号笔、牛皮纸、灭菌棉签、试管架、废物缸等。

2.2方法与步骤2.2.1 牛肉膏蛋白胨培养基制备（见表1）。

步骤：称量→熔化→调PH表1：牛肉膏蛋白胨培养基实际用量（注：调PH到 7.0~7.2）试剂牛肉膏蛋白胨NaCl 琼脂水用量 1.5g 5g 2.5g 10g 500ml2.2.2 实验步骤步骤内容备注1高压灭菌：1.将三角瓶与装入5-10ml无菌水的2支试管塞入棉塞并用牛皮纸线绳包扎，将20个培养皿用牛皮纸包好；2.放入灭菌锅开始灭菌。

121℃灭菌20min2琼脂平板制备：1.将培养基冷却后，右手拿三角瓶，左手拿出棉塞，并快速将瓶口靠近火焰。

2.右手拿锥形瓶，左手拇指与食指将培养皿打开一道缝隙，右手将三角瓶的培养基倒入培养皿中，左手立即盖上培养皿盖。

3.冷到培养皿，接种时，三角瓶口和半开的培养皿均要保持在火焰旁，保证无杂菌进入。

却培养皿。

3接种：1.取棉签并用无菌水蘸湿。

2.用湿棉签分别擦拭手掌，桌面，门把手等（详见表2），并将6个培养皿置于空气中不同的时间。

实验一实验室和人体表面微生物的检查一实验目的1 证明实验室环境与体表存在微生物2 比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型3 体会无菌操作的重要性二实验原理平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源的样品接种于培养基上，在适宜温度下培养，1-2d内每一菌体能通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落。

每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小、表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑等。

因此可通过平板培养基来检查环境中微生物的数量和类型。

三、器材1、培养基牛肉膏蛋白胨琼脂平板2、仪器或其他用具无菌水、灭菌棉签（装在试管内），接种环，试管架，酒精灯，记号笔，废物缸。

四、操作步骤1、写标签任何一个实验，在动手操作前均需首先将器皿用记号笔做上记号（包括班级、姓名、日期、样品来源等），字尽量小些，写在皿底的一边，不要写在当中，以免影响观察结果。

注：培养皿的记号一般写在皿底上，如果写在皿盖上，同时观察两个以上培养皿的结果，打开皿盖时容易混淆。

2、实验室细菌检查（1）空气将一个肉膏蛋白胨琼脂平板放在实验台上，移去皿盖，使琼脂培养基表面暴露在空气中，将另一块肉膏蛋白胨琼脂平板放在洁净工作台内或无人走动的实验室中，移去皿盖，1h后盖上两个皿盖。

（2）实验台①用记号笔在皿底外面中央画一直线，再在此线中间处画一垂直线。

②取棉签左手拿含有棉签的试管，在火焰旁用右手的手掌边缘和小指、无名指夹持棉塞，将其取出，将管口很快地通过酒精灯的火焰，烧灼管口；轻轻地倾斜试管，用右手的拇指和食指将棉签小心地取出。

放回棉塞，并将空试管放在试管架上。

③弄湿棉签左手取灭菌水试管，如上法拔出棉塞并烧灼管口，将棉签插入水中，再提出水面，在管壁上挤压一下以除去过多的水分，小心将棉签取出，烧灼管口，放回棉塞，并将灭菌水试管放在试管架上。

④取样将湿棉签在实验台面或门旋钮上擦拭约2cm2的范围。

⑤接种在火焰旁用左手拇指和食指或中指使平皿开启成一缝。

实验室环境和人体表面微生物的检查姓名：张弛学号：201100140157 班级：生院2011级生物基地生北周一第六组同组者：关事成、钱丹丹、喻心仪、刘婷婷、钟天白【实验目的】1、证实实验室环境与人体表面存在微生物。

2、体会无菌操作的重要性。

3、观察不同菌落类群微生物的菌落形态特征。

4、熟练掌握从固体培养物中转接微生物的无菌操作技术。

5、学习掌握培养基的配置原理。

6、通过对几种培养基的配制，掌握配制培养基的一般方法和步骤。

【实验原理】显微镜技术是观察到微生物的其中一种方法，这是通过放大微生物个体。

另一种方法是通过“放大”成子细胞群（菌落），使我们看到它们的存在，即通过培养的方法是肉眼看不见的单个菌体在固体培养基上，经过生长繁殖形成几百万个菌聚集在一起的肉眼可见的菌落（colony）。

高温对微生物具有致死效应，因此在微生物的转接过程中，一般在火焰旁进行，并用火焰直接灼烧接种环，以达到灭菌的目的，但一定要保证其冷却后方可进行转接，以免烫死微生物。

高压蒸汽灭菌。

高压蒸汽灭菌是将灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾儿产生蒸汽。

待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时，由于蒸汽不能溢出，儿增加了灭菌锅内的压力，从而使沸点增高，得到高于100°C的温度。

导致菌体蛋白质凝固变性儿达到灭菌的目的。

【实验器材】1、培养基肉膏蛋白胨琼脂平板2、溶液和试剂无菌水，牛肉膏，蛋白胨，NaCl，琼脂等。

3、仪器和其他用品灭菌棉签（装在试管内），试管，试管架，酒精灯，记号笔，废物缸，接种环，三角烧瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，天平，高压蒸汽灭菌锅，pH试纸（pH5.5~9.0），棉花，牛皮纸，麻绳，纱布，培养皿等【操作步骤】1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备。

准确称量各组分倒入烧杯，搅拌溶化，将培养基分装在两个三角瓶里。

加塞，包扎。

2、灭菌。

将18个平板、2个装有无菌水的试管、2个装有培养基的锥形瓶，用牛皮纸包好并标记，置于高压蒸汽灭菌锅中灭菌20min。

实验2实验室环境和人体表面的微生物检查13生物基地刘洋201300140059一、实验目的1.证实实验室环境与人体表面存在微生物2.体会无菌操作的重要性3.观察不同类群微生物的菌落形态特征4.掌握生理生化反应培养基的配置原理和一般方法步骤5.巩固无菌操作技术二、实验器材1.肉膏蛋白胨琼脂平板牛肉膏1.05g、蛋白胨3.5g、NaCl1.75g、琼脂7g、水350ml、pH7.0~7.2、121℃灭菌20min。

2.溶液和试剂无菌水3.仪器和其他用品灭菌棉签（装在试管内）、试管架、煤气灯或酒精灯、记号笔和废物缸等。

三、实验原理通过培养的方法使肉眼看不见的单个菌体在固体培养基上，经过生长繁殖形成几百万个菌聚集在一起的肉眼可见的菌落。

四、实验内容及步骤1.在标签纸上做好标记并贴在培养皿侧面。

2.牛肉膏蛋白胨培养基的制备：（1）称量：准确称取牛肉膏1.05g、蛋白胨3.5g、NaCl1.75g放入烧杯中。

（2）熔化：在上述烧杯中加入少于所需的水量（所需水量为350ml），用玻璃棒搅匀，补充水到所需的总体积350ml。

（3）调pH：用1mol/LNaOH和1mol/LHCl进行调节，直至溶液pH达到7.0~7.2。

（4）分装：将其中200ml溶液装入500ml三角瓶中，向三角瓶中加入4.0克琼脂，向烧杯剩余液体中加入3.0克琼脂，在石棉网上加热烧杯，使琼脂溶解，将烧杯中溶液分装到10支试管中，每支试管中加入体积为试管总体积的1/5左右。

（5）加塞：在三角瓶口上塞上棉塞，防止外界微生物进入造成污染。

（6）包扎：加塞后，在棉塞外包一层牛皮纸，将全部试管用麻绳捆好（还有一支装有无菌水的试管），同样的方法把三角瓶包好，扎好。

用记号笔注明培养及名称、组别、配制日期。

（7）灭菌：将上述培养基以0.1MPa，121℃，90min高压蒸汽灭菌。

（8）搁置斜面：将灭菌的试管培养基冷却至50℃左右，将试管口端搁在玻璃棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管的总长的一般为宜。

微生物学实验实验一实验室环境和人体表面微生物的检查实验二油镜的使用和细菌的简单染色实验三细菌的革兰氏染色和芽孢染色实验四微生物大小的测定和酵母菌死活细胞的鉴定实验五培养基的配制与消毒灭菌实验六土壤微生物的分离纯化与鉴定实验七食品微生物检验 (一)细菌总数测定实验八食品微生物检验（二）大肠菌群数测定实验九大肠杆菌生长曲线的测定实验十IMViC与硫化氢试验实验一、实验室环境和人体表微生物的检查1.一、目的：1.比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量与类型；2.观察不同类型微生物的菌落形态特征；3.体会无菌操作的重要性。

2.二、原理：1.微生物无孔不入，无处不在。

2.微生物→营养琼脂平板→菌落或菌苔。

（37 ℃倒置培养24 h）3.描述：菌落的大小、表面光滑或粗糙、干燥或湿润、隆起或扁平、边缘整齐或锯齿状、菌落透明或不透明、颜色以及质地均匀与否、疏松或紧密等，以便检查环境中细菌的类?秃褪 俊?4.细胞、放线菌、酵母菌和霉菌四大类型都可能存在，本实验重点观察细菌。

3.三、器材：1.培养基：营养琼脂平板（牛肉膏蛋白胨培养基）2.器具：无菌水、灭菌棉签、接种环（针）、酒精灯等。

4.四、步骤：1.标记。

组号/姓名、日期、样品来源。

2.接种。

3.倒置培养，37℃ 24 h4.观察结果。

5.五、结果6.样品来源菌落数菌落类型特征描写本实验室（流动空气30 min）1 大小形态干湿扁/隆透明度颜色边缘23接种室（不流动空气30min）洗手前洗手后头发屑指甲垢实验台门把1.六、思考题：1.人多的实验室与少人走动的实验室比较，平板上的菌落数和菌落类型有区别吗？试解释。

2.通过本实验，在防止培养物的污染和防止细菌的扩散方面，你有何体会？3.4.实验二油镜的使用和细菌的简单染色一、实验目的1、学习和掌握油镜的原理和使用技术。

2、学习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的简单染色法。

二、实验原理1．油镜使用原理：光镜的几种物镜中以油镜的放大倍数最大，尤其适用于微生物学研究。

表面微生物监测在我们的生活中，微生物无处不在，它们可能存在于我们的皮肤、空气、水、食物等各种物体表面。

有些微生物是有益的，它们可以帮助我们消化食物、维护生态平衡，但有些则可能对我们的健康产生威胁。

因此，对表面微生物的监测变得至关重要。

本文将探讨表面微生物监测的重要性以及实施这种监测的方法。

防止疾病传播：微生物，特别是病原体，可以通过直接接触或空气传播。

对医院、学校、公共交通工具等高密度人群集中的场所进行表面微生物监测，可以帮助我们及时发现并控制疾病的传播。

保障食品安全：在食品生产链的各个环节，如农场、加工厂、零售店等，对表面微生物进行监测可以确保食品的安全，避免因微生物污染导致的食物中毒事件。

维护公共卫生：在公共场所，如游泳池、健身房、公共厕所等，对表面微生物进行监测可以确保环境的清洁和卫生，从而防止疾病的传播。

传统方法：包括培养法和显微镜直接观察法。

培养法是通过将样本接种到培养基上，然后观察是否有微生物生长来判断是否存在特定种类的微生物。

显微镜直接观察法是通过显微镜直接观察样本表面是否有微生物。

分子生物学方法：近年来，分子生物学方法开始被广泛应用于表面微生物监测。

例如，聚合酶链反应（PCR）和基因测序技术可以快速、准确地检测出样本中的微生物种类和数量。

自动化方法：随着技术的发展，一些自动化方法也开始被应用于表面微生物监测。

例如，自动细菌计数器可以通过图像识别技术自动检测并计数样本中的微生物。

表面微生物监测对于预防疾病传播、保障食品安全和维护公共卫生都至关重要。

随着科技的不断发展，我们期待有更多高效、准确且易用的方法被应用于表面微生物监测，以更好地保障我们的健康和生活环境。

在未来的研究和应用中，我们需要进一步了解各种表面微生物的特性和行为，以便更准确地判断其可能对人类健康造成的影响。

我们也需要提高公众对表面微生物的认识和理解，以便更好地预防和控制疾病的传播。

表面微生物监测是一项持续且重要的任务，需要我们不断地学习、研究和探索。

实验室环境和人体表面的微生物检查注意事项嘿，小伙伴们！今天咱们来唠唠《 实验室环境和人体表面的微生物检查注意事项》这事儿呀。

首先呢，咱们说说实验室环境微生物检查的注意事项哇。

一、采样方面呀。

在采集实验室环境的微生物样本时，哎呀呀，可一定要选对地方呢！像那些经常被触碰的实验台表面、仪器的操作按钮周围呀，这些地方可是微生物容易藏身的地方哟！采样工具呢，必须是经过严格消毒的呀，不然采到的样本就不准啦，这可不行呢！还有哇，采样的面积和数量也要有个规划呀，不能随便采采就算了呢，不然怎么能准确反映整个实验室环境的微生物情况呢？二、培养过程呢。

在培养采集到的微生物样本时，哇，温度和湿度的控制超级重要呀！这就像是照顾小婴儿一样，稍微有点差错，可能就得不到准确的结果啦！而且呀，用于培养的培养基要选择合适的哟，不同的微生物可能需要不同的营养成分才能茁壮成长呢，这可不能马虎呀！在培养过程中，要时刻观察有没有污染的情况呀，如果有杂菌混入了，那可就前功尽弃了呢，这多让人沮丧呀！三、鉴定环节。

鉴定微生物的时候，哎呀，各种鉴定方法要准确无误呢！无论是通过生化反应还是基因测序之类的手段呀，操作人员一定要经过专业的培训呀，不然把微生物的种类搞错了可就麻烦大了呢！接下来再聊聊人体表面微生物检查的注意事项吧。

一、采样的位置。

人体表面微生物可不一样呢，要根据检查的目的选择采样的部位呀。

如果是想检查手上的微生物，那就要把手的各个部位都采到样呢，像手指缝呀，手掌心呀之类的。

要是检查皮肤表面的，那也不能只采一个地方呀，不同的皮肤区域微生物的种类和数量可能有很大差异呢，这是不是很神奇呀？二、避免干扰。

在采样的时候呀，要尽量避免外界微生物的干扰呢。

比如说，采样之前不要用有消毒功能的洗手液过度清洗呀，不然把原本的微生物都杀死了，还怎么检查呢？还有哇，采样的动作要轻柔呢，不要把皮肤弄破了，要是弄破了，那可能会有血液里的微生物混进来，这样结果就不准啦，哎呀！三、个人卫生情况。

微生物实验室自查标题：微生物实验室自查引言概述：微生物实验室是进行微生物学研究和实验的重要场所，为确保实验室环境和操作符合规范，减少实验误差和安全风险，进行定期的自查是必不可少的。

本文将从实验室设施、实验操作、实验材料、废物处理和安全管理等方面，详细介绍微生物实验室自查的内容和要点。

一、实验室设施1.1 实验室清洁卫生- 确保实验室地面、台面、仪器设备等表面保持干净整洁，定期消毒清洁。

- 检查实验室通风系统是否正常运行，保证空气流通畅通。

- 定期清洁消毒实验室垃圾桶和垃圾分类。

1.2 实验室安全设施- 检查实验室安全出口、紧急洗眼器、紧急淋浴器等安全设施是否完好并易于操作。

- 确保实验室应急预案和安全演练计划得到有效执行。

- 定期检查实验室消防设备是否齐全并定期进行消防演练。

1.3 实验室标识- 检查实验室内部的标识牌是否清晰明了，包括实验室区域、危险品存放位置、应急电话等。

- 确保实验室内各区域的标识牌符合规范，易于识别。

- 定期检查实验室标识是否完整，如有损坏及时更换。

二、实验操作2.1 操作规范- 确保实验人员遵守实验操作规程，按照实验流程进行操作。

- 检查实验操作过程中是否存在违规行为，及时纠正并进行记录。

- 定期对实验操作规程进行更新和培训，保证实验人员操作规范。

2.2 实验材料使用- 检查实验材料的存储条件是否符合要求，避免受潮、变质等情况。

- 定期检查实验材料的有效期，避免使用过期材料导致实验结果不准确。

- 确保实验材料的标识清晰明了，避免混淆使用。

2.3 实验记录- 确保实验记录的准确性和完整性，及时记录实验过程和结果。

- 定期对实验记录进行归档和备份，保证数据安全可靠。

- 检查实验记录的规范性，如有不符合要求的及时整改。

三、实验材料3.1 材料准备- 检查实验材料的准备是否充分，避免因材料不足导致实验中断。

- 确保实验材料的质量符合要求，避免因材料质量问题导致实验结果不准确。

- 定期对实验材料进行清点和整理，确保材料存放有序。