微卫星 DNA 标记是解决亲子鉴定的有效手段
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《美丽硬仆骨舌鱼的全基因组的微卫星标记的开发及利用》美丽硬仆骨舌鱼的全基因组微卫星标记的开发及利用一、引言美丽硬仆骨舌鱼作为一种重要的观赏鱼和水产资源,其遗传学研究对于保护其种质资源、提高养殖效率以及进行遗传育种等具有重要意义。
全基因组微卫星标记(Microsatellite Markers)的开发和利用为这一研究提供了新的工具。
本文旨在探讨美丽硬仆骨舌鱼全基因组微卫星标记的开发过程及其在遗传学研究中的应用。
二、材料与方法1. 材料本研究所用材料为美丽硬仆骨舌鱼样本,采集自不同地域和种群。
2. 方法(1)基因组DNA提取:提取美丽硬仆骨舌鱼基因组DNA。
(2)微卫星位点筛选:通过生物信息学手段,筛选出全基因组的微卫星位点。
(3)引物设计及合成:根据筛选出的微卫星位点,设计特异性引物,并合成。
(4)PCR扩增及基因分型:利用合成的引物进行PCR扩增,对扩增产物进行基因分型。
(5)数据分析:对基因分型数据进行统计分析,得到微卫星标记的多态性信息。
三、结果与分析1. 全基因组微卫星标记的开发通过生物信息学分析,我们在美丽硬仆骨舌鱼的全基因组中成功筛选出多个微卫星位点,并设计了相应的特异性引物。
这些引物在后续的PCR扩增中表现出良好的扩增效果和特异性。
2. 微卫星标记的多态性分析对扩增产物进行基因分型后,我们得到了大量微卫星标记的多态性信息。
这些信息包括等位基因频率、杂合度、多态信息含量等,为后续的遗传学研究提供了丰富的数据支持。
3. 遗传多样性分析利用开发的微卫星标记,我们对不同地域和种群的美丽硬仆骨舌鱼进行了遗传多样性分析。
结果表明,各地区种群间存在一定的遗传差异,这为保护其种质资源和进行遗传育种提供了重要的参考依据。
4. 亲子鉴定及亲缘关系分析利用微卫星标记,我们成功进行了美丽硬仆骨舌鱼的亲子鉴定及亲缘关系分析。
这有助于了解其繁殖策略、种群结构等方面的信息,为保护和利用这一资源提供有力支持。
四、讨论与展望本研究成功开发了美丽硬仆骨舌鱼的全基因组微卫星标记,并对其在遗传学研究中的应用进行了探讨。
dna鉴定可以作为亲子干系证明亲子干系一直以来都是一个分外重要的话题,尤其在涉及到继承权、抚养权和遗产分配等方面。
长期以来,人们一直在寻找一种准确且可靠的方法来证明亲子干系,而DNA鉴定就成为了这个问题的最佳解决方案。
DNA(脱氧核糖核酸)是构成生物体的遗传物质,它携带着一个人一生的遗传信息。
因为每个人的DNA都是并世无双的,因此通过比对DNA样本,可以准确地确定亲子干系。
DNA鉴定是一种利用分子生物学技术,比对被鉴定者和被对比者之间的DNA序列,以确定他们之间是否存在亲子干系的方法。
起首,DNA鉴定可以通过比对共有的DNA序列,裁定两个人是否有血缘干系。
DNA序列是人类遗传信息的重要组成部分,它包含了各种基因信息,可以确定一个人的遗传特征。
当一个孩子的DNA序列与父母的DNA序列进行比对时,若果共有的DNA序列完全一致,那么可以确定孩子与父母具有亲子干系。
其次,DNA鉴定还可以通过比对特定的基因位点,确定亲子干系的概率。
科学家们已经发现了一些具有多态性的基因位点,这些位点的基因序列在不同人群中具有不同的频率。
通过检测这些位点上的基因序列,可以计算出亲子干系的概率。
比如,在一个父母与子女的DNA鉴定中,若果在多个特定基因位点上,父亲和孩子的基因序列都与母亲的基因序列完全一致,那么亲子干系的概率就分外高。
此外,DNA鉴定还可以通过比对DNA指纹确定亲子干系。
DNA指纹是人类DNA的一种特殊表达形式,它与个体的生活习惯、环境等因素无关,几乎不会发生变化。
通过检测DNA指纹,可以确定一个人的个体特征,从而确定亲子干系。
DNA指纹的精准性和可靠性分外高,是一种抱负的亲子干系证明方法。
然而,尽管DNA鉴定可以准确地确定亲子干系,但它也有一些局限性。
起首,DNA鉴定需要采集被鉴定者和被对比者的DNA样本,这就需要确保样本的完整性和准确性。
其次,某些极少数的特殊状况可能导致DNA鉴定的错误结果,比如基因突变、样本污染等。
DNA分子标记技术的研究与应用一、本文概述本文旨在对DNA分子标记技术的研究与应用进行全面的概述。
DNA分子标记技术作为现代分子生物学领域的一项重要工具,已经在生物学研究、遗传育种、疾病诊断等多个领域展现出广泛的应用前景。
本文首先介绍了DNA分子标记技术的基本概念、发展历程以及主要类型,包括限制性片段长度多态性(RFLP)、随机扩增多态性DNA(RAPD)、扩增片段长度多态性(AFLP)和单核苷酸多态性(SNP)等。
接着,文章详细阐述了这些技术在不同领域中的具体应用,包括基因克隆、基因定位、遗传图谱构建、物种亲缘关系分析、基因表达和调控研究等。
本文还讨论了DNA分子标记技术在实践应用中面临的挑战和未来发展趋势,如高通量测序技术的结合、大数据分析的利用以及生物信息学的进一步发展等。
通过本文的综述,旨在为相关领域的研究人员和技术人员提供一个全面、深入的了解DNA分子标记技术的平台,以促进该技术的进一步发展和应用。
二、DNA分子标记技术的基本原理与类型DNA分子标记技术是一种直接以DNA多态性为基础的遗传标记技术,其基本原理在于利用DNA分子在基因组中存在的丰富的多态性,通过特定的技术手段将这些多态性转化为可识别的遗传信息,从而实现对生物个体或群体的遗传差异进行精确分析。
这种技术以其高度的准确性、稳定性和多态性,在生物学研究、遗传育种、种质鉴定、基因定位、分子育种、疾病诊断等领域中得到了广泛应用。
基于DNA-DNA杂交的分子标记技术:这类技术主要包括限制性片段长度多态性(RFLP)和DNA指纹技术。
它们通过比较不同个体或群体间DNA片段的杂交信号差异,揭示出基因组中的多态性。
这类标记具有稳定性高、共显性遗传等特点,但操作复杂、成本较高。
基于PCR的分子标记技术:随着聚合酶链式反应(PCR)技术的出现和发展,基于PCR的分子标记技术应运而生。
这类技术包括随机扩增多态性DNA(RAPD)、扩增片段长度多态性(AFLP)和序列特征化扩增区域(SCAR)等。
亲子鉴定是通过比较个体的遗传信息来确定亲子关系的一种科学方法。
它的基本原理是基于人类的遗传特征,通过比较DNA序列或基因型的相似性和差异性来确定亲子关系的可能性。
以下是亲子鉴定的基本原理和步骤:DNA采集:首先,需要采集参与鉴定的个体的DNA样本。
通常采集的样本包括血液、口腔黏膜细胞(通过唾液样本)、头发、指甲等。
DNA提取:从采集到的样本中提取出DNA。
提取DNA的方法可以使用化学方法、机械方法或自动提取仪器等。
PCR扩增:采用聚合酶链式反应(PCR)技术,通过特定的引物扩增目标DNA片段。
通常,选择具有高多态性的基因座进行扩增,例如核酸微卫星(STR)位点。
基因分型:通过基因分型技术,将扩增得到的DNA片段进行分析。
基因分型可以采用凝胶电泳、毛细管电泳、质谱等方法,用于测定目标基因座的等位基因型。
数据比对和分析:将被鉴定的个体的基因型数据与参考群体的基因型数据进行比对和分析。
参考群体通常包括母亲、父亲和孩子(或其他相关的亲属),以确定基因型之间的亲子关系。
统计分析和判读:通过统计学分析,计算亲子关系的可能性或指数。
常用的指数包括亲子指数(PI)、联合亲子指数(CPI)和亲子指数(PPI)等。
根据统计学指数的大小和相应的阈值,来判定亲子关系的可信度。
需要注意的是,亲子鉴定的结果是基于统计学的概率,具有一定的误差范围。
因此,通常会在鉴定结果中提供一个相应的概率值或置信度。
亲子鉴定是一种复杂的科学技术,需要专业的实验室和技术人员进行操作和解读。
它在法律、医学和个人层面都有广泛的应用,可以帮助确定亲子关系、解决争议和提供遗传信息。
卫星DNA英文名称:satellite DNA真核细胞染色体具有的高度重复核苷酸序列的DNA。
总量可占全部DNA的10%以上,主要存在于染色体的着丝粒区域,通常不被转录。
因其碱基组成中GC 含量少,具有不同的浮力密度,在氯化铯密度梯度离心后呈现与大多数DNA有差别的“卫星”带而得名。
用等密度氯化铯梯度离心法分离匀质DNA时,在主带附近出现的副带DNA。
一般含有高度重复的DNA序列,其功能尚不清楚。
高度重复的DNA序列,重复单元长度不一,主要分布于染色体着丝粒的异染色质区。
卫星DNA(satelliteDNA)是一类高度重复序列DNA在介质氯化铯中作密度梯度离心,离心速度可以高达每分钟几万转;此时DNA分子将按其大小分布在离心管内不同密度的氯化铯介质中,小的分子处于上层,大的分子处于下层;从离心管外看,不同层面的DNA形成了不同的条带。
根据荧光强度的分析,可以看到在一条主带以外还有一个或多个小的卫星带。
这些在卫星带中的DNA即被称为卫星DNA,这种DNA的GC含量一般少于主带中的DNA,浮力密度也低。
卫星DNA-分类卫星DNA按其浮力密度的大小可以分成I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四类,其浮力密度分别是1.687,1.693,1.697和1.700g/cm3。
各类卫星DNA都是由各种不同的重复序列家族所组成。
卫星DNA通常是串联重复序列。
卫星DNA 按其重复单元的核苷酸的多少,可以分为两类。
一类是小卫星DNA(minisatelliteDNA),由几百个核苷酸对的单元重复组成。
另一类是微卫星DNA(microsatelliteDNA),由2个到20个左右的核苷酸对的单元重复成百上千次所组成。
卫星DNAI家族由42bp的单元组成,其中17bp(ACATAAAATATAAAGT)为可变区,25bp(ACCCAAAAAGTTATTATATACTGT)为重复单元。
卫星DNAⅡ家族是保守性差的ATTCC重复。
卫星DNAⅢ是较保守的ATTCC重复,且与10bp的序列(ATCGGGTTG)相间分布。
亲子鉴定最简单方法是什么亲子鉴定是通过比较父母和孩子的DNA信息来确定亲子关系的一种科学方法。
亲子鉴定在法律和医学方面都起到了重要的作用,可以帮助解决父母间或亲子间的争议和纠纷。
在现代科学技术的发展下,亲子鉴定的方法也越来越多样化和精确化。
下面将介绍几种最常用的亲子鉴定方法。
1.DNA基因鉴定DNA基因鉴定是目前最常用且最可靠的亲子鉴定方法。
它通过比较父母和孩子的DNA序列,分析相关基因的遗传信息,来判断亲子关系的密切程度。
这种方法通常通过采集血液、唾液或头发等样本来提取DNA,并利用聚合酶链反应(PCR)技术和分子标记技术进行分析。
2.STR分型法STR分型法是一种通过分析DNA中的短串联重复序列(Short Tandem Repeats,简称STR)来进行亲子鉴定的方法。
STR在DNA序列上重复的次数和类型都是遗传信息的一部分,在人类基因组中存在着大量的STR序列。
通过比较父母和孩子的STR序列,可以确定是否有相似的遗传情况,从而判断亲子关系。
3.SNP分析法SNP分析法是一种通过分析DNA中的单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,简称SNP)来进行亲子鉴定的方法。
SNP是指DNA序列上的一些碱基发生了突变,形成了不同的等位基因。
通过比较父母和孩子的SNP序列,可以确定是否有相同的等位基因,从而判断亲子关系。
4.Y染色体比对法Y染色体比对法是一种通过比较父亲和儿子的Y染色体上的遗传标记来进行亲子鉴定的方法。
由于Y染色体只由父亲传递给儿子,因此可以通过比对Y染色体上的遗传标记,判断是否有相同的遗传信息,从而判断亲子关系。
这种方法在解决父子争议或男性亲属关系的亲子鉴定中经常使用。
在上述亲子鉴定方法中,DNA基因鉴定是目前最广泛使用且简单有效的方法。
它能够在较短的时间内得出准确的结果,并且具有高度的精确性和可靠性。
同时,DNA基因鉴定方法也具有非侵入性,样本采集相对简单,对被鉴定者的身体健康没有任何副作用。
亲子鉴定的原理分子生物学亲子鉴定是一种通过分子生物学手段判断父母与子女间血缘关系的技术。
它基于DNA的遗传特性,通过比较DNA序列或DNA片段的相似性,确定父母和孩子之间的关系。
下面将详细介绍亲子鉴定的原理。
1.遗传物质DNA:人类的遗传物质是DNA(脱氧核糖核酸),DNA负责传递和储存个体的遗传信息。
DNA由四种碱基(腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶)构成,它们组成了DNA的双链结构。
2.DNA片段长度多态性:DNA片段长度多态性是指人类DNA中存在不同长度的DNA片段,这些片段由特定的DNA序列重复产生。
这些重复序列可以根据其长度进行分析,如PCR扩增技术可以放大这些片段以便于分析。
3.PCR扩增技术:聚合酶链反应(PCR)是一种常用的分子生物学技术,可在短时间内扩增特定的DNA片段。
PCR技术通常会使用DNA引物,即两个相互反向的DNA序列,其序列与目标DNA片段的两端互补。
PCR扩增技术可以通过加热、中和和延伸的循环操作来扩增DNA片段。
4. DNA测序:DNA测序是一种通过读取DNA碱基序列的方法,用于确定DNA片段的具体序列。
常用的DNA测序方法有Sanger测序和新一代测序技术。
DNA测序可以用于比较DNA样本之间的相似性。
基于以上原理,亲子鉴定的步骤通常包括以下几个关键步骤:1.采样:亲子鉴定首先需要收集父母和孩子的DNA样本。
通常可以采集口腔黏膜细胞或者血液细胞中提取DNA。
DNA提取过程通常包括细胞破裂、蛋白酶处理和酒精沉淀等步骤。
2.扩增DNA片段:使用PCR技术扩增特定的DNA片段。
该片段通常是具有多态性的DNA序列,如微卫星序列或核心STR序列。
这些片段是在人类基因组中高度变异的区域。
3.DNA分析:扩增的DNA片段可以通过凝胶电泳等方法进行分析。
DNA片段长度的比较通过观察目标DNA和已知基因座之间的迁移速率来进行。
4.数据分析和结果解读:通过比较父母和孩子的DNA片段长度,可以计算出DNA片段长度的相似性。
dna鉴定方法摘要:1.DNA鉴定的基本原理2.常见的DNA鉴定方法3.各类DNA鉴定方法的优缺点4.应用场景及注意事项正文:DNA鉴定,又称DNA亲子鉴定,是一种通过分析遗传物质DNA序列来判断亲子关系的生物技术。
DNA鉴定在法医学、遗传学、生物学等领域具有广泛的应用。
如今,随着科学技术的不断发展,DNA鉴定方法也日益丰富。
下面我们将介绍几种常见的DNA鉴定方法,以及它们各自的优缺点。
一、DNA鉴定的基本原理DNA鉴定的基本原理是基于孟德尔遗传定律,通过分析亲子间基因型的相似性,从而计算出亲子关系的概率。
鉴定过程中,通常会对比父母和子女的STR(短串联重复序列)基因座,以确定亲子关系。
二、常见的DNA鉴定方法1.短串联重复序列(STR)分析法STR分析法是目前应用最广泛的DNA鉴定方法。
它通过检测特定基因座上的短重复序列,分析亲子间的遗传信息。
STR基因座具有高度多态性,且易于检测,因此准确性较高。
2.SNP(单核苷酸多态性)分析法SNP分析法是通过检测特定位点上的核苷酸变化来判断亲子关系。
与STR 分析法相比,SNP分析法的检测精度更高,但检测过程相对复杂。
3.线粒体DNA分析法线粒体DNA分析法是通过检测线粒体基因序列来判断亲子关系。
由于线粒体DNA具有母系遗传特点,该方法主要用于解决母系遗传纠纷。
4.芯片分析法芯片分析法是将多个基因座同时进行分析,从而提高鉴定效率。
该方法适用于大规模的DNA鉴定需求,但设备成本较高。
三、各类DNA鉴定方法的优缺点1.STR分析法:优点- 准确性高、检测速度快、成本较低;缺点- 对某些特殊案例的鉴定准确性略有不足。
2.SNP分析法:优点- 检测精度高、适用于复杂案例;缺点- 检测过程复杂、成本较高。
3.线粒体DNA分析法:优点- 适用于母系遗传纠纷;缺点- 仅能判断母系亲子关系,准确性相对较低。
4.芯片分析法:优点- 高效、高通量;缺点- 设备成本高、检测费用较高。
《美丽硬仆骨舌鱼的全基因组的微卫星标记的开发及利用》美丽硬仆骨舌鱼的全基因组微卫星标记的开发及利用一、引言随着现代生物学技术的迅猛发展,基因组学已经成为生物学领域研究的重要方向。
在众多的生物研究中,硬仆骨舌鱼的基因组学研究也引起了广大科研人员的极大兴趣。
其中,对美丽硬仆骨舌鱼全基因组的微卫星标记(SSR标记)的开发与利用显得尤为重要。
这一技术不仅可以用于深入了解其基因结构和功能,而且有助于在生态保护、物种进化以及育种等多个方面进行实际应用。
二、美丽硬仆骨舌鱼全基因组微卫星标记的开发1. 开发方法对于美丽硬仆骨舌鱼全基因组微卫星标记的开发,主要采用的方法包括:生物信息学分析、PCR扩增、克隆测序等。
首先,通过生物信息学分析,从已公布的基因组数据中筛选出潜在的微卫星序列;然后,利用PCR技术进行扩增;最后,通过克隆测序等技术手段,验证其准确性和特异性。
2. 实验步骤具体实验步骤如下:(1)收集美丽硬仆骨舌鱼的DNA样本;(2)利用生物信息学软件进行序列分析,筛选出潜在的微卫星序列;(3)设计特异性引物,进行PCR扩增;(4)对PCR产物进行克隆测序,验证微卫星标记的准确性和特异性;(5)对验证后的微卫星标记进行定位和命名。
三、美丽硬仆骨舌鱼全基因组微卫星标记的利用1. 生态保护通过对美丽硬仆骨舌鱼全基因组微卫星标记的研究,可以更好地了解其种群遗传结构、遗传多样性以及种群动态变化等。
这有助于评估其生态风险,制定出更为有效的生态保护策略。
2. 物种进化微卫星标记可用于研究美丽硬仆骨舌鱼的进化历程。
通过比较不同地域、不同种群的微卫星标记差异,可以揭示其进化历程和种群间的亲缘关系。
3. 育种应用在育种方面,微卫星标记可用于亲本鉴定、杂交育种等方面。
例如,通过分析微卫星标记的遗传多态性,可以鉴定出优质的亲本,提高育种效率。
此外,还可以利用微卫星标记进行亲子鉴定,为水产养殖业提供有力的技术支持。
四、结论美丽硬仆骨舌鱼全基因组微卫星标记的开发与利用具有重要的科学意义和实际应用价值。
人类短串联重复序列(STR)的研究进展短串联重复序列( Short tandem repeat ,STR)又称微卫星DNA,STR 是一种可遗传的不稳定的并且具有高度多态性的短的核苷酸重复序列. STR 多态性具有种类多,分布广,高度多态性等特点,并按孟德尔遗传规律[ 1 ]在人群中世代相传. 通过对STR 多态性的认识,极大地推动了人类基因组的研究. 这种多态性标志已广泛用于构建人类遗传连锁图谱、基因定位、遗传病诊断、肿瘤细胞染色体分离与重组以及亲子鉴定等法医学检查.DNA遗传标记的多态性研究发展按时间顺序可分为三代[4 ]。
第1代遗传标记:限制性片段长度多态性( restriction fragment length polymorphism, RFLP)是Wyman 和White 于1980年偶然发现的,人类14号染色体上存在DNA片段长度有变化的区域,这些区域的结构特点是DNA由一段序列串联重复、首尾相接而成。
重复次数可在几次至数百上千次之间变化。
DNA 重复单位长度在数bp至数十bp之间,组成串联重复的DNA是小卫星DNA。
第2代遗传标记:短串联重复序列是由Holly等发现的重复单位的长度只有2~6 bp、重复次数一般在数次至几十次之间的串联重复DNA序列,即微卫星DNA。
微卫星DNA的等位基因片段的长度一般在400 bp以下,故又称为短串联重复序列( STR)。
第3代遗传标记:单核甘酸多态性( single nucleotide polymorphism, SNP)是单个碱基的置换、插入或缺失而形成的,是美国MIT提出的新一代多态性标记系统[5],近年来成为多种研究的焦点。
虽然SNP的多态性位点是最多的,能比STR提供更全面的基因信息,但是STR还是以其独特的优点保存下来,仍被广泛的研究。
1.1 STR 的构成STR 的核心序列为2~7bp ,呈串联重复排列.重复次数10~60 次左右,其总长度常小于400 bp.常见的有一、二、三、四核苷酸重复序列,约占真核生物基因组的5 %. 人类基因组的STR 单核苷酸重复以polyA ,polyT 多见,双核苷酸重复以(CA) n ,( GT) n , (AA) n , ( GG) n 常见, ( GC/ CG) 少见,其原因是由于3′端为G的C(即CPG) 易于甲基化. 三核苷酸重复以(CXG) n 类型常见,由于三核苷酸具有高度多态性,常用作DNA 的标记物.每个特定位点的STR 均由两部分构成:中间的核心区和外围的侧翼区. 核心区含有一个以上称为“重复”的短序列,一般该重复单位的碱基对数目不变,而串联在一起的重复单位数目是随机改变的,如果用一种不切重复单位的限制性内切酶把DNA 分子切割成限制性片段,该限制性片段中位于核心区的外围即是侧翼区. 人群中不同个体可表现为侧翼区相同而串联重复单位的数目不同;也可为相同数目的重复单位,但侧翼区大小不同,或者两者均不同. 通过对那些非STR 位点的DNA 限制性片段长度多态性( Rest riction f ragment lengthpolymorphism ,RFL P) 研究表明,每个位点的RFL P仅能检测到1 个或数个等位基因. 因此可以推论,STR 位点的侧翼区变异数也仅有少数几个. 这样,人群中该特定STR 位点的等位基因差异,主要应来自不同数目的串联重复[2,3]。
先上个度娘:鉴定方法DNA亲子鉴定的方法:1.DNA指纹法DNA指纹指具有完全个体特异的dna多态性,其个体识别能力足以与手指指纹相媲美,因而得名。
可用来进行个人识别及亲权鉴定,同人体核DNA的酶切片段杂交,获得了由多个位点上的等位基因组成的长度不等的杂交带图纹,这种图纹极少有两个人完全相同,故称为"DNA指纹"。
由于DNA指纹图谱具有高度的变异性和稳定的遗传性,且仍按简单的孟德尔方式遗传,成为目前最具吸引力的遗传标记,可广泛用于亲自鉴定。
特点:1.高度的特异性:研究表明,两个随机个体具有相同DNA图形的概率仅3×10^-11;如果同时用两种探针进行比较,两个个体完全相同的概率小于5×10^-19。
全世界人口约50亿,即5×10^9。
因此,除非是同卵双生子女,否则几乎不可能有两个人的DNA指纹的图形完全相同。
2.稳定的遗传性:DNA是人的遗传物质,其特征是由父母遗传的。
分析发现,DNA 指纹图谱中几乎每一条带纹都能在其双亲之一的图谱中找到,这种带纹符合经典的孟德尔遗传规律,即双方的特征平均传递50%给子代。
3.体细胞稳定性:即同一个人的不同组织如血液、肌肉、毛发、精液等产生的DNA指纹图形完全一致。
2.STR检测,短串联重复序列(short tandem repeat,STR)又称微卫星DNA(micro satellite DNA),是一类广泛存在于人类基因组中的DNA多态性基因座。
它由2~6碱基对构成核心序列,呈串联重复排列。
STR基因位点长度一般在100~300 bp之间.因个体间DNA 片断长度或DNA序列差异而成高度多态性,在基因传递过程中遵循孟德尔共显性方式遗传。
因其基因片段短、扩增效率高、判型准确等特点,被称作第二代DNA指纹,近几年亲子鉴定多采用该方法。
3.SNP-单核苷酸多态性SNP成为第三代遗传标志,人体许多表型差异、对药物或疾病的易感性等等都可能与SNP 有关。
微卫星DNA与亲子鉴定
一. 微卫星DNA:
重复单位序列最短,只有2~6bp,串联成簇,长度50~
100bp,又称为短串联重复序列(Short Tandem Repeat STR)。
广泛分布于基因组中。 其中富含A-T碱基对,是在研究DNA
多态性标记过程中发现的。1981年Miesfeld等首次发现微卫
星DNA,其重复单位长度一般为1~6个核苷酸,双核苷酸重
复单位常为(CA)n和(TG)n。
二.亲子鉴定:
根据鉴定目的的不同,DNA亲子鉴定可以分为司法鉴定
和个人鉴定。司法鉴定,是指在诉讼活动中鉴定人运用科学
技术或者专门知识对诉讼涉及的专门性问题进行鉴别和判
断并提供鉴定意见的活动,是我国主要的法律鉴定制度。
三. 微卫星 DNA 标记是解决亲子鉴定的有效手段, 无论
家畜, 还是野生动物或人工圈养小群体, 象马匹、奶牛、肉
牛、东北虎、绵羊、鳄鱼等动物都有学者 成功解决了亲子
关系的确认。Ellegr en 等用 5 个 马科的微卫星座位( 要求
有 6 个以上的多态性座位) 判定马的亲权关系可使排除率
达 98% 以上, 10个位点排除率达 99. 99% 。Binns 等用 6
个微卫星位 点解决了 20 匹以前用血型无法判定的纯血马
的亲 权归属, Lee 和 Choi 应用 14 对马科微卫星引物对纯
种马进行鉴定, 结果支持微卫星标记在亲子鉴定中的潜力,
排除率为 99. 98% 。Sherm an 等[使用 微卫星座位评价肉
牛公牛数量和公牛间亲缘关系对 后代的影响, 并计算非父
排除率和不明父亲的概率。 贾名威等用 6 个微卫星座位判
清了几头奶牛的嫌 疑父亲, 还使用这 6 对引物为法院做
过亲子鉴定, 破 案后确与事实吻合。Mo mmens 等用微卫星
引物 作了大量的亲子鉴定研究, 同时也指出微卫星是作
为遗传距离计算和分子系统发生树构建的理想标 记。张于
光等用 6 对家猫和 4 对苏门答腊虎共 10 对引物鉴定了
7 个父子关系不清的东北虎后代。对 于绵羊的嫌疑父亲确
认也是一样的有效与准确Fitzsim mons 等( 2002) 用微卫
星 DNA 标记结合mtDNA 对暹罗鳄、古巴鳄及湾鳄 103 只个
体进行研 究, 成功鉴定出 4 个个体为种间杂交后代, 其
中 2 个最初的形态鉴定有误, 而有 1 个险些作为纯种暹
罗 鳄野外放养, 有效地避免了种间杂交个体对野外群 体
中暹罗鳄种质资源的影响。张志和等对成都动 物园、成都
大熊猫繁育研究基地的大熊猫幼子及其 母亲和可疑父亲作
了父亲鉴定, 通过基因型分析结 果有效认出这些大熊猫之
间的父子关系。我们开展 的大额牛( Bo s frontalis) 与
婆罗门牛( Bos indicus) 人工授精种间杂交试验取得较大
进展, 并对第一例杂 交后代 进行 了亲 子鉴 定, 得 到
的 RCP ( relative chance of paternity, 父权相对机会)
为 99. 9949%,表明大额牛与婆罗门牛种间杂交的可行性
[ 20] , 目前 先后获得了 16 头大婆 F1 后代( 3、 13 ) 。
微卫星标记是目前用途十分广泛的一类DNA分子标记,是继
RFLP标记之后发展起来的一种新型分子标记。与RFLP、RAPD
以及小卫星标记相比较,微卫星标记具有数量大、分布广且
均匀、多态信息含量高、共显性遗传、分析方便、适合进行
自动化和半自动化检测、服从孟德尔遗传规律等优点⋯ ,而
且在多态性、平均杂合度等方面其位点值均高于蛋白标记位
点。同时,微卫星受选择压力小,更能反映群体分化水平及
亲缘关系远近,因此在亲缘关系分析、个体鉴定、亲子鉴定
以及疾病控制、标记辅助选择等方面得到广泛应用。
四.用微卫星标记技术进行亲子鉴定的基本原理
在现代动物生产和育种中,通常利用畜群系谱来确定亲缘关
系并以此来确定个体选留,但在混合授精、胚胎移植、寄养
等条件下却不能准确判断某些个体的亲缘关系。利用微卫星
多态性,即以多个微卫星在一个群体中等位基因频率为基
础,通过计算排除概率,便可进行亲子鉴定与血缘控制
五.微卫星DNA的优势:与其他亲子鉴定方法相比较,微卫
星标记检测方法在样品采集和统一检测标准方面更为方便,
血液、组织、毛发以及福尔马林保存样品等都是很好的原材
料 J,同时检测不受年龄和环境等因素的影响,在亲子鉴定
中比其他标记有更高的准确性。