实例解析——紫外可见分光光度法(UV-VIS)
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紫外可见分光光度法的英文缩写紫外可见分光光度法的英文缩写是UV-Vis spectroscopy。
以下是一篇生动、全面且具有指导意义的文章,介绍紫外可见分光光度法(UV-Vis spectroscopy)的原理、应用以及实验步骤。
紫外可见分光光度法(UV-Vis spectroscopy)是一种常用的分析技术,旨在测量样品在紫外和可见光区域的吸收和透射。
通过测量样品溶液对特定波长的光的吸收程度,可以推断样品的化学组成、浓度和结构。
这项技术在化学、生物化学、环境科学等领域有着广泛的应用。
在UV-Vis分光光度法中,常用的仪器是UV-Vis分光光度计。
该仪器包括一个光源、一个样品室和一个光检测器。
光源通常是一种白炽灯或者氘灯,可以发射出可见光和紫外光。
样品室通常是一个透明的玻璃或石英池,用于容纳样品溶液。
光检测器可以测量样品溶液对光的吸收程度。
UV-Vis分光光度法的原理是根据比尔-朗伯-兰伯特定律(Beer-Lambert Law)。
该定律表明,在理想条件下,物质溶液吸光度与浓度成正比。
当光通过样品溶液时,物质吸收特定波长的光,吸收量与物质的浓度和路径长度成正比。
通过测量吸收量,可以得到样品溶液的浓度。
UV-Vis分光光度法可用于定量分析和定性分析。
在定量分析中,可以利用已知浓度的标准溶液构建标准曲线,从而确定未知样品的浓度。
在定性分析中,可以通过样品在不同波长下的吸收特性,判断样品的成分和结构。
进行UV-Vis分光光度法实验时,需要注意一些步骤。
首先,准备样品溶液,确保样品溶解彻底。
然后,调节分光光度计使其在零吸光度下进行基准校准。
接下来,将样品溶液装入样品室,并通过选择适当的波长和路径长度,测量吸光度,并记录数据。
最后,根据标准曲线或其他定量方法,计算样品的浓度。
UV-Vis分光光度法在各个领域有着广泛的应用。
在化学领域,它可用于分析有机化合物、无机化合物和金属离子的浓度。
在生物化学领域,它可用于研究蛋白质、核酸和酶等生物大分子的结构和浓度。
紫外-可见分光光度法名词解释1. 紫外- 可见分光光度法呀,这就像是给物质做一个特殊的“光线体检”。
啥意思呢?就是利用物质对紫外和可见区域的光有不同的吸收程度来研究物质的方法。
比如说,你想知道一杯果汁里某种维生素的含量,就可以用这个方法。
就像医生用各种仪器检查我们身体里的各种指标一样,这个方法就是用紫外 - 可见光来检查物质里的“成分指标”。
2. 紫外- 可见分光光度法呢,简单来说是个超级厉害的“光侦探”。
它专门研究物质和紫外 - 可见光之间的那点事儿。
物质就像一个个独特的小世界,不同的物质对紫外 - 可见光的吸收就像每个小世界独特的密码。
举个例子,在检测污水里的污染物时,这个方法就像一把神奇的钥匙,通过光的吸收情况,把污染物这个“坏蛋”给找出来,太酷了吧!3. 紫外- 可见分光光度法,听起来有点高大上,其实就是用紫外和可见光能看透物质的一种魔法。
哈哈,有点夸张啦。
就是说,不同的物质对特定波长的紫外 - 可见光的吸收是不一样的,这就像是每个人对不同口味的食物有不同的喜好一样。
比如说,在制药行业,要检测药品的纯度,这个方法就派上大用场了,就像我们挑水果时,一眼能看出哪个是好的,这个方法能一眼看出药品纯不纯。
4. 哟,紫外- 可见分光光度法可不得了。
这是一种让光和物质“聊天”的方法。
怎么聊呢?通过测量物质对紫外 - 可见光的吸收量来获取物质的信息。
打个比方,假如你是个寻宝者,在一堆矿石里找特殊的矿石,紫外 - 可见分光光度法就像一个寻宝探测器,不同的矿石对光的吸收不一样,就像宝藏有不同的标记一样,这个方法就能帮你找到你想要的“宝藏矿石”。
5. 紫外 - 可见分光光度法是啥?这是一种像给物质照X光的技术,不过用的是紫外 - 可见光哦。
你想啊,物质在光面前就像透明的一样,只是不同物质有不同的“透明度”,这个透明度就是对光的吸收。
比如在检测食品添加剂的含量时,这个方法就像一个精明的小管家,严格把关添加剂的量,防止过量的添加剂像“小恶魔”一样影响我们的健康。
紫外可见分光光度法名词解释
紫外-可见分光光度法(UV-Vis)是一种测试物质吸收、透射和反射光的方法,它包括紫外光(200-400纳米波长)和可见光(400-800纳米波长)范围。
这项技术用于定量分析物质的浓度,因为物质特定波长的吸收特性可以与其浓度成正比。
吸收光谱由吸光度(A)表示,其中A与光通过溶液时被吸收的光量成正比。
紫外-可见分光光度法可以广泛应用于许多领域,如生物化学、生物医学、环境科学、食品和饮料分析等。
它可以用于定量分析和质量控制,检测溶液中的有机和无机物质,分析颜料和染料的浓度,以及研究溶液中的化学反应和光化学过程。
在实验中,通常使用紫外-可见分光光度计来测量样品溶液在不同波长的吸光度。
通过与空白溶液进行比较,可以确定吸光度与浓度之间的关系,并计算出样品的浓度。
紫外可见分光光度法实例解析一、原理分析UV-VIS依据电子跃迁光谱,通常分子轨道基态外层电子处在,当分子外层吸收紫外或者可见辐射后,从基态向激发态跃迁。
其中紫外光谱:200~400nm,可见400~780nm。
其定性依据是不同物质对不同波长吸光度不同,定量依据是朗伯比尔定律A= εbc 吸光度分子二、适用范围一般适用于有机物,尤其是含有发色光能团、大共轭体系如含有苯环的有机物的测定三、特点:灵敏度高、选择性好、准确度好、通用性强、操作简单、价格低廉缺点:远不如红外光谱好,很多化合物在紫外没有吸收或者吸收很弱,而且紫外光谱特征性不强。
可以用来检验一些具有大的共轭体系或者发色官能团,并作为其他方法的补充。
四、仪器组成:光源——单色器——狭缝——样品池——检测器五、准备工作实验开始前查相关文献确定显色剂,显色剂:将待测组分形成有色化合物反应类型:络合反应氧化还原反应取代反应缩合反应显色剂选择条件:(1)灵敏度(2)选择性(3)生色物质稳定(4)组成恒定(5)显色剂在测定波长处无明显吸收,有色化合物与显色剂颜色对比大六、实验仪器前期设定:由待测物质查阅相关文献,确定使用可见区还是紫外区,确定光源钨丝或者氢、氘。
由待测物质确定样品池采用紫外区的石英池或者可见区的玻璃池检测器选用光电倍增管达到最佳检测效果七、配置标准检测液、显色剂溶液、参比溶液、标准溶液标准溶液:由分析纯的待测物质配置而成的溶液参比溶液:若仅待测组分和显色剂反应产物有吸收,其他试剂无吸收,用水做参比若显色剂和其他试剂略有吸收,试液本身无吸收,用“试剂空白”(不加试样溶液)参比若待测试液有吸收,而显色剂无吸收,则用“试样空白”(不加显色剂)做参比一般都选用试剂空白,即八、样品前处理,制成相应的溶液,如果其中有干扰离子,则加入掩蔽剂进行掩蔽或者采用化学方法分离出干扰离子九、实验条件确定:(1)最大吸收波长确定取1ml的标准溶液,1ml显色剂配制成溶液,稀释、定容、差文献确定谱线大致范围,多次测定,选择有最大吸收时的波长定为最大吸收波长,并且和标线对比,确定其误差是否在允许范围内,适当控制吸光度在最适范围(2)显色剂用量确定分别取1ml标准液,不同体积显色剂配成溶液,稀释、定容、多次测定得到吸光度-显色剂用量曲线,选择使得曲线平缓的最低用量再增加0.5ml为最佳显色剂用量(设为a ml)(3)显色温度确定取分别取1ml标准液、和a ml的显色显色液,稀释定容,测量在相同时间,不同温度下的吸光度显色时间曲线,得到最适温度T0(4)显色时间的确定分别取1ml标准液、和a ml的显色显色液,稀释定容,恒温T0测量,分在测量得到吸光度-显色时间曲线。
紫外可见分光光度法实例解析
一、原理分析
UV-VIS依据电子跃迁光谱,通常分子轨道基态外层电子处在,当分子外层吸收紫外或者可见辐射后,从基态向激发态跃迁。
其中紫外光谱:200~400nm,可见400~780nm。
其定性依据是不同物质对不同波长吸光度不同,定量依据是朗伯比尔定律A= εbc 吸光度分子
二、适用范围
一般适用于有机物,尤其是含有发色光能团、大共轭体系如含有苯环的有机物的测定三、特点:灵敏度高、选择性好、准确度好、通用性强、操作简单、价格低廉
缺点:远不如红外光谱好,很多化合物在紫外没有吸收或者吸收很弱,而且紫外光谱特征性不强。
可以用来检验一些具有大的共轭体系或者发色官能团,并作为其他方法的补充。
四、仪器组成:光源——单色器——狭缝——样品池——检测器
五、准备工作
实验开始前查相关文献确定显色剂,
显色剂:将待测组分形成有色化合物
反应类型:络合反应氧化还原反应取代反应缩合反应
显色剂选择条件:(1)灵敏度(2)选择性(3)生色物质稳定(4)组成恒定(5)显色剂在测定波长处无明显吸收,有色化合物与显色剂颜色对比大
六、实验仪器前期设定:
由待测物质查阅相关文献,确定使用可见区还是紫外区,确定光源钨丝或者氢、氘。
由待测物质确定样品池采用紫外区的石英池或者可见区的玻璃池
检测器选用光电倍增管达到最佳检测效果
七、配置标准检测液、显色剂溶液、参比溶液、标准溶液
标准溶液:由分析纯的待测物质配置而成的溶液
参比溶液:
若仅待测组分和显色剂反应产物有吸收,其他试剂无吸收,用水做参比
若显色剂和其他试剂略有吸收,试液本身无吸收,用“试剂空白”(不加试样溶液)参比
若待测试液有吸收,而显色剂无吸收,则用“试样空白”(不加显色剂)做参比一般都选用试剂空白,即
八、样品前处理,制成相应的溶液,如果其中有干扰离子,则加入掩蔽剂进行掩蔽或者采用化学方法分离
出干扰离子
九、实验条件确定:
(1)最大吸收波长确定
取1ml的标准溶液,1ml显色剂配制成溶液,稀释、定容、差文献确定谱线大致范围,多次测定,选择有最大吸收时的波长定为最大吸收波长,并且和标线对比,确定其误差是否在允许范围内,适当控制吸光度在最适范围
(2)显色剂用量确定
分别取1ml标准液,不同体积显色剂配成溶液,稀释、定容、多次测定得到吸光度-显色剂用量
曲线,选择使得曲线平缓的最低用量再增加0.5ml为最佳显色剂用量(设为a ml)
(3)显色温度确定
取分别取1ml标准液、和a ml的显色显色液,稀释定容,测量在相同时间,不同温度下的吸光度
显色时间曲线,得到最适温度T0
(4)显色时间的确定
分别取1ml标准液、和a ml的显色显色液,稀释定容,恒温T0测量,分在测量得到吸光度-显色时间曲线。
得到实验最佳显色时间t0
(5)实验酸度确定
分别取1ml标准液、和a ml的显色显色液,稀释定容,在T0 t0 不同PH值下测量得到吸光度—PH 曲线,得到最佳PH值
控制合适的吸光度,选择合适入射光波长,选择合适参比溶液
十、线性范围确定
取不同浓度下的葡萄糖标准溶液和aml显色液,调整最佳时间条件,测量吸光度,得到吸光度-浓度曲线求相关系数、线性范围
十一、测定样品含量及回收率是否符合要求:
由估计的待测物质浓度估计是否在线性范围内,如在的话按照1ml样品溶液+一定量标准样品配置一组实验组,另取一组样品空白组,测定样品含量、回收率及其偏差。
减去标准样品可得测定含量
十二、实验结果的定性分析
对照标准谱图,如果最大吸收峰和标准物相同,摩尔吸光系数相同,可认为是同种物质,但是一般选用此方法进行大共轭体系,发色官能团的鉴定
生色团谱线常常受到溶剂、其他取代基影响而发生红移和蓝移现象需要进行一定的理论计算
可通过反式异构体的λmax 和εmax大于顺式异构体判定是否为顺反异构物
十三、实验结果的定量分析
应用朗伯比尔定律,A= εbc,不同浓度同种物质,吸收曲线形状相似λmax不变。
吸收谱带强度和物质分子吸收的光子数成正比,是物质定量分析的依据
干扰消除:
选择干扰成分等吸收的两个波长
利用Aλ1 = Aa λ1 + Ai λ1
Aλ2 = Aa λ2 + Ai λ2
Ai λ1 = Ai λ2
Aa λ2 - Aa λ1 =(εaλ1 -εaλ2)bCa
定量分析过程中除了受到干扰离子作用外还可能受到增色减色效应的影响
十四、误差分析及其解决办法
(1)浓度过大时,吸光质点相互作用——将待测样品进行稀释后测量
(2)存在着解离,聚合,互变异构等化学平衡——反应前大概确定其中是否含有会和待测物质发生上
述反应的物质。
有的话应予以消除,或者在实验过程中,检查最大吸收波长与标准谱线的区别并且以此来进行分析是否存在上述反应。