药物分析课件第4章-药物定量分析与分析方法验证

一、概述
含金属与卤素药物须处理后方可进行测定。
处理方法视结合牢固程度而异。
卤素与芳环相环相连牢固；与脂肪族碳相连 结合不牢固。
含金属药物：金属不直接与碳相连为含金属 的有机药物，不牢固，一般直接测定；金属与碳 原子以共价键相连，结合比较牢固---为有机金 属药物，须适当处理。
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含卤素有机药物的分析
含卤素有机药物系指药物分子结构中 所含卤素直接与芳环或脂肪链相连者，而 不包括某些有机药物的卤酸盐或氢卤酸盐。
结构特点：C—X
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（一）卤原子的活泼性
1.卤原子与碳原子直接相连 卤原子的活泼性和它直接
相连的烃基的结构有很大关系
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（1）乙烯型卤和芳卤 不活泼
CH2 CH X
冷凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水
洗涤3次，每次15ml，洗液与滤液合并，加冰
醋酸5ml与曙红钠指示液5滴，用硝酸银滴定液
(0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L)
相当于20.46mg的C11H9 I 3N2O4。
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（2）酸性还原后测定法
方法原理：在醋酸和锌粉存在的 条件下，有机药物（多用于含碘有机药 物），发生还原裂解反应，使有机结合 的卤素（碘）转变为无机卤素离子（碘 离子），采用银量法测定卤素离子的含 量。
I
I
COOH
I
I
NH C (CH2)4 C NH
I
O
O
I
胆影酸
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I
I
CH2CHCOOH
H2N

三氯叔丁醇的含量测定

CCl3-C(CH3)2-OH + 4NaOH
+ HCOONa +2H2O
△
(CH3)2CO +3NaCl
NaCl + AgNO3

AgCl
+ NaNO3
AgSCN +
AgNO3 + NH4SCN
NH4NO3
2. 用酸水解后测定法
某些含金属的有机药物，用 适当的酸性水溶液溶解并转化为 可溶性盐，适合于分析。
含量% = （V 空白 – V 剩余) ×T ×F /W×100%
例如：司可巴比妥钠的含量测定 间接碘量法 做空白试验 90页
CH2 CH CH2 C C3H7 CH CH3
O H C N C ONa C N O
司可巴比妥钠
求滴定度？ 写出含量计算式？
二、光谱分析法
（一）紫外-可见分光光度法（200nm～760nm) 灵敏度高，可达10-4g/ml ～ 10-7g/ml 1. 特点 准确度高，SRD（%）为2% ～5% 仪器价格低廉，操作简单，易普及，应用 范围广。
湿法破坏 干法破坏
(一)湿法破坏
HNO3-H2SO4法 H2SO4-硫酸盐法
H2SO4-HClO4法
H2SO4-KMnO4 分解剂 和 氧化剂 破坏共价键
应用实例：凯氏定氮法
用于蛋白质、氨基酸、含有氨基的药物、
含有酰胺结构的药物的含量测定
常量法和半微量法
操作过程：
1、消化：
药物置凯氏烧瓶中，加入硫酸、硫酸钾，
（2）间接滴定法
①生成物滴定法
例如 葡萄糖酸锑钠的含量测定
H+
Sb5+ + 2KI

单质溴还原为溴负离子。
测定含碘药物时，分解产生的碘化氢可被氧
气进一步氧化，其燃烧产物主要为单质碘，
并 含 有 少 量 的 五 价 碘 （ HIO3 ） 与 一 价 碘
吸
（HI）。当使用AgNO3滴定法测定含量时，
收 液 的
用H2O-NaOH溶液-SO2饱和溶液作为吸收液， 上述不同价态的碘均转变为负一价的碘
H2O2与水的混合液作为吸收液，燃烧产物经
吸收转变为H2SO4，加入盐酸溶液并煮沸除
去剩余的过氧化氢后，加入BaCl2，使硫酸生
吸
成BaSO4，以重量法测定含量。
收 液
含磷药物（有机膦酸类）的燃烧产物为P2O5，
的 以水为吸收液，加入少量硝酸溶液并经煮沸
选 择
使焦磷酸（H4P2O7）和偏磷酸[(HPO3)n]转 化为磷酸后，采用钼蓝比色法测定含量。
f. 砷盐的检查：有机结合的砷经与无水Na2CO3或 Ca(OH)2 、 Mg(NO3)2 共 热 （ <700℃ ） 转 化 为 无机砷酸盐后，依法检查。本法主要用于高分子 化合物（如：右旋糖酐铁）或植物提取物（如： 大豆油）中砷盐的检查，亦应用与少数有机药物 （如吡罗昔康、布美他尼等）.
② 氧瓶燃烧法：
1. 湿法破坏
适用于含氮有机合成药物分析的前处理，在生物制 品分析中用于氮（包括蛋白质）、磷、硫柳汞及氯 化钠测定法的前处理； 亦可用于生物样品中金属元素测定时生物基质的去除。 主要分解剂：硫酸 辅助分解剂：硝酸、高氯酸、过氧化氢。 湿法破坏可分为：硫酸-硝酸法、硫酸-高氯酸法、 硫酸-硫酸盐法、硝酸-高锰酸钾法。
选 （ NaI ） ； 若 使 用 间 接 碘 量 法 测 定 时 ， 用
择
H2O-NaOH溶液为吸收液，此时吸收液中的

I H3COCHN
COOH I
+ 11NaOH + Zn
NHCOCH3 I
回流
△
H2 N
COO Na
+ 3NaI + 2CH3COONa
N H2
NaI+AgNO3
+ 2Na2ZnO2 + H2O
AgI +NaNO3
三、经有机破坏的分析方法
目的：将药物分析中有机结构部分 完全破坏，使有机结合形式的待测 原子转变为可测定的无机离子。
NH3↑+H3BO3→NH4BO2 →H2SO4滴定
将含氮药物与硫酸在凯氏烧瓶中共热，药 物分子中有机结构被氧化分解成二氧化碳 和水，有机结合的氮则转变为无机氨，并 与过量的硫酸结合为硫酸氢铵及硫酸铵， 经氢氧化钠碱化后释放出氨气，并随水蒸 气馏出，用硼酸溶液或定量的酸滴定液吸 收后，再用酸或碱滴定液滴定。
2、酸水解后测定法 将含金属的有机药物与适当的矿酸（
如盐酸）共热，将不溶性金属盐类水解 置换为可溶性盐，然后用配位滴定法或 剩余的酸碱滴定法测定。 例：十一烯酸锌
（三） 经还原分解后测定法
将含碘有机药物在碱性下，加还原 剂（如锌粉）加热回流，药物产生还 原裂解反应，使其转变为无机的碘， 然后采用银量法测定。
难以分解的药物 辅助氧化剂 30% 过氧化氢和高氯酸
不能在高温时加入，应待消解液 放冷后加入，并再次加热继续消解
3.应用范围：含有氨基或酰胺结构的 药物含量
偶氮或肼结构的含氮药物，在消解过程 易生成氮气而损失，在消解前加入锌粉还 原
杂环中的氮不易断键而难以消解，可用 氢碘酸或红磷还原为氢化杂环后在消解
哈医大药分第4章定量分析与 分析方法验证.

ChP收载的容量分析法，均给出滴定度。根据称取量W、 消耗体积V、滴定度T，可求。
实际工作与药 典要求存在差 异，需要校正。
校正因子（F） =实 规际 定摩 摩尔 尔浓 浓度 度 T'=FT
含量（%）= VT 100% W
= VTF100% W
（2）间接滴定法
1）生成物滴定法
该法的百分含量计算与直接滴定方法同，只是在计算 滴定度时需考虑被测药物与中间化合物以及中间化合 物与滴定剂三者之间的化学计量关系。
单色光辐射穿过被测物质溶液时，在一定浓度范围 内该物质吸收的量与该物质浓度、液层厚度成正比。
A=Ecl
注意：药物分析中，E通常采用百分吸收系
数：
E 1% 1cm
其物理意义为：当待测溶液浓度为每 100ml中含待测药物1g，液层厚度1cm时 的吸光度值
c(g/100m)l
A E1%
1cm
3．仪器校正和检定 （1）波长：允许误差为紫外光区±1nm， 500nm处±2nm. （2）吸光度的准确度 （3）杂散光的检查 （4）对溶剂的要求：使用范围不能小于截止使用波长 （5）测定法：需做空白对照
标 示 量 (% )=cxD W 100% W B
W 单位制剂的平均装量，如：g/片，g/粒，g/ml, ml/ml B:标示量:单位制剂的标示量（ g/片，g/粒，g/ml, ml/ml ）
异 维 A 胶 囊 2 0 粒 ， 精 密 称 取 V m l 5 m l C H 2 C l2 定 容 5 0 m l量 瓶 移 取 2 m l 定 容 1 0 0 m l 3 6 1 n m 测 A x
4．测定方法 1)对照品比较法
cx
Ax AR
CR
Ax AS

3. 利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含量
（1）含锑药物 例如：葡萄糖酸锑的含量测定
Sb5+ + 2KI H+ Sb3+ + 2K+ ++ I2
I2 + 2Na2S2O3
2NaI + Na2S4O6
（2）含铁药物
2Fe3+ + 2KI I2 + 2Na2S2O3
2Fe2+ + 2K+ + I2 2NaI + Na2S4O6
0C O
CH C O CH
Fe
第一节 定量分析样品的前处理方法
(二)、经水解后测定法
1、碱水解法 适用范围：含卤素有机药物结构中卤素原子结合不
牢固的药物。
CCl3 C(CH3 )2 OH 4NaOH 回流(CH3 )2 CO 3NaCl HCOONa 2H2O
三氯叔丁醇 NaCl AgNO3 AgCl NaNO3
优选第四章药物定量分析与分 析方法验证
第一节 定量分析样品的前处理方法
Pretreatment of sample used in quantitative analysis
一、概述
为什么要对定量分析的样品进行前处理？
含卤素有机药物 R-X （F，Cl, Br, I ）
金属有机药物 R-O-Me（有机酸或酚的
第一节 定量分析样品的前处理方法
三、经有机破坏的分析方法
湿法破坏
药物分析中常用的有机破坏的方法有 干法破坏
HNO3-HClO4法
氧瓶燃烧法
湿法破坏 HNO3-H2SO4法
H2SO4-硫酸盐法
KMnO4 HNO3- H2SO4-HClO4法； H2SO4-H2O2； H2SO4-

（3）计算分光光度法
维生素A的含量测定：三点校正法
（4）比色法
三、色谱分析法
☆按分离原理分为： 吸附；分配；离子交换；排阻色谱
☆按分离方法分为： PC；TLC；柱色谱；GC；HPLC
1、系统适用性试验
（1）理论塔板数 （2）分离度 （3）重复性 （4）拖尾因子
（1）色谱柱的理论塔板数
勇于开始，才能找到成 功的路
第四章 药物定量分析与 分析方法验证第七版
2020年4月23日星期四
一、目的要求
• 掌握定量分析样品前处理方法。 • 掌握定量分析方法特点。 • 掌握药品质量标准分析方法验证。
二、教学内容
第一节 定量分析方法的分类和特点。 第二节 定量分析样品的前处理方法。 第三节 药品质量标准分析方法验证。
第一节 定量分析方法的 分类与特点
例6、对乙酰氨基酚的含量测定
取本品适量，置250mL容量瓶中，加0.4％ 氢氧化钠溶液50mL，溶解后，加水至刻度， 摇匀。精密量取该溶液5mL，置100mL容量 瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液10mL，加水至 刻度，摇匀。在257nm波长处测定吸收度为 0.590。按其吸收系数（E1%1cm）为715计算 其含量为99.66％，问取样量为多少克？
习题1
• 异烟肼的含量测定：取供试品0.2052g，置 100mL量瓶中，加水稀释至刻度，精密量取 25mL，加水50mL，加盐酸20mL与甲基橙指 示剂1滴，用溴酸钾滴定液（0.01733mol/L） 滴定，消耗此溶液13.65mL，1mL溴酸钾滴定 液（0.01667mol/L）相当于3.429mg异烟肼 ，试计算异烟肼的含量。
一、容量分析法
（一）容量分析法的特点 1、操作简单、快速； 2、耐用性高；

（二）干法破坏
适用于含卤素、硫、磷等有机药物 分析的前处理，亦用于某些药物中硒
和砷盐的检查。
高温炽灼法 氧瓶燃烧法
1.高温炽灼法 将含待测元素（卤素、磷、砷 盐)的有机药物经高温灼烧灰化， 使有机结构分解而待测元素转化为 无机元素或可溶性无机盐。 常加入无水碳酸钠、硝酸镁、 氢氧化钙、氧化锌等辅助灰化
2. 氧瓶燃烧法 oxygen flask combustion method 适用于含卤素或硫、磷等元素 的有机药物的鉴别、限量检查或含 量测定 亦可用于药物中杂质硒的检查
原理 将有机药物放入充满氧气的密闭燃 烧瓶中充分燃烧，有机结构彻底分解 为二氧化碳和水，待测元素转化为氧 化物（或无氧酸），被吸收于适当的 吸收液中，然后根据欲测物质的性质， 采用适宜的方法进行分析
A. H2O2溶液 B. H2O2—NaOH溶液
C. NaOH溶液 D．硫酸肼饱和液 E. NaOH—硫酸肼饱和液
例4. 氧瓶燃烧法可用于
A. 含卤素有机药物的含量测定 B. 醚类药物的含量测定
C. 检查甾体激素类药物中的氟
D. 检查甾体激素类药物中的硒 E. 芳酸类药物的含量测定
本章要求


掌握凯氏定氮法及氧瓶燃烧法的原理 及所加试剂、操作要点 熟悉各种定量分析样品的前处理方法 的适用范围
难以分解的药物 辅助氧化剂 30% 过氧化氢和高氯酸
不能在高温时加入，应待消解 液放冷后加入，并再次加热继续消 解
3.应用范围：含有氨基或酰胺结构的 药物含量
偶氮或肼结构的含氮药物，在消解过 程易生成氮气而损失，在消解前加入锌粉 还原 杂环中的氮不易断键而难以消解，可 用氢碘酸或红磷还原为氢化杂环后在消解 含氮量超过10%的样品，在消解液中加 入少量多碳化合物，如蔗糖、淀粉等还原 剂，以利于氮转变为氨。