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紫外 - 可见分光光度法紫外 - 可见分光光度法是在 190～800nm 波长范围内测定物质的汲取度，用于鉴识、杂质检查和定量测定的方法。
当光穿过被测物质溶液时，物质对光的汲取程度随光的波长不一样而变化。
所以，经过测定物质在不一样波优点的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的汲取光谱。
从汲取光谱中，可以确立最大汲取波长λ max和最小汲取波长λ mim。
物质的汲取光谱拥有与其构造有关的特点性。
所以，能够经过特定波长范围内样品的光谱与比较光谱或比较品光谱的比较，或经过确立最大汲取波长，或经过丈量两个特定波优点的汲取比值而鉴识物质。
用于定量时，在最大汲取波优点丈量必定浓度样品溶液的吸光度，并与必定浓度的比较溶液的吸光度进行比较或采纳汲取系数法求算出样品溶液的浓度。
仪器的校订和检定1.波长因为环境要素对机械部分的影响，仪器的波长常常会略有改动，所以除应按期对所用的仪器进行全面校订检定外，还应于测定前校订测定波长。
常用汞灯中的较强谱线 237.83nm、253.65nm、275.28nm、296.73nm、313.16nm、334.15nm、365.02nm、404.66nm、435.83nm、546.07nm 与 576.96nm，或用仪器中氘灯的 486.02nm与 656.10nm谱线进行校订，钬玻璃在波长 279.4nm、287.5nm、333.7nm、360.9nm、418.5nm、460.0nm、484.5nm、536.2nm 与 637.5nm 处有尖锐汲取峰，也可作波长校订用，但因根源不一样或跟着时间的推移会有细小的变化，使用时应注意；最近几年来，试试由高氯酸狄溶液校订双光束仪器，以10%高氯酸溶液为溶剂，配置含氧化狄（Ho2O3）4%的溶液，该溶液的汲取峰波长为241.13nm,278.10nm,287.18nm,333.44nm,345.47nm,361.31nm,416.28nm,451.30nm, 485.29nm,536.64nm和 640.52nm。
紫外-可见分光光度法1 简述紫外-可见分光光度法是在190-800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和含量测定的方法。
定量分析通常选择物质的最大吸收波长处测出吸光度，然后用对照品或吸收系数求算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定；对已知物质定性可用吸收峰波长或吸光度比值作为鉴别方法；若该物质本身在紫外光区无吸收，而其杂质在紫外光区有相当强度的吸收，或杂质的吸收峰处该物质无吸收，则可用本法作杂质检查。
物质对紫外辐射的吸收是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生，因此，紫外吸收主要决定于分子的电子结构，故紫外光谱又称电子光谱。
有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环等发色基团，均可在紫外区（200〜400nm）或可见光区（400〜850nm）产生吸收。
通常使用的紫外-可见分光光度计的工作波长范围为190~900nm。
紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图。
朗伯-比尔（Lambert-Beer）定律为光的吸收定律，它是紫外-可见分光光度法定量分析的依据，其数学表达式为:A=log -1=ECL式中A为吸光度；T为透光率；E为吸收系数；C为溶液浓度；L为光路长度。
如溶液的浓度（C）为1%（g/ml），光路长度（L）为lcm，相应的吸光度即为吸收系数以E1%表示。
如溶液的浓度（C）为摩尔浓度（mol/L），光路长度为lcm 1cm时，则相应有吸收系数为摩尔吸收系数，以表示。
2仪器紫外-可见分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处理系统等部分组成。
为了满足紫外-可见光区全波长范围的测定，仪器备有二种光源，即氘灯和碘钨灯，前者用于紫外区，后者用于可见光区。
单色器通常由进光狭缝、出光狭缝、平行光装置、色散元件，聚焦透镜或反射镜等组成。
色散元件有棱镜和光栅二种，棱镜多用天然石英或熔融硅石制成，对200〜400nm波长光的色散能力很强，对600nm以上波长的光色散能力较差，棱镜色散所得的光谱为非匀排光谱。
紫外-可见分光光度法是在190～800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。
当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。
因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。
从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。
物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。
因此，可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。
用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。
紫外可见吸光分光光度法在环境分析中的应用领域
摘要：紫外可见分光光度法是一种应用很广的方法。
在学习其基本原理和仪器结构后，得到该分析方法是一种具有广谱适用性的分析方法。
本文综述了紫外可见分光光度法的原理特点以及在环境监测中的应用，并且具体举例说明，概述了紫外可见分光光度法的应用方法以及注意事项。
关键词：紫外可见分光光度法，朗伯比尔定律，特点，水与废水，大气
1.引言
随着社会环保意识的增强，人们对环保工作越来越重视。
企业废水的分析与处理已经极大地影响着企业的发展和效益。
更深刻影响着人们的日常生活。
现在测试水和废水的仪器有紫外可见分光光度计。
它已在各个科学研究领域和现代生产与管理部门广泛应用。
2.紫外可见分光光度计基本原理
紫外可见吸光光度法是根据物质对紫外光和可见光选择性吸收而进行分析的方法。
吸光光度法的理论基础是光的吸收定律———朗伯—比尔定律，其数学表达式为
A=Kdc
朗伯—比尔定律的物理意义是，当一束平行单色光垂直通过某溶液时，溶液的吸光度A与吸光物质的浓度c及液层厚度d成正比。
当液层厚度d以cm、吸光物质浓度c以“mol·L-1”为单位时，系数K就以ε表示，称为摩尔吸收系数。
此时朗伯—比尔定律表示为
A=εdc
式中摩尔吸收系数单位为L·mol-1·cm-1。
吸光光度法具有较高的灵敏度和一定的准确度，特别适宜于微量组分的测量。
3.特点
（1）应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收，因此均可借此法加以测定。
到目前为止，几乎化学元素周期表上的所有元素（除少数放射性元素和惰性元素之外）均可采用此法。
Kr Rb Sr Y Zr Nb Mo Tc Ru Rh Pd Ag Cd In Sn Sb Te I Xe Cs Ba La Hf Ta W Re Os Ir Pt Au Hg Tl Pb Bi Po At Rn
Fr
注：
图内实线圈内的元素可用直接法测定，虚线圈内的元素可用间接法测定。
带A 的表示与环境污染有关的元素。
其中放射性元素只有铀和钍常用光度法测定，其它元素都采用放射性分析测量。
（2）灵敏度高
由于相应学科的发展，使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展，从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。
特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究，使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。
相对于其它痕量分析方法而言，光度法的精密度和准确度一致公认是比较高的。
（3）选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定，如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定，已有比较满意的方法了。
（4）准确度高
对于一般的分光光度法来说，其浓度测量的相对误差在1-3%范围内，如采用示差分光度法测量，则误差往往可减少到千分之几。
（5）适用浓度范围广
可从常量（1-50%）（尤其是使用示差法）到痕量（10-8-10-6%）（经预富集后）。
（6）分析成本低、操作简便、快速
由于分光光度法具有以上优点，因此目前仍广泛地应用于化工、冶金、地质、
医学、食品、制药等部门及环境监测系统。
目前光度法比较成熟，可测元素多，灵活性强。
有些大型仪器不易解决的分析问题，光度法可以发挥作用。
4.紫外可见分光光度法在环境监测中的应用
（1）水和废水监测
对于一个水系的监测分析和综合评价，一般包括水相（溶液本身）、固相（悬浮物、底质）、生物相（水生生物）。
在水质的常规监测中，紫外可见分光光度法占有较大的比重。
由于水和废水的成分复杂多变，待测物的浓度和干扰物的浓度差别很大，在具体分析时必须选择好分析方法。
（2）实例分析--紫外可见分光光度法测废水中的微量苯酚
苯酚的中性溶液在紫外光区的最大吸收波长λmax=270 nm。
基于Lambert-beer定律，在270 nm处测定不同浓度苯酚的标准样品的吸光值，并自动绘制标准曲线。
再在相同的条件下测定未知样品的吸光度值，根据标准曲线可得出未知样中苯酚的含量。
a.已知浓度的苯酚溶液（0.030g/L）的全谱扫描
三次扫描结果如下 :
标准样品的特征吸收峰在268.33nm 处，吸收峰值为0.4636，可知在测定工作曲线时所用的波长为268.33nm。
待测样品在268.33nm 的吸收峰值约为6，欲将其吸收峰值降低至0.3 左右，于是将待测样品稀释25 倍。
b.测量一系列标准浓度溶液的吸光度，绘制工作曲线，得到回归方程
标准溶液及其对应吸光度值
（1）仪器应放置在清洁、干燥、无尘、无腐蚀气体和不太亮的室内,工作台应牢固稳定。
（2）测定波长在360nm以上时可用玻璃比色皿;波长在360nm以下时,要用石英比色皿。
比色皿外部要用吸水纸吸干,不能用手触摸光面的表面。
（3）仪器配套的比色皿不能与其它仪器的比色皿单个调换。
如需增补,应经校正后方可使用。
（4）不测量时,应使样品室盖处于开启状态,否则会使光电管疲劳,数字显示不稳定。
（5）测定结束后,应依次关闭光路闸门、光源、稳压器及检流计电源,取出比色皿洗净,用镜头纸擦干,放于比色皿盒内。
