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1.生物药物：又称为生物工程，是指人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其它基础学科的科学原理，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的技术。
2.生物技术药物：采用DNA重组技术或其它生物技术生产的用于预防、治疗和诊断疾病的药物，主要是重组蛋白和核酸类药物，如细胞因子、纤溶酶原激活剂、血浆因子等。
3.质粒载体：质粒是指独立于原核生物染色体之外具有自主复制能力的遗传物质。
分三种构型：共价闭合环状DNA(cccDNA)、开环DNA(ocDNA)、线状DNA(IDDNA)。
在琼脂糖凝胶电泳中迁移率：cccDNA > IDDNA > ocDNA4.目的基因的常用制备方法主要包括化学合成法、PCR法、基因文库法和cDNA文库法等。
5.PCR法是指聚合酶链反应，是根据生物体内DNA复制原理在DNA聚合酶催化和dNTP参与下，引物依赖DNA模板特异性的扩增DNA。
在含有DNA模板、引物、DNA聚合酶、dNTP的缓冲溶液中通过三个循环步骤扩增DNA：：①变性—双链DNA模板加热变性，解离成单链模板；②退火—温度下降，引物与单链模板结合（温度下降，PCR特性下降，效率升高）；③延伸—温度调整至DNA聚合酶最适宜温度，DNA聚合酶催化dNTP加至引物3′-OH，引物以5′→3′方向延伸，最终与单链模板形成双联DNA, 并开始下一个循环。
6.cDNA文库法：cDNA是指与mRNA互补的DNA。
cDNA文库法是指提取生物体总mRNA，并以mRNA作为模板，在逆转录酶的催化下合成cDNA的一条链，再在DNA聚合酶的作用下合成双链cDNA，将全部cDNA都克隆到宿主细胞而构建成cDNA文库。
7.影响目的基因与载体之间连接效率的主要因素：①DNA片段之间的连接方式；粘性末端的连接效率高于平头末端。
②目的基因与载体的浓度和比例；增加DNA浓度可以提高连接效率，目的基因于载体DNA的摩尔数比应大于1。
反义核酸技术(antisense technology) 主要包括反义RNA ( antisense RNA) 和反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide) ,可以通过多种机制快速、可预测地调节培养组织或细胞的基因表达,用来快速、有效地测定基因功能。
RNA 干扰技术天然反义RNA 广泛存在于原核和真核细胞内, 通过与靶基因形成RNA-RNA 或RNA-DNA 双螺旋, 对基因功能起重要的调节作用。
RNA 干扰技术(RNA interference ,RNAi) 正是利用了反义RNA 与正链RNA 形成双链RNA ,特异性抑制靶基因轉录後表达这一原理,成为研究轉录後调控的有效工具, 广泛用于功能基因组学、基因治疗和轉录调控机制研究。
在这一技术中,早期使用双链RNA (double-strand RNA , dsRNA) 作为干扰剂,核心技术是小分子干扰RNA( small interfering RNA , siRNA) 的设计与合成(哺乳动物通常选择21～23 bp dsRNA ,其他生物选择更长的片段) ,另外,还包括siRNA 的标记、轉染和RNAi 的检测。
然而,基因敲除实验显示RNAi 存在一定程度的非特异性。
分析认为,RNAi 最初在哺乳动物细胞中所获得的成功,部分是由于所使用的短链dsRNA 激活了胞内dsRNA 依赖的蛋白激酶,引起细胞反应并不断累积。
新近两方面技术的发展使得RNAi 在哺乳动物细胞中更加奏效: (1) 使用能使siRNA 稳定表达的新的载体系统[21 ] ; (2) 利用人U6核内小RNA ( snRNA) 启动子进行单一RNA 轉录单位的核内表达[22 ] 。
即通过轉染dsRNA 的胞内表达并在胞内降解成约20 bp 的dsRNA ,後者通过RNA依赖的RNA 合成酶复制,并结合到核酸酶复合物上,形成RNA 诱导的轉录沉默复合体(RNA-induced silencing complex ,RISC) ,降解靶mRNA。
PCR技术的应用，使得Aptamer的研究近年来有了长足的进步，筛选到了一大批能与各种蛋白或小分子特异紧密结合的核酸分子(Apta-mer)。
这些Aptamer包含了RNA、双链DNA、单链DNA等多种形式的寡聚核苷酸，其配体的性质各异。
用于抗病毒的aptamer多为RNA分子，与基因表达调控有关的重要病毒蛋有什么不妥。
但对白就不行了，人说话的声音受情绪控制的，拍摄时表演的情绪在后期很难模仿到一模一样，就算能模仿，那等于让演员重演一边，而且还要花时间、花场地、花设备。
所以我们看电影拍摄花絮中的场景，拍摄的时候，只有一个专门录对白的话筒。
而其他的声音，可以在后期再录，或直接从音源库里找，然后根据画面进行“配音”就可以了。
3后期编辑电脑配置专业用于后期编辑的系统是计算机技术和数字电视技术相结合的产物，它主要有三部分组成：音频处理卡（即声卡）、视频处理卡（包括视频采集卡和视频压缩卡）以及编辑软件。
用来视频编辑的电脑，最大的区别就是是否有采编卡。
业余领域多半是无卡编辑，通过1394接口或者USB接口把摄像带的内容传输到电脑硬盘中，生成为A VI文件，然后用计算机软件对视频进行后期编辑制作，生成一个新的A VI文件，最后再将视频用专用的压缩软件将编辑好的A VI文件压缩成为MPEG1或MPEG2文件，刻为VCD或DVD永久保存。
任何后期编辑的工作流程，都可以简单地看成输入、编辑、输出这样三个步骤。
当然，由于不同软件功能的差异，其使用流程还可以进一步细化。
一般来说，素材的采集与输入采集主要是利用Premiere Pro软件,将模拟视频、音频信号转换成数字信号存储到计算机中，或者将外部的数字视频存储到计算机中，成为可以处理的素材。
4剪辑软件的横向比较在后期编辑上，目前主要采取无非线性编辑系统，非线性编辑系统是建立在计算机平台上的视频编辑应用系统。
它是集合传统的线性编辑系统里的全部设备为一体的编辑系统。
随着计算机软件方面的逐步发展，“无卡非线性编辑系统”问世，无卡非线性编辑系统造价低廉，它弥补了非线性编辑卡价格昂贵的缺陷，成为DV影片后期编辑的首选。
反义药物的简介反义技术是近些年来发展的一种全新的药物设计方法，它所合成的反义药物作用非常的大，那你了解反义药物吗?下面是店铺为你整理的反义药物的简介的相关内容，希望对你有用!反义药物的简介反义技术(antisense technology)是近些年来发展的一种全新的药物设计方法，主要是根据碱基互补配对原则和核酸杂交原理，利用人工合成、天然存在的互补寡核苷酸片段，与目的基因(单链、双链DNA)或信使核糖核酸(mRNA)的特定序列相结合，从基因复制、转录、剪接、转运翻译等水平上调节靶基因的表达，干扰遗传信息从核酸向蛋白质的传递，从而达到抑制、封闭或破坏靶基因的目的。
利用这一技术开发的药物称为反义药物，通常是指反义寡核苷酸，即人工合成的DNA或RNA单链片段，主要包括反义DNA(AS-ODN)，反义RNA(ASON)，多肽核酸(PNA)，核酶(ribozyme)等。
反义药物的优缺点优点特异性较强，一个15聚体的反义寡核苷酸含有30-45氢键，而低分子的传统药物(200-600u)与靶点一般只形成1-4个键;信息量较大，遗传信息从DNA-RNA-蛋白质，用互补寡核苷酸阻断某种蛋白的合成是很准确的;反义药物以核酸为靶点，与蛋白质作为靶点比较，更易合理设计新药物。
由于作用于遗传信息传递的上游，所需药量较低，副作用可能较少。
缺点剂量依赖性的副作用,包括脾肿大、血小板减少、免疫刺激、肝中酶 (天冬氨酸转氨酶 ,丙氨酸转氨酶 )水平升高、部分凝血致活酶的活化时间延长和补体的活化等。
反义药物的研究进展反义药物研究始于1978年，以后随着人类基因组计划的飞速发展以及针对某些发病率高又暂无有效治疗药物的疾病，反义药物治疗的研究兴趣逐年高涨。
目前已经证实许多疾病的病因与基因有关。
第一代反义药物第一代反义药物是由合成DNA单体制成的。
它经修饰后仅含一种硫磺物质，以替代核苷酸之间磷酸连接的氧分子。
迄今，由于这种称作硫代磷酸酯变体的硫代磷酸醋寡脱氧核昔酸(PS-ODN)在遇到组织核酸酶时能提高药物的稳定性，并且能延长血桨的半衰期，所以它广泛应用于多数寡脱氧核苷酸类药品中。
U pA G pU 5'外显子3'外显子内含子核酶的研究进展摘要： 80年代初，由美国科学家Cech 和Altman 发现了核酶,随着人类基因工程研究的深入，工作者和基础科学研究人员开始注意到核酶在各方面的应用潜力。
关键词： 概念 分类 剪接机制 反义核酸技术 医学上的应用 应用实例 技术问题核酶的概念核酶一词用于描述具有催化活性的RNA, 即化学本质是核糖核酸(RNA), 却具有酶的催化功能。
核酶的作用底物可以是不同的分子, 有些作用底物就是同一R NA 分子中的某些部位。
核酶的功能很多,有的能够切割RNA, 有的能够切割DN A, 有些还具有RNA 连接酶、磷酸酶等活性。
与蛋白质酶相比，核酶的催化效率较低，是一种较为原始的催化酶。
核酶的分类剪接型核酶：这类核酶具有核酸内切酶和连接酶两种活性。
、作用机制：通过既剪又接的方式除去内含子 。
需要鸟苷酸或鸟苷及镁离子参与剪接机制：I 型内含子的结构特点： 1、拼接点序列为5’U··· ···G3’ 2、中部核心结构3、内部引导序列pGpA G pU 3'U 5'OH4、剪接通过转酯反应进行剪切型核酶：这类核酶催化自身或者异体RNA的切割，相当于核酸内切酶。
这类RNA进行催化反应时只切不接。
类型：1) 自体催化剪切型2) 异体催化剪切型。
特点：在Mg 2+ 或其他二价金属离子存在下，在特定的位点，自我剪切，产生5‘-OH 和2’, 3‘-环磷酸二酯末端。
核酶的应用核酶是在对多种植物病毒卫星RNA及类病毒RNA的自我剪接研究中发现的，数量较少，常见于rRNA的内含子。
核酶的具体作用主要有：1.核苷酸转移作用。
2.水解反应，即磷酸二酯酶作用。
3.磷酸转移反应，类似磷酸转移酶作用。
4.脱磷酸作用，即酸性磷酸酶作用。
RNA内切反应，即RNA限制性内切酶作用。
核酸内切酶可以催化水解多核苷酸内部的磷酸二酯键。
反义核酸技术(antisense technology) 主要包括反义RNA ( antisense RNA) 和反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide) ,可以通过多种机制快速、可预测地调节培养组织或细胞的基因表达,用来快速、有效地测定基因功能。
RNA 干扰技术天然反义RNA 广泛存在于原核和真核细胞内, 通过与靶基因形成RNA-RNA 或RNA-DNA 双螺旋, 对基因功能起重要的调节作用。
RNA 干扰技术(RNA interference ,RNAi) 正是利用了反义RNA 与正链RNA 形成双链RNA ,特异性抑制靶基因轉录後表达这一原理,成为研究轉录後调控的有效工具, 广泛用于功能基因组学、基因治疗和轉录调控机制研究。
在这一技术中,早期使用双链RNA (double-strand RNA , dsRNA) 作为干扰剂,核心技术是小分子干扰RNA( small interfering RNA , siRNA) 的设计与合成(哺乳动物通常选择21～23 bp dsRNA ,其他生物选择更长的片段) ,另外,还包括siRNA 的标记、轉染和RNAi 的检测。
然而,基因敲除实验显示RNAi 存在一定程度的非特异性。
分析认为,RNAi 最初在哺乳动物细胞中所获得的成功,部分是由于所使用的短链dsRNA 激活了胞内dsRNA 依赖的蛋白激酶,引起细胞反应并不断累积。
新近两方面技术的发展使得RNAi 在哺乳动物细胞中更加奏效: (1) 使用能使siRNA 稳定表达的新的载体系统[21 ] ; (2) 利用人U6核内小RNA ( snRNA) 启动子进行单一RNA 轉录单位的核内表达[22 ] 。
即通过轉染dsRNA 的胞内表达并在胞内降解成约20 bp 的dsRNA ,後者通过RNA依赖的RNA 合成酶复制,并结合到核酸酶复合物上,形成RNA 诱导的轉录沉默复合体(RNA-induced silencing complex ,RISC) ,降解靶mRNA。
