HPLC_RI法快速准确测定大豆磷脂酰胆碱含量

HPLC-电雾式检测器（CAD）检测法测定脂质体中磷脂含量HPLC.电雾式检测器(CAD)检测法测定脂质体中磷脂含量姜庆伟,杨瑞,梅兴国(军事医学科学院毒物药物研究所,北京lOO85O)摘要:目的建立HPLC一电雾式检测器(ChargedAerosolDetection,CAD)检测脂质体磷脂含量及降解产物的方法.方法选用几种类脂材料制备成空白脂质体注射剂及冻干粉针剂,利用HPLC.CAD测定脂质体磷脂膜中各种类脂的含量,采用反相c色谱柱,流动相为甲醇一水,梯度洗脱,流速1mL?min～.结果4种类脂材料的平均回收率分别为99.2%,98.7%,99.5%,99.1%;RSD分别为1.1%,1.5%,0.8%,1.3%.结论实验充分证明了HPLC一电雾式检测器联合应用,可以快速,高效,准确地检测脂质体中的磷脂含量及杂质.关键词:脂质体;二棕榈酰磷脂酰胆碱;二硬脂酰磷脂酰甘油;单棕榈酰磷脂酰胆碱;二硬脂酰磷脂酰乙醇胺一聚乙二醇;高效液相色谱法中图分类号:R944文献标识码:A文章编号:1001—2494(2007)23—1794—03 DeterminationofPhospholipidandItsDegradationProductsinLiposomesforInjectionbyH PLC-ChargedAerosolDetection(CAD)JIANGQing—wei,YANGRui,MEIXing—guo(InstituteofPharnm~ologyandToxicology,AcademyofMilitaryMedicalSciences,8e~ng100850,China)ABSTRACT:OBJECTIVETodevelopaHPLC?CADmethodforthedeterminationofDSP E—PEG,phosphatidylcholine(DPPC),DSPG,lysophosphatidylcholine(MPPC)inphospholipidbilayerofblankliposomesforinje ction.METHODSAseparationwasper-formedonaCRcolumnwiththemobilephaseofme山anol—watergradientelutionattheflowrateof1mL?min～.RESULTSTheav. eragerecoveriesofDSPE—PEG,DSPG,MPPCandDPPCwere99.2%,98.7%,99,5%and99.1%andwithRSDsof1.1%, 1.5%,0.8%and1.3%respectively.CONCLUSIONHPLC—CAD,anewmethodforphospholipidsanalysis.provideshighsensitivityand reproducibility.KEYWORDS:liposome;DSPG;MPPC;DPPC;DSPE—PEG;HPLC电雾检测器(CAD)是一种独特的技术,HPLC洗脱液经雾化器中氮气的作用而雾化,其中较大的液滴在碰撞器的作用下经废液管流出,较小的溶质(分析物)液滴在室温下干燥,形成溶质颗粒.同时,用于载气的氮气分流形成的第二股氮气流经过电晕式装置(含高压铂金丝电极)形成带正电荷的氮气颗粒,与溶质颗粒反向相遇时经碰撞使溶质颗粒带上正电.为了消除由带有过多正电荷的氮气所引起的背景电流,在含溶质颗粒的气流流入静电检测计之前,通过一种称之为离子井的装置(带有低负电压)使迁移率较大的颗粒(即粒度较小的氮气颗粒)的电荷中和,而迁移率小的带电颗粒把它们的电荷转移给一个颗粒收集器,最后用一个高灵敏度的静电检测器测出带电溶质的信号电流.由此产生的信号电流与溶质(分析物质)的含量成正比.CAD可实际应用于任何非挥发或半挥发化合物,包括:药物化合物,脂类,碳水化合物,多肽,药物分子支架,类固醇,蛋白质,聚合物等.磷脂和胆固醇是脂质体主要成分,其稳定性直接影响脂质体药物的包封率和渗漏率及脂质体在体内的行为.磷脂酰胆碱可能水解产生有害杂质——溶血磷脂酰胆碱¨J,与动脉粥样硬化及血栓形成关系密切.目前,磷脂分析多采用HPLC—ELSD法,其特点是散射光的对数响应值与组分的质量的对数成线性关系,但此对数关系变异性较大,且其灵敏度较低,最低检测限在50～100ng之间.CAD检测器作为一种通用型检测器,在磷脂的分析检测方面显示出了非凡的能力,文献报道甘油三酯,胆固醇等类脂物质的最低检测限达到了1ng_9J.本实验建立了HPLC.CAD测定空白脂质体注射液及冻干粉针剂中DSPE.PEG,DSPG,MPPC,DPPC的含量,考察了不同放置条件下脂质体中磷脂的稳定性.作者简介:姜庆伟,男,硕士研究生通讯作者:梅兴国,男,教授,博士生导师Tel:(010)66932644E-mail:*****************ChinPharmJ,2007December,V o1.42No.23中国药学杂志2007年l2月第42卷第23期1材料与方法1.1材料与仪器2130型高效液相色谱仪(Hitachi公司),Corona电雾式检测器(美国ESA公司),超纯水机(LABCONCO),二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC),二硬脂酰磷酯酰甘油(DSPG),单棕榈酰磷酯酰胆碱(MPPC),二硬脂酰磷脂酰乙醇胺.聚乙二醇(DSPE.PEG)对照品(Lipoid公司,纯度>99%),甲醇为色谱纯,三氯甲烷为分析纯,纯水(实验室自制).1.2色谱条件Corona参数:气体:241.3KPa氮气;Filter:Low;Range:200pA;HPLC参数:流动相A为水;流动相B为甲醇.梯度洗脱时问表:0.0min,10/90(%A/%B,以下同);2.5min,0/100;12.0min,0/100;15.0rain,10/90.流速1.0mL?min～,色谱柱Ve—nusilXBPC8(4.6mm×250mm,5m),柱温25℃,进样量10L.1.3溶液的配制1.3.1标准溶液的配制精密称取DSPE.PEG, DSPG,MPPC,DPPC各10mg,置于10mL量瓶中, 加入甲醇.三氯甲烷(1:2)溶液3mL溶解,并用甲醇稀释至刻度.分别精密量取0.05,0.1,0.2,0.3,0.4,0.6mL的贮备液到1～6号10mL量瓶中,加入甲醇一三氯甲烷(8:2)稀释至刻度,混合均匀,依照浓度递增分别标定为1～6号标准溶液.1.3.2脂质体样品溶液配制分别取实验室自制的空白脂质体注射液及冻干复水空白脂质体(磷脂质量浓度约为25g?L)20L,加入到10mL量瓶中,加入3mL三氯甲烷.甲醇(2:1)的溶液溶解,并加入甲醇稀释至刻度,经0.45m的微孔滤膜过滤后,备用.1.3.3系统适应性溶液配制取空白脂质体样品经酸(1mol?LHC1),碱(1tool?LNaOH),氧(向溶液中通氧3h),热(100℃水浴,2h),强光照射(4500Lx,72h)破坏后,按"1.3.2"样品配置方法配制系统适用性溶液,备用.1.4系统适用性取初始流动相进样测定,观察基线状况.空白脂质体注射液中各辅料及酸,碱,氧化,高温,强光破坏试验中产生的杂质是否影响各磷脂成分的检测. 检查酸,氧化,高温,强光破坏试验中MPPC的含量是否增大.1.5精密度取同一批样品,按"1.3.4"方法制备样品溶液,中国药学杂志2007年12月第42卷第23期平行测定6次,计算平均含量和RSD值.1.6回收率分别精密称取处方量辅料和DSPE.PEG,DSPG,MPPC,DPPC对照品适量,按样品溶液制备方法用甲醇一三氯甲烷(8:2)配成体积分数80%,100%,120%的溶液各3份,进样测定,计算回收率及RSD值.1.7标准曲线的绘制取各标准液,每份样品进样3次,进样量10L,按峰面积一浓度绘制各组分标准曲线,并计算回归方程,及r值.1.8样品测定将空白脂质体注射液和冻干粉针剂,分别置25℃(相对湿度75%),4℃的条件下放样.分别于第0,30,60,90天取样,按样品溶液配制方法配制样品溶液,进样测定,以外标法计算含量.2结果2.1系统适用性系统适用性试验结果表明,空白脂质体注射液中各辅料和酸,碱,氧化,高温,强光破坏试验中产生的杂质均不影响DSPE—PEG,DSPG,MPPC,DPPC的检测.检查酸,氧化,高温,强光破坏试验中MPPC的含量增大.见图1.3367l00l331672O0图1系统适用性HPLC色谱图A一空白色谱图;B一经酸破坏后的色谱图;1一二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇;2一二硬脂酰磷酯酰甘油;3一单棕榈酰磷酯酰胆碱;4一二棕榈酰磷脂酰胆碱,Fig1TypicalHPLCchromatogramofsystemsuitabilityA—blank;B—destroyedbyacid;1一DSPE—PEG;2一DSPG;3一MPPC;4一DPPC 2.2精密度DSPE.PEG,DSPG,MPPC,DPPC对磷脂的含量分别为3.35,3.31,3.20,12.56g?L～,RSD值分别为1.8%,2.1%,1.1%,1.5%(n=6).2.3回收率DSPE—PEG,DSPG,MPPC,DPPC的平均回收率分另U为99.2%,98.7%,99.5%,99.1%,RSD分别为1.1%,1.5%,0.8%,1.3%(n=3).Chin0J.2007December.V o1.42No.232.4标准曲线DSPE.PEG,DSPG,MPPC,DPPC4种磷脂的质量浓度与峰面积呈直线关系,且线性关系良好,回归方程分别为Y=34874x一1551O,r=0.9988;Y=33469x一26669,r=0.9983;y=40397x+16755,r=0.9991;y=46909x+23795,r=0.9995.2.5样品测定脂质体样品中的其他组分与磷脂能够有效分离,不影响磷脂的测定,其中2.70min的色谱峰为脂质体中加入冻干保护剂,在磷脂分析的过程中可以同时进行定量测定,见图2.样品测定结果见表1.由表1可见,25℃条件下放置的脂质体注射液中的MPPC含量均有不同程度的提高.实验结果表明,脂质体冻干粉针样品稳定性明显优于注射液.003367j00j33j67200t/min图2脂质体样品的HPLC色谱图1一加入冻干保护剂脂质体;2一药物Fig2HPLCChromatogramofliposomesample 1——liposomespikedwithfreeze-?dryprotectiveagent;2——drug 表1样品磷脂含量测定Tab1Phospholipidcontentsinliposomesample4讨论实验表明,CAD检测器作为一种新型通用检测器,其性能完全适用于磷脂分析.实验得到的磷脂标准曲线中,CAD检测器的响应值与组分的质量成直线关系,不同于ELSD检测器响应值与组分质量ChinPhamJ.2007December,V o1.42No.23的对数关系,更便于计算,且具有更高的灵敏度,更好的重现性.对于CAD检测器,流动相的pH值过高会造成基线飘移和噪音增大,实验中采用的流动相的pH值应小于8.5,可以采用适量的乙二胺和冰醋酸调节流动相的pH值.实验建立的反相HPLC—CAD测定磷脂的方法采用的甲醇.水溶剂系统具有溶剂系统简单,低毒的特点;使用c色谱柱具有适中的极性,满足高效分离,快速检测要求;CAD检测器操作简便,灵敏度高,重现性好.实验中需使用高纯氮气,并保持压力稳定,有利于基线的平稳.由于DSPE—PEG和DSPG两种磷脂的性质非常相近,且对流动相的水分含量敏感,因此在实验中应对甲醇中的水分含量进行严格的控制,保证磷脂的有效分离.色谱图中各浓度的DPPC峰均有不同程度的拖尾,主要是由于甲醇的洗脱能力较弱导致的.本实验建立的HPLC.CAD检测法完全满足磷脂的分析检测要求,为脂质体制剂的磷脂成分分析检测提供了一套完整的方法,成为脂质体制剂中磷脂的含量和降解产物检测的一种有效手段. REFERENCES[1]SAKAIM,MIYAZAKIA,HAKAMA TAH,eta1.Lysophosphati- dylcholineplaysanessentialroleinthemitogeniceffectofoxi- dizedlowdensitylipoproteinonmurineacrophages[J].,Biol Chem,1994,269(50):31430-31435.[2]GENGWF,NIUCQ,ZHANGT,eta1.Determinationofcompo—sitionofphospholipidbilayerindoxombicinhydrochloridelipo—BonesforinjectionbyHPLC?ELSD[J].Chin,om(中国医药工业杂志),2005,36(6):359-361.[3]IOFFEV,KALENDAREVT,RUBINSTEINI.eta1.Reverse phaseHPLCforpolarlipids.SimpleandselectiveHPLCproce? duresforanalysisofphospholipid-basedderivativesofvalpmic acidandV ariousnon?steroidalanti—inflammatorydrugs[J]., PfmmBiomedAnal,2002.30:391_4O3.[4]NORDBACKJ,LUNDBERGE,CHRISTIEW,eta1.Separation oflipidclassesfrommarineparticulatematerialbyHPLCona polyvinylalcohol?bondedstationaryphaseusingdual—channele. vaporativelight?scatteringdetection[J].MarChem,1998,60: 165.175.[5]ZHANGWN,HEHB,FENGYQ,eta1.Separationofphos. phatidylcholineandphosphatidylethanolaminebyusinghigh—per? formancedisplacementchromatography[J].,ChromatogrA, 2004,1036:145—154.[6]YOONTH,KIMIH.Phosphatidylcholineisolationfromeggyolk phospholipidsbyhigh—performanceliquidchromatography[J]., ChromatogrA,2002,949:209-216.[7]GRIZARDG,SIONB,BAUCHARTD,eta1.Separationandquan—tificationofcholesterolandmajorphospholipids,classesinhumanBoneRbyhigh?performanceliquidchromatographyandlight?scatter? ingdetection[J].,ChrormaogrB,2000,740:101.107.[8]OLIVIERM,OLIVIERR,DIDIERE,eta1.Directlipidquantita. tionofcationiclipoBomesbyreversed?phaseHPLCinlipoplexpmp~ationprocess[J].Eur,mBi~harm,2000,50:353—356.[9]MOREAURA.TheanalysisoflipidsviaHPLCwithaCharged AerosolDetector[J].却池,2006,41(7):727.(收稿日期:2006.12.11)中国药学杂志2007年12月第42卷第23期。

大豆磷脂中PC、PE、PI测定方法的研究王瑛瑶【摘要】为准确快速地对大豆磷脂中的主要成分磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇(PI)进行定量分析,对分析柱、流动相、检测波长进行了选择与优化,最终建立了以Lichrosorb Si60为分析柱,205 nm波长下,以V(正己烷)∶V(异丙醇)∶V(1%乙酸)=8∶8∶1为流动相的高效液相色谱测定法.【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】2008(033)002【总页数】3页(P73-75)【关键词】大豆磷脂;磷脂酰胆碱;磷脂酰乙醇胺;磷脂酰肌醇;高效液相色谱【作者】王瑛瑶【作者单位】国家粮食局,科学研究院,北京,100037【正文语种】中文【中图分类】工业技术2008年第 33 卷第 2 期中国油脂CHINA OILSANDF'ATS73检化验大豆磷脂中 PC 、 PE 、 PI 测定方法的研究王瑛瑶（国家粮食局科学研究院，北京 100037 ）摘要：为准确快速地对大豆磷脂中的主要成分磷脂酰胆碱( PC)、磷脂酰乙醇胺 (PE) 、磷脂酰肌醇 ( Pl) 进行定量分析，对分析柱、流动相、检测波长进行了选择与优化，最终建立了以 LichrosorbSi - 60为分析柱，205nm 波长下，以矿（正己烷）：y （异丙醇）：y （ 1% 乙酸） =8 ：8 ：1 为流动相的高效液相色谱测定法．，关键词：大豆磷脂；磷脂酰胆碱；磷脂酰乙醇胺；磷脂酰肌醇；高效液相色谱中图分类号： TQ646文献标志码：A文章编号：1003-7969(2008)02-0073-03 QuantitativedeterminationofPC,PEandPI insoybean phospholipids WANG YingyaoAc'ademyof'StateAdministrationof'Grain,P.R.C.,Beijing100037,China) Abstract:Thc analysis column.the nu,l)ilc-phaseandtheUVdetector wavelengthwerechosedamlopti- mized inorcler toquicklyancl quancitativelydeterminethemaincompositionsof phosphatidylcholine PC),phosphaticlylethanclamine(PF.) andphosphatidylinositol(P[) in soybeanphospholipids.Asuc- cletisf'ul highperformanceliquj( 】 c-hnwalography(HPLC)methoclwasdevelopedbyu singthefollowing‘ )pPratin gc-onditions: Lichrosorl) Si -60(1(’ JuⅢn,mobile phaseV(hcxane):V (isopropanol):V(1a/oacetic: ac-icls()Iutic,n)=8:8: I,UVclrtec-tior]wavfllength205nm. Keywords:soyl)eanphosphc)li[)icIH;I)hospliacidylcholine ; phosphatidylethandamine; phosphatidylinositc)l; HPl.C.磷脂是生命的基础物质，是人体正常代谢与健康生存不可缺少的物质，已被广泛应用于食品、药品、化妆品、化学工业等领域。

文件制修订记录1.0目的制定磷脂的检验操作规程，确保生产质量。

2.0适用范围本规程适用于磷脂的质量评价与质量控制。

3.0职责质量管理部负责本规程的实施。

4.0正文4.1 外观取适量试样，置于清洁、透明的玻璃器皿中，在自然光线下，目视观察其色泽和状态，嗅其气味。

4.2含量测定4.2.1试剂4.2.1.1 正己烷：色谱纯。

4.2.1.2 异丙醇：色谱纯。

4.2.1.3 水：色谱纯。

4.2.1.4 冰醋酸：色谱纯。

4.2.1.5 1％冰醋酸溶液：1ml冰醋酸用色谱纯水定容到100ml。

4.2.1.6 磷脂酰胆碱：标准物质，纯度≥99％。

4.2.1.7 流动相：V(正己烷)+V(异丙烷)+V(1％冰醋酸溶液)=8+8+1。

4.2.2仪器与设备4.2.2.1 分析天平：精度为0.0001g。

4.2.2.2 刻度吸管：0.5ml，1ml，5ml。

4.2.2.3 容量瓶：5ml，10ml，100ml。

4.2.2.4量筒：100ml，500ml，1000ml。

4.2.2.5 液相色谱仪。

4.2.2.6 液相色谱柱：Si-60柱子，填料粒度为5um。

长度250mm，内径4.6mm。

4.2.3分析步骤4.2.3.1 标准溶液的配制精确称取约20mg磷脂酰胆碱，用V(正己烷)+V(异丙醇)+V(1％冰醋酸溶液)=8+8+1混合溶剂溶解并定容到10ml ，配制磷脂酰胆碱标准溶液，使溶液中磷脂酰胆碱为2mg/ml 。

准确吸取此溶液0.25ml 、1.25ml 、2.50ml 、3.75ml 、5.00ml ，并用V(正己烷)+V(异丙烷)+V(1％冰醋酸溶液)=8+8+1混合溶剂定容到5ml ，使溶液中磷脂酰胆碱的最终浓度为0.1mg/ml~2.0mg/ml 。

低于﹣16℃保存备用，保存时注意容器口的密封。

4.2.3.2 标准工作曲线的制作分别取不同浓度的磷脂酰胆碱标准溶液10uL 注入液相色谱中。

以样品组分浓度为横坐标，组分峰面积为纵坐标，绘制磷脂酰胆碱的标准工作曲线。

饲料级大豆磷脂中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的检测研究杨海锋;赵志辉;顾赛红;邢增涛【摘要】本研究探讨了应用高效液相色谱法同时检测饲料添加剂大豆磷脂中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的可行性.结果表明:应用液相色谱法检测三种主成分含量方法的相对标准偏差均小于4%.回收率均为96%～103%.该方法应用于测定饲料级大豆磷脂中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇含量可行.【期刊名称】《中国饲料》【年(卷),期】2010(000)006【总页数】3页(P41-43)【关键词】大豆磷脂;磷脂酰胆碱;磷脂酰乙醇胺;磷脂酰肌醇;高效液相色谱法【作者】杨海锋;赵志辉;顾赛红;邢增涛【作者单位】上海市农科院农产品质量标准与检测技术研究所;上海市农科院农产品质量标准与检测技术研究所;上海市农科院农产品质量标准与检测技术研究所;上海市农科院农产品质量标准与检测技术研究所【正文语种】中文【中图分类】S816.17磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇是大豆磷脂中最重要的活性成分，其所占比重的高低，是衡量大豆磷脂品质优劣的一个重要标准（章慧芳和陆娅，2007）。

随着大豆磷脂市场需求的不断扩大，经常发生大豆磷脂产品的贸易纠纷。

广大生产企业和用户都希望对大豆磷脂中的有效成分磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇进行检验和检测。

国内外研究报道的大豆磷脂的检测方法主要是定磷法、薄层色谱法（TLC）、高效液相色谱法（HPLC）等（张颖颖等，2006；卜延刚等，2004）。

定磷法需要消化、显色等过程，操作繁琐、耗时。

薄层色谱法干扰因素多，灵敏度不高，显色后定量误差较大而主要用于定性分析。

高效色相色谱法以其高速、高效、高灵敏度、系统封闭避免不饱和键氧化等优点，受到普遍关注（董晓渭等，2000；Mounts和Nash，1990）。

然而由于研究者应用的前处理技术、检测方法都不相同（张德权等，2006；Rombaut等，2005；Singleton 和Stikeleather，1995；Becart等，1990），即使都使用HPLC技术，但分离柱、填料、流动相也存在差异，缺乏一个统一的标准。

饲料级大豆磷脂中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的
检测研究
杨海锋;赵志辉;顾赛红;邢增涛
【期刊名称】《中国饲料》
【年(卷),期】2010(000)006
【摘要】本研究探讨了应用高效液相色谱法同时检测饲料添加剂大豆磷脂中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的可行性.结果表明:应用液相色谱法检测三种主成分含量方法的相对标准偏差均小于4%.回收率均为96%～103%.该方法应用于测定饲料级大豆磷脂中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇含量可行.【总页数】3页(P41-43)
【作者】杨海锋;赵志辉;顾赛红;邢增涛
【作者单位】上海市农科院农产品质量标准与检测技术研究所;上海市农科院农产品质量标准与检测技术研究所;上海市农科院农产品质量标准与检测技术研究所;上海市农科院农产品质量标准与检测技术研究所
【正文语种】中文
【中图分类】S816.17
【相关文献】
1.HPLC-ELSD法测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱含量 [J], 孙浩洋;汪勇;欧仕益
2.低碳醇对大豆磷脂中磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺的选择性研究 [J], 曹栋;裘爱泳;
王兴国;蒋大勇
3.气相色谱法测定大豆磷脂中磷脂酰肌醇 [J], 高树刚;申书昌;王文波;陈志强;安红
4.丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的测定方法验证 [J], 丁丽燕; 郑娟; 朱晓晓
5.丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的含量测定[J], 梁亚龙; 陈艳明; 倪成良; 王东凯
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大豆磷脂中卵磷脂检测方法研究嘿，朋友们！今天咱来唠唠大豆磷脂中卵磷脂检测方法这个事儿。

这可不像听起来那么枯燥哦，说不定这里面的门道还能让你眼前一亮呢！大豆磷脂啊，那可是个好东西。

在好多领域都有它的身影，而卵磷脂又是大豆磷脂里的重要成分。

那怎么准确地检测出卵磷脂的含量呢？这就需要一些靠谱的方法啦。

先说这薄层色谱法吧。

它就像是一个小小的侦探，能把卵磷脂从大豆磷脂这个“大家庭”里给揪出来。

把样品点在薄板上，然后让溶剂带着各种成分跑起来。

嘿，不同的成分跑的速度可不一样哦，卵磷脂就会在特定的位置留下它的“脚印”。

再通过和标准品对比，就能大概知道卵磷脂的含量啦。

不过呢，这个方法虽然简单直观，但是精度有时候就像个调皮的小孩，不是特别高。

气相色谱法那可就有点高大上啦。

它就像一个超级精密的扫描仪，能把样品里的各种成分分得清清楚楚。

把样品气化后，让它们在柱子里跑，不同的成分在柱子里的停留时间不一样，卵磷脂也会在特定的时间跑出来被检测到。

这个方法的精度那是相当高的，就像给卵磷脂来了个高清“特写”，能把它的含量测个明明白白。

但是呢，它也有个小缺点，就是前期的处理比较麻烦，就好像给它准备一场“华丽登场”，得费不少功夫准备道具似的。

还有那高效液相色谱法，这可是个厉害的角色。

它就像一个高效的分拣员，能快速准确地把卵磷脂和其他成分分开。

样品被注入到流动相里，在柱子里流动，通过和固定相的相互作用，卵磷脂就会在合适的时间被检测出来。

这个方法不仅精度高，而且速度快，就像开了加速挂一样，能很快给出结果。

不过呢，仪器比较贵，维护起来也有点麻烦，就像养个娇贵的宝贝一样，得精心伺候着。

除了这些，还有一些其他的方法呢。

比如说光谱法，它就像是给卵磷脂拍照片，通过分析它对不同波长光的吸收情况来确定含量。

这方法简单快速，就像随手拍个照那么容易。

但有时候也会受到其他成分的干扰，就像拍照的时候旁边突然冒出来个捣乱的家伙，影响了效果。

在实际检测的时候啊，咱得根据具体情况来选择合适的方法。

HPLC-ELSD色谱法测定氢化大豆卵磷脂的含量
佚名
【期刊名称】《《中外食品加工技术》》
【年(卷),期】2003(000)012
【摘要】建立了检测氢化大豆卵磷脂 (氢化大豆磷脂酰胆碱 ,HSPC)的高效液相色
谱法。

采用梯度洗脱及蒸发光散射检测器(ELSD) ,流动相为氯仿-异丙醇-水系统。

结果表明 ,HSPC的保留时间为 9.3min ,定量线性范围 0 .5～ 2 .3mg/mL(r
=0 .9996 ) ,相对标准偏差 1.4 9%。

建立的方法用于氢化大豆卵磷脂的含量测定 ,
灵敏度高 ,操作简便。

【总页数】1页(P75)
【正文语种】中文
【相关文献】
1.HPLC-ELSD色谱法测定氢化大豆卵磷脂的含量 [J], 冯会迎;胡忍乐;韩欢牛;李进旺;杨治旻
2.高效液相色谱法测定复方氢化可的松霜中氢化可的松的含量 [J], 宁德英
3.高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱法测定食品中多形态硒含量 [J], 房艳;王贝;高俊海;张雅莉
4.高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱法测定食品中多形态硒含量 [J], 房艳;王贝;高俊海;张雅莉
5.高效液相色谱法测定复方氢化可的松栓中醋酸氢化可的松的含量 [J], 高同舟;慕芳英;韩映晨;张晓玲;郑美善;谭荭
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HPLC-ELSD法测定大豆磷脂注射液中有关物质蒋玲;陈亮;刘衍兴;屠锡德;周建平【期刊名称】《药学进展》【年(卷),期】2007(31)8【摘要】目的:建立HPLC-ELSD法测定大豆磷脂注射液中有关物质溶血性磷脂酰胆碱的含量.方法:采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-冰醋酸(500∶10,用三乙胺调pH至6.2)为流动相,柱温为室温,流速为1.0 mL/min,进样量为10 μL;蒸发光散射检测器参数:载气为空气,载气压力为250 kPa,载气流量为2.0 L/min,漂移管温度为60 ℃.结果:大豆磷脂注射液中主成分磷脂酰胆碱和溶血性磷脂酰胆碱能很好地分离检出,其线性浓度范围分别为20.4～801.6(r=0.999 5)和10.652～532.6(r=0.999 4)mg/L,溶血性磷脂酰胆碱的最低检测限为5.326 ng.辅料对检测无干扰.结论:该方法准确、灵敏、快捷,适用于大豆磷脂注射液中有关物质的测定.【总页数】4页(P366-369)【作者】蒋玲;陈亮;刘衍兴;屠锡德;周建平【作者单位】徐州市光合生物营养品有限公司研发部,江苏,徐州,221003;江苏恩华药业集团有限责任公司技术中心,江苏,徐州,221003;徐州市光合生物营养品有限公司研发部,江苏,徐州,221003;中国药科大学药剂学教研室,江苏,南京210009;中国药科大学药剂学教研室,江苏,南京210009【正文语种】中文【中图分类】O657.72【相关文献】1.HPLC-ELSD法测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱含量 [J], 孙浩洋;汪勇;欧仕益2.HPLC-ELSD法测定氨甲环酸注射液的含量及有关物质 [J], 张发喜3.HPLC-ELSD法测定硫酸依替米星氯化钠注射液有关物质 [J], 赵卫;袁耀佐;芦丽;张玫;4.HPLC-ELSD法测定硫酸依替米星氯化钠注射液有关物质 [J], 赵卫;袁耀佐;芦丽;张玫5.HPLC-ELSD法测定脂肪乳注射液的含量及有关物质 [J], 王亚红;陈建明;张仰眉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

血浆磷脂酰胆碱含量的测定实验报告引言本实验旨在测定血浆中磷脂酰胆碱的含量。

磷脂酰胆碱是人体内一种重要的生物活性物质，它在神经传递、脂质代谢和免疫调节等多个生理过程中起着重要的作用。

通过准确测定血浆中磷脂酰胆碱的含量，可以为研究疾病发生机制、筛选药物和评估治疗效果等提供重要参考.实验方法1. 实验前准备：- 准备好血浆样本和所需试剂。

- 根据实验需要，确保所有试剂都符合质量标准，避免污染和误差。

2. 样本处理：- 取相应的血浆样本，将其离心分离血浆。

- 将血浆样本加入离心管，并在高速离心下离心沉淀。

- 严格按照实验操作要求，避免样本交叉污染。

3. 磷脂酰胆碱含量的测定：- 取一定量的血浆样本，加入适量的试剂进行反应。

- 使用合适的技术手段（例如比色法、质谱法等）测定磷脂酰胆碱含量。

- 根据实验结果计算血浆中磷脂酰胆碱的浓度。

4. 实验数据处理：- 对实验数据进行统计分析，包括计算均值、标准差等。

- 根据实验设计和研究目的，使用适当的统计方法进行数据解读和概括。

实验结果根据实验测定，我们得到了血浆样本中磷脂酰胆碱的含量浓度。

详细的数据结果和统计分析见附表。

结论通过本实验测定，我们得到了血浆中磷脂酰胆碱的准确含量。

这为研究疾病机制、评估治疗效果等提供了重要依据。

实验结果的可重复性和准确性对于进一步的研究具有重要意义。

讨论与展望本实验中使用的方法对于测定血浆磷脂酰胆碱含量是有效的，但仍存在一些局限性。

例如，实验可能受到样本数量和质量的限制，同时样本的采集和处理也可能对实验结果产生影响。

在今后的研究中，可以进一步探索改进实验方法和扩大样本量以提高实验结果的可靠性和可重复性。

参考文献[1] 张某某, 李某某, 等. 血浆磷脂酰胆碱测定方法的比较与应用[J]. 化学杂志, 20XX, XX(X): XX-XX.附录附表1：血浆样本中磷脂酰胆碱含量测定结果。

高效液相色谱法检测蛋黄卵磷脂中的磷脂酰胆碱刘静波;常皓;王二雷;宫新统;姜轶群【期刊名称】《吉林大学学报：工学版》【年(卷),期】2012(0)S1【摘要】为建立一种准确、简便的蛋黄卵磷脂中磷脂酰胆碱的检测方法,采用高效液相色谱-紫外检测法对其进行了研究。

SHIMADZU LC-2010高效液相色谱仪配备AGILENT ZORBAXRX-SIL型硅胶柱,在200nm下对磷脂酰胆碱进行检测,流动相采用简单的甲醇/乙酸二元体系,加入的乙酸溶液改善了磷脂酰胆碱的峰形,有效抑制了严重的拖尾现象。

流速较低,为0.5mL/min,减少了流动相的使用量。

采用外标法定量,标准曲线线性范围较宽,为10～160μg/mL。

检出限为0.5904μg/mL,定量限为1.9680μg/mL。

经方法学验证性试验,证明本方法精密度、稳定性良好,准确度较高。

【总页数】5页(P449-453)【关键词】食品加工技术;高效液相色谱;磷脂酰胆碱;卵磷脂【作者】刘静波;常皓;王二雷;宫新统;姜轶群【作者单位】吉林大学军需科技学院营养与功能食品研究室;吉林大学生命科学学院【正文语种】中文【中图分类】T-55【相关文献】1.蛋黄卵磷脂和蛋黄磷脂酰胆碱的组成与结构分析 [J], 徐明明;吕晶;方欣欣;郑璐侠;陈钢2.高效液相色谱法测定卵磷脂中磷脂酰胆碱的含量 [J], 关明;王岩;陈坚3.高效液相色谱法测定磷脂软胶囊中磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰乙醇胺的含量 [J], 王海波; 莫紫梅; 袁光蔚; 廖子祎4.高效液相色谱法测定大豆磷脂类保健食品中的磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇 [J], 贺茜;吕卓;史朝烨;雷会宁;樊少娟;马月;李涛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

磷脂含量测定方法
磷脂是一类非常重要的生物分子，在细胞结构和功能中起着关键作用。

那怎么来测定磷脂含量呢？这可是个有趣的问题呀！
常见的方法之一就是比色法，就好像我们通过观察颜色的变化来判断一件事情一样。

通过特定的试剂与磷脂反应，产生有颜色的物质，然后测量这个颜色的深浅，就能推算出磷脂的含量啦！这是不是很神奇呢？就如同我们根据天上云朵的颜色和形状来推测天气情况一样。

还有薄层层析法呢，它就像是给磷脂们来一场“选美比赛”。

把磷脂样品在薄层板上展开，不同的磷脂会在特定的位置上显现出来，然后通过与标准品比较，就能知道有多少磷脂啦！这多有意思呀，仿佛是在给磷脂们划分各自的“地盘”。

高效液相色谱法也是很厉害的哦！它就像是一个超级精确的“分拣员”，可以把不同的磷脂非常准确地分离出来，然后再进行定量分析。

这可真是高科技呀，能把那么复杂的磷脂混合物分得清清楚楚。

另外，核磁共振法也不能小瞧呀！它能从分子层面上告诉我们磷脂的信息，就好像是直接钻进磷脂的“内心世界”去探索一样。

每种方法都有自己的特点和适用范围呢，我们得根据具体情况来选择合适的方法。

就像我们选择工具一样，不同的任务需要不同的工具，不是吗？我们不能随便拿起一个方法就用，得像个聪明的工匠一样，精心挑选最适合的工具来完成我们的工作。

总之，磷脂含量测定方法多种多样，各有千秋。

我们要善于利用这些方法，去揭开磷脂世界的神秘面纱，去探索那些隐藏在细胞中的奥秘。

这难道不是一件令人兴奋的事情吗？让我们带着好奇和热情，去深入了解磷脂含量测定的奇妙世界吧！。