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第九章高效液相色谱

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第9章-二氢吡啶类-钙通道阻滞药物的分析

第9章-二氢吡啶类-钙通道阻滞药物的分析
L/O/G/O
第九章 二氢吡啶类 钙通道阻滞药物的分析
学习要求：
• 1. 掌握：二氢吡啶类药物的基本结构及主 要理化性质；结构、性质与分析方法间的 关系；铈量法的原理、方法及注意事项。
• 2. 熟悉：二氢吡啶类药物的化学鉴别反应 及有关物质检查的方法；
• 3. 了解：二氢吡啶类药物其他的鉴别试验 及含量测定方法、及体内分析中样品的处 理方法。
色谱与质谱条件 色谱柱为Chiral-AGP柱 (150mm×4.0mm，5µm)，流动相为10 mmol/L醋酸铵缓 冲液(pH4.5)-正丙醇(99:1)，流速0.9 ml/min，柱温30℃。 APCI离子源，温度350℃，辅助气(N2)流速2 L/min，气 帘气(N2)压力410kPa流速1.2 L/min，电晕放电电流2A， 正离子选择反应监测(SRM)[M+H]+离子，N2碰撞能量 15eV，用于定量分析的离子反应分别为m/z409→238(氨 氯地平)和m/z260→116(S-(-)-普萘洛尔)。
二、分光光度法
（一）紫外分光光度法
ChP2010尼群地平软胶囊的鉴别： 避光操作。取本品的内容物约1g，置100ml量瓶 中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，取10ml，置 100ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，在 353nm与303nm的波长处分别测定吸光度，在 353nm与303nm的吸光度比值应为2.1～2.3。
第五节 体内二氢吡啶类药物的分析
氨氯地平分子结构中含有一个手性碳原子， 故具有一对光学异构体R-(+)-氨氯地平与S-(-)氨氯地平，仅S-(-)-氨氯地平具有血管扩张作用， 其中左旋氨氯地平药效是消旋氨氯地平的2倍， 因此需进行血浆中氨氯地平对映体的手性分离 与立体选择性药动学研究。

高效液相色谱法教学【全】精选全文

高效液相色谱法教学【全】精选全文
P307~311
例: 流动相极性变化对组分k’的影响
②更换色谱柱（改变N）
措施： a.选择长柱子(N=L/H) b.填料颗粒尽量小 c.低流速(溶质传质阻力小，峰扩展小) d.低的溶剂粘度(提高柱效)
高效液相色谱法
High Performance Liquid
Chromatography （HPLC）
前言:
HPLC是70年代以后发展最 快的一个分析化学分支，现 已成为生化、医学、药物、 化学化工、食品卫生、环保 检测等领域最常用的分离分 析手段。
我国：
开始仅为少数研究实验室拥有， 现很多的生产、研究、质检部门都拥有。 广泛应用于： 质量控制、分析化验、制备分离。 讲课目的：入门 教材：《实用色谱法》（詹益兴 编著） 学习要求：记好笔记，
ⅰ大分子，扩散系数小 ⅱ小分子，扩散系数大
5. 影响分离的因素与提高柱效的途径
• 液体的扩散系数仅为气体的万分之一，在高效液
相色谱中,速率方程中的分子扩散项B/u较小，可忽略 不计，即 H = A + C u
• 降低传质阻力是提高 柱效主要途径。 •气相和液相Ｈ－ｕ区别
§１－４ 分离度 (Rs)
于世林编著)
第一章 高效液相色谱法基本原理 §1－1 概述 一、色谱法
混合物最有效的分离、分析方法。 是一种分离技术。 混合物分离过程：试样中各组分在 固液两相间不断进行着的分配。 一相固定不动，称为固定相。 另一相是携带试样混合物流过固定 相的液体，称为流动相。
液相色谱仪
高效液相色谱仪流程图
(1) 存在着浓度差，产生纵向扩散;
(2) 扩散导致色谱峰变宽，H↑(Ｎ↓)，分离变差; (3) B/u与流速有关：流速↓→ 滞留时间↑→ 扩散↑

第九章 色谱法概论-2

第九章 色谱法概论-2

8）选择性因子 α：调整保留值 ） 之比
某组分2的调整保留值与组分1的调整保留 值之比，称为选择性因子 。 由于相对保留值只与柱温及固定相性质有 关，而与柱径、柱长、填充情况及流动 相流速无关，因此，它在色谱法中，特 别是在气相色谱法中，广泛用作定性的 依据。 K2 k2 α = r2， = = 1 K1 k1
1．流出曲线和色谱峰
色谱图） 流出曲线（色谱图）：电信号强度随时间变化曲线 色谱峰：流出曲线上突起部分 色谱峰
从色谱图上可以得到许多重要 信息：
①根据色谱峰的个数，可以判断试样中所含组 分的最少个数。 ②根据色谱峰间的距离，可评价色谱条件的选 择是否合理。 ③利用色谱峰的保留值及区域宽度，可评价柱 效。 ④根据色谱峰的保留值，可以对组分进行定性 分析。 ⑤根据色谱峰的面积或峰高，可以对组分进行 定量分析。
♠某组分的 = 0时，即不被固定相保留，最先流出。 某组分的K 某组分的 时 即不被固定相保留，最先流出。
11．容量因子 11．
分配系数K 分配系数 ： K = CS
以吸附色谱为例见图示 吸附→ 解吸→再吸附 →再解吸 →反复多次洗 脱→被测组分分配系数不同→ 差速迁移 → 分 离
图示
分配系数的微小差异→吸附能力的微小差异 微小差异积累→较大差异→吸附能力弱的组分先流出； 吸附能力强的组分后流出 back
色谱过程示意图
二、色谱流出曲线和基本概念
1．流出曲线和色谱峰 2．保留值：色谱定性参数 3．色谱峰的区域宽度：色谱柱效参数
第2节 色谱过程与术语 一、 色谱过程：
色谱过程是当流动相中携带的混合物流
经固定相时，其与固定相发生相互作用。 经固定相时，其与固定相发生相互作用。 由于混合物中各组分在性质和结构上的差 与固定相之间产生的作用力的大小、 异，与固定相之间产生的作用力的大小、 强弱不同，随着流动相的移动， 强弱不同，随着流动相的移动，混合物在 两相间经过反复多次的分配平衡， 两相间经过反复多次的分配平衡，使得各 组分被固定相保留的时间不同， 组分被固定相保留的时间不同，从而按一 定次序由固定相中流出。 定次序由固定相中流出。

现代色谱分析试题

现代色谱分析试题

现代⾊谱分析试题第⼀章⾊谱法概论1. 综述各种⾊谱法的特点及其应⽤。

2. 简要说明⽓相⾊谱法（GLC、GSC）、⾼效液相⾊谱法（HPLC的各类⽅法）特点及其应⽤范围？3. 试⽐较⾊谱法（GC、HPLC）之间的异同？第⼆章⾊谱基本理论例1 采⽤3M⾊谱柱对A、B⼆组分进⾏分离，此时测得⾮滞留组分的t M值为0.9min ，A组分的保留时间（t R(A)）为15.1min，B组分的t R为18.0min，要使⼆组分达到基线分离（R=1.5），问最短柱长应选择多少⽶（设B组分的峰宽为1.1 min）？解⽅法（1）：由已知条件，得n B=16(18.0/1.1)2=4284r i,B=18.0-0.9/15.1-0.9=1.20K/B=18.0-0.9/0.9=19则因为所以故⽅法（2）：同⽅法（1）得n B=4284；r i,B=1.20；K/B=19所以则n B (R=1.5)=16 (1.5)2(1.2/0.2)2[(1+19)/19]2=1425故L=n (R=1.5)H=14250.07=99.8cm1m1.A、B ⼆组分的分配系数之⽐为0.912，要保证⼆者的分离度达到1.20，柱长因应选择多少⽶？设有效塔板⾼度为0.95mm.。

2.有⼀液相⾊谱柱长25cm,流动相速度为0.5ml/min，流动相体积为0.45ml，固定相体积为0.25ml,现测得萘、蒽、菲、芘四组分（以A、B、C、D）的保留值及峰宽如表3-1。

根据已知条件试计算出：（1）各组分容量及分配系数；（2）各组分的n及n eff；（3）各组分的H 值及H eff值；（4）画出四组分的K/值之间的关系曲线表3-1 在HPLC柱上测得的A、B、C、D 的组分t R(min) W h/2(min)⾮滞留组分ABCD 4.06.513.514.620.10.420.971.101.38答：（1）K/（A=0.60；B=2.38；C=2.65；D=4.03）；（2）（A=4021；B=3099；C=2818；D=3394）n eff（A=595；B=1535；C=1486；D=2178）;（3）H（A=0.06；B=0.08；C=0.09；D=0.07）H eff（A=0.42；B=0.16；C=0.17；D=0.11）;(5)根据已有数据，绘出K/--n--n eff曲线，⾃⾏判断正确与否，并分析原因。

高效液相色谱法-精品课程

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6. 高效液相色谱法
《仪器分析》精品课程组
《仪器分析》精品课程
6.1 概述 6.2 高效液相色谱仪
《仪器分析》精品课程
一、高效液相色谱法简介 高效液相色谱法起源于经典液相色谱法，它
是现代分析化学中最重要的分离分析方法之一。 直到20世纪60年代后期，才产生了具有现代意义 的高效液相色谱。
高效液相色谱是化学、生物化学与分子生物 学、医药学、农业、环保、商检、药检、法检等 学科领域与专业最为重要的分离分析技术。国际 市场调查表明，高效液相色谱仪在分析仪器销售 市场中占有最大的份额，增长速度最快。
为液体或各种液体的混合，可供选择的机会多。流动相对 分离的贡献很大，可通过溶剂来控制和改进分离。
操作温度：GC需高温；HPLC通常在室温下进行。
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9.2 高效液相色谱仪
高效液相色谱仪是实现液相色谱分析的 仪器设备，自1967年问世以来，由于使用了 高压输液泵、全多孔微粒填充柱以及高灵敏 的检测器，实现了对样品的高速、高效和高 灵敏的分离测定。

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3.过滤器 在高压输液泵的进口和它的出口与进样
阀之间，应设置过滤器。 4.梯度洗脱装置
梯度洗脱就是在分离过程中使两种或两 种以上不同极性的溶剂按一定程序连续改变 它们之间的比例，从而使流动相的强度、极 性、pH值或离子强度相应地变化，达到提高 分离效果，缩短分析时间的目的。
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准确，重复性好，如图。
装入样品
进样 采样环
进色谱柱 泵入溶剂 出口
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3.自动进样器 由计算机自动控制定量阀，按预先
编好的样品注射程序进行工作。取样、 进样、复位、管路清洗等，可全部自动 完成。

陈纭老师第九章二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析

陈纭老师第九章二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析
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二、分光光度法
（一）紫外分光光度法 ChP2010尼群地平软胶囊的鉴别： 避光操作。取本品的内容物约1g，置100ml量瓶 中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，取10ml，置 100ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，在 353nm与303nm的波长处分别测定吸光度，在 353nm与303nm的吸光度比值应为2.1～2.3。
陈纭老师第九章二氢吡 啶类钙通道阻滞药物的
分析
2021/1/3
陈纭老师第九章二氢吡啶类钙通道阻 滞药物的分析
学习要求：
• 1. 掌握：二氢吡啶类药物的基本结构及主 要理化性质；结构、性质与分析方法间的 关系；铈量法的原理、方法及注意事项。
• 2. 熟悉：二氢吡啶类药物的化学鉴别反应 及有关物质检查的方法；
陈纭老师第九章二氢吡啶类钙通道阻 滞药物的分析
（二）红外分光光度法
ChP2010尼群地平片的鉴别：
避光操作。取本品（约相当于尼群地平
100mg），研细，加丙酮10ml，振摇使溶解，
滤过，滤液暗处挥干，残渣经减压干燥，依法
测定。本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱
（光谱集600）一致。
陈纭老师第九章二氢吡啶类钙通道阻 滞药物的分析
色谱与质谱条件 色谱柱为Chiral-AGP柱
(150mm×4.0mm，5µm)，流动相为10 mmol/L醋酸铵缓
冲液(pH4.5)-正丙醇(99:1)，流速0.9 ml/min，柱温30℃。
APCI离子源，温度350℃，辅助气(N2)流速2 L/min，气 帘气(N2)压力410kPa流速1.2 L/min，电晕放电电流2A， 正离子选择反应监测(SRM)[M+H]+离子，N2碰撞能量 15eV，用于定量分析的离子反应分别为m/z409→238(氨

第九章 二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析


醇2ml，搅拌使溶解，移至试管中，加1%氯化
汞溶液3ml，即发生白色沉淀。
（四）重氮化-偶合反应
BP2010硝苯地平的鉴别： 取本品25mg，加10ml盐酸-水-乙醇混合溶液 （1.5∶3.5 ∶ 5），温热，加入锌粒0.5g，放 臵5分钟，滤过，滤液加亚硝酸钠溶液（10g/L） 5ml，放臵2分钟，再加入氨基磺酸铵溶液
第一节
二氢吡啶类药物 的基本骨架：
结构与性质
一、常见药物的结构
H N
6 1 2 5 4 3
R1 R2OOC
CH3 COOR3 R4 R5
CH3 CH3OOC
H N
CH3 COOCH3 NO 2
CH3 CH3CH2OOC
H N
CH3 COOCH3
NO2
硝苯地平
CH3 (CH3)2CHOOC
H N
CH3 COO(CH2)2OCH3
10.下列性质属于尼莫地平的是：
A B 氧化性 还原性
C
D E
弱碱性
弱酸性 旋光性
11.下列药物中，可与碘化铋钾反应 生成橙药沉淀的是：
A B 硝苯地平 尼群地平
C
D E
地西泮
阿司匹林 巴比妥钠
3. 二氢吡啶环氨基质子解离性 4. 稳定性
5. 旋光性
6. 吸收光谱特性
第二节 鉴别试验
一、化学鉴别法
（一）与亚铁盐反应 二氢吡啶类药物苯环上硝基பைடு நூலகம்有氧化性， 可将氢氧化亚铁氧化为红棕色氢氧化铁沉淀。
ChP2010尼莫地平的鉴别： 取本品约20mg，加乙醇2ml溶解后，加新制
的5%硫酸亚铁铵溶液2ml，1.5mol/L硫酸溶液1
滴与0.5mol/L氢氧化钾溶液1ml，强烈振摇，1

高效液相色谱法教学全169页PPT

51、 天 下 之 事 常成 于困约 ，而败 于奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
Hale Waihona Puke 谢谢！高效液相色谱法教学全
26、机遇对于有准备的头脑有特别的 亲和力 。 27、自信是人格的核心。
28、目标的坚定是性格中最必要的力 量泉源 之一， 也是成 功的利 器之一 。没有 它，天 才也会 在矛盾 无定的 迷径中 ，徒劳 无功。- -查士 德斐尔 爵士。 29、困难就是机遇。--温斯顿．丘吉 尔。 30、我奋斗，所以我快乐。--格林斯 潘。

高效液相色谱法-精品课程共31页

高效液相色谱法-精品课程
11、获得的成功越大，就越令人高兴 。野心 是使人 勤奋的 原因， 节制使 人枯萎 。 12、不问收获，只问耕耘。如同种树 ，先有 根茎， 再有枝 叶，尔 后花实 ，好好 劳动， 不要想 太多， 那样只 会使人 胆孝懒 惰，因 为不实 践，甚 至不接 触社会 ，难道 你是野 人。(名 言网) 13、不怕，不悔(虽然只有四个字，但 常看常 新。 14、我在心里默默地为每一个人祝福 。我爱 自己， 我用清 洁与节 制来珍 惜我的 身体， 我用智 慧和知 识充实 我的头 脑。 15、这世上的一切都借希望而完成。 农夫不 会播下 一粒玉 米，如 果他不 曾希望 它长成 种籽； 单身汉 不会娶 妻，如 果他不 曾希望 有小孩 ；商人 或手艺 人不会 工作， 如果他 不曾希 望因此 而有收 益。-- 马钉路 德。
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71、既然我已经踏上这条道路，那么，任72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。——韩非
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