高效液相色谱-质谱法分析(氟虫腈及代谢物)原始记录

氟虫腈有效成分常用的分析方法：液相色谱法1.方法介绍试样用乙腈溶解，过滤，以乙腈+水+甲醇为流动相，C18不锈钢柱柱和220nm紫外检测器，对试样中的氟虫腈进行高效液相色谱分离和测定。

2.试剂乙腈甲醇：优级纯二次蒸馏水磷酸氟虫腈标样：已知质量分数，≥99%3.仪器高效液相色谱仪：具有220nm紫外检测器色谱数据处理机色谱柱：250mm×4.6mm（id）不锈钢柱，内填 C18填充物过滤器：滤膜孔径约0.45μm进样器：20μL定量进样阀4.操作条件柱温：40℃流量：1.5mL/min检测波长：220nm进样体积：20μL流动相：乙腈+甲醇+0.05%H3PO4水溶液=33+25+55（φ）保留时间：氟虫腈约10.2min5.测定步骤5.1.标样溶液的制备称取氟虫腈标样50mg（精确称至0.2mg），置于100mL容量瓶中，用乙腈溶解定容，摇匀。

5.2.试样溶液的制备称取含氟虫腈50mg（精确称至0.2mg）的试样，置于100mL容量瓶中，用乙腈溶解定容，摇匀，过滤。

5.3.测定在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻两针氟虫腈相对响应值变化小于 1.0%后，按标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

6.计算将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中氟虫腈峰面积分别进行平均。

氟虫腈的质量分数X（%），按下面公式计算：X=r2·m1·p r1·m2式中：r1——标样溶液中氟虫腈峰面积的平均值r2——试样溶液中氟虫腈峰面积的平均值m1——标样的质量（g）m2——试样的质量（g）P——标样中氟虫腈的质量分数（%）7.本方法适用范围本方法适用于氟虫腈原药、悬浮剂等单制剂的分析。

对不同的复配制剂，可视具体情况适当改变条件来达到最佳分离测定结果。

摘要本论文从不同溶剂（正己烷、乙腈、乙酸乙酯）提取、不同的提取方式（匀浆、超声、振摇）、不同的净化方式（Flotisil硅酸镁、NH2、GCB、PSA、C18）等方面对回收率的影响得出以下主要结果。

1、通过溶剂（正己烷、乙腈、乙酸乙酯）对氟虫腈及其代谢物的分析选择乙腈作为最佳提取溶液。

2、考察不同提取方式（匀浆、超声、振摇）对氟虫腈及其代谢物的提取分析选择振摇样品30min为最佳提取方式。

3、根据几种不同的固相萃取柱的作用不同，选择使用Flotisil（硅酸镁）萃取柱进行净化为最佳的净化方式。

4、根据氮吹温度（65~70℃、70~75℃、75℃以上）回收率比较，及氟虫腈及其代谢物性质选择最佳温度为60~70℃。

建立了一种快速提取、净化、使用超高效液相色谱-质谱串联联用（UPLC-MS/MS)对氟虫腈及其代谢物的新方法。

用乙腈作为提取液提取，置于摇床上振摇30min，经过Flotisil （硅酸镁）净化后，使用UPLC-MS/MS仪器的MRM进行分析。

回收率在70~110%之间，相对标准偏差为6.5%，小于10%。

关键词：UPLC-MS/MS；氟虫腈及其代谢物；农药残留；AbstractIn this paper, from different solvents (normal hexane, acetonitrile, ethyl acetate extraction, different extraction methods (homogenate, ultrasound, vibration wave), different purification (Flotisil magnesium silicate, NH2, GCB and PSA, C18) on the recovery rate of the main results are as follows.1) through the analysis of the solvents (hexane, acetonitrile, ethyl acetate) to the analysis of the choice of acetonitrile as the best extraction solution.2) the extraction of different extraction methods (homogenization, ultrasound, vibration) on the extraction and analysis of fluoride and its metabolites were selected as the best extraction method of 30min.3) according to the different role of several different solid phase extraction column, choose to use Flotisil (magnesium silicate) extraction column for the best purification method.4) according to the nitrogen blowing temperature (65~70 degrees C, 70~75 degrees C, above 75 degrees) recovery rate, and the nature of the fluorine and its metabolites to select the best temperature for 60~70.A new method for the rapid extraction, purification and the use of ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS) for the detection of fluoride and its metabolites was established. With acetonitrile as extraction liquid extraction, placed in bed shaking for 30 min, after purification Flotisil (magnesium silicate) using UPLC-MS / MS instrument of MRM analysis. Recovery rate in 70~110%, the relative standard deviation is 6.5%, less than 10%.Key words: UPLC-MS/MS; fluorine; cyanide and its metabolites; pesticide residues;目录摘要 (I)Abstract (II)目录 (III)第1章绪论 (1)1.1研究背景 (1)1.2研究目的及意义 (1)1.2.1研究目的 (1)1.2.2研究意义 (2)1.3本章小结 (2)第2章文献综述 (3)2.1农药残留的现状及危害 (3)2.1.1农药的影响 (3)2.1.1.1对环境的影响 (3)2.1.1.2对农药使用者的影响 (3)2.1.1.3食物中的农药残留 (3)2.1.2农药的分类以及危害 (3)2.1.2.1有机磷农药 (3)2.1.2.2有机氯农药 (4)2.1.2.3氨基甲酸酯类农药 (4)2.1.2.4拟除虫菊酯类农药 (4)2.2超高效液相色谱-质谱/质谱联用技术（UPLC-MS/MS)概述 (4)2.2.1 UPLC-MS/MS的原理与特点 (5)2.2.2 UPLC-MS/MS技术的展望 (5)2.3氟虫腈及其代谢物概述 (5)2.3.1氟虫腈及代谢物简介 (5)2.3.2氟虫腈及其代谢物在环境的归趋 (6)2.3.2.1 氟虫腈在水体中的降解 (6)2.3.2.2氟虫腈在土壤中的环境行为 (7)2.3.3.3氟虫腈毒性作用机理 (7)2.4 果蔬样品前处理技术 (8)2.4.1固相萃取 (8)2.4.1.1固相萃取法概述 (8)2.4.1.2固相萃取法的基本原理和方法 (8)2.4.2 Qu ECh EＲS 方法(分散固相萃取) (8)2.4.2.1QuEChERS方法概述 (9)2.4.2.3 QuEChERS方法原理 (9)2.4.2.3 QuEChERS方法的优点 (9)2.4.3液相微萃取 (9)2.4.3.1液相微萃取概述 (9)2.4.3.2液相微萃取的特点 (10)2.4.4固相微萃取（SPME） (10)2.4.4.1固相微萃取（SPME）概述 (10)2.4.4.2固相微萃取（SPME）原理 (10)2.5本章小结 (10)第3章实验材料与方法 (11)3.1药品及试剂 (11)3.2仪器设备 (12)3.2.1仪器条件 (13)3.2.1.1液相色谱的分离条件 (13)3.2.1.2质谱的分离参数 (14)3.3试验方法 (14)3.3.1单一农药标准品配制 (14)3.3.2 实验流程 (15)3.4本章小结 (16)第4章结果与分析 (17)4.1提取试剂的选择 (17)4.2固相萃取柱选择 (17)4.2.1固相萃取柱概述 (17)4.2.2固相萃取柱的种类 (17)4.2.2.1以硅胶为基质的固相萃取柱 (17)4.2.2.2以高聚物为基质的固相萃取柱 (18)4.2.2.3以无机材料为主的固相萃取柱 (18)4.2.3各种固相萃取柱的净化效果与选择 (18)4.3氮吹温度的选择 (19)4.4提取方式的选择 (19)4.4.1超声波提取法的原理及其优缺点 (19)4.4.2匀浆提取法的原理及其优缺点 (20)4.4.3振摇提取法的原理及其优缺点 (20)4.5纯混标与基质标（柑橘、番茄、菜心）峰面积的比较 (20)4.5色谱条件优化 (21)4.6质谱条件的优化 (23)4.7方法验证 (23)4.7.1线性范围和检出限 (23)4.7.2添加回收试验 (24)4.8本章小结 (25)结论 (26)参考文献 (27)致谢....................................................... 错误！未定义书签。

分析与检测氟虫腈是一种广谱杀虫剂，对多种害虫具有防治作用，对作物无害。

但是，大量研究表明其有神经毒性作用，长期摄入可能导致肝肾损伤。

故，它被世界卫生组织列为“对人类有中度毒性”的化学品[1]。

目前氟虫腈的检测主要有气相、液相、气质、液质等方法[2-6]，其中液质法因灵敏度高、选择性强、检测时间短等优势被广泛应用。

现有的文献和标准多是用一种或几种前处理方法同时处理多种不同类型的样品，但食品样品基质复杂，这种处理方式针对性不高，会造成样品提取不完全或过度处理，导致回收率偏低或造成不必要的浪费。

故本文针对粮谷类食品建立了简单、快速且灵敏度高的检测方法，以应对大批量粮谷类食品中氟虫腈的检测，满足检测实验室的实际需求。

1　材料与方法1.1　材料和仪器乙腈、甲醇、乙酸乙酯、丙酮均为色谱纯；无水硫酸钠、无水硫酸镁、氯化钠、PSA、C18均为分析纯。

Agilent 1260/6470三重四级杆液质联用仪。

大米、糙米、小麦粉、大豆与玉米粉均购自超市。

1.2　提取与净化称取5.0 g样品于50 mL离心管中，加水10 mL，涡旋混匀1 min，静置10 min，待样品充分溶胀后加20 mL 乙腈，涡旋1 min，振荡提取5 min，加2 g氯化钠，6 g无水硫酸钠，振摇混匀，涡旋1 min，5 000 r/min离心5 min，待净化。

准确吸取1 mL上清液于2 mL离心管中，加50 mg C18和150 mg无水硫酸镁，涡旋混合30 s，5 000 r/min离心5 min，上清液过0.22 μm滤膜，待测。

1.3　仪器条件色谱柱：C18 50 mm×3.0 mm，2.7 μm；柱温40 ℃；进样量20 μL；流速0.3 mL/min；流动相A为0.1%甲酸水溶液，B为乙腈，梯度洗脱：0～1 min，A90%，B10%；1.5～3.1 min，A10%，B90%；3.6～6.0 min，A90%，B10%。

质量技术监督研究2020年第5期（总第71期）Quality and Technical Supervision ResearchNO.5.2020General NO.71ＱｕＥＣｈＥＲＳ－高效液相色谱－串联质谱测定茶叶中氟虫腈及其代谢产物残留量王秀云, 张 聪 ,刘亿婕,陈 亮, 游菁菁,高海荣,程 琳（福建省食品药品质量检验研究院，福建 福州 350002）摘要：建立液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）同时检测茶叶中氟虫腈及其代谢产物残留量方法。

样品经1%甲酸乙腈溶剂提取，用硫酸镁（MgSO 4）、乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（PSA）、十八烷基硅烷键合硅胶C 18和石墨化炭黑（GCB）净化。

待测物在电喷雾离子源负离子模式下进行电离，用多反应监测（MRM）模式采集测定。

结果表明：4种目标物在浓度为0.1ng/mL ～10ng/mL 范围内均具有良好的线性关系，R 2≥0.999；3个添加水平（n=6）的平均回收率在82.9%～103%范围内，相对标准偏差2.4%～6.3%之间，检出限为0.5μg/kg，定量限为2.0μg/kg。

该方法便捷、快速、灵敏度高，适用于茶叶中氟虫腈及其代谢产物的检测。

关键词：QuEChERS；液相色谱-串联质谱；氟虫腈及其代谢产物收稿日期：2020-08-02作者简介：王秀云，女，福建省食品药品质量检验研究院，检验员，主管药师，硕士张 聪，男，福建省食品药品质量检验研究院，检验员，工程师，硕士刘亿婕，女，福建省食品药品质量检验研究院，检验员，主管药师，硕士陈 亮，男，福建省食品药品质量检验研究院，检验员，工程师，硕士游菁菁，女，福建省食品药品质量检验研究院，检验员，主管药师，硕士高海荣，女，福建省食品药品质量检验研究院，科所负责人，工程师 ，硕士程 琳，女，福建省食品药品质量检验研究院，检验员，助理工程师，硕士1引言氟虫腈（Fipronil）商品名锐劲特，属于苯基咪唑类杀虫剂的一种，因其具有活性高、起效速度快、作用效期长、杀虫谱广等特点[1]，自从研发出来以后就受到农药界专家的喜爱，在解决一些水稻、蔬菜、家禽等的病虫害问题方面得到广泛的应用[2]。

超高效液相色谱串联质谱法快速定量检测鸡蛋中的氟虫腈及其三种代谢物俞婧;刘茁;马俊美;范素芳;李强;王娟;翟洪稳;贾昭斌【摘要】基于超高效液相色谱串联质谱技术,本文建立了一种鸡蛋中氟虫腈及其三种代谢物(氟甲腈、氟虫腈砜、氟虫腈亚砜)的快速检测方法.鸡蛋去壳后匀浆,经乙腈提取后盐析,上清液采用U PLC-M S/M S-ESI负离子多反应检测模式进行分析测定.结果表明,氟虫腈及三种代谢物在0.1-20.0ng/mL范围内线性良好,检出限为0.15～0.35ug/kg,定量限为0.55～0.7ug/kg,平均加标回收率在95.00％～105.58％之间,相对标准偏差在1.10％～5.01％之间.该方法便捷快速且准确定量,可应用于实际样品检测中.【期刊名称】《河北省科学院学报》【年(卷),期】2019(036)001【总页数】8页(P66-73)【关键词】超高效液相色谱串联质谱;氟虫腈;代谢物;鸡蛋;定量检测【作者】俞婧;刘茁;马俊美;范素芳;李强;王娟;翟洪稳;贾昭斌【作者单位】河北省食品检验研究院,河北省食品安全重点实验室,河北石家庄050091;河北科技大学生物科学与工程学院,河北石家庄 050018;河北省食品检验研究院,河北省食品安全重点实验室,河北石家庄 050091;河北省食品检验研究院,河北省食品安全重点实验室,河北石家庄 050091;河北省食品检验研究院,河北省食品安全重点实验室,河北石家庄 050091;河北省食品检验研究院,河北省食品安全重点实验室,河北石家庄 050091;河北省食品检验研究院,河北省食品安全重点实验室,河北石家庄 050091;河北省食品检验研究院,河北省食品安全重点实验室,河北石家庄050091【正文语种】中文【中图分类】TS207.3氟虫腈是一种用于防治跳蚤、虱子、蟑螂、螨、蚂蚁等虫害的苯基吡唑类广谱杀虫剂，与γ-氨基丁酸受体结合，可控制害虫神经系统使其兴奋过度死亡[1]，自1987年法国罗纳-普朗克公司开发以来，在世界范围内广泛应用[2-4]。