Livestock and Poultry

试验研究ＬＩＶＥＳＴＯＣＫＡＮＤＰＯＵＬＴＲＹＩＮＤＵＳＴＲＹＮｏ．６，２０２２基金项目：宜宾职业技术学院自然科学项目“抹荷竹叶替代部分麦麸对肉用家兔生长性能影响的研究”（ＺＲＫＹ２１ＹＢ ０８）；宜宾职业技术学院院级科研平台（ｙｂｚｙ２１ｋｙｐｔ ０７）；宜宾职业技术学院院级创新团队（ｙｂｚｙ２１ｃｘｔｄ ０８）竹叶作为畜禽饲料的饲用价值评定李　貌，孙佳静，黄荣焱，李帅东（宜宾职业技术学院，四川宜宾６４４０００）摘　要：竹子是一种常绿植物，我国的竹资源非常丰富，各种竹产物被研究并应用到生产中。

而竹叶是竹的重要组成部分，竹叶是国宝大熊猫的重要食源，然而，很少有对其营养价值及在畜禽生产上的应用进行报道。

主要从常见竹叶的干物质、粗蛋白质、粗纤维、粗脂肪、粗灰分、抗营养因子及其化学成分等方面进行分析评定，为其在畜牧业上的应用奠定基础。

关键词：竹叶；畜禽；营养价值；抗营养因子ｄｏｉ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８－０４１４．２０２２．０６．００２　引言竹为多年生草本植物，属于竹亚科和禾本科。

该亚科包含７５个属，约１２５０种。

中国是世界上竹类资源最丰富的国家，有５００多种，据最新报道我国的竹林面积已超过１亿亩（１亩≈６６６．７ｍ２），约占世界竹林面积的２５％，其面积和产量均居世界之冠。

长期以来盲目开荒及超载过牧使得草地资源不断被破坏，草畜矛盾十分尖锐。

开发新的饲料资源对畜牧业的发展至关重要。

众所周知，竹叶是大熊猫的主食，也可以用作畜禽的食物来源。

国内外有不少养殖户将竹叶作为牛和羊等家畜的饲料原料，但未对其营养价值进行过系统评价。

而粗蛋白质、粗灰分、粗脂肪、粗纤维、干物质、矿物质含量等是评价一种物质能否作为家畜饲料的重要评定指标。

因此对竹叶饲用价值进行深层次的评价对于促进农林产业发展和饲料资源的开发利用具有重要指导意义。

竹叶的主要营养成分１ １　干物质动物的摄食值和摄食能力决定其干物质的消耗。

干物质消化率在３０％以上、有机物消化率在５０％以上、干物质总灰分在１０％以下的品种一般被认为是好饲料。

疫病防治ＬＩＶＥＳＴＯＣＫＡＮＤＰＯＵＬＴＲＹＩＮＤＵＳＴＲＹＮｏ．１１，２０２３２种常见牛病的中药疗法马春花福海县解特阿热勒镇农业（畜牧业）发展服务中心，新疆福海８３６４００摘　要　由于饲养管理不当，牛食道哽塞病和泄泻疾病常有发生。

在临床上采用中药疗法收到了较好的效果。

对２种病的治疗方法进行介绍，为其治疗提供参考。

关键词　牛；食道梗塞；泄泻；综合治疗ｄｏｉ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８ ０４１４．２０２３．１１．０２０　引言部分养牛户，特别是一些散养户，由于饲养管理方法不当，易造成牛患食道梗塞和泄泻疾病，如果治疗方法不当，将会造成一定的经济损失。

多年来，笔者在临床上采用中药疗法治疗牛上述２种疾病，治愈率达９６．６％，取得了良好的效果。

将２种病的具体治疗方法介绍如下。

　食道梗塞１）病因。

牛将粗硬物质吞咽入食道中阻塞食道的一种疾病。

主要是由于喂饮不定时，重度使役后把牛急忙赶回来，呼吸喘息未定，即上槽饲喂，因饥饿过度，吃草料太急，咀嚼不细，吞咽过猛，阻塞于食道，或草料涎沫相缠在一块，甚至草团内夹杂着异物，猛咽而阻塞于食道，或猛食萝卜、甘薯等块根类饲料，未经咀嚼而囫囵吞咽，阻塞于食道。

２）临床症状。

病牛突然停止采食，站立不安，不断伸头缩项，欲吐不吐，两眼频翻白眼，不时空咳嗽，空口咀嚼，口角流涎沫，甚至张口流涎，浑身流汗，用手指压在左侧食道沟，可触摸到食道里有坚硬的阻塞物，甚至阻塞部位从外表可看出凸出。

如果被流涎沫裹缠住的草料咽进胃里，则淤气和黏涎相缠的草料结滞在胃里不能消化，这是噎隔。

发生噎隔的牛，表现为精神萎靡，不时打嗝，头低咬牙，肚腹膨胀。

３）预防。

平时加强饲养管理，不能剧烈劳累，使役后回家途中缓慢行走，如果牛急速赶回来，要休息一会再上槽饲喂，开始草料要少给一点，少给勤添。

对块根类饲料要切碎后喂食，要清除草料中的坚硬异物。

４）手术治疗。

首先针对发病牛，先用手在食道外面揉摸噎塞住的部位，如果涎草噎塞的位置接近咽喉，可用木棒从脖项下端向上推赶，如果阻塞物是坚硬异物，需用两手拇指从患部下端向上挤推，推至咽部时，用手捏住阻塞物让其不往下坠，再将开口器使于口中，然后将手伸进牛的咽喉，将阻塞在喉中的涎草团掏出来，并及时灌服清油３００ｍＬ，灌油后不要马上饲喂草料，要停留５ｈ左右饲喂。

畜禽粪污资源化利用技术专栏☆中国畜牧业Resource utilizatio n tech no l ogy oflivestock and poultry manure畜禽粪肥检测技术指南之测定（五）一、全猛含量的测定1.范围：本节规定了畜禽粪肥中全猛含量测定的试验方法：本节适用于畜禽粪肥样品全猛含量的测定。

2.原子吸收分光光度法’（1）原理。

采用盐酸一硝酸一氢氟酸一高氯酸全分解的方法，加入适量的掩蔽剂，使样品中的待测元素全部进入试液，然后将试液喷入空气一乙烘火焰中，在火焰的高温下，猛化合物离解为基态原子，该基态原子蒸气对相应的空心阴极灯发射的特征谱线产生选择性吸收，在选择的最佳测定条件下，测定猛的吸光度。

（2）试剂和材料。

所用试剂、水和溶液的配制，在未注明规格和配制方法时，均应按HG/T3696规定执行。

盐酸：P=1.19克/毫升，优级纯；硝酸：p=1.42克/毫升，优级纯；硝酸溶液，1+1：用硝酸配制；硝酸溶液，体积分数为0.2%：用硝酸配制；氢氟酸：p=1.49克/毫升；高氯酸：P=1.68克/毫升，优级纯；硝酸镰］水溶液，质量分数为5%；猛标准储备液，1000毫克/升：称取1.0000克（精确至0.0002克）光谱纯金属猛粒于50毫升烧杯中，用20毫升硝酸溶液溶解后，转移至1000毫升容量瓶中，用水定容至标线，摇匀；猛标准使用液，10.0毫克/升：用硝酸溶液逐级稀释猛标准储备液配制:（3）仪器和设备。

通常实验室仪器；原子吸收分光光度计（带有背景校正器）；猛空心阴极灯；乙烘钢瓶；空气压缩机，应备有除水、除油和除尘装置；仪器参数。

不同型号仪器的最佳测试条件不同，可根据仪器使用说明书自行选择。

通常本文采用_________表1仪器测最条件_________元素猛测定波长（纳米）279.5通带宽度（纳米） 1.3灯电流（毫安）一-7.5火焰性质氧化性表1中的测量条件°（4）分析步骤。

中国畜牧兽医 2024,51(3):1259-1266C h i n aA n i m a lH u s b a n d r y &V e te r i n a r y Me d i c i n e 组蛋白去乙酰化酶参与畜禽病毒感染的作用及机制谭 磊1,彭小烨2,王开心2,黄小久2,张 帆3,禹思宇4(1.长江大学动物科学技术学院,荆州434025;2.湖南农业大学动物医学院,长沙410128;3.长沙环境保护职业技术学院,长沙410004;4.长沙海关技术中心,长沙410004)摘 要:畜禽在养殖过程中易受病毒感染,给养殖业造成严重的经济损失,其中部分畜禽病毒(如乙脑病毒和口蹄疫病毒)属于人兽共患性病原,对养殖工作人员及消费者健康也可造成潜在威胁㊂因此,防控畜禽病毒不仅可减少养殖业经济损失,同时对保障公共健康也十分重要㊂组蛋白去乙酰化酶(h i s t o n ed e a c e t y l a s e ,H D A C s )属于表观遗传修饰酶,可通过调控组蛋白乙酰化过程影响基因表达,继而参与多种生命活动过程㊂大量研究表明,H D A C s 可通过与病毒蛋白互作或影响细胞相关信号通路来参与多种畜禽病毒感染过程,且H D A C s 抑制剂处理可抑制部分病毒(如伪狂犬病病毒和马立克病毒)复制,提示H D A C s 可作为抗畜禽病毒感染的广谱抗病毒药物靶点㊂因此,深入了解H D A C s 参与畜禽病毒感染的过程对防控畜禽病毒感染具有重要意义㊂作者简要介绍了H D A C s及其抑制剂,重点综述了H D A C s 参与畜禽病毒感染的作用及机制,为深入研究H D A C s 调控畜禽病毒感染提供参考,为开发新型抗病毒药物提供科学指导㊂关键词:组蛋白去乙酰化酶(H D A C s);抑制剂;畜禽病毒感染;作用及机制中图分类号:S 852.65文献标识码:AD o i :10.16431/j.c n k i .1671-7236.2024.03.038 开放科学(资源服务)标识码(O S I D ):收稿日期:2023-08-17基金项目:湖南省自然科学基金-科教联合项目(2021J J 60091)联系方式:谭磊,E -m a i l :l e i t a n @s t u .h u n a u .e d u .c n ㊂通信作者禹思宇,E -m a i l :82346418@q q.c o m R o l e a n dM e c h a n i s mo fH i s t o n eD e a c e t yl a s e i nL i v e s t o c k a n dP o u l t r y Vi r u s I n f e c t i o n T A N L e i 1,P E N G X i a o y e 2,WAN G K a i x i n 2,HU A N G X i a o j i u 2,Z H A N GF a n 3,Y US i yu 4(1.C o l l e g e o f A n i m a lS c i e n c e a n dT e c h n o l o g y ,Y a n g t z eU n i v e r s i t y ,J i n gz h o u 434025,C h i n a ;2.C o l l e g e o f V e t e r i n a r y M e d i c i n e ,H u n a nA g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t y ,C h a n gs h a 410128,C h i n a ;3.C h a n g s h aE n v i r o n m e n t a lP r o t e c t i o nV o c a t i o n a lC o l l e g e ,C h a n gs h a 410004,C h i n a ;4.C h a n g s h aC u s t o m sT e c h n o l o g y C e n t e r ,C h a n gs h a 410004,C h i n a )A b s t r a c t :L i v e s t o c k a n d p o u l t r y a r ee a s y t os u f f e rf r o m v i r u si n f e c t i o n d u r i n g t h eb r e e d i n g p r o c e s s ,w h i c hc a u s e s s e r i o u s e c o n o m i c l o s s e s t o t h e b r e e d i n gi n d u s t r i e s .I n a d d i t i o n ,s o m e v i r u s e s b e l o n g t oz o o n o t i c p a t h o g e n s (i n c l u d i n g J a p a n e s ee n c e p h a l i t i sv i r u sa n dF o o t -a n d -m o u t hd i s e a s e v i r u s ),w h i c h p o s e p o t e n t i a l t h r e a t st ot h e p u b l i ch e a l t ho f l i v e s t o c k w o r k e r sa n dc o n s u m e r s .T h e r e f o r e ,t h e p r e v e n t i o n a n d c o n t r o lo fl i v e s t o c k a n d p o u l t r y v i r u s e s n o to n l y ca n r e d u c e e c o n o m i c l o s s e si nt h eb r e e d i n g i n d u s t r y ,b u ta l s oi sv e r y i m p o r t a n tf o rs a f e g u a r d i n g p u b l ic h e a l t h .H i s t o n ede a c e t y l a s e s (H D A C s )b e l o n g t ot h ee p i g e n e t i c m o d if i c a t i o ne n z ym e s ,w h i c h a f f e c t g e n e e x p r e s s i o nb y r e g u l a t i n g t h e h i s t o n e a c e t y l a t i o n p r o c e s s ,s o a s t o p a r t i c i p a t e i n v a r i o u s l i f e a c t i v i t yp r o c e s s e s .N u m e r o u ss t u d i e sh a v es h o w nt h a tH D A C s p a r t i c i pa t e i nv a r i o u sa n i m a l v i r u si n f e c t i o n p r o c e s s e sb y i n t e r ac t i n g w i t h v i r a l p r o t e i n s o ri n f l u e n c i n g c e l l u l a rs i g n a l i n gp a t h w a y s ,a n d H D A Ci n h i b i t o rt r e a t m e n tc a ni n h i b i tt h er e pl i c a t i o no fs o m ev i r u s e s (s u c ha s中国畜牧兽医51卷P s e u d o r a b i e sv i r u sa n d M a r e k sd i s e a s ev i r u s),s u g g e s t i n g t h a t H D A C sc a ns e r v ea sb r o a d-s p e c t r u m a n t i v i r a l d r u g t a r g e t s a g a i n s t a n i m a l v i r u si n f e c t i o n.D e e p e ri n v e s t i g a t i o n o ft h e i n v o l v e m e n t o f H D A C s i nl i v e s t o c ka n d p o u l t r y v i r u s i n f e c t i o ni so f g r e a ts i g n i f i c a n c ef o rt h e p r e v e n t i o na n dc o n t r o lo fl i v e s t o c ka n d p o u l t r y v i r u si n f e c t i o n.T h ea u t h o rb r i e f l y i n t r o d u c e s H D A C s a n d t h e i r i n h i b i t o r s,m a i n l y s u m m a r i z e s t h e r o l e sa n d m e c h a n i s m so fH D A C s i na n i m a l v i r u si n f e c t i o n.T h i sr e v i e w w i l l p r o v i d er e f e r e n c ef o ri n-d e p t hr e s e a r c h o nt h er e g u l a t i o no f H D A C s i nl i v e s t o c k a n d p o u l t r y v i r u si n f e c t i o n,a n d p r o v i d e g u i d a n c ef o r d e v e l o p i n g n o v e l a n t i v i r a l a g e n t s a g a i n s t v i r u s i n f e c t i o n.K e y w o r d s:h i s t o n ed e a c e t y l a s e s(H D A C s);i n h i b i t o r s;l i v e s t o c ka n d p o u l t r y v i r u s i n f e c t i o n;r o l e a n dm e c h a n i s m中国畜禽养殖业发展迅速,其不仅是中国农村经济发展和实现农民致富的支柱性产业,同时为保障畜禽产品供应和满足消费者对畜禽产品需要做出了重要贡献㊂在养殖过程中,畜禽易受到多种病原感染,其中包括病毒性㊁细菌性和寄生虫性病原,这给畜禽养殖业造成了巨大的经济损失[1-3]㊂畜禽病毒感染引发的疾病存在流行快㊁危害大和难以防控等特征,且部分病毒可感染人,对公共健康也造成巨大的威胁[4]㊂目前对于病毒性疾病的防控主要依赖于疫苗免疫接种及提高饲养管理水平,但病毒在进化过程中存在易突变的特点,导致出现疫苗免疫逃逸现象,影响疫苗的免疫效果[5-6]㊂近年来,研发广谱抗病毒药物防控畜禽病毒逐渐成为热点㊂组蛋白可与D N A结合组成核小体,而核小体是染色体最小组成蛋白,因此,组蛋白修饰可影响染色体结构,从而调控基因表达[7]㊂组蛋白修饰有多种,其中乙酰化是组蛋白修饰的重要方式,组蛋白乙酰化可促进基因转录,而去乙酰化则抑制基因转录[8]㊂组蛋白去乙酰化酶(h i s t o n ed e a c e t y l a s e, H D A C s)不仅可调控组蛋白乙酰化过程,还可参与多种生物过程,如部分H D A C s在多种癌症或肿瘤细胞中高表达,且H D A C s抑制剂具有抑制肿瘤生长或抗癌作用[9-10];类似地,部分H D A C s参与畜禽病毒感染过程,且使用对应的抑制剂可发挥抗病毒感染作用[11]㊂截至目前,已有大量文献报道了H D A C s参与畜禽病毒感染过程及机制,笔者重点综述当前已报道的H D A C s参与畜禽病毒感染机制及其抑制剂调控病毒感染的进展,旨在为筛选广谱抗畜禽病毒感染药物靶点提供参考㊂1H D A C s及其抑制剂组蛋白乙酰化修饰是指在组蛋白N-端尾部特定氨基酸位点乙酰基化,有利于D N A和组蛋白八聚体的解离,继而激活基因转录,其受组蛋白乙酰基转移酶和H D A C s共同调控,是一种动态平衡状态[12]㊂H D A C s可去除已被乙酰化组蛋白上的赖氨酸残基乙酰基,从而抑制基因转录过程㊂根据H D A C s基因序列特征及参与的调控作用,可将其分为4个不同类型,分别为Ⅰ型(H D A C1㊁H D A C2㊁H D A C3和H D A C8)㊁Ⅱ型(H D A C4㊁H D A C5㊁H D A C6㊁H D A C7和H D A C9)㊁Ⅲ型(S i r t1-7)和Ⅳ型(H D A C11)[13]㊂Ⅰ㊁Ⅱ和Ⅳ型均为Z n2+依赖性酶,而Ⅲ型则属于N A D+依赖性酶[13]㊂目前被美国食品药品监督管理局批准作为药物的H D A C s抑制剂存在5种,分别为S A H A㊁F K-288㊁P X D-101㊁H B I-8000和L B H-589,但它们对H D A C s具有广谱抑制性,即特异性较差;但也有一些抑制剂可针对特异亚型H D A C s,如M o c e t i n o s t a t主要针对Ⅰ型H D A C s,而P C I-34051则主要针对H D A C8[14]㊂2H D A C s参与猪病毒感染的研究进展2.1猪伪狂犬病病毒猪伪狂犬病病毒(P s e u d o r a b i e sv i r u s,P R V)属于α疱疹病毒亚科成员,是一种严重威胁中国养猪业发展的重要传染性病原之一[15]㊂P R V感染可引起猪伪狂犬病(p s e u d o r a b i e s,P R),可导致发病仔猪高死亡率和妊娠母猪流产等㊂此外,P R V可感染多种哺乳动物,包括反刍动物㊁犬科动物㊁猫科动物等㊂近年来已证实P R V可感染人,且可导致严重的临床症状,甚至是死亡[16-17]㊂W a l t e r s等[18]研究发现,P R V感染可激活细胞H D A C2磷酸化过程,且使用Ⅰ类H D A C s抑制剂(H D A C iⅦ)可干扰P R V复制效率㊂G u o等[19]首先采用s i R N A干扰技术探究了H D A C1参与P R V 感染作用,发现干扰HD A C1基因可显著抑制稳定06213期谭磊等:组蛋白去乙酰化酶参与畜禽病毒感染的作用及机制表达绿色荧光蛋白的重组P R V(P R V-G F P)感染3D4/21细胞后病毒滴度㊁P R V g B蛋白表达量和表达G F P细胞比例;反之,过表达H D A C1则可提高P R V-G F P在细胞中的复制效率;作者进一步选用H D A C抑制剂(T S A)探究其对P R V感染的影响,发现安全浓度T S A可呈剂量依赖性地抑制P R V-G F P在细胞中的复制效率,同时可抑制野生型P R V 多种复制相关基因(如E P O㊁U S1和I E180基因)的相对转录水平[19]㊂进一步探究抑制剂发挥抗病毒机制发现,T S A可通过引起细胞D N A损伤,从而激活细胞c G A S通路相关先天性免疫系统来发挥抗P R V感染作用[19]㊂X u等[20]发现,H D A C6也参与P R V感染过程,在P R V感染不同细胞系(如V e r o㊁P K15)过程中,宿主蛋白H D A C6相对表达丰度随时间(0~24h)有显著上调趋势㊂H D A C6抑制剂(T u b a c i n)处理可显著降低病毒感染细胞后P R V g E蛋白表达量和子代病毒滴度;类似地,敲除HD A C6基因也可显著抑制P R V复制效率,而过表达H D A C6则促进P R V复制效率㊂进一步研究发现,P R V复制可诱导细胞D N A损伤应答(组蛋白H2A x磷酸化),而多种途径可导致细胞D N A损伤,其中包括A T M㊁A T R和D N A依赖性蛋白激酶㊂A TM通路抑制剂(K u55933)处理可抑制P R V复制,而T u b a c i n处理或敲除HD A C6基因可抑制H2A x磷酸化㊂该研究结果提示,H D A C6通过A T M信号通路促进细胞D N A损伤应答来提高P R V复制效率,同时H D A C6抑制剂是有效的抗P R V感染小分子化合物㊂2.2猪流行性腹泻病毒猪流行性腹泻病毒(P o r c i n ee p i d e m i cd i a r r h e a v i r u s,P E D V)属于冠状病毒科成员,其是导致仔猪腹泻的主要肠道病毒之一[21]㊂P E D V感染可导致仔猪出现腹泻㊁呕吐和脱水等临床症状,同时伴随高死亡率,是影响全世界养猪业健康发展的重要病原之一[22]㊂当前对于P E D V的防控主要依赖于疫苗免疫接种,但P E D V基因组具有高变异率,导致依赖于疫苗免疫对该病的防控效果较差[23]㊂X u等[24]研究发现,P E D V感染可导致I P E C-J2细胞多种亚型HD A C基因转录水平显著下调,其中包括HD A C1㊁HD A C3㊁HD A C4㊁HD A C11和S i r t2基因;且P E D V感染24h后可下调细胞H D A C1蛋白相对表达水平㊂H D A C s抑制剂(M S-275和S A H A)处理可提高P E D V在细胞中的复制效率,敲除HD A C1基因对促进P E D V复制效果更显著;但过表达HD A C1基因则发挥相反的作用,即抑制P E D V复制效率;P E D V感染还可激活细胞先天性免疫系统,即先天性免疫相关基因(如I F I TM1㊁I S G15㊁O A S1基因等)转录水平均显著上调,但H D A C抑制剂处理则抑制该过程[12]㊂进一步研究发现,P E D V N蛋白可抑制细胞H D A C1蛋白表达,且其N L S1区域发挥重要抑制作用;S p1蛋白可与H D A C1互作,且过表达S p1可促进H D A C1蛋白表达,而P E D V N蛋白可通过与S p1蛋白互作而抑制其转录水平[24]㊂以上结果表明, P E D V N蛋白可通过抑制S p1蛋白来干扰H D A C1蛋白表达,从而促进病毒自身复制㊂2.3猪德尔塔冠状病毒与P E D V类似,猪德尔塔冠状病毒(P o r c i n e d e l t a c o r o n a v i r u s,P D C o V)属于冠状病毒科成员,其也是导致仔猪腹泻常见的肠道病毒之一[25]㊂值得注意的是,P D C o V感染导致仔猪腹泻症状较P E D V 轻,且死亡率也更低㊂此外,已有研究证实P D C o V 可感染多种动物,包括禽㊁鼠和人类,提示该病原具有潜在的人兽共患风险[26-27]㊂目前针对P D C o V疫苗产品种类或数量有限,因此研发抗P D C o V感染药物对于该病的防控十分必要㊂L i等[28]研究发现,P D C o V感染可抑制细胞(L L C-P K1和I P I-F X)去乙酰化酶活性,呈剂量依赖性;P D C o V感染可显著抑制细胞HD A C2㊁HD A C8和S i r t1等基因转录水平,但上调HA T1㊁M Y S T2和C R E B B P等基因转录水平,且P D C o V 感染可显著抑制H D A C2蛋白表达水平(呈剂量依赖性)㊂进一步研究发现,过表达H D A C2可抑制P D C o V感染细胞病毒N蛋白表达水平和病毒滴度;而干扰HD A C2基因或H D A C2抑制剂(C A Y)处理则提高P D C o V在细胞中的复制效率㊂随后, L i等[28]分别转染过表达P D C o V N s p5和H D A C2蛋白的质粒入细胞,发现P D C o V N s p5蛋白可有效切割H D A C2蛋白,但N s p5蛋白失去蛋白酶活性后则对H D A C2蛋白没有切割活性;相对应的,若将H D A C2第261位氨基酸突变,则其无法被N s p5蛋白切割㊂且转染缺失第261位氨基酸的H D A C2蛋白无法激活细胞先天性免疫相关基因转录水平,也无法发挥其抗P D C o V感染的特性㊂以上结果表明,P D C o V N s p5蛋白可通过降解H D A C2或抑制H D A C2活性来干扰细胞抗病毒反应,继而促进病毒自身复制㊂1621中国畜牧兽医51卷2.4口蹄疫病毒口蹄疫病毒(F o o t-a n d-m o u t h d i s e a s ev i r u s, F M D V)感染可引起一种烈性传染病 口蹄疫,该病原可感染多种偶蹄动物,如猪㊁牛和羊等,临床症状主要包括患畜蹄部㊁口腔和鼻镜等处出现水疱㊁心肌炎等[29-30]㊂此外,F M D V还可感染人,是一种对公共健康可造成巨大威胁的人兽共患性病原[31]㊂H o u等[32]首次探究H D A C9参与F M D V感染作用及机制,结果发现,与野生型细胞相比,敲除HD A C9基因不影响B H K-21细胞生长特性,但显著提高了F M D V感染引起的细胞病变㊁病毒滴度和病毒编码基因相对转录水平等;且H D A C抑制剂(T S A和S A H A)处理也可提高F M D V V P1蛋白相对表达水平;转录组测序结果发现,H D A C9可能通过T o l l-l i k e㊁MA P K㊁N O D-l i k e㊁p53和N F-κB信号通路影响F M D V感染㊂2.5猪圆环病毒2型猪圆环病毒2型(P o r c i n ec i r c o v i r u st y p e2, P C V2)属于单股㊁有囊膜的正链D N A病毒,其可感染多种哺乳动物,包括犬㊁禽和狐狸等,且可引发相应的疾病[33]㊂P C V2是导致猪圆环病毒相关疾病的重要病原,临床症状主要包括仔猪多系统衰竭㊁肺炎和妊娠母猪繁殖障碍等;此外,P C V2感染可引起患畜免疫抑制,降低免疫力,导致P C V2与其他病原混合感染现象十分常见[34]㊂W a n g等[35]研究发现,P C V2感染虽不影响H D A C6蛋白相对表达水平,但可显著激活H D A C6蛋白去乙酰化酶活性,继而抑制A c-t u b i n蛋白活性(A c-t u b i n蛋白活性可用于监测H D A C6蛋白活性);且仅P C V2C a p蛋白抑制细胞H D A C6蛋白活性,而P C V1C a p㊁R e p和P C V2R e p蛋白对其活性均无影响㊂此外,在小鼠模型中,马尾藻多糖和山豆根多糖均可通过抑制H D A C活性来发挥抗P C V2感染作用[36-37]㊂以上结果提示,H D A C s可能间接参与P C V2感染过程,其是否可直接参与P C V2感染还需要进一步探究㊂2.6猪乙脑病毒及非洲猪瘟病毒研究人员就H D A C s是否参与猪乙脑病毒(J a p a n e s e e n c e p h a l i t i s v i r u s,J E V)和非洲猪瘟病毒(A f r i c a n s w i n e f e v e r v i r u s,A S F V)感染进行了初步探究㊂F r o u c o等[38]研究发现,体外试验中不同H D A C抑制剂干扰A S F V感染效率存在差异,其中N a P B处理可完全抑制A S F V感染,而其他抑制剂(V P A㊁T S A和S A H A)对A S F V感染干扰效果相对较差;进一步研究发现,N a P B处理主要是抑制病毒晚期蛋白合成,并破坏病毒感染引起的组蛋白乙酰化过程,但对病毒无直接杀灭作用㊂A d h y a等[39]发现,J E V感染可导致细胞H D A C s酶活性下降,同时导致H D A C1㊁H D A C2和H D A C3蛋白相对表达量下调(6㊁12和24h),提示H D A C家族可能参与J E V感染过程,但具体作用及机制仍有待进一步探究㊂3H D A C s参与其他病毒感染的研究进展3.1流感病毒甲型流感病毒(I n f l u e n z aAv i r u s,I A V)是一种影响全世界公共健康的重要病原,同时该病原可以感染多种动物,如禽类(鸡㊁鸭和鹅)和猪等[40]㊂I A V感染可引起急性和高度接触性呼吸道疾病,其可通过空气中飞沫和接触等方式传播㊂由于I A V 在进化过程中基因组变异程度高,导致疫苗接种对该病原的防控效果较差[41]㊂H u s a i n等[42]首次报道了H D A C6参与I A V感染的作用及机制,其研究发现,过表达H D A C6可显著降低I A V感染A549细胞后病毒N P蛋白相对表达水平和子代病毒滴度㊂相对应地,敲降HD A C6基因或H D A C6抑制剂(T u b a c i n)处理均能显著提高I A V复制效率;进一步研究发现,T u b a c i n处理促进了子代病毒释放,且抑制H D A C6活性可促进病毒成分向质膜的运输效率㊂以上结果提示, H D A C6是通过抑制I A V成分向质膜运输效率来干扰病毒感染过程㊂C h e n等[43]采用免疫共沉淀研究发现,I A V编码聚合酶酸性蛋白(p o l y m e r a s e a c i d i c p r o t e i n,P A)可与H D A C6蛋白相互作用,且H D A C6蛋白可促进P A降解过程㊂以上研究表明,H D A C6可通过不同途径抑制I A V感染效率,其他亚型H D A C s是否参与I A V感染还需要进一步探究㊂3.2小反刍兽疫病毒小反刍兽疫病毒(P e s t ed e s p e t i t sr u m i n a n t s v i r u s,P P R V)是一种对绵羊和山羊养殖业健康发展造成巨大威胁的R N A病毒㊂潘春荣等[44]探究了P R R V感染对不同亚型HD A C基因转录水平的影响,发现该病毒感染可显著提高HD A C2基因转录水平,但对其他HD A C基因无显著影响㊂其后选用不同抑制剂处理发现,仅S A H A㊁T M P269和MG C D0103处理可显著抑制P R R V N蛋白相对表达水平和子代病毒滴度㊂26213期谭 磊等:组蛋白去乙酰化酶参与畜禽病毒感染的作用及机制3.3 马立克病毒马立克病毒(M a r e k sd i s e a s ev i r u s ,M D V )感染可导致禽马立克病,其临床症状包括内脏淋巴瘤和神经损伤等㊂L i a o 等[45]通过间接免疫荧光试验和免疫共沉淀试验发现,细胞H D A C 1和H D A C 2蛋白的N -端结构域与M D V 编码M e q 蛋白相互作用参与病毒感染过程;进一步研究发现,过表达M e q 蛋白可通过蛋白酶依赖途径降解细胞外源性H D A C 1和H D A C 2蛋白表达水平㊂另一项研究发现,M D V U S 3蛋白可激活H D A C 1和H D A C 2蛋白磷酸化过程,但不同基因型M D V U S 3蛋白激活途径存在差异,如M D V -1U S 3可靶向H D A C 1蛋白第406位氨基酸,而M D V -2则靶向第406㊁410和415位氨基酸[46]㊂3种基因型M D V U S 3蛋白均可与H D A C 1和H D A C 2蛋白相互作用,且使用Ⅰ型H D A C 抑制剂可显著抑制M D V 在细胞中的增殖效率[46]㊂如表1所示,H D A C s 参与多种畜禽病毒感染过程,但其参与病毒感染的作用及潜在机制存在差异㊂表1 H D A C s 参与畜禽病毒感染作用及抑制剂对病毒感染作用统计结果T a b l e 1 S t a t i s t i c a l r e s u l t s o fH D A C s p a r t i c i p a t i o n i n l i v e s t o c ka n d p o u l t r y v i r u s i n f e c t i o na n d i n h i b i t o r e f f e c t s o nv i r u s i n f e c t i o n 病毒V i r u s e s 种类S p e c i e s H D A C s 作用F u n c t i o no fH D A C sH D A C s 抑制剂作用F u n c t i o no f H D A C s i n h i b i t o r模型M o d e l 参考文献R e f e r e n c e sP R VH D A C 1H D A C 1通过诱导细胞D N A 损伤,激活细胞c G A S 通路相关先天性免疫系统来干扰病毒复制抑制病毒复制(T S A )3D 4/21细胞G u o 等[19]H D A C 6H D A C 6通过A TM 信号通路激活细胞D N A 损伤反应来提高P R V 复制效率抑制病毒复制(T u b a c i n)P K 15和V e r o 细胞X u 等[20]P E D VH D A C 1P E D V N 蛋白可通过抑制S p 1蛋白来干扰H D A C 1蛋白表达,从而促进病毒自身复制促进病毒复制(M S -275和S A HA )I P E C -J 2细胞X u 等[24]P D C o V H D A C 2P D C o V N s p 蛋白可通过降解H DA C 2或抑制H D A C 2活性来干扰细胞抗病毒反应促进病毒复制(C A Y )L L C -P K 1细胞L i 等[28]F M D V H D A C 9敲除HD A C 9基因可促进F M D V 复制-B H K -21细胞H o u 等[32]P C V 2H D A C 6P C V 2C a p 蛋白抑制细胞H DA C 6蛋白活性-P K 15细胞W a n g 等[35]J E VH D A C 1㊁H D A C 2㊁H D A C 3J E V 感染可下调H D A C 1㊁H D A C 2和H D A C 3蛋白相对表达水平-R AW 264.7细胞F r a n c o 等[38]A S F V -N a PB 处理抑制A S F V 晚期蛋白合成,从而发挥抗病毒复制作用抑制病毒复制(N a P B )V e r o 细胞A d h ya 等[39]I A V H D A C 6H D A 6蛋白可降解I A V P A 蛋白,同时抑制子代病毒复制,从而发挥抗病毒作用促进病毒复制和子代病毒释放(T u b a c i n)A 549细胞H u s a i n 等[42]㊁C h e n 等[43]P P R VH D A C 2P R R V 感染激活HD A C 2基因转录水平抑制病毒复制(S A HA ㊁TM P 269和MG C D 0103)V e r o 细胞潘春荣等[44]M D VH D A C 1㊁H D A C 2M D V 编码M e q 蛋白和US 3蛋白均可与H D A C 1和H D A C 2蛋白相互作用;其中M e q 蛋白可降解H D A C 1/2蛋白,而U S 3蛋白可导致H D A C 1/2磷酸化抑制M D V 复制(N a B 和T C H -100)C E F 细胞L i a o 等[45]㊁L i a o 等[46]4 小 结近年来,H D A C s 参与多种畜禽病毒感染研究及部分H D A C s 抑制剂抗病毒作用受到广泛关注㊂总体而言,部分病毒(如P R V ㊁M D V 和P R R V )感染可激活特定HD A C 基因转录水平,过表达HD A C 基因则促进病毒复制,H D A C s 特异性抑制剂处理3621中国畜牧兽医51卷则可抑制病毒复制效率,提示H D A C s特异性抑制剂可作为颉颃以上病毒感染的药物[19-20,44-46]㊂值得注意是,大部分研究仅在体外试验中探究了H D A C s抑制剂的抗病毒效果,未来还需进一步在体内试验中确定其抗病毒活性㊂此外,研究人员还可构建特定亚型HD A C基因敲除动物模型,探究其对动物模型生长性能的影响,继而探究其是否具有抗病毒作用,如针对P R V,可构建敲除HD A C2或HD A C6基因的小鼠或猪模型㊂此外,部分病毒(如P E D V和P D C o V)感染可抑制细胞特定HD A C基因转录水平,敲除㊁敲降或H D A C s抑制剂处理则可提高病毒(如P E D V㊁P D C o V㊁F M D V和I A V)的复制效率[24,28,32,42-43]㊂基于此,可考虑构建HD A C基因敲除细胞系,旨在提高以上病毒在细胞的复制效率,为相应的减毒活疫苗或灭活疫苗研发提供良好的细胞载体㊂参考文献(R e f e r e n c e s):[1]程晋龙,赵烨,张国中.危害畜禽养殖业的主要冠状病毒[J].中国兽医杂志,2020,56(9):56-59.C H E N G J L,Z HA O Y,Z HA N G G Z.T h e m a i nC o r o n a v i r u st h a t h a r m s t h el i v e s t o c k a n d p o u l t r yb r e e d i n g i n d u s t r y[J].C h i n e s eJ o u r n a l o f V e t e r i n a r yM e d i c i n e,2020,56(9):56-59.(i nC h i n e s e) [2]赵乾明,齐萌,徐泽立,等.规模舍饲羊场羊消化道及环境寄生虫情况调查[J].中国畜牧兽医,2023,50(5):2156-2165.Z HA O Q M,Q I M,X U Z L,e t a l.I n v e s t i g a t i o no fi n t e s t i n a l p a r a s i t e s o c c u r r e n c e i n s h e e p a n de n v i r 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饲料中粗蛋白质含量测定注意事项杨美兰（曲靖市兽药饲料监察所，云南曲靖６５５０００）摘　要：粗蛋白质是饲料中最重要的营养指标，也是确定饲料等级的重要指标之一。

准确测定饲料中粗蛋白的含量尤其重要，它对提高饲料品质、优化配方、控制生产成本具有指导意义。

总结了饲料中粗蛋白质含量测定过程中的注意事项，供业内参考。

关键词：饲料；粗蛋白质；含量测定；影响因素ＤＯＩ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８－０４１４．２０２０．１０．０１６　引言蛋白质是构成各种组织器官的基本物质，由多种氨基酸组成，为生命活动提供必要的营养物质。

在畜禽饲料中蛋白质的含量是评定饲料营养价值的重要指标之一，在饲料质量检验检测过程中通常是以饲料中含有的氮元素的含量乘以蛋白质转化系数（常以６．２５来表示）所得到的数据来推算饲料中蛋白质的含量。

李博［１］综述了饲料中蛋白质的多种检测方法，包括凯氏定氮法、杜马斯燃烧法、近红外光谱法、纳氏比色法、双缩脲法、原子荧光分光光度计法，分别介绍了各方法的原理、特点及应用。

虽然检测方法校多，但是经过多年使用和验证表明，用得较多的是凯氏定氮法［２］。

　检测原理及国家标准１．１　国家标准《ＧＢ／Ｔ６４３２－２０１８饲料中粗蛋白的测定　凯氏定氮法》为粗蛋白测定的仲裁法，适用于饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中粗蛋白质的测定。

１．２　检测原理试样在催化剂作用下，经过浓硫酸消解，使含氮物转化为硫酸铵，然后加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后再用盐酸标准溶液滴定，测出氮含量，乘以６．２５计算出粗蛋白质含量。

　粗蛋白测定过程中的影响因素（１）采样应做到随机、客观、有代表性，严格遵循四分法缩减取样。

在样品粉碎过筛时，要将试样全部通过０．４２ｍｍ的实验筛进行粉碎，需要密切注意试样粉碎过筛后要充分混合均匀，减少检测误差［３］。

磨样过程中应该少量多次加样，一则避免磨样时产生热量致使样品结块，二则保证样品粉碎细度达到要求，若样品粉碎后粗细不一，将大大增加取样误差，进一步影响蛋白质的最终测定结果。

猪副伤寒病临床症状及治疗方法李晓燕（青海省海西州都兰县巴隆乡畜牧兽医站，青海都兰８１６１００）摘　要：猪副伤寒即猪沙门氏菌病，是由致病性沙门氏菌引起的猪的一种传染病。

急性型表现为败血症，亚急性和慢性型以顽固性腹泻和回肠及大肠发生固膜性肠炎为特征。

１～４月龄的猪是易感猪群，一年四季均可发生，气候聚变，寒冷潮湿，营养障碍时多发，常呈散发性或地方流行性。

病猪和带菌猪是主要的传染源，主要经消化道传染，给养殖户带来了极大的负面影响。

以副伤寒临床症状为前提，探究了具体的治疗方法，希望能为以后的相关工作提供一定的借鉴。

关键词：副伤寒；临床症状；治疗方法ｄｏｉ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８－０４１４．２０２１．１１．０５６　引言副伤寒临床症状潜伏期由２ｄ至数周不等，临床分为急性和慢性型。

副伤寒死亡率极高，给养殖户造成的伤害也是无法估算的，因此明确治疗方法是非常有必要的。

　流行病学猪副伤寒即猪沙门氏菌病，主要是由沙门氏菌属中的几个成员感染后所导致的高发传染病［１］。

该病主要分为２大类型：急性型（败血型）、亚急性型和慢性型（结肠炎型），其发病特征以腹泻、肠炎为主。

此病为人畜共患传染病，易感动物为人、各种畜禽，年龄无限制，均可感染，尤其幼龄动物最易感染，１～４月龄的猪具有高发特征。

病猪和携带病原菌的健康猪为主要传染源，其肠道中含有大量病原菌，排出途径多样，如粪尿、乳液、胎衣羊水等。

此病发病没有季节性，四季都有发病的可能性，尤其下雨、气候潮湿时最易感染此病，呈散发性或地方性流行。

若在猪养殖过程中存在圈舍脏乱、粪尿未能及时处理、长时间无消毒、通风差、温度湿度不适宜、饲料饮水污染严重等饲养管理问题均可诱发此病。

另外，各种应激因素也可导致该病的发生发展，如天气骤变、手术等［２］。

　临床症状由于猪断奶前后体质弱以及应激反应，最易引发猪副伤寒病的发生，尤其２～４月龄的猪，表现为猪体温高热不退，４１℃～４２℃，精神萎靡，无食欲饮欲，拒食趴卧，反应缓慢，病期短，死亡率高。

鸡ＶＡ缺乏症的病因分析与诊治冯利锐（黑龙江省北安市农业农村局，黑龙江北安１６４０００）摘　要：鸡食中包含丰富的营养和能量物质，只有营养均衡才能保证鸡的日常营养所需，保证鸡良好的生产性能，发挥出有效的价值，创造更多的经济效益。

ＶＡ在鸡的发育成长过程中发挥着十分重要的作用，鸡只保证有正常的ＶＡ，才能让鸡的骨骼和组织功能得到发育，防止鸡出现不良疾病和反应。

主要分析鸡ＶＡ缺乏症发生的原因、主要症状和诊断方法以及措施，为鸡ＶＡ缺乏症的诊治提供依据和参考。

关键词：鸡ＶＡ缺乏症；病因；诊治ｄｏｉ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８－０４１４．２０２１．０５．０７８!　引言在鸡的正常生长过程中，鸡饲料发挥着至关重要的作用，对鸡饲料的科学配比会促进鸡的正常生长。

虽然鸡在正常生长的过程中对维生素的需要不是非常多，但是其对鸡的身体机能具有较大的影响，其会对鸡的生理过程起到调节作用，ＶＡ是鸡生长过程中关键的脂溶性维生素，可以有效地保证鸡的正常发育，让鸡的视力功能和黏膜结构得到保护。

如果生长的过程中存在代谢方面的异常，就会影响鸡的生产性能，引发多种疾病，给饲养场带来较大的经济损失。

"　鸡,)在鸡体内的代谢ＶＡ在鸡的身体中会形成正常的代谢，其一旦进入鸡的体内会被直接运送至肠道中，进而和肠中的细胞形成混合酯，让其直接进入鸡的血浆，最后到达患者的肝脏。

因为该种细胞在进入细胞之前会发生水解，在机体中被有效地收藏起来。

被身体吸收的ＶＡ叫做视黄醇，这种物质和黄蛋白发生作用以后，就会在肝脏中被储存，并在鸡发生疾病的时候被有效地进行释放，有效地发挥出作用。

现阶段ＶＡ的正常摄入能够让鸡的视力受到保护，同时使上皮细胞保持完整，让鸡可以进行正常的繁殖，保证骨骼的正常发育和生长。

而且鸡体中的激素合成也需要ＶＡ的支持，让脑脊髓中的液压始终保持正常。

虽然当前鸡ＶＡ的需要不是十分广泛，但可以保证鸡不会发生ＶＡ缺乏症，如果鸡在生长的过程中缺乏ＶＡ的供应，机体中所具备的ＶＡ就会被代谢完，从而发生病变，不利于鸡营养的吸收。

羊常见疾病的防治措施金　珍（兰州市城关区动物疫病预防控制中心，甘肃兰州７３００００）摘　要：随着畜牧行业的不断发展，在畜牧养殖活动中，逐渐加大了羊的养殖力度。

在羊养殖活动开展过程中，由于受到传统养殖模式和诸多客观因素的影响，出现了羔羊痢疾、满病、羊球虫病、急性瘤胃膨胀、羊肝片吸虫病等多种不同类型的常见疾病，通过加强羊常见疾病的预防工作，可有效保障羊群的健康生长及食品安全，从而带动我国养羊产业的进步与发展。

基于此，提出羊疾病的综合性预防和常见的几种疾病的防治措施，为羊养殖活动提供有效参考。

关键词：羊疾病；预防；常发羊病；防治策略ｄｏｉ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８－０４１４．２０２１．０５．０７４　引言随着社会经济的不断发展，人们的生活水平有了明显的提升。

羊肉具有较高的食用价值，得到人们的青睐，使得羊肉的市场需求量逐年增加。

我国的羊群数量和羊群规模在逐渐扩大，带动了我国羊养殖行业的长期发展，具有广阔的发展前景和巨大的发展潜力。

在羊养殖活动开展过程中，羊类疾病的发生会直接对羊的养殖和经济效益带来影响，不仅影响了羊的正常生长，同时还限制了羊肉的售卖，导致养殖户的经济收入得不到有效保障。

因而在羊养殖活动开展过程中，要全面加强羊疾病预防等相关工作，查找出羊疾病发生的原因，并采取积极有效的措施，全面加强羊疾病的防治工作。

　羊疾病的综合预防１ １　做好羊的品质管理工作在羊养殖过程中，要全面加强羊的品质的控制，才能有效提升羊养殖的整体效果。

①在选择种羊时，要综合参考羊的体重、产毛量、产肉量等相关参数，挑选品质优良，体质壮健的种羊来完成繁殖活动，提升选种的科学性和合理性，有效保障羊的品质。

②应对种羊身体健康情况详细了解，避免引入携带病菌的种养，对羊群造成威胁，种养引入后，应根据羊的体型、外貌和生产性能的不同，选择针对性的养殖方案。

１ ２　加强免疫管理工资要加强羊的免疫管理工作，制定科学合理的免疫制度，根据常见的羊疾病，确定羊的免疫时间和接种次数，有效提升免疫的效果。

☆2019年第7期Resource utilization technology of:畜禽粪污资源化livestock and poultry manure利用技术专栏畜禽粪肥检测技术指南之测定（七）一、大环内酯类抗生素的测定1.范围本冑规定了畜禽粪肥中红密素和罗红雷素含址高效液相色谱测定的试验方法本肖适用于畜禽粪肥固体样品2.原理样品中红簿素和罗红霉素用0.1摩尔/升的NagEDTA—Mcllvaine缓冲溶液提取,经过固相萃取小柱净化.洗脱液经氮气吹F 后，用高效液相色谱法测定.外标法龙量3.试剂和材料本节所用试剂除特别注明外.均为分析纯水为蒸憎水，色谱用水为去离子水.符合GB/T6682用水的规定红霉素:纯度大于等于99%；罗红帶素：纯度大于等于99%；屮醇：色谱纯；乙睛：色谱纯；磷酸二氢钱；磷酸氢二钠；磷酸；柠檬酸；氢氧化钠；盐酸；0.03摩尔/升的磷酸二氢馁溶液：准确称取柠檬酸3.45克,用蒸憎水溶解，定容于1000毫升并用磷酸调PH至2.0；0.2摩尔/升磷酸氢二钠溶液：准确称取磷酸氢二钠28.40克.用蒸憎水溶解.定容于1000毫升；0.2摩尔/升柠檬酸溶液：准确称取柠檬酸42.00克，用蒸懈水溶解.定容于1000毫升；0.1摩尔/升Na^EDTA—Mcllvaine缓冲溶液:将0.2摩尔/升磷酸氢二钠溶液与0.2摩尔/升柠檬酸溶液按照8:5（V：V）混合，用氢氧化钠或盐酸调pH为4.5；红霉素和罗红霉素混介标准储备液：准确称取红霉素和罗红霉素60毫克.分别溶于10毫升甲醇中，配制成6.0克/升的混合标准储备液，于4。

（2保存；红霉素和罗红霧素混合标准T.作溶液：从混合标准储备液中取若干，用混合流动相定容成所需浓度的「：作液.现配现用4.仪器和设备岛效液相色谱47Resource utilization technology of livestock and poultry manure ☆中国畜牧业畜禽粪污资源化利用技术专栏仪和紫外检测器；固相萃取小柱；填料；色谱柱；针筒式微孔滤膜；固相萃取装置；氮吹仪；高速离心机；超声波清洗器；涡旋混合器。