急性眼刺激试验-规范

五、急性眼刺激性/腐蚀性试验Acute Eye Irritation/Corrosion Test1 范围本规范规定了动物急性眼刺激性或腐蚀性试验的基本原则、要求和方法。

本规范适用于化妆品原料及其产品安全性毒理学检测。

2 规范性引用文件OECD Guidelines for Testing of Chemicals（No 405，April 2002）USEPA OPPTS Harmonized Test Guidelines（Series 870.2400，Aug.1998）3 试验目的确定和评价化妆品原料及其产品对哺乳动物的眼睛是否有刺激作用或腐蚀作用及其程度。

4 定义4.1 眼睛刺激性（Eye irritation）：眼球表面接触受试物后所产生的可逆性炎性变化。

4.2 眼睛腐蚀性（Eye corrosion）：眼球表面接触受试物后引起的不可逆性组织损伤。

5 试验的基本原则受试物以一次剂量滴入每只实验动物的一侧眼睛结膜囊内，以未作处理的另一侧眼睛作为自身对照。

在规定的时间间隔内，观察对动物眼睛的刺激和腐蚀作用程度并评分，以此评价受试物对眼睛的刺激作用。

观察期限应能足以评价刺激效应的可逆性或不可逆性。

动物如果在试验的任何阶段出现严重抑郁、痛苦的表现，则应该给予人道地处死，依据试验情况对受试物进行适当评价。

动物如出现角膜穿孔、角膜溃疡、角膜4分超过48h、缺乏光反射超过72h、结膜溃疡、坏疽、腐烂等情况，通常为不可逆损伤的症状，也应该给予人道地处死。

6试验方法6.1 受试物液体受试物一般不需稀释，可直接使用原液，染毒量为0.1mL。

若受试物为固体或颗粒状，应将其研磨成细粉状，染毒量应为体积0.1mL或重量不大于100mg（染毒量应进行记录）。

受试物为强酸或强碱（pH值≤2或≥11.5），或已证实对皮肤有腐蚀性或强刺激性时，可以不再进行眼刺激性试验。

气溶胶产品需喷至容器中，收集其液体再使用。

6.2 实验动物和饲养环境首选健康成年白色家兔。

1.1 引言根据《中华人民共和国传染病防治法》、《中华人民共和国传染病防治法实施办法》和《消毒管理办法》制订本规范。

本规范含总则、消毒检验技术规范、医疗卫生机构消毒技术规范和疫源地消毒技术规范四个部分。

1.2 适用范围本规范适用于在中华人民共和国境内生产、经营、使用和检验消毒产品的组织，医疗卫生机构以及传染病疫源地和其他一切需要消毒的场所。

1.3 术语1.3.1 消毒disinfection杀灭或清除传播媒介上病原微生物，使其达到无害化的处理。

1.3.2 灭菌sterilization杀灭或清除传播媒介上一切微生物的处理。

1.3.3 化学指示物chemical indicator利用某些化学物质对某一杀菌因子的敏感性，使其发生颜色或形态改变，以指示杀菌因子的强度(或浓度)和/或作用时间是否符合消毒或灭菌处理要求的制品。

1.3.4 生物指示物biological indicator将适当载体染以一定量的特定微生物，用于指示消毒或灭菌效果的制品。

1.3.5 消毒剂disinfectant用于杀灭传播媒介上的微生物使其达消毒或灭菌要求的制剂。

1.3.6 灭菌剂sterilant可杀灭一切微生物(包括细菌芽孢)使其达到灭菌要求的制剂。

1.3.7 高效消毒剂high-efficacy disinfectant指可杀灭一切细菌繁殖体（包括分枝杆菌）、病毒、真菌及其孢子等，对细菌芽孢（致病性芽孢菌）也有一定杀灭作用，达到高水平消毒要求的制剂。

1.3.8 中效消毒剂intermediate-efficacy disinfectant指仅可杀灭分枝杆菌、真菌、病毒及细菌繁殖体等微生物，达到消毒要求的制剂。

1.3.9 低效消毒剂low-efficacy disinfectant指仅可杀灭细菌繁殖体和亲脂病毒，达到消毒要求的制剂。

1.3.10 有效氯available chlorine有效氯是衡量含氯消毒剂氧化能力的标志，是指与含氯消毒剂氧化能力相当的氯量(非指消毒剂所含氯量)，其含量用mg/L 或%浓度表示。

消毒产品检验技术规范Technical Standard for Testing Disinfection Products 1 消毒产品消毒效果检验技术规范1.1 消毒剂杀微生物试验1.1.1 适用范围主要适用于消毒剂鉴定和日常检测，用来评价各种用途的消毒剂对微生物的杀灭效果。

按此方法进行的试验，只是对消毒剂的杀菌能力的重要方面进行验证，侧重反映消毒剂的实用剂量与杀菌能力。

不能反映消毒剂的全面特性。

1.1.2 菌悬液与菌片的制备1.1.3 活菌培养计数技术1.1.4 残留消毒剂的去除方法1.1.5 中和剂鉴定试验1.1.6 物理法去除残留消毒剂试验1.1.7 细菌定量杀灭试验1.1.8 杀灭分枝杆菌试验1.1.9 真菌杀灭试验1.1.10 病毒灭活试验1.1.11 能量试验1.1.12 各种因素对消毒剂杀菌作用影响的测定1.2 消毒剂模拟现场和现场消毒鉴定试验1.2.1 消毒剂对食（饮）具消毒效果的模拟现场鉴定试验1.2.2 消毒剂对医疗器械的消毒模拟现场试验1.2.3消毒剂对医疗器械的模拟现场灭菌试验1.2.4 连续使用稳定性试验1.2.5消毒剂对手消毒的模拟现场试验1.2.6消毒剂对手消毒现场试验1.2.7 消毒剂对皮肤消毒的模拟现场试验1.2.8消毒剂对皮肤消毒现场试验1.2.9消毒剂对其他表面消毒模拟现场鉴定试验1.2.10消毒剂对其他表面消毒现场鉴定试验1.3 空气消毒效果鉴定试验1.3.1 目的检测消毒器械或消毒剂对空气中细菌的杀灭和清除作用，以验证其对空气的消毒效果。

其他方法对空气的消毒效果，亦可参照本试验的有关原则进行。

1.3.2 试验设备和器材1.3.3 试验阶段1.3.4 实验室试验与模拟现场试验操作程序1.3.5 现场试验1.4 水的消毒效果鉴定试验1.4.1生活饮用水消毒效果鉴定1.4.1.1 目的检测生活饮用水消毒剂与消毒器械的杀菌效果，以验证其对生活饮用水消毒能否达到卫生合格标准。

急性眼刺激试验急性毒性试验动物急性毒性试验研究动物在24小时内服用一次或多次后在一定时间内产生的毒性反应人类使用的药物通常需要动物急性毒性试验。

需要啮齿动物或非啮齿动物通常小鼠或大鼠通过口腔、吸入或皮肤暴露于药物。

急性毒性试验主要测量LD50(浓度)，观察急性中毒性能、经皮吸收能力以及对皮肤、粘膜和眼睛是否有局部刺激等。

急性毒性试验处于药物毒理学研究的早期阶段，对阐明药物的毒性作用和了解其毒性靶器官具有重要意义。

急性毒性试验获得的信息对某些药物的长期毒性试验剂量的设计和一期临床试验初始剂量的选择具有重要的参考价值，并能提供一些与人类用药过量所致急性中毒有关的信息。

急性眼刺激/眼腐蚀试验(巴豆油或甲醛)定义:眼刺激:指眼球表面接触试样后可逆的炎症变化眼睛腐蚀性:指眼球表面与被测样品接触造成的不可逆组织损伤。

试验的基本原理:将1个试验样品一次滴入每只实验动物一只眼的结膜囊，另一只未处理的眼作为自身对照。

2在规定的时间间隔内，观察对动物眼睛的刺激和腐蚀程度及评分，从而评价试样对眼睛的刺激观察时间应足以评估刺激效应的可逆性和不可逆性。

观察时间至少为72小时，但一般不超过21d几天。

3当动物表现出严重而持久的疼痛迹象时，应以适当的方式处死动物；4强酸或强碱物质，如酸碱度≤2或酸碱度≥11.5，由于其可预测的腐蚀特性，不需要测试。

5.在皮肤试验中被证明具有腐蚀性或严重刺激毒性的物质不需要进行眼睛刺激试验，可以假定这些物质会对眼睛造成类似的严重后果；6在充分和公认的体外试验结果确定可能产生刺激性或腐蚀性物质时无需进行体内试验目的:检测外来化合物对实验动物眼睛和粘膜的主要刺激和腐蚀作用的急性试验，以提供与受试物质接触的人眼和粘膜的潜在危险信息实验动物:优选成年白兔(如果使用其他哺乳动物进行实验，实验者应提供选择依据)，选择对人皮肤和粘膜反应相对相似的[动物，常用动物包括兔和豚鼠动物种类的选择应基于待观察的指标和模型的合理性。

急性眼刺激试验检验机构全称检验报告样品受理编号：第页/共页样品名称接样日期检验项目急性眼刺激试验检验完成日期一、材料和动物1．受试样品：名称及批号、剂型、颜色、嗅味、液体比重和产品黏膜消毒最高应用液浓度。

2. 动物：品种、来源、等级合格证号、体重范围，饲料及饲养环境条件。

3. 其它可能影响试验结果的材料及其有关情况。

二、方法：1. 检测依据 (写明所依据的资料及所在的条目)。

2．简述受试物制备和浓度，滴入家兔眼结膜囊的受试物用量，被动闭合时间，开始冲洗时间，观察方法和时间及阴性对照处理。

3．检测依据中未包括或需要特殊说明可能影响检测结果的问题。

三、实验结果文字叙述染毒后动物的眼刺激反应及程度，并描述中毒表现。

将实验结果列表6-53、表6-54。

家兔眼刺激（3天内）反应评分动物编号损害表现眼睛刺激反应积分1 h 24 h 48 h 72 h 平均评分*样品对照样品对照样品对照样品对照样品对照1 角膜损害虹膜损害结膜充血结膜水肿2 角膜损害虹膜损害结膜充血结膜水肿3 角膜损害虹膜损害结膜充血结膜水肿*平均评分系指24h、48h、72h评分之和除以观察时间段数3样品受理编号：第页/共页( ) 量认（）字（）号家兔眼刺激（3天后）反应评分动物编号损害表现眼睛刺激反应积分 7d 14d 21d样品对照样品对照样品对照1 角膜损害虹膜损害结膜充血结膜水肿2 角膜损害虹膜损害结膜充血结膜水肿3 角膜损害虹膜损害结膜充血结膜水肿四、结论：受试物对家兔急性眼刺激反应分级及其依据。

法定代表人(或授权的技术负责人) (签字) 检验机构盖章最终审核日期年月日。

急性眼刺激试验标准操作规程目的：确定评价化学品对哺乳类动物眼睛是否有刺激作用及其程度。

概述：受试样品以一次剂量加入每只实验动物的一侧眼睛结膜囊内，以未作处理的另一侧眼睛作为自身对照；在规定的时限内，观察对动物眼睛的刺激和腐蚀作用程度并评分，以此评价受试样品对眼睛的刺激作用。

观察时间赢能足以评价刺激效应的可逆性和不可逆性。

观察时间最少72小时，但是一般不超过21天；当动物出现严重和持久的痛苦迹象是，以适当的方式将动物处死；强酸物质或强碱物质，由于其可预见的腐蚀特性，不必做本实验；已在皮肤试验中证实具有腐蚀或严重刺激毒性的物质不必进行眼刺激试验；在充分并公认的体外试验结果中确定可能产生刺激性或腐蚀性的物质不必进行体内试验。

1；样品处理液态受试样品，一般不需要稀释，可直接使用。

不溶性或难溶固体或颗粒状物质，应其研磨成细粉状，过74微米孔径筛。

气溶胶产品需喷至容器中，收集其液体再使用。

对挥发性物质，剂量可以通过使用前后称量容器质量进行估值。

2；实验动物：成年白兔，2000克到3000克（1）可预见有严重反应的受试样品，先考虑用一只动物试验，结果有反应，则不必进行，不反应则，至少需要3只动物。

3；剂量设计；液态受试样品染毒量为0.1ML。

若受试样品为固态难溶颗粒状，染毒量应为100MG。

4；试验步骤（1）试验前眼睛的检查试验前动物药在动物实验室环境中至少适应3天。

试验前24小时，要对实验动物的两只眼睛进行常规检查。

有眼睛刺激症状，角膜缺陷或结膜损伤的动物不能用于试验。

（2）染毒；轻轻拉开实验动物一侧眼睛的下眼睑，将受试样品0.1ml（或100mg）滴入结膜囊中，使上，下眼被动闭合一秒，以防止受试样品丢失。

未处理的另一侧眼睛作为自身对照。

（3）滴入受试样品24小时内不冲洗眼睛，如果认为必要，在24小时可进行冲洗。

（4）根据表2的评价标准，如果受试样品出现中度以上刺激性时，必需时另选3只动物进行冲洗试验，滴入受试样品闭合一秒，30秒后用生理盐水冲洗5分钟，水的流量和流速都不应导致眼损伤。

一、实验背景化妆品、药物、化工产品等在使用过程中，可能会对皮肤和眼睛产生刺激作用。

为了评估这些物质的安全性，本实验对某化妆品进行了急性皮肤眼刺激试验，以观察其对皮肤和眼睛的刺激反应。

二、实验目的1. 评估某化妆品对皮肤和眼睛的急性刺激作用；2. 为该化妆品的安全性评价提供依据。

三、实验材料1. 实验动物：成年白色家兔，体重2.0-2.5kg，共8只；2. 受试化妆品：某品牌化妆品，生产批号：20231201；3. 赋形剂：无刺激性乳液；4. 实验仪器：皮肤刺激试验箱、电子天平、滴管、纱布、胶布、绷带等。

四、实验方法1. 急性皮肤刺激试验（1）实验动物分组：将8只家兔随机分为两组，每组4只，分别为实验组和对照组。

（2）皮肤准备：实验前24小时，将实验动物背部脊柱两侧毛剪掉，去毛范围各约3cm×6cm，不可损伤表皮。

（3）涂抹受试物：实验组将0.1ml受试化妆品滴在2.5cm×2.5cm大小的四层纱布上，敷贴在一侧皮肤上；对照组将相同体积的赋形剂敷贴在另一侧皮肤上。

然后用一层油纸覆盖，再用无刺激性胶布和绷带加以固定。

（4）观察与记录：试验结束后1、24和48小时，观察涂抹部位皮肤反应，按照表1和表2进行皮肤反应积分和刺激强度评价。

2. 急性眼刺激试验（1）实验动物分组：将8只家兔随机分为两组，每组4只，分别为实验组和对照组。

（2）眼刺激准备：实验前24小时，将实验动物眼部用生理盐水清洗，去除分泌物。

（3）滴加受试物：实验组将0.1ml受试化妆品滴入每只实验动物的一侧眼结膜囊内；对照组将相同体积的赋形剂滴入另一侧眼结膜囊内。

（4）观察与记录：试验结束后1、24和48小时，观察眼睛刺激反应，按照表1和表2进行刺激强度评价。

五、实验结果1. 急性皮肤刺激试验实验组：1只家兔在试验结束后1小时出现轻微红斑，24小时后红斑消退；2只家兔在试验结束后24小时出现轻微红斑和水肿，48小时后症状消失；1只家兔在试验结束后48小时出现轻微红斑和水肿，72小时后症状消失。

ybb眼刺激标准
YBB眼刺激标准是关于化学品对眼睛产生刺激的一个标准。

它规定了化学品对眼睛的刺激程度和分类，以便更好地评估和控制化学品对眼睛的潜在危害。

根据YBB眼刺激标准，化学品可以分为五个类别，从无刺激到严重刺激。

这些类别是根据化学品对眼睛的刺激程度和持续时间来划分的。

在评估化学品对眼睛的刺激时，需要考虑多个因素，包括化学品的浓度、暴露时间、暴露方式等。

此外，YBB眼刺激标准还规定了测试方法和实验要求，以确保评估结果的一致性和可靠性。

总之，YBB眼刺激标准是一个重要的标准，有助于更好地评估和控制化学品对眼睛的潜在危害。

了解这个标准可以帮助化学品生产商、使用者和管理者更好地管理化学品，保护人们的眼睛健康。