紫外可见分光光度法测定药物含量的计算实例

实验七 维生素B 1片的含量测定一、实验目的1、掌握吸收系数法测定药物含量的方法。

2、熟悉紫外-可见分光光度计的原理及操作 二、实验原理维生素B 1结构中的嘧啶环为一芳香杂环，具有紫外吸收。

因此可在其最大吸收波长处测定吸光度，进行含量测定。

三、实验仪器和试剂： 1.仪器：紫外-可见分光光度计、量瓶(100mL)、台秤、量筒(100mL)、烧杯、分析天平、漏斗、铁架台、铁圈、滤纸、剪刀等。

2. 试剂：维生素B 1片、盐酸溶液（9—>1000） 四、实验内容：取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维生素B 125mg ），置100ml 量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约70ml ，振摇15分钟，使维生素B 1溶解，加盐酸（9→1000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml ，置另一100ml 量瓶中，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在246nm 处测定吸光度，按C 12H 17ClN 4OS ·HCl 的吸收系数（E 1%1cm ）为421计算，即得。

五、实验数据记录及处理标示量%%1001001%11⨯⨯⨯⨯⨯⨯=-Sm W D V E A cm六、注意事项（一） 仪器的准备1. 开启电源，使仪器预热20分钟。

2. 开机前，先确认仪器样品室是否有东西挡在光路上，以免影响仪器自检。

（二）仪器的操作步骤1. 设置波长（246nm）。

2. 测定。

3. 数据记录与结果处理。

（三）将比色皿洗净装盒，关机（四）填写仪器使用记录，（五）维生素B1的紫外吸收峰随溶液pH的变化而不同，因此要严格控制溶液的pH值。

七、思考题1.单色光不纯对于测得的吸收曲线有何影响？2.利用邻组同学的实验结果，比较同一溶液在相同仪器上测得的吸光度有无不同，试做解释。

药物分析含量计算一、原料药（百分含量）1、容量法注：W ：取样量 F ：浓度矫正因子T ：滴定度（每毫升标准溶液中相当于被测物质的质量。

）aA ＋ bB → cC ＋ dD例1：用直接滴定法测定阿司匹林原料药的含量，若供试品的称量为W （g ），氢氧化钠滴定液的浓度为C （mol/L ），消耗氢氧化钠滴定液的体积为V （mL ），每1mL 的氢氧化钠滴定液（0.1mol/L ）相当于18.02mg 的阿司匹林，则含量的计算公式为（ B ）。

A 、B 、C 、D 、E 、 例2：碘量法测定V C 含量时，若V C 的分子量为176.13，每1mL 碘滴定液（0.1mol/L ）相实际质量W ％=取样量 ×100％= V·F·T W ×100％ 理论浓度 实际浓度F= ↓ 标准液 ↓ 被测物 T A/B =b/a·W B ·M百分含量= V ×C ×18.02×10-3 W ×100％百分含量= V ×C ×18.02×10-3 0.1×W ×100％百分含量= 百分含量= 百分含量= V ×C ×18.02 0.1×W ×100％V ×C ×18.02×0.1 W ×100％V ×C ×18.02 ×100％ W当于V C 的质量为：BA 、4.403mgB 、8.806mgC 、17.61mgD 、88.06mgE 、1.761mg2、紫外法：E 1％1cm ：当吸光物质溶液浓度为1％（1g/100mL ），液层厚度为1CM 时，一定条件下的吸收度。

例：对乙酰氨基酚的含量测定方法为：取本品约40mg ，精密称定，置250mL 容量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液50mL 溶解后，加水至刻度后，摇匀，精密量取5mL ，置100mL 容量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液10mL ，加水至刻度后，摇匀，照分光光度法，在257nm 的波长处测定吸收度，按C 8H 9NO 2的吸收系数为715计算，即得，若样品称样量为m （g ） ，测得的吸收度为A ，则含量百分率的计算式为（ A ）。

维生素1B 片的含量测定一．实验目的1.掌握标准曲线法测定药物含量的方法；2.熟悉紫外—可见光光度计的原理和操作。

二、实验原理维生素B1结构中的嘧啶环为一芳香杂环，具有紫外吸收。

用维生素B1的标准品的稀释浓度梯度溶液测吸光度，得到标准曲线，再根据所测样品的吸光度求浓度， 求出标示量%=S*m W*n *V *Cx *100%三、实验药品及仪器实验药品：维生素1B 片10片，盐酸溶液，维生素B1标准品实验仪器：紫外—可见光光度计，50ml 容量瓶*10，玻璃棒，漏斗，烧杯 四、实验内容及步骤1. 用分析天平精密称取维生素B1标准品10mg ，于小烧杯中加适量稀盐酸溶解，振摇十分钟至完全溶解，转移至50ml 容量瓶用盐酸定容；2. 分别精密量取溶液1ml ，1.5ml, 2ml,2.5ml, 3ml 于50ml 容量瓶，加盐酸稀释至刻度，用紫外—可见光光度计测得其对应吸光度，得维生素B1标准曲线； 3取维生素B1药片10片，于分析天平称重，得平均片重`W=10m； 4.研细（用研钵），用分析天平精密称取约0.13g （相当于维生素1B 10mg ），于小烧杯中加适量稀盐酸溶解，振摇十分钟至完全溶解，转移至50ml 容量瓶用盐酸定容，摇匀。

5. 用干燥滤纸滤过，精密量取滤液2mL ，置另一50mL 量瓶中，再加盐酸溶液稀释至刻度，摇匀。

再做平行溶液三份；6.分别测三组样品的吸光度，再依据标准曲线求得浓度，再依据公式求得标示量。

五、注意事项1. 仪器的准备（1）开启电源，使仪器预热20分钟；（2）开机前，先确认仪器样品室内是否有东西挡在光路上，以免影响仪器的自检； 2. 仪器的操作步骤（1）设置波长（246nm ）； （2）测定；（3）数据记录与处理。

3. 将比色皿洗净装盒，关机；4. 维生素1B 的紫外吸收峰随溶液pH 的变化而不同，因此要严格控制溶液的pH 值。

5. 本品含维生素1B （HCl OS ClN H C 41712）应为标示量的90.0%~110.0%。

紫外分光光度法测定维生素C片维生素C的含量一、实验目的1.学习利用紫外吸收光谱测定物质含量的原理和方法；2.熟练紫外-可见分光光度计的操作。

二、实验原理维生素C（VC）是一种酸性己糖衍生物，具有烯醇式己糖内酯立体结构，分D和L两种立体构型，但只有L型有生理功效。

维生素C具有较强的还原性,在一定条件下氧化型和还原型可以互变,两者均具有生物活性(结构式见图1),其C2和C3位上两个相邻的烯醇式羟基极易解离而释放出H+,故维生素C虽然不含自由羧基，仍具有有机酸的性质。

维生素C呈无色无臭的片状结晶体,易溶于水,不溶于脂。

在酸性环境中稳定,遇空气中氧、热、光、碱性物质,特别是有氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时可促进其破坏速度。

具有π电子的共轭双键化合物、芳香烃化合物等，在紫外光谱区都有强烈吸收，其摩尔吸收系数k可达104-106数量级。

利用紫外吸收光谱进行定量分析，要借助朗伯-比尔定律。

根据维生素C在稀硫酸溶液（维生素C水溶液在pH 5～6之间稳定）中，在245 nm 波长处有最大吸收的特性，建立了紫外分光光度法测定维生素C片含量的方法。

三、实验仪器及试剂实验仪器：容量瓶（100 ml、1000 ml）、移液管（0.5 ml、5 ml）、烧杯、紫外分光光度计实验用品：98%浓硫酸（分析纯，1.84 g/ml）、维生素C对照品系以原料药经105 ℃干燥至恒重（含量为99.7 %）、维生素C片（2片）、去离子水四、实验步骤1. 0.005 mol·L-1硫酸溶液的配制用0.5 ml移液管移取0.27 ml 98%浓硫酸放入事先已盛有蒸馏水的烧杯中，搅拌，冷却至室温后移入1000 ml容量瓶，稀释至刻度，待用。

2. 0.5 g·L-1对照品溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的维生素C对照品50 mg置100 ml量瓶中，加0.005 mol·L-1硫酸溶液制成0.5 g·L-1对照品溶液。

分光光度法测定阿奇霉素片的含量【摘要】目的：建立紫外可见分光光度法准确快速测定阿奇霉素片的含量。

方法：参考阿奇霉素片溶出度的测定方法，以乙醇和0.1 mol/L盐酸为溶剂，75→100硫酸溶液为显色剂，在室温显色30 min，然后于482 nm波长处测定显色后溶液的吸收度，与显色后的标准品溶液相比较计算阿奇霉素片的含量，并与微生物测定方法相比较。

结果：阿奇霉素在7.5～52.5 μg/mL的浓度范围内吸收度A和浓度C之间成线性相关，回归方程A=0.0201C-0.1059，r=0.9999；回收率（99.7±0.31）%，RSD=0.3 %，样品测定结果与微生物方法相一致。

结论：本方法简便、准确，适用于阿奇霉素片的含量控制。

【关键词】阿奇霉素；分光光度法；含量；测定阿奇霉素（Azithromycin）为15元环大环内酯类抗生素，抗菌谱与红霉素相类似，对化脓性链球菌、肺炎链球菌以及流感杆菌有杀菌作用，对部分葡萄球菌属具有抑菌作用，临床主要用于呼吸道、皮肤软组织感染和沙眼衣原体引起的尿道炎和宫颈炎等感染性疾病的治疗［1］。

片剂为阿奇霉素常见的剂型，2005版《中国药典》的含量检测方法是微生物法［2］。

该方法操作繁琐，检验周期长，影响因素多，不适合样品的快速分析。

另外，阿奇霉素的化学结构上无共轭双键，在紫外光区无特征吸收，无法直接用紫外分光光度法对其质量进行测定。

笔者参考阿奇霉素片溶出度的测定方法［2］，并参考同类药物罗红霉素胶囊的测定方法［3］，建立了用分光光度法快速检测阿奇霉素片含量的方法，现将结果报道如下。

1 仪器与试药1.1 仪器760CRT紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）；精天FA2004A分析天平（上海良平仪器仪表有限公司）。

1.2 试药阿奇霉素原料（含量95.3%，批号：20060607）为郑州永和制药有限公司惠赠，阿奇霉素对照品（952 u/mg）购自中国药品生物制品检定所，阿奇霉素片（河南辅仁堂制药有限公司，批号：20060703、20060905、20061014）购自药店，其他试剂均为分析纯。

紫外分光光度法测定阿司匹林的含量一、实验目的1. 了解阿司匹林的合成方法及性质。

2. 掌握紫外分光光度法分析阿司匹林含量的原理及操作。

二、方法原理乙酰水杨酸(acetyl salicylic acid)( 阿司匹林Aspirin)是一种非常普遍的治疗感冒的药物，有解热止痛作用，同时还软化血管。

19世纪末，人们成功地合成了乙酰水杨酸。

直到目前，阿司匹林仍是一个广泛使用的具有解热止痛作用治疗感冒的药物。

在过量NaOH介质中，阿司匹林定量水解为水杨酸钠，其在290—300 nm处有较强的紫外吸收，且其吸光度在一定条件下，与阿司匹林的浓度呈线性关系，因此，在合适条件下，可用紫外分光光度法测定阿司匹林的含量。

溶剂和其他成分不干扰测定。

COOHOC O +COOCH3O+C3OC H OOH3+H O22三、仪器和试剂仪器紫外—可见分光光度计；50mL容量瓶；10mL吸量管、5ml吸量管。

试剂 0.5000mg·mL-1水杨酸贮备液：称取0.2500g水杨酸先溶于少量0.1moL·L-1NaOH 溶液中，然后用蒸馏水定容于500mL容量瓶中；0.1moL·L-1 NaOH 溶液。

四、实验内容1、对照液的配制：将七个50.00mL容量瓶按0-6依次编号。

分别移取水杨酸储备液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL于相应编号容量瓶中，各加入1.0mL 0.1moL·L-1 NaOH溶液，先用蒸馏水稀释至30mL左右，80℃水浴加热10分钟，冷却至室温，稀释至刻度，摇匀。

2、试样溶液的配制：准确称取适量阿司匹林样品于50mL烧杯中，加入0.1moL·L-1NaOH 溶解，定量转移至50mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

从50mL容量瓶中取一定量的试样溶液至另一个50mL容量瓶中，蒸馏水稀释至30mL左右，80℃水浴加热10分钟，冷却至室温，稀释至刻度，摇匀。

验证性试验实验十七 对乙酰氨基酚片的含量测定一、目的要求1.掌握对乙酰氨基酚片的含量测定的原理。

2.掌握紫外可见分光光度法测定药物含量的方法及计算。

二、仪器与试药1.仪器Mettler AL204电子天平 752型紫外可见分光光度仪刻度移液管 规格：5mL 、10mL 定量滤纸（直径10cm ）容量瓶 规格：100mL 500mL 研钵HHS 型电热恒温水浴锅2.试药对乙酰氨基酚片 规格0.3g 氢氧化钠 三氯化铁试液 蒸馏水三、实验原理利用对乙酰氨基酚结构中有共轭结构，在紫外区有吸收，最大吸收波长为257nm ，测定其最大吸收波长处的吸收度即可计算其含量。

四、实验内容本品含对乙酰氨基酚（C 8H 9NO 2）应为标示量的95.0%～105.0%。

【鉴别】本品的水溶液加三氯化铁试液，即显蓝紫色。

【含量测定】取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于对乙酰氨基酚40mg ），置250mL 量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50mL 与水50mL ，振摇15分钟，加水至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL,置100mL 量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液，加水至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在257nm 的波长处测定吸光度，按C 8H 9NO 2的吸收系数（%11cm E ）为715计算，即得。

计算：对乙酰氨基酚片标示量%＝A ：供试品在257nm 的波长处测得的吸收度；D ：供试品的稀释倍数； %11cmE :吸收系数; W ：对乙酰氨基酚片片的平均片重； W ：称取对乙酰氨基酚片粉的量。

五、注意事项1.移液管、容量瓶的使用方法。

2.振摇充分，使样品溶解完全。

%100100D 1%1⨯⨯⨯⨯⨯⨯标示量W E W A cm3.紫外分光光度法的操作。

六、思考题1. 对乙酰氨基酚片还有什么测定方法，试举两例？2.常用各种容量仪器在使用时应注意哪些问题？七、参考文献《中国药典》2010年版二部，207，化学工业出版社。

实验七 维生素B 1片的含量测定一、实验目的1、掌握吸收系数法测定药物含量的方法。

2、熟悉紫外-可见分光光度计的原理及操作 二、实验原理维生素B 1结构中的嘧啶环为一芳香杂环，具有紫外吸收。

因此可在其最大吸收波长处测定吸光度，进行含量测定。

三、实验仪器和试剂： 1.仪器：紫外-可见分光光度计、量瓶(100mL)、台秤、量筒(100mL)、烧杯、分析天平、漏斗、铁架台、铁圈、滤纸、剪刀等。

2. 试剂：维生素B 1片、盐酸溶液（9—>1000） 四、实验内容：取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维生素B 125mg ），置100ml 量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约70ml ，振摇15分钟，使维生素B 1溶解，加盐酸（9→1000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml ，置另一100ml 量瓶中，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在246nm 处测定吸光度，按C 12H 17ClN 4OS ·HCl 的吸收系数（E 1%1cm ）为421计算，即得。

五、实验数据记录及处理标示量%%1001001%11⨯⨯⨯⨯⨯⨯=-Sm W D V E A cm六、注意事项（一） 仪器的准备1. 开启电源，使仪器预热20分钟。

2. 开机前，先确认仪器样品室是否有东西挡在光路上，以免影响仪器自检。

（二）仪器的操作步骤1. 设置波长（246nm）。

2. 测定。

3. 数据记录与结果处理。

（三）将比色皿洗净装盒，关机（四）填写仪器使用记录，（五）维生素B1的紫外吸收峰随溶液pH的变化而不同，因此要严格控制溶液的pH值。

七、思考题1.单色光不纯对于测得的吸收曲线有何影响？2.利用邻组同学的实验结果，比较同一溶液在相同仪器上测得的吸光度有无不同，试做解释。

药物分析含量测定结果的计算原料药 以实际百分含量表示：片剂 片剂的含量测定结果常用含量占标示量的百分比表示：标示量%═%100⨯标示量每片的实际含量═%100⨯⨯标示量平均片重取样量测得量m m注射液 注射液的含量测定结果一般用实测浓度占标示浓度的百分比表示：1. 原料药含量测定结果的计算 （1）滴定分析法① 直接滴定法： （无空白）T ——滴定度(g/mL)，每毫升滴定液相当于被测组分的克数 V ——滴定时，供试品消耗滴定液的体积（mL ） F ——浓度校正因子W ——供试品的质量 (g)例1：P 93 例题例2：非那西丁含量测定：精密称取本品0.3630g 加稀盐酸回流1小时后，放冷，用亚硝酸钠液（0.1010mol/L ）滴定，用去20.00mL 。

每1mL 亚硝酸钠液（0.1mol/L ）相当于17.92mg 的C 10H 13O 2N 。

计算非那西丁的含量为（E ）A. 95.55%B. 96.55%C. 97.55%D. 98.55%E. 99.72% %100⨯=WTVF百分含量%72.99%1003630.0101.01010.000.2092.17%3=⨯⨯⨯⨯=-非那西丁%100⨯=取样量测得量百分含量m m %100%⨯=标示实测标示量c c 标准实际c c F =② 剩余滴定法 （做空白）V 0——滴定时，空白消耗滴定液的体积（mL ） 其他符号的意义同直接滴定法含量计算公式例1：P 94 例题例2：精密称取青霉素钾供试品0.4021g ，按药典规定用剩余碱量法测定含量。

先加入氢氧化钠液(0.1mol/L)25.00mL ，回滴时消0.1015mol/L 的盐酸液14.20mL ，空白试验消耗0.1015mol/L 的盐酸液24.68mL 。

求供试品的含量，每1mL 氢氧化钠液(0.1mol/L)相当于37.25mg 的青霉素钾。

（2）紫外分光光度法① 吸收系数法例——P 122：（1）对乙酰氨基酚的含量测定方法为：取本品约40mg ，精密称定，置250mL 量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50mL 溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5mL ，置100mL 量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10mL ，加水至刻度，摇匀，照分光光度法，在257nm 的波长处测定吸收度，按C 8H 9NO 2的吸收系数( )为715计算，即得。

2021年 第1期 广 东 化 工 第48卷 总第435期 · 165 ·柱色谱-紫外分光光度法 测定关黄柏中总生物碱的含量蓝松(宜春学院化学与生物工程学院，江西 宜春 336000)[摘 要]目的：采用柱色谱-紫外分光光度法测定关黄柏中总生物碱的含量，为关黄柏药材的全面质量控制提供一定依据。

方法：用柱色谱-紫外分光光度法，以盐酸小檗碱为对照品，采用盐酸-乙醇(1︰100)浸渍后超声提取，经过氧化铝柱分离纯化，在265 nm 处测定关黄柏中总生物碱的含量。

结果：盐酸小檗碱浓度在2.36~11.80 μg/mL 时具有良好的线性关系，平均回收率为98.80 %，重复性试验RSD 为2.8 %(n=5)。

结论：柱色谱-紫外分光光度法测定关黄柏中总生物碱含量，方法简便，重现性好，可以作为关黄柏药材的质量控制方法之一。

[关键词]关黄柏；柱色谱-紫外分光光度法；盐酸小檗碱[中图分类号]O65 [文献标识码]A [文章编号]1007-1865(2021)01-0165-02Content Determination of Total Alkaloids in Phellodendron Amurense RuprLan Song(College of Chemistry and Biologineering of Yichun University, Yichun 336000, China)Abstract: Objective: To establish column chromatography-UV spectrophotometry for determination of total alkaloids (berberine hydrochloride) in Phellodendron amurense Rupr., to provide a scientific basis for the quality control of Radix Phellodendron amurense Rupr. Methods: The sample was extracted with HCl-C 2H 5OH(1︰100) by cold after ultrasonic extraction and total alkaloids were separated on alumina column. Using berberine hydrochloride as control, the content of total alkaloids were determined by UV-spectrophotometry at detection wavelength of 265 nm. Results: The calibration curves for berberine hydrochloride was linear in the range of 2.36~11.80μg/mL. The average recovery was 98.80 %, and the RSD was 2.8 % (n=5). Conclusion: The method is rapid, accurate and reliable, which can be used for the quality control of Phellodendron amurense Rupr.Keywords: Phellodendron amurense Rupr.；column chromatography-uv spectrophotometry ；berberine hydrochloride ；content determination1 前言关黄柏为芸香科植物黄檗Phellodendron amurense Rupr.的干燥树皮，具有清热燥湿、泻火除蒸、解毒疗疮的功效[1]。

盐酸普鲁卡因含量测定方法盐酸普鲁卡因是一种局部麻醉药物，广泛用于手术和疼痛治疗。

在药品生产中，需要对盐酸普鲁卡因的含量进行测定，以确保药品的质量和安全性。

下面介绍盐酸普鲁卡因含量测定方法。

一、荧光法测定盐酸普鲁卡因含量荧光法是一种常用的药品含量测定方法，适用于含有芳香族化合物的药品。

盐酸普鲁卡因即为一种芳香族化合物，因此适用荧光法进行测定。

方法步骤：1. 取一定量的盐酸普鲁卡因样品，溶于适量的乙醇中；2. 将样品溶液置于荧光分析仪中，进行荧光强度测定；3. 根据测定结果计算盐酸普鲁卡因的含量。

二、紫外分光光度法测定盐酸普鲁卡因含量紫外分光光度法是一种常用的药品含量测定方法，适用于含有芳香族化合物的药品。

盐酸普鲁卡因即为一种芳香族化合物，因此适用紫外分光光度法进行测定。

方法步骤：1. 取一定量的盐酸普鲁卡因样品，溶于适量的乙醇中；2. 将样品溶液置于紫外分光光度计中，进行吸光度测定；3. 根据测定结果计算盐酸普鲁卡因的含量。

三、高效液相色谱法测定盐酸普鲁卡因含量高效液相色谱法是一种常用的药品含量测定方法，适用于各种药品。

盐酸普鲁卡因也可以通过高效液相色谱法进行测定。

方法步骤：1. 取一定量的盐酸普鲁卡因样品，溶于适量的甲醇中；2. 将样品溶液经过过滤器过滤，去除杂质；3. 将样品溶液注入高效液相色谱仪中，进行色谱分离；4. 根据测定结果计算盐酸普鲁卡因的含量。

盐酸普鲁卡因含量测定有多种方法，其中荧光法、紫外分光光度法和高效液相色谱法是常用的方法。

在药品生产中，需要根据药品特性选择合适的测定方法，以确保药品的质量和安全性。