一、实验目的
1. 了解白菜叶片变色的原因及过程。
2. 掌握植物细胞中色素的提取和分离方法。
3. 通过实验探究影响白菜叶片变色的因素。
二、实验原理
白菜叶片中含有多种色素，如叶绿素、类胡萝卜素等。在正常生长条件下，叶绿素含量较高，使叶片呈现绿色。当外界环境或内在因素发生变化时，叶片中的色素成分和含量会发生改变，从而导致叶片变色。
三、实验材料与仪器
1. 实验材料：白菜、蒸馏水、无水乙醇、层析液、滤纸、滴管、剪刀、研钵、滤纸等。
2. 实验仪器：显微镜、天平、恒温水浴锅、层析缸、紫外灯等。
四、实验步骤
1. 取新鲜白菜叶片，用剪刀剪成小块，放入研钵中。
2. 向研钵中加入适量蒸馏水和无水乙醇，研磨充分。
3. 将研磨好的混合液用滤纸过滤，得到提取液。
4. 将提取液倒入层析缸中，用滤纸作为层析板，滴上少量提取液。
5. 将层析缸放入紫外灯下观察，记录各色素带的位置和颜色。
6. 分别设置不同实验组，如低温处理、高温处理、光照处理、遮光处理等，观察白菜叶片变色情况。
7. 记录各实验组的叶片颜色变化及变化时间。
五、实验结果与分析
1. 叶片色素提取与分离结果 实验结果显示，白菜叶片中主要含有叶绿素、类胡萝卜素等色素。叶绿素呈蓝绿色，类胡萝卜素呈橙黄色，在紫外灯下观察时，叶绿素带位于滤纸的上方，类胡萝卜素带位于滤纸的下方。
2. 影响白菜叶片变色的因素
（1）低温处理：低温条件下，白菜叶片的叶绿素含量降低，导致叶片变黄。实验结果显示，低温处理组的叶片在2天后开始变黄，4天后变为黄色。
（2）高温处理：高温条件下，白菜叶片的叶绿素含量同样降低，但速度较快。实验结果显示，高温处理组的叶片在1天后开始变黄，3天后变为黄色。
（3）光照处理：光照条件下，白菜叶片的叶绿素含量增加，叶片颜色保持绿色。实验结果显示，光照处理组的叶片在5天后仍保持绿色。
（4）遮光处理：遮光条件下，白菜叶片的叶绿素含量降低，导致叶片变黄。实验结果显示，遮光处理组的叶片在3天后开始变黄，5天后变为黄色。
薄层层析 及绿色叶色素提取
1.什么叫薄层层析法?原理是什么啊?
薄层层析又叫薄层色谱，是色谱法中的一种，是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属固-液吸附色谱，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于少量样品(几到几微克，甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大，因此，又可用来精制样品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的质。此外，薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种"预试"。薄层色谱(Thin Layer
Chromatography)常用TLC表示，又称薄层层析，属于固-液吸附色谱。是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。一方面适用于小量样品(几到几十微克，甚至0.01μg)的分离;另一方面若在制作薄层板时，把吸附层加厚，将样品点成一条线，则可分离多达500mg的样品。因此又可用来精制样品。故此法特别适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物资。此外，在进行化学反应时，常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失来判断反应是否完成。薄层色谱是在被洗涤干净的玻板(7×3cm左右)上均匀的涂一层吸附剂或支持剂，带干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上，凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内，浸入深度为0.5cm。待展开剂前沿离顶端约1cm附近时，将色谱板取出，干燥后喷以显色剂，或在紫外灯下显色。薄层层析,又名薄层色谱.是色谱法的一种类型.其基本原理是利用混合物各组分在某一物质中的吸附或者溶解性能(即分配)的不同,或者其他亲和作用性能的差异,使混合物的溶液各种物质,进行反复的吸附或者分配等作用,从而将各种组分分开.流动的混合物溶液称为流动相;固定的物质称为固定相.薄层层析法的固定相是涂在玻璃板上的硅胶或者氧化铝.2、薄层层析取三块显微载玻片，用硅胶G加0.5%羧甲基纤维素调制后制板，晾干后在110?活化1h。3.绿色叶色素提取分离绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素。叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg)，其差别仅是a中一个甲基被b中的甲酰基所取代。它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物，是植物进行光合作
实验名称：叶绿体色素的提取、分离、理化性质
系别：机械工程系 班级：机械11实验者：潘霖 学号：2011010389
同组姓名：肖鹤翀 实验日期：2011.10.22
Ⅰ 提取与分离
一、 实验目的：
1. 学习应用薄层色谱法分离叶绿体色素的实验方法。
2. 了解叶绿素的组成、性质和测定叶绿素有助于理解光合作用的本质。
二、 实验原理:
叶绿体是进行光合作用的细胞器。叶绿体中的叶绿素a，叶绿素b，胡萝卜素和叶黄素与类囊体膜结合成为色素蛋白复合体。这些色素都不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用乙醇等有机溶剂提取。提取液可用薄层色谱法加以分离和鉴别。
薄层层析色谱法是将吸附剂均匀地涂在玻璃板上成一薄层，将此吸附剂薄层作为固定相，把待分离的样品溶液点在薄层板的下端，然后用一定量的溶剂作流动相，将薄层板的下端浸入到展开剂当中。由于吸附剂对不同物质的吸附能力大小不同，吸附力强的物质相对移动慢一些，而吸附力弱的物质则相对移动快一些，从而使各组分有不同的移动速度而彼此分开。
植物活性成分的分离常用薄层层析法和柱层析法，其中柱层析适用于大量制备。本实验采用薄层层析色谱法，其中固定相用硅胶预制板。
三、 实验材料与试剂:
1. 新鲜的菠菜叶片。
2. 体积分数为95%的乙醇，碳酸钙粉末，展开剂（石油醚：丙酮：苯=7:5:1，体积比）。
3. 研钵，漏斗，三角瓶，剪刀，点样毛细管，层析缸，硅胶预制板，滤纸。
四、 实验步骤:
（一） 色素提取液的制备
1. 取新鲜叶片4~5片，洗净，擦干叶表面，去除中脉剪碎，放入研钵中。
2. 向研钵中加入少量CaCO3粉末，再加2~3ml体积分数为95%的乙醇，充分研磨至糊状，再加10~15ml体积分数为95%的乙醇，上清液用漏斗过滤出，残渣再用10ml体积分数为95%的乙醇冲洗一次，一同过滤于三角瓶中，即制成叶绿体色素提取液。提取液应避光保存，因提取量较大，可用于其他相关实验（如后面的叶绿素理化性质的验证）。
一种叶绿素提取方法
引言
叶绿素是一种重要的植物色素，也是光合作用的关键物质。研究叶绿素的提取方法对于了解光合作用的机理、研究生长发育过程以及进行细胞分析具有重要意义。本文将介绍一种常用的叶绿素提取方法——酒精浸提法。
酒精浸提法的原理
酒精浸提法是通过酒精溶剂将叶绿素从植物组织中提取出来。酒精具有较好的溶剂性，可以溶解叶绿素并将其分离出来。叶绿素在酒精中的溶解度较高，并且酒精可通过提供一定的离子含量增加其溶解度。此外，酒精对叶绿素具有较好的萃取选择性，能够提取出大部分的叶绿素而不引入其他杂质。
实验步骤
1. 准备样品
选择新鲜的植物叶片作为实验样品。最好选择富含叶绿素的叶片，如绿色蔬菜、树叶等。将样品清洗干净，去除表面的尘土和杂质。
2. 打碎样品
将清洗后的叶片放入研钵中，用均质器或者研钵搅碎成细小的颗粒。搅碎过程中需要加入一定量的酒精，以保证样品与酒精充分混合。
3. 酒精浸提
将搅碎好的样品倒入容器中，加入足够的酒精将样品完全浸泡。可以选择常规的酒精，如80%的乙醇溶液。盖好容器，尽量防止酒精的挥发。
4. 沉淀分离
待样品浸泡一段时间后，酒精中的叶绿素会与植物组织分离出来形成沉淀。可以使用离心机将样品进行离心，使得叶绿素沉淀到离心管底部。离心的速度和时间可以根据实验需要进行调整。
5. 圆珠研磨
取出离心管中的沉淀，将其转移到操作台上的玻璃研钵中。使用圆珠研磨器进行研磨，直到获得均匀的绿色浆糊状物。这一步的目的是将叶绿素进一步溶解和提取出来。
6. 过滤
将研磨后的绿色浆糊通过滤纸进行过滤。过滤后，收集滤液，其中包含大部分的叶绿素。
7. 蒸发
将过滤后的滤液置于干燥器中，选择适当的温度和时间进行蒸发。蒸发的目的是将酒精溶剂蒸发掉，从而得到纯净的叶绿素。
8. 叶绿素的保存
将蒸发后得到的纯净叶绿素储存在干燥的环境中，以免其受潮变质。可以选择小瓶或者小夹子进行储存，储存的过程中要避免阳光直射和高温。
