谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase, GR)活性测定试剂盒使用说明

兔子谷胱甘肽(GSH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T12 pg/ml-450 pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定兔子血清、血浆及相关液体样本中谷胱甘肽(GSH)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔子谷胱甘肽(GSH)水平。

用纯化的兔子谷胱甘肽(GSH)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入谷胱甘肽(GSH)，再与HRP标记的谷胱甘肽(GSH)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽(GSH)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中兔子谷胱甘肽(GSH)浓度。

试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.。

谷氨酰胺酶(glutaminase,GLS)活性测定试剂盒使用说明产品简介：GLS存在于高等动物和某些细菌以及植物根中，催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代谢中具有重要调控作用，尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。

GLS催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨，利用奈氏试剂检测氨增加的速率，即可计算其酶活性。

试验中所需的仪器和试剂：台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、冰和双蒸水。

产品内容：试剂一×1瓶，60mL，4℃保存；试剂二×1瓶，50mL，4℃保存；试剂三×1瓶，60mL，常温保存；试剂四×1瓶，12mL，常温保存；试剂五×1瓶，6mL，常温保存；试剂六×1瓶，6mL，常温避光保存。

操作步骤：一、粗酶液提取：称取约0.1g组织，加入0.9ml试剂一研钵中研磨均匀，于48000rpm℃离心10min，取上清，作为待测液（粗酶液）。

二、测定步骤：1、空白管：（1）蒸馏水0.05mL，加试剂一0.2mL，加试剂二0.8mL，混匀后37℃水浴1h；（2）加入试剂三1.05mL，混匀后8000rpm离心10min；取上清液1.0mL到新离心管中，加入试剂四0.23mL，混匀；（3）取0.8mL到新离心管中，依次加入试剂五0.1mL和试剂六0.1mL，混匀后等待10min，即可用于调零。

2、样品管：仅需要把蒸馏水0.05mL换成粗酶液0.05mL即可，其余同空白管。

3、实际测定只要做一个空白管，用于调零，于420nm处比色，记录吸光值，记为A。

GLS活性计算：1、酶活性单位定义：37℃下每mg蛋白质每小时催化谷氨酰胺生成1μmol氨。

2、计算公式：GAA（U/mg prot）＝363.1×(A－0.1301)÷蛋白质浓度（mg/mL）。

小鼠谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）ELISA检测试剂盒说明书小鼠谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）ELISA检测试剂盒说明书检测原理试剂盒采纳双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻di洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最后的黄色。

颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），计算样品活性。

样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避开任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞快速当心地分别。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存：假如样本收集后不适时检测，请按一次用量分装，冻存于20℃，避开反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3.37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在28℃，使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。

试验中不用的板条应立刻放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对比或者空白；依照说明书操作时样本已经稀释5倍，最结束果乘以5才是样本实际浓度。

严格依照说明书中标明的时间、加液量及次序进行温育操作。

全部液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒构成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无停止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0S5）浓度依次为：0、30、60、120、240、480U/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

人谷胱甘肽（GSH）说明书人谷胱甘肽(GSH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中谷胱甘肽(GSH)的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人谷胱甘肽(GSH)水平。

用纯化的人谷胱甘肽(GSH)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入谷胱甘肽(GSH)，再与HRP 标记的谷胱甘肽(GSH)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽(GSH)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人谷胱甘肽(GSH)浓度。

试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：720ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

全血谷胱甘肽还原酶（Whole Blood Glutathione Reductase，简称GR）是一种存在于人体血液中的酶。

谷胱甘肽还原酶是一种关键的抗氧化酶，在细胞内起着重要的作用。

谷胱甘肽还原酶参与谷胱甘肽（Glutathione，简称GSH）的还原过程。

谷胱甘肽是一种三肽，由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成。

它在细胞内起着抗氧化、解毒和免疫调节的作用。

当细胞暴露在氧化压力下或遇到毒性物质时，谷胱甘肽会被氧化为氧化型谷胱甘肽（GSSG），此时谷胱甘肽还原酶就发挥作用，将氧化型的谷胱甘肽还原为还原型的谷胱甘肽，以保持细胞内的氧化还原平衡。

通过这个还原过程，谷胱甘肽还原酶发挥着重要的细胞保护作用，帮助维持细胞的健康功能。

它在机体内的含量和活性可以用来评估机体的抗氧化能力和细胞氧化损伤的程度。

测定全血谷胱甘肽还原酶的活性可以作为一种辅助手段来评估机体的抗氧化能力和细胞氧化损伤的程度，以及某些疾病的发生和进展情况。

测定该酶的活性通常采用了一系列的酶促反应和颜色指示剂，通过测定酶促反应的速率或颜色的变化，来计算谷胱甘肽还原酶的活性水平。

需要注意的是，谷胱甘肽还原酶活性的测定结果受多种因素影响，如年龄、性别、环境因素等。

因此，具体的解读还需要结合临床背景和其他相关指标进行综合分析。

继续谈论全血谷胱甘肽还原酶的相关信息，除了上述提到的作用和测定方法，我还可以补充以下内容：1. 影响谷胱甘肽还原酶活性的因素：除了年龄、性别和环境因素外，还包括遗传因素、营养状况、药物使用等。

例如，一些药物如抗癫痫药物和抗生素可能会影响谷胱甘肽还原酶的活性。

2. 谷胱甘肽还原酶与疾病关系：谷胱甘肽还原酶活性的异常水平可能与一些疾病的发生和进展有关。

例如，许多研究表明，谷胱甘肽还原酶活性的降低可能与氧化应激相关的疾病如癌症、心血管疾病和神经退行性疾病等有关。

3. 其他测定方法：除了测量全血谷胱甘肽还原酶的活性，还可以通过测量谷胱甘肽还原酶基因表达水平或检测谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽的比值来评估谷胱甘肽系统的功能。

谷氨胺酶GLS）检测试剂说明书微量法货号：UPLC-MS-4447规格：100T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体70mL×1瓶4℃保存试剂一粉剂×1瓶4℃保存试剂二A液体0.4mL×1支4℃保存试剂二B液体 1.6mL×1瓶4℃保存试剂三液体2mL×1瓶常温保存标准品液体1mL×1支4℃保存溶液的配制：1、提取液：使用前37℃预热；2、试剂一：临用前加入5mL提取液充分溶解待用；3、试剂二B：临用前将试剂二A倒入试剂二B中混匀（A:B=1：4比例），或者根据样本所需，按照体积比试剂二A：试剂二B=1:4现配现用；4、标准品：10μmol/mL氮标准液，使用前37℃预热。

产品说明：GLS（EC3.5.1.2）主要存在于高等动物和某些细菌以及植物根中，催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代谢中具有重要调控作用，尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。

本试剂盒利用靛酚蓝比色法测定GLS催化谷氨酰胺生成的氨来计算其酶活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和双蒸水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1.组织：按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5-10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液），冰上匀浆后于4℃，12000g离心15min，取上清置于冰上待测。

2.细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500-1000：1的比例（建议500万个细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3s，间隔7s，总时间3min）；然后4℃，12000g离心15min，取上清置于冰上待测。

可见分光光度法氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量检测试剂盒说明书货号：UPLC-MS-4488规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体50mL×1瓶4℃保存试剂二液体170μL×1支4℃保存试剂三液体60mL×1瓶4℃保存试剂四液体8mL×1瓶4℃保存试剂五粉剂×1瓶4℃保存试剂六液体40μL×1瓶4℃保存标准品粉剂10mg×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂二：有毒易挥发试剂，涉及该试剂的步骤建议在通风橱内操作。

2、试剂五：临用前加入8mL蒸馏水，溶解后-20℃分装保存；3、试剂六：液体置于试剂瓶内EP管中。

临用前根据样本量将试剂六、蒸馏水按1:20（V:V）的比例配制备用，现用现配；4、标准品：用1mL蒸馏水溶解，浓度为10mg/mL，4℃保存。

产品说明：氧化型谷胱甘肽（GSSG）是谷胱甘肽（GSH）的氧化形式，又称为二硫代谷胱甘肽，是两分子的谷胱甘肽氧化而成。

GSSG会被谷胱甘肽还原酶还原成GSH，因此机体中大多数是以还原型形式存在。

测定细胞内GSH 和GSSG含量以及GSH/GSSG比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。

本试剂盒利用谷胱甘肽能和5,5’-二硫代-双-（2-硝基苯甲酸）（5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid，DTNB）反应产生2-硝基-5-巯基苯甲酸，2-硝基-5-巯基苯甲酸在波长412nm处具有最大光吸收的特点，通过2-乙烯吡啶抑制样本中原有的还原型谷胱甘肽，然后利用谷胱甘肽还原酶将GSSG还原为GSH，借此测定氧化型谷胱甘肽的含量。

技术指标：最低检出限：1.369μg/mL线性范围：1.5625-50μg/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测试剂盒(DTNB速率比色法) 简介：谷胱甘肽(glutathione，GSH)存在于几乎身体的每一个细胞，参与细胞许多功能活动，是一种氧自由基消除剂。

谷胱甘肽能帮助保持正常的免疫系统的功能，保护组织细胞免受氧化损伤，并具有抗氧化作用和整合解毒作用，半胱氨酸上的巯基为其活性基团，故常简写为G-SH或GSH，易与某些药物(如扑热息痛)、毒素(如自由基、碘乙酸、铅、汞、砷等)等结合，具有整合解毒作用。

谷胱甘肽具有广谱解毒作用，在延缓衰老、增强免疫力、抗肿瘤等功能性食品广泛应用。

谷胱甘肽是研究活性氧和自由基的重要指标，亦是机体氧化物牵累的重要指标。

还原型谷胱甘肽(GSH)是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽，由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成，能可逆的转变为氧化型谷胱甘肽(GSSG)，其存在形式会随着细胞内代谢的情况而发生相互转变。

氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测试剂盒(DTNB速率比色法)(GSSG Assay Kit)是一种简单易行的氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测的试剂盒，其检测原理是先检测还原型谷胱甘肽(GSH)含量，再检测总谷胱甘肽(T-GSH)含量T-GSH减去GSH即得氧化型谷胱甘肽(GSSG)：待测样品中的还原型谷胱甘肽(GSH)与发色底物DTNB反应，产生稳定黄色的TNB和GSSG；谷胱甘肽还原酶把氧化型谷胱甘肽(GSSG)还原成还原型谷胱甘肽(GSH)，由GSSG还原成的GSH和样品本身含有的GSH都与发色底物DTNB反应，生成黄色的TNB和GSSG，前后两个反应合并起来，总谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相当于一个呈色的限速反应，总谷胱甘肽(T-GSH)含量决定了黄色含量。

通过分光光度法(酶标仪)检测410nm处吸光度，与相应处理的GSH标准比较，分别获得还原型谷胱甘肽(GSH)和总谷胱甘肽(T-GSH)，用T-GSH 减去GSH即得氧化型谷胱甘肽(GSSG)。

该试剂盒可用于检测血浆、血清、组织、细胞等样品中氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量，亦可检测还原型谷胱甘肽(GSH)和总谷胱甘肽(T-GSH)含量。

http://www.solarbio.com谷氨酰胺酶(glutaminase,GLS)活性测定试剂盒使用说明

分光光度法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号：BC1450规格：50管/48样

产品内容：试剂一×1瓶，60mL，4℃保存；试剂二×1瓶，20mL，4℃保存；试剂三×1瓶，30mL，常温保存；试剂四×1瓶，10mL，常温保存；试剂五×1瓶，6mL，常温保存；试剂六×1瓶，6mL，常温避光保存。

产品说明：GLS（EC3.5.1.2）存在于高等动物和某些细菌以及植物根中，催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代谢中具有重要调控作用，尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。GLS催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨，利用奈氏试剂检测氨增加的速率，即可计算其酶活性。

需自备仪器和用品：台式离心机、可见分光光度计、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、冰和http://www.solarbio.com蒸馏水。

操作步骤：一、粗酶液提取：细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一），进行冰浴匀浆。8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。二、测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至420nm，蒸馏水调零。2、样品测定（在EP中加入下列试剂）：试剂名称（uL）测定管对照管样本25蒸馏水25试剂一100100试剂二400400混匀，37℃水浴1小时试剂三525525混匀，8000g，25℃离心10min；取上清液，在EP管中加入下列试剂上清液650650http://www.solarbio.com试剂四150150