乙酰胆碱酯酶活性抑制剂筛选比色法检测试剂盒产品说明书

请在使用前仔细阅读说明书微生物活性检测试剂盒-W S T————比色法微生物代谢活性检测概述：微生物活性检测试剂盒-WS是一种全新的通过比色法检测微生物代谢活性的试剂盒。

本试剂盒采用WST®-8作为比色指示剂。

WST®-8通过电子载体被细胞内的脱氢酶还原为水溶性的橙黄色甲臜染料。

（如下图所示），生成的甲臜量与活细胞数量成正比。

本试剂盒包含所有所需的试剂。

可以简单，快速的进行检测。

试剂内含：- WST溶液： 1 ml x 5 tubes- 电子载体溶液（DMSO溶液）：0.5ml x 1 tube贮藏条件：4℃保存。

所需设备和材料：z酶标仪（450-490nm滤光片）z 96孔培养板z培养箱µl，200 µl单枪和200 µl排枪z 10tubez 1.5ml操作说明书：染色溶液的配制：在无菌的1.5ml tube内，按9:1的比例混合WST溶液和电子载体溶液。

（该配制好的染色溶液可以在4℃保存1个月）*在96孔板中，每孔需加入10 µl染色溶液，请提前计算并准备好适当提及的染色溶液。

*如果您检测的样品是革兰氏阳性菌、真菌、低响应菌种（如副溶血弧菌），请先用DMSO或无菌水8倍稀释电子载体溶液，将WST溶液和稀释后的电子载体溶液按照9:1的比例配制成染色溶液。

微生物代谢检测：1. 制备适当浓度微生物细胞的悬液，在96孔板内每孔接种190µl该悬液2. 每孔加入10µl的染色溶液3. 将培养板在培养箱中培养（37℃或合适的温度）4. 用酶标仪测定在450nm处的吸光度经本试剂盒测试过的微生物种类：真菌：Candida utilis, Saccharomyces cerevisiae, Zygos accharomyces rouxii, Candida albicans, Candida krusei, Candida parapsilosis革兰氏阳性菌：Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Corynebacterium glutamicum, Enterococcus faecalis,Lactobacillus casei, Listeria monocytogenes, Micrococcus luteus, Staphylococcusaureus, Staphylococcus epidermidis革兰氏阴性菌：Acetobacter sp., Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enteritidis, Salmonella typhimurium, Serratia marcescens, Vibrioparahaemolyticus, Yersinia enterocolitica药物敏感性测试：革兰氏阴性菌：1. 根据McFarland比浊法制备107CFU/ml的微生物细胞悬液。

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-168-3301或800-8283301 订货e-mail ：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站 微信公众号Kinase-Lumi™化学发光法激酶活性检测试剂盒产品编号 产品名称包装 S0150S Kinase-Lumi™化学发光法激酶活性检测试剂盒 1000次 S0150MKinase-Lumi™化学发光法激酶活性检测试剂盒10000次产品简介：Kinase-Lumi™化学发光法激酶活性检测试剂盒(Kinase-Lumi™ Luminescent Kinase Assay Kit )，是一种通过化学发光法测定激酶反应后溶液中ATP 的剩余量(最高可达10μM)来定量检测激酶活性的试剂盒。

本试剂盒也可用于检测任何消耗ATP 的酶，例如ATPase 。

本试剂盒可以检测反应体系中浓度最高为10μM 的ATP ，并在0-10μM 范围内有良好的线性关系。

对于更高浓度的ATP ，可以选购检测浓度上限为50μM 的Kinase-Lumi™增强型化学发光法激酶活性检测试剂盒(Kinase-Lumi™ Plus Luminescent Kinase Assay Kit )或上限为200μM 的Kinase-Lumi™超强型化学发光法激酶活性检测试剂盒(Kinase-Lumi™ Max Luminescent Kinase Assay Kit )，或者需要适当稀释后再进行检测。

另外两个试剂盒分别在0-50μM 和0-200μM 范围内有良好的线性关系。

本试剂盒应用范围广，适用于各类消耗ATP 的激酶，包括以蛋白或多肽为底物的蛋白激酶和以糖、脂、醇等为底物的非蛋白激酶。

本试剂盒也同样适用于检测消耗ATP 的ATPase 。

本试剂盒的检测激酶活性的原理参考图1。

激酶在反应过程中催化ATP 上的磷酸基团转移到底物的羟基上，从而使ATP 转变为ADP ，这样就可以根据ATP 的减少量来定量激酶的活性。

不同酶源乙酰胆碱酯酶的抑制剂筛选方法比较刘佳莉;苑玉和;陈乃宏【摘要】目的:建立一种可靠、快速、便捷、经济的乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)抑制剂的筛选方法,为新药发现阶段AChE 抑制剂的筛选提供经济可靠的微量筛选方法,然后对植物提取物样品进行筛选.方法:分别采用电鳗AChE、人源红细胞AChE、大鼠海马区、纹状体匀浆液中的AChE 为酶源.以96 孔板为载体,利用优化的Ellman 方法,在生理pH 值和温度的条件下,以他克林和石杉碱甲作为阳性对照,检测对不同酶源AChE 的抑制作用,确定最佳酶反应条件(最佳底物浓度、反应时间、显色剂浓度),并对植物提取物样品的AChE抑制作用进行检测.结果:采用上述四种酶源的AChE 进行AChE 抑制剂微量筛选方法操作简便快速、可靠经济.其中应用电鳗AChE 进行筛选显示灵敏度较高,他克林和石杉碱甲对电鳗AChE 的抑制作用相当,而对人源红细胞AChE、大鼠海马区、纹状体匀浆酶源的抑制作用,石杉碱甲明显优于他克林,所筛选植物提取物对AChE均没有抑制作用.结论:本实验中所建立的筛选方法操作简便、快速、可靠经济,可用于纯化合物的筛选.【期刊名称】《神经药理学报》【年(卷),期】2011(001)003【总页数】4页(P27-30)【关键词】乙酰胆碱酯酶;石杉碱甲;他克林;阿尔茨海默病【作者】刘佳莉;苑玉和;陈乃宏【作者单位】天然药物活性物质与功能国家重点实验室,中国;医学科学院北京协和医学院药物研究所,北京,100050,中国;天津中医药大学,天津,300193,中国;天然药物活性物质与功能国家重点实验室,中国;医学科学院北京协和医学院药物研究所,北京,100050,中国;天然药物活性物质与功能国家重点实验室,中国;医学科学院北京协和医学院药物研究所,北京,100050,中国【正文语种】中文【中图分类】R965.1随着世界人口不断趋于老龄化，阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）、帕金森病（Parkinson’s Disease，PD）等神经退行性疾病的发病率亦逐年升高，研究表明它们与胆碱能神经系统减退有关［1］。

蛇足石杉体内抑制乙酰胆碱酯酶活性物质的内生真菌的分离凌庆枝;董丽辉;范三微;何军邀;高莉莉;黄贝贝;魏兆军【摘要】[目的]从蛇足石杉体内分离筛选出具有体外抑制乙酰胆碱酯酶活性的内生真菌.[方法]取野外采集的蛇足石杉的叶、茎和根进行表面消毒后接种于PDA培养基,分离出内生真菌后进行摇瓶发酵,超声提取其发酵产物,以DTNB法检测其发酵产物在体外抑制乙酰胆碱酯酶的活性.[结果]从根、茎、叶中分离得到194株内生真菌,在马铃薯葡萄糖液体培养基(PDB)中发酵后,对内生真菌发酵提取液进行体外AChE抑制活性检测；共有31株内生真菌显示出体外AChE抑制活性,抑制活性较强的有13株,抑制率在50.2％～80.5％.其中从蛇足石杉茎部位分离得到9株,叶部位分离得到4株.[结论]从蛇足石杉体内可分离出内生真菌,该内生真菌的发酵产物在体外有较强的抑制乙酰胆碱酯酶活性,这可能是寻找乙酰胆碱酯酶抑制药物的有效途径之一.%[Objective] To isolate endophytic fungi with acetylcholinesterase (AChE) inhibitory activities from Huperziaserrata(Thunb. ) Trev. [Method] Stems, leaves and roots of H. serrata were collected from the open field. Then, they were inoculated on PDA culture medium after the surface sterilization. Based on the isolation of endophytic fungi, shaking flask fermentation was conducted; and fermentation products were extracted by ultrasound. Inhibitory effects in vitro of fermentation products on AChE were detected by DTNB method. [ Result] A total of 194 endophytic fungi were isolated from the roots, stems and leaves. After the fermentation in potato glucose liquid medium (PDB), in vitro AChE inhibitory activity was detected in endophytic fungi fermentation extracting liquid. 31 endophytic fungi showed in vitro AChEinhibitory activity. Among them, 13 strains had relatively strong inhibitory activity, with the inhibitory rate being 50. 2% -80.5%. 9 strains were isolated from the H, serrata stems; and 4 strains were isolated from leaves. [ Conclusion ] Endophytic fungi could be isolated from the H. serrata. The fermentation products of the endophytic fungi showed relatively strong in vitro inhibitory activity to AChE, which might be one of the effective approaches to find the inhibitory drugs of AChE.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2012(000)030【总页数】3页(P14706-14707,14712)【关键词】蛇足石杉[Huperzia serrata(Thunb.)Trev.];内生真菌;乙酰胆碱酯酶;抑制【作者】凌庆枝;董丽辉;范三微;何军邀;高莉莉;黄贝贝;魏兆军【作者单位】浙江医药高等专科学校,浙江宁波315100;浙江医药高等专科学校,浙江宁波315100;浙江医药高等专科学校,浙江宁波315100;浙江医药高等专科学校,浙江宁波315100;浙江医药高等专科学校,浙江宁波315100;浙江医药高等专科学校,浙江宁波315100;合肥工业大学生物与食品工程学院,安徽合肥230009【正文语种】中文【中图分类】S567蛇足石杉［Huperzia serrata(Thunb.)Trev.］是石杉科(Huperiaceae)石杉属(Huperzia)的蕨类植物，又名千层塔、山芝、蛇足草等，分布于东北、福建、广东、广西、云南和贵州等地。

细胞内氧化应激活性氧单线态氧气比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途细胞内氧化应激活性氧单线态氧气比色法定量检测试剂是一种旨在通过二甲基4亚硝基苯胺，受到单线态氧气一的作用，出现去色现象，由分光光度仪比色分析，定量检测细胞内单线态氧气活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。

可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。

其适用于各种活体细胞(动物、人体等)内单线态氧气的检测。

产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。

技术背景超氧自由基阴离子(6UPerOXideradiCaI；O2过氧化氢(hydrogenperoxide；H2O2)、羟自由基或氢氧基(hydroxylradical；0H)、过氧化基(ρeroxylradical；R00'氢过氧自由基(hydroperoxyl；HOO烷氧自由基(alcoxy!radical).氮氧基(niiricOxide；NO)、过氧亚硝基阴离子(PerOXyniIrileanion；ONOO)次氯酸(hypochlorousacid；HCl0)、半酸自由基(SemiqUinoneradiCaI)、单线态氧气(Singletoxygen)等细胞内活性氧族(ReaciiveOxygenSpecies;ROS)的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。

其中单线态氧气(SinglelOXygen；I02)是分子轨(O2)的抗磁形式或电激发形式。

通过染料分子，例如孟加拉红(RoSeBengal),亚甲基兰(MelhyIeneBIue)、吓咻类化合物(PorPhyrinS)染料的光敏过程中能量转移产生，或过氧化氢和次氯酸的化学反应产生。

单线态氧气可以调节紫外线A辐射的生物学作用、激活各种细胞信号通路等。

单线态氧气会导致植物的光动力损伤(photodynamicdamage)和动物心血管问题。

基于二甲基・4.亚硝基苯胺(NH-DimeihyLp-Iiiirosoaniline;PNDA或RNO)作为单线态氯气的选择性受体，在单线态氧气的存在下，产生去色作用，在分光光度仪下(44Onm波长)，呈现吸光峰值的降低。

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-1683301或800-8283301 订货e-mail ：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站 微信公众号碱性磷酸酶检测试剂盒产品编号 产品名称包装 P0321S 碱性磷酸酶检测试剂盒 100次 P0321M碱性磷酸酶检测试剂盒500次产品简介：碧云天生产的碱性磷酸酶检测试剂盒(Alkaline Phosphatase Assay Kit)是一种用于快速、便捷地检测细胞或组织样品的裂解或匀浆产物的上清液、血清、血浆、尿液等样品中内源性的碱性磷酸酶活性的试剂盒。

碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)也称碱性磷酸酯酶(EC 3.1.3.1)，可以在碱性条件下催化磷酸酯键的水解。

哺乳动物中，肝脏、胆管、肾脏、骨头和胎盘中的碱性磷酸酶活性比较高。

常见的碱性磷酸酶包括肠道碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, intestinal, ALPI)、非组织特异性碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, tissue-nonspecific isozyme, ALPL)和胎盘碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, placental type, 也称placental alkaline phosphatase, PLAP)。

常见的小牛肠碱性磷酸酶(Calf Intestinal Alkaline Phosphatase, CIAP/CIP)被广泛用于二抗等的标记最终用于蛋白和核酸等的检测，也常用于DNA 或RNA 5´和3´末端的去磷酸化(去单磷酸化)，特别是质粒的5´末端去磷酸化以避免质粒自连等。

干细胞，如iPS 中，碱性磷酸酶的活性很高，常被用作iPS 成功诱导的标志。