化瘀祛痰方药对巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1CD36表达的影响_贾连群
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泽泻汤对巨噬细胞泡沫化脂质沉积及其LXRα和ABCA1表达的影响薛偕华;魏伟;陈彤;周晓茂;林志诚;陈立典【期刊名称】《中国动脉硬化杂志》【年(卷),期】2013(21)11【摘要】目的以大鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,经ox-LDL(50 mg/L)诱导后建立巨噬细胞泡沫化模型,观察泽泻汤对细胞LXRα和ABCA1表达的影响。
方法分别采用ox-LDL(50 mg/L)和Dil-ox-LDL(10 mg/L)处理大鼠腹腔巨噬细胞24 h,同时20%泽泻汤血清干预后,油红O染色和荧光显微镜观察细胞内脂质沉积情况;蛋白免疫印迹检测细胞LXRα和ABCA1的表达情况。
结果 ox-LDL(50 mg/L)和Dil-ox-LDL(10 mg/L)处理巨噬细胞成功建立巨噬细胞泡沫化模型;与空白组的巨噬细胞比较,模型组巨噬细胞内脂质沉积增加,泽泻汤血清干预组巨噬细胞内脂质沉积明显减少。
空白组巨噬细胞和模型组巨噬细胞LXRα呈低水平表达,泽泻汤血清干预组细胞LXRα表达明显增加;与空白组比较,模型组巨噬细胞ABCA1表达明显增加,泽泻汤血清干预组巨噬细胞中ABCA1亦呈高表达,但较模型组略低。
结论 ox-LDL(50 mg/L)和Dil-ox-LDL(10 mg/L)处理巨噬细胞可以成功建立巨噬细胞泡沫化模型;泽泻汤能改善巨噬细胞泡沫化过程的脂质沉积,可能通过上调LXRα表达来实现的。
【总页数】6页(P971-976)【关键词】泽泻汤;巨噬细胞泡沫化;LXRct;ABCA1【作者】薛偕华;魏伟;陈彤;周晓茂;林志诚;陈立典【作者单位】福建中医药大学附属康复医院脑病科;福建中医药大学【正文语种】中文【中图分类】R363【相关文献】1.泽泻汤对巨噬细胞泡沫化脂质沉积及其IL-1β表达的影响 [J], 林高城;陈云欢;杨莉惠;魏伟;邹愉龙;陈雨2.糖肾方激活PGC-1α/LXR/ABCA1信号通路改善高脂诱导的巨噬细胞胆固醇摄取及流出 [J], 许可;高骏伟;刘鹏;申正日;贾慧;吴宸广;田锋;王立范;李平3.泽泻汤对巨噬细胞源性泡沫细胞MMP-9表达的影响及其与ERK通路的相关性[J], 陈彤;魏伟;邹愉龙;周晓茂;邓阳阳;卓丽萍;薛偕华4.24-乙酰泽泻醇A对氧化型低密度脂蛋白诱导巨噬细胞脂代谢因子ABCA1、CD36及炎症因子CD147、MMP-9的影响 [J], 施凤飞;魏伟;汪玉成;苏清平;薛偕华5.姜黄素通过LXRα-ABCA1通路抑制小鼠巨噬细胞脂质聚集 [J], 郑伟;李强;陈欣;李亚新;李珊因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
网络出版时间:2023-12-0115:59:40 网络出版地址:https://link.cnki.net/urlid/34.1086.R.20231130.1320.024野黄芩素通过促进胆固醇外流途径抑制巨噬细胞泡沫化的作用机制吴若琳1,黄裕鸿1,王天琦2,孙文龙3,李敬达1(长江大学1.生命科学学院、2.农学院,湖北荆州 434000;3.山东理工大学生命与医药学院,山东淄博 255000)收稿日期:2023-06-10,修回日期:2023-08-25基金项目:国家自然科学青年科学基金资助项目(No82004020);国家自然科学青年科学基金资助项目(No81903878)作者简介:吴若琳(2000-),女,硕士生,研究方向:中药治疗代谢类疾病,E mail:402647145@qq.com;李敬达(1987-),男,博士,讲师,研究方向:中药治疗代谢类疾病,通信作者,E mail:jingdali_shenqi@163.comdoi:10.12360/CPB202305009文献标志码:A文章编号:1001-1978(2023)12-2266-08中国图书分类号:R284 1;R329 24;R341 35;R344 8;R543 5摘要:目的 探究野黄芩素对巨噬细胞泡沫化及胆固醇外流作用的影响及潜在机制。
方法 使用佛波醇12 十四酸酯13 乙酸酯(PMA)诱导THP 1细胞巨噬化,并通过MTT法检测不同浓度野黄芩素对巨噬细胞活力的影响;利用胆固醇含量检测试剂盒及NBD荧光标记胆固醇测定不同浓度野黄芩素对巨噬细胞胆固醇蓄积和外流作用的干预效果;采用分子对接、ELISA、双荧光素酶报告基因和Westernblot法确定野黄芩素对PPARγ LXRα ABCA1信号通路的激活情况;利用siRNA干扰技术分析PPARγ基因沉默对野黄芩素增强胆固醇外流途径和抑制巨噬细胞泡沫化的影响。
结果 野黄芩素可剂量依赖性地抑制oxLDL诱导的胆固醇蓄积,加速胆固醇外流途径并明显提高LXRα和ABCA1蛋白表达;同时,野黄芩素可结合PPARγ,并启动其下游LXRα ABCA1信号通路。
《益气化痰祛瘀方调节M1-M2巨噬细胞极化对COPD大鼠肺部炎症及血管重塑的影响》益气化痰祛瘀方调节M1-M2巨噬细胞极化对COPD大鼠肺部炎症及血管重塑的影响摘要:本文旨在探讨益气化痰祛瘀方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型中M1/M2巨噬细胞极化的调节作用,及其对肺部炎症和血管重塑的影响。
通过实验研究,我们发现该方剂能够有效调节巨噬细胞的极化状态,减轻COPD大鼠的炎症反应和血管重塑程度,为COPD的治疗提供新的思路和方法。
一、引言慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种以持续气流受限为特征的慢性支气管炎和肺气肿,其发病机制复杂,涉及多种细胞和分子参与的炎症反应。
M1和M2型巨噬细胞在COPD的发病过程中扮演着重要角色。
M1型巨噬细胞促进炎症反应,而M2型巨噬细胞则参与组织修复和抗炎过程。
因此,调节M1/M2巨噬细胞的极化状态成为治疗COPD的新靶点。
本研究通过益气化痰祛瘀方对COPD大鼠进行治疗,并观察其对M1/M2巨噬细胞极化、肺部炎症及血管重塑的影响。
二、材料与方法1. 材料实验所需的药物为益气化痰祛瘀方,COPD大鼠模型通过烟雾暴露法建立。
实验中使用的试剂和仪器均符合实验要求。
2. 方法(1)分组与给药:将大鼠随机分为模型组、治疗组和正常组,治疗组给予益气化痰祛瘀方灌胃治疗。
(2)检测指标:通过病理学检查、免疫组化等方法检测大鼠肺部M1/M2巨噬细胞的数量和分布,以及肺部炎症和血管重塑的程度。
三、实验结果1. M1/M2巨噬细胞极化的调节实验结果显示,治疗组大鼠肺部M1型巨噬细胞数量减少,M2型巨噬细胞数量增加,表明益气化痰祛瘀方能够有效地调节M1/M2巨噬细胞的极化状态。
2. 对肺部炎症的影响治疗组大鼠肺部炎症反应较模型组明显减轻,表现为炎症细胞浸润减少,炎症介质水平降低。
3. 对血管重塑的影响治疗组大鼠肺部血管重塑程度较模型组减轻,表现为血管壁增厚和管腔狭窄等病理改变得到改善。
四、讨论本研究表明,益气化痰祛瘀方能够调节COPD大鼠模型中M1/M2巨噬细胞的极化状态,减轻肺部炎症反应和血管重塑程度。
心血管疾病(Cardiovascular Diseases,CVD),包括冠心病、急性心肌梗死、脑梗死等,是世界范围内死亡的主要原因之一,而动脉粥样硬化(Atherosclerosis,ATH)则是CVDs的主要原因。
关于ATH的发病机制目前尚无统一的认识,有学者认为ATH是以动脉内皮功能障碍开始的慢性炎症状态,低密度脂蛋白(Low Density Lipoprotein,LDL)尤其是其氧化形式在其中起着关键作用[1-3]。
在动脉粥样硬化发展过程中,氧化型低密度脂蛋白(Oxidized Low Density Lipoprotein,Ox-LDL)被巨噬细胞大量吞噬,胆固醇持续积累变成泡沫细胞,泡沫细胞刺激内皮细胞产生细胞因子和趋化因子,从而导致炎症反应,促进斑块的形成并产生ATH。
景虎通脉方是第三、四、五批全国老中医药专家学术经验继承工作指导老师赵淳教授用于治疗ATH的经验方,取得了良好的临床效果[4-6]。
前期实验结果证实,景虎通脉方可有效改善实验性颈动脉粥样硬化及高脂血症模型兔血脂,降低其外周血炎症因子白介素-6(Interleukin 6,IL-6)、细胞间黏附分子-1(Intercellular Cell Adhesion Molecule-1,ICAM-1)的表达,并可能通过抑制Toll样受体4(Toll-like Receptor 4,TLR4)信号通路以改善颈动脉斑块形成[7-9]。
结合我们的临床实践及前期动物实验研究结果,景虎通脉方的抗ATH作用机制可能与巨噬细胞及泡沫细胞的转化、炎症反应具有极为密切的关系。
本实验观察了景虎通脉方含药血清对巨噬细胞炎症反应及泡沫化形成的影响,进一步探讨景虎通脉方抗动脉粥样硬化的可能机制。
1 实验材料1.1 实验细胞、实验动物 RAW264.7巨噬细胞:小鼠单核巨噬细胞白血病细胞株,购自中国科学院昆明动物研究所细胞库,编号KCB200602YJ。
$%!" 化痰祛湿活血方对脂多糖诱导的巨噬细胞焦亡形态的影响刘鸣昊,刘素彤,尚东方,张丽慧,顾亚娇,赵文霞河南中医药大学第一附属医院脾胃肝胆科,郑州450000摘要:目的 化痰祛湿活血方对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞焦亡形态的影响及机制研究。
方法 复制体外LPS诱导活化RAW264.7细胞模型,分为空白组,模型组,化痰祛湿活血方高、中、低剂量组,对照组。
经相应的含药血清干预24h。
扫描电子显微镜观察各组细胞形态。
免疫荧光对GSDMD-N进行定量定位分析。
结果 空白组细胞形态圆形规整,表面光滑;对照组细胞肿胀,表面有褶皱,包膜有隙,符合细胞焦亡形态。
对照组细胞表面有气泡状突出物,伪足明显。
细胞膜有孔隙,高剂量组细胞形态无肿胀,表面粗糙有伪足,胞膜上未见明显孔隙。
低剂量和中剂量组细胞肿胀,细胞膜表面粗糙有孔隙,有伪足伸出。
免疫荧光结果显示,与空白组相比模型组GSDMD-N阳性染色强度明显增加,对照组与中药组较模型组GSDMD-N阳性染色强度均有减弱。
结论 化痰祛湿活血方可改善巨噬细胞焦亡现象,减少GSDMD-N表达。
关键词:脂肪肝;巨噬细胞;细胞焦亡基金项目:国家自然科学基金项目(81904154);河南省科技攻关计划(202102310168);河南省重点研发与推广专项课题(192102310425);河南省中医药科学研究专项课题(2019JDZX2051);河南省科技攻关计划项目(202102310495);河南省特色骨干学科中医学学科建设项目(STG-ZYXKY-2020024)EffectofHuatanQushiHuoxueprescriptiononlipopolysaccharide-inducedpyroptosisofmacrophagesLIUMinghao,LIUSutong,SHANGDongfang,ZHANGLihui,GUYajiao,ZHAOWenxia.(DepartmentofHepatologyandSpleen-Stomach,TheFirstAffiliatedHospitalofHenanUniversityofTraditionalChineseMedicine,Zhengzhou450000,China)Correspondingauthor:ZHAOWenxia,zhao-wenxia@163.com(ORCID:0000-0001-6666-9469)Abstract:Objective ToinvestigatetheeffectofHuatanQushiHuoxueprescriptiononlipopolysaccharide(LPS)-inducedpyroptosisofRAW264.7cellsanditsmechanism.Methods AninvitrocellmodelofLPS-inducedactivatedRAW264.7wasestablishedanddividedintoblankgroup,modelgroup,high-,middle-,andlow-doseHuatanQushiHuoxueprescriptiongroups,andcontrolgroup.Thecorrespondingdrug-containingseruminterventionwasperformedfor24hours.Ascanningelectronmicroscopewasusedtoobservecellmorphol ogy,andimmunofluorescenceassaywasusedtoperformquantitativelocalizationofGSDMD-N.Results Thecellsintheblankgroupwereroundandregularinshapewithsmoothsurface,andthoseinthecontrolgroupwereswollen,withfoldsonthesurfaceandgapsinthecap sule,whichwereconsistentwiththemorphologyofcellpyroptosis.Thecellsinthecontrolgrouphadbubblesonthesurfacewithobviouspseudopodiaandporesincellmembrane,andthoseinthehigh-dosegroupwerenotswollenandhadaroughsurfacewithpseudopodia,withnoobviousporesincellmembrane.Thecellsinthelow-andmiddle-dosegroupswereswollenandhadaroughsurfaceofcellmem branewithporesandpseudopodia.Immunofluorescenceassayshowedthatcomparedwiththeblankgroup,themodelgrouphadasignificantincreaseinthepositivestainingintensityofGSDMD-N,andcomparedwiththemodelgroup,thecontrolgroupandtheTraditionalChinesemedicinegrouphadareductioninthepositivestainingintensityofGSDMD-N.Conclusion HuatanQushiHuoxueprescriptioncanim provethepyroptosisofmacrophagesandreducetheexpressionofGSDMD-N.Keywords:FattyLiver;Macrophages;PyroptosisResearchfunding:NationalNaturalScienceFoundationofChina(81904154);ScienceandTechnologyResearchProgramofHenanProv ince(202102310168);KeyRESEARCHandPromotionProjectofHenanProvince(192102310425);TraditionalChineseMedicineScienceResearchProjectofHenanProvince(2019JDZX2051);KeyScienceandTechnologyProjectofHenanProvince(202102310495);TCMDis ciplineConstructionProjectofCharacteristicBackboneDisciplinesofHenanProvince(STG-ZYXKY-2020024)DOI:10.3969/j.issn.1001-5256.2022.09.014收稿日期:2022-02-15;录用日期:2022-03-17通信作者:赵文霞,zhao-wenxia@163.com 非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)进展为肝硬化、肝衰竭等终末期肝病的重要环节[1],也是临床干预的关键节点。
化瘀祛痰颗粒质量标准研究
贾连群;杨关林;陈阳;任路;张哲;张会永
【期刊名称】《中国中医药信息杂志》
【年(卷),期】2013(020)002
【摘要】目的建立化瘀祛痰颗粒的质量标准.方法采用薄层色谱法对化瘀祛痰颗粒中党参、黄芪、绞股蓝、郁金进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定丹酚酸B 的含量,色谱柱为Diamonsil C18柱,流动相为甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59),流速1.0 mL/min,检测波长286 nm,柱温30℃.结果薄层鉴别各样品特征斑点显色清晰,阴性样品无干扰;高效液相色谱法测出丹酚酸B在0.1425~1.425 0μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.999 7,平均回收率为98.45%,RSD=1.99%.结论本方法准确可靠、专属性强、重复性好,可用于化瘀祛痰颗粒的质量控制.
【总页数】3页(P65-67)
【作者】贾连群;杨关林;陈阳;任路;张哲;张会永
【作者单位】辽宁中医药大学,辽宁沈阳110847
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.解毒化瘀颗粒的质量标准研究 [J], 毛德文;邱华;唐农;夏星;龙富立;张荣臻
2.祛痰、化瘀和祛痰化瘀方对氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞增殖及凋亡功能的影响 [J], 陈冰;林雅军;马雅銮;李玉梅;薛欣;胡镜清
3.益气化瘀颗粒剂质量标准研究 [J], 刘峰;张恒
4.化瘀无糖颗粒的质量标准研究 [J], 隋继英;刘向红;陈金娜;窦明金
5.健脾化瘀颗粒质量标准研究 [J], 何屹;王兴海
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丹参酮ⅡA对泡沫细胞胆固醇平衡的影响卢德赵;林韬琦;王萍儿;杨贞;沃兴德【期刊名称】《中国动脉硬化杂志》【年(卷),期】2012(20)5【摘要】目的通过体外细胞实验阐明丹参酮ⅡA对泡沫细胞胆固醇平衡的影响。
方法体外培养小鼠RAW264.7细胞,以氧化型低密度脂蛋白诱导为泡沫细胞模型,并用不同浓度的丹参酮ⅡA进行处理,通过油红O染色观察细胞内脂质堆积情况,酶比色法定量检测细胞内总胆固醇和胆固醇酯的变化,荧光定量PCR和WesternBlot检测细胞中CD36、三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、肝脏X受体α(LXRα)、过氧化体增殖物激活型受体α(PPARα)及PPARγ的mRNA和蛋白表达。
结果 0~20 mg/L的丹参酮ⅡA对泡沫细胞增殖活力无明显影响,20 mg/L丹参酮ⅡA干预后,泡沫细胞内胆固醇酯与总胆固醇的比值显著降低,细胞内脂质累积减少,并上调AB-CA1、LXRα和PPARα的mRNA和蛋白表达,但对CD36表达无明显作用。
结论丹参酮ⅡA能抑制泡沫细胞的形成,其机制可能是通过诱导PPARα、LXRα和ABCA1表达,促进胆固醇的外排。
【总页数】5页(P402-406)【关键词】丹参酮ⅡA;胆固醇平衡;泡沫细胞;氧化型低密度脂蛋白【作者】卢德赵;林韬琦;王萍儿;杨贞;沃兴德【作者单位】浙江中医药大学生命科学学院【正文语种】中文【中图分类】R363【相关文献】1.丹参酮ⅡA上调ABCA1表达促进泡沫细胞胆固醇流出 [J], 胡海燕;李跃艳;李春霞;李兴;陈梦华;周寿红2.白细胞介素34对巨噬细胞泡沫化过程中细胞内胆固醇水平的影响 [J], 刘庆艳;白静;赵宇;汤喆;农京国;王禹3.绞股蓝总皂苷调节THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇平衡的作用机制 [J], 寿迪飞;卢德赵;王萍儿;卢嫣静;余英;林韬琦;沃兴德4.丹参酮ⅡA对ox-LDL诱导的小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞蛋白质组的影响 [J], 闫昭芫;耿伸;刘佳;卢德赵;柴惠5.丹参酮ⅡA对ApoE^(-/-)动脉粥样硬化小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇流出相关基因表达的影响 [J], 赵秋宇;贾连群;王俊岩;陈文娜;陈阳;朱美林;马佳会因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
益气化痰祛瘀方对冠心病大鼠纤溶系统的影响左海宁;张东梅;张文立;赵淑明【摘要】目的:观察益气化痰祛瘀方对冠心病大鼠纤溶系统的影响,以探讨其治疗冠心病的作用机制.方法:采用喂饲高脂饲料并腹腔注射脑垂体后叶素的方法复制冠心病大鼠模型,实验分为正常组、模型组、复方丹参滴丸对照组、益气化痰祛瘀方高、低剂量组,施加相应药物干预6周后,采用免疫组化法检测大鼠心肌和主动脉组织PAI-1、t-PA的表达.结果:模型组大鼠心肌和主动脉组织PAI-1表达增强,t-PA表达减弱(P<0.01);各给药组PAI-1的表达减弱,t-PA的表达增强(P<0.01);益气化痰祛瘀方高、低剂量组均优于复方丹参滴丸对照组(P<0.05或P<0.01),益气化痰祛瘀方高、低剂量组间无明显差异(P>0.05).结论:益气化痰祛瘀方可通过调节冠心病大鼠心肌、主动脉组织PAI-1、t-PA受体表达,促进纤维溶解,抑制血栓形成,改善冠状动脉血液供应,达到治疗冠心病的目的.【期刊名称】《河北中医药学报》【年(卷),期】2011(026)004【总页数】2页(P5-6)【关键词】益气化痰祛瘀方;冠心病;大鼠;纤溶系统;PAI-1;t-PA【作者】左海宁;张东梅;张文立;赵淑明【作者单位】河北省乐亭县中医院,乐亭,063600;河北省张北县医院;河北医科大学第二医院;河北省乐亭县中医院,乐亭,063600【正文语种】中文【中图分类】R285.5冠心病是由冠状动脉粥样硬化导致冠脉管腔狭窄和冠脉痉挛性改变,引起冠状动脉供血相对不足,致使心肌缺血、缺氧所引起的心脏疾病。
益气化痰祛瘀方经多年临床观察,治疗冠心病的疗效显著。
前期研究表明,本方通过调节冠心病大鼠6-Keto-PGF1а与TXB2的平衡状态,以达到减轻实验动物冠心病病变的作用。
[1]据报道,冠心病的发生、发展与纤溶系统的异常亦有着密切的关系,本研究旨在通过实验观察益气化痰祛瘀方对冠心病大鼠心肌和主动脉组织PAI-1、t-PA表达的影响,了解其对冠心病大鼠纤溶系统的影响。
行气祛痰化浊中药对血小板聚集性红细胞变形性及血液粘度作
用初探
冯亚
【期刊名称】《福建中医学院学报》
【年(卷),期】1998(008)001
【摘要】根据中医传统理论,采用家兔体外实验方法,选取5种临床上常用的行气祛痰化浊类中药,就其对血小板聚集性、红细胞变形性及血液粘度的作用进行了初步研究,对照药物为丹参。
结果表明,抑制血小板聚集方面,药物高浓度时,枳实较丹参作用更为显著(P<0.05),石菖蒲与丹参作用相似(P>0.05);增强红细胞变形能力方面,枳实比丹参作用更为显著(P<0.01),石菖蒲、厚朴作用与丹参相似(P>0.1)。
本结果为临床上此类中药的应用提供了较客观的实验依据,并说明行气祛痰化浊中药在探索防治心脑血管疾病新药方面有深入研究的价值。
【总页数】3页(P24-26)
【作者】冯亚
【作者单位】福建省中医药研究院
【正文语种】中文
【中图分类】R289.5
【相关文献】
1.祛痰化浊汤联合阿托伐他汀治疗高脂血症的临床观察 [J], 陈侃; 薛燕; 朱岚
2.活血通痹合祛痰化浊汤对稳定型心绞痛患者症状改善及GQOL-74评分的影响[J], 杨蔚;杨英豪
3.基于肝细胞线粒体功能探讨“化瘀祛痰、健脾化浊”法对动脉粥样硬化的治疗作用 [J], 邰贺;姜晓琳;陈巍;武跃华;宋囡;贾连群
4.化浊祛痰法对冠心病患者临床疗效及免疫机制的影响 [J], 朱红俊;苏伟;韩瑶瑶;周春刚
5.化浊祛痰法对冠心病患者临床疗效及免疫机制的影响 [J], 朱红俊;苏伟;韩瑶瑶;周春刚
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消痰化瘀中药对NAFLD大鼠LXRα mRNA和ABCA1表达的影响∗张一昕;邓国兴;吴中秋;于文涛;徐晶;韩雪;潘思彤【期刊名称】《河北中医药学报》【年(卷),期】2015(000)002【摘要】目的::观察消痰化瘀中药对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠脂质代谢和肝脏LXRα和ABCA1mRNA表达的影响,探讨其作用机理。
方法:随机将SD雄性大鼠分正常对照组、模型对照组、东宝肝泰对照组以及消痰化瘀中药高、中、低剂量组,一边造模一边灌胃给予相应药物。
用药8周后,检测各组大鼠血清TC、TG、 HDL、LDL、 FFA和肝组织中TC、 TG的含量改变,并观察肝组织LXRα mRNA和小肠ABCA1表达变化以及肝组织形态学的变化。
结果:消瘀化痰中药能降低模型大鼠TC、 TG、 FFA、 ALT、 AST的含量或活性,促使LXRα mRNA 和ABCA1的表达上调,改善肝组织的病变程度。
结论:调控LXRα/ABCA1通路相关基因,促进肝脏脂质代谢,可能是消痰化瘀中药对NAFLD的治疗作用靶点之一。
【总页数】4页(P1-3,7)【作者】张一昕;邓国兴;吴中秋;于文涛;徐晶;韩雪;潘思彤【作者单位】河北中医学院石家庄050200;河北中医学院石家庄050200;河北中医学院石家庄050200;河北中医学院石家庄050200;河北中医学院石家庄050200;河北中医学院石家庄050200;河北中医学院石家庄050200【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.山楂叶总黄酮对AS模型大鼠PPARα、LXR、ABCA1mRNA表达的影响 [J], 高英英;欧芹;魏晓东;马雷2.消痰化瘀中药对非酒精性\r脂肪肝大鼠脂质代谢和相关基因表达的影响 [J], 刘宇;郭建利;刘晨旭;韩雪;石铖;路帅;郝蕾;张一昕3.瑞舒伐他汀、依折麦布对ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞LXRα、ABCA1及Caveolin-1mRNA表达的影响 [J], 王玉玲;员旭红;贺彧彬;李佳;韩永魁;申晓彧4.消痰化瘀中药对NAFLD大鼠SREBP 1c/FAS/ACCmRNA表达的影响 [J], 鲍新民; 郭建利; 刘晨旭; 路帅; 韩雪; 娄丽娟; 张一昕5.冠心康对动脉粥样硬化大鼠主动脉LXRα、ABCA1基因表达的影响 [J], 章怡祎;刘萍因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
化瘀祛痰方药对巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1、CD36表达的影响贾连群,杨关林,赵钢,李学涛,张哲,张会永,杜莹,曹媛(辽宁中医药大学,辽宁沈阳110847)摘要:目的:观察化瘀祛痰方药及其拆方对THP -1源性泡沫细胞腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)、CD36表达的影响,探讨该方药的作用机制,并比较方药全方及各拆方的疗效及调控作用。
方法:体外培养THP -1细胞,佛波酯(PMA )使之巨噬化,氧化型低密度脂蛋白(ox -LDL )使巨噬细胞泡沫化。
细胞随机分为空白对照组、模型组、补气组、化瘀组、祛痰组和全方组。
油红O 染色观察细胞浆脂滴变化,酶法测定细胞内总胆固醇(TC )、游离胆固醇(FC )、胆固醇酯(CE )的含量,并计算CE /TC 值。
反转录-聚合酶链反应(RT -PCR )定量分析ABCA1、CD36mRNA 水平。
结果:模型组细胞TC 、FC 、CE 含量及CE /TC 值均显著高于对照组(P <0.01);与模型组相比,全方组和祛痰组细胞TC 、FC 、CE 含量及CE /TC 值均显著降低。
RT -PCR 结果提示模型组细胞ABCA1、CD36mRNA 水平显著升高;而化瘀祛痰方药及祛痰拆方含药血清可显著升高ABCA1mRNA ,显著降低CD36mRNA 水平。
结论:化瘀祛痰方药及祛痰方可抑制ox -LDL 诱导的THP -1细胞泡沫化,该作用可能与其上调ABCA1基因、下调CD36基因表达,从而减弱THP -1细胞对ox -LDL 摄取有关。
关键词:化瘀祛痰复方;动脉粥样硬化;THP -1源性泡沫细胞;腺苷三磷酸结合盒转运体A1;胆固醇中图分类号:R2-03文献标志码:B 文章编号:1000-1719(2013)02-0234-04Effect of Huayu Qutan Recipe on Expressions of ABCA 1and CD 36inMacrophage-Derived Foam Cell Model of THP -1Cell Line JIA Lianqun ,YANG Guanlin ,ZHANG Zhe ,LI Xuetao ,ZHANG Huiyong ,FENG Junyi (Liaoning University of Traditional Chinese Medicine ,Shenyang 110847,Liaoning ,China )Abstract :Objective :To observe the influence of Huayu Qutan recipe and its separated recipes on the expressions of ABCA1and CD36in macrophage-derived foam cell model of THP -1cell line.Methods :Human THP -1cells were cultured with 160nmol /L PMA for 24h in order to differentiate the cells to macrophages.The macrophages were incubated with 100mg /L ox -LDL for 24h to form foam cells.Then the cells were equally divided into six groups randomly ;the normal serum control ,model ,Buqi recipes ,Huayu recipes ,Qutan recipe groups and Huayu Qutan recipes groups.RT -PCR method was used to test the changes of expressions of ABCA1and CD36.Results :In model group ,the contents of TC ,FC ,CE ,CE /TC ratio as well as the expressions of ABCA1and CD36were significantly increased compared with control group.Compared with model group ,the contents of TC ,FC ,CE ,CE /TC ratio and expression of ABCA1were obviously increased while the expression of CD36was obviously decreased in the Huayu Qutan recipe group and Qutan recipe group.Conclusion :Huayu Qutan recipe and Qutan recipe could inhibit atheroselerotic foam formation through up -regulating ABCA1expression and down -regulating CD36expression.Key words :Huayu Qutan recipe ;atherosclerosis (AS );THP -1derived foam cell ;ATP binding cassette transporter1(AB-CA1);cholesterol收稿日期:2012-08-19基金项目:国家自然科学基金青年基金项目(81202834);辽宁省高等学校杰出青年学者成长计划资助项目(LJQ2011100);中国博士后科学基金特别资助项目(201104611)作者简介:贾连群(1975-),女,辽宁营口人,副教授,在站博士后,研究方向:中药防治心血管疾病分子生物学机制。
通讯作者:杨关林(1962-),男(锡伯族),黑龙江肇东人,教授,博士后导师,研究方向:中西医结合防治心血管疾病。
动脉粥样硬化(AS )是心脑血管疾病的主要病理基础,巨噬细胞无限制摄取氧化脂质形成泡沫细胞是AS 早期病变的重要环节。
在AS 形成过程中,这种巨噬细胞源性泡沫细胞的形成是动脉壁内膜下产生脂肪纹的启动步骤,也是决定斑块形成情况的关键因素[1]。
大量流行病学研究表明,血浆高密度脂蛋白(HDL )与AS 性心血管病的危险性呈负相关,其主要机制是HDL 通过胆固醇逆向转运促进外周细胞(主要是巨噬细胞)蓄积的胆固醇向肝脏转运,并最终通过胆汁、粪便排出体外[2]。
腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)是一种调节巨噬细胞内胆固醇流出的关键膜蛋白,CD36是巨噬细胞表面主要识别、内吞氧化型低密度脂蛋白(ox -LDL )的重要受体,二者在巨噬细胞胆固醇流出过程中发挥重要作用课题组前期研究发现,化瘀祛痰方药能显著降低冠心病不稳定型心绞痛患者血浆ox -LDL 、总胆固醇(TC )、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯水平,显著升高血清高密度脂蛋白胆固醇、一氧化氮水平[3-4],初步提示该药可能通过调节胆固醇代谢进而发挥抗AS作用,但是具体机制尚不清楚。
本研究以体外培养THP-1细胞株为研究对象,以ABCA1、CD36基因为效应指标,探讨化瘀祛痰方药全方及各拆方对THP-1细胞胆固醇流出的影响,并比较该方药全方及各拆方的疗效及调控作用。
1材料1.1动物雄性SD大鼠,SPF级,体重(300ʃ10)g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,合格证号:SCXK (京)2006-0009。
动物购进后,饲养环境温度为(25ʃ1)ħ,自然光照,喂以全价颗粒饲料(配方:玉米面40%,白面26%,麸子10%,豆饼10%,鱼粉10%,骨粉2%,盐1%及复合维生素1%),自由饮食,正常适应环境7天,进入实验状态。
1.2细胞株THP-1细胞株购于中国科学院上海细胞库,来源于美国细胞培养中心(ATCC)。
使用含100mL/L 胎牛血清的1640培养基,在37ħ、50mL/L CO2条件下培养细胞。
每2天换一次液,4 6天传代1次。
3次传代后进行实验,随机分组。
1.3药物化瘀祛痰方(全方)由党参、黄芪、绞股蓝、丹参、茯苓、半夏、菖蒲、川芎、赤芍、郁金组成;补气方由党参、黄芪、绞股蓝组成;化瘀方由丹参、川芎、赤芍、郁金组成;祛痰方由茯苓、半夏、菖蒲组成,以上药材均购于辽宁中医药大学附属医院。
各组方药分别浸泡1h 后,武火煮沸,文火煮20min,过滤,重复煎3次,合并滤液,浓缩至全方含生药1.79g/mL,补气方含生药0.75g/mL,化瘀方含生药0.54g/mL、祛痰方含生药0.42g/mL,各组煎剂冷却后4ħ保存。
1.4试剂1640培养基、胎牛血清、0.25%胰蛋白酶购自美国Hyclone公司。
ox-LDL购自广州奕源生物科技有限公司。
佛波酯,油红O购自美国Sigma公司。
总胆固醇(TC)检测试剂盒、游离胆固醇(FC)检测试剂盒购自上海名典生物工程有限公司。
Bradford蛋白质测定试剂盒购自南京凯基生物科技发展有限公司。
RT -PCR Kit、Trizol、琼脂糖购自TaKaRa公司。
ABCA1、CD36、GADPH引物由TaKaRa公司合成。
其余试剂均为分析纯。
2方法2.1含药血清制备成年雄性SD大鼠40只,随机分为5组:空白对照组、全方组、补气组、化瘀组、祛痰组、空白对照组4只,其余每组各9只。
灌胃给药,每日1次,连续9日。
动物给药量为全方组:17.9g/kg,补气组:7.5g/kg,化瘀组:5.4g/kg,祛痰组:4.2g/kg,空白对照组ig等量生理盐水。
大鼠末次灌胃后2h(灌药前禁食不禁水12 h),腹主动脉采血,离心后分离血清,合并同组含药血清,0.22μm微孔滤膜过滤后分装,-86ħ保存备用。
2.2泡沫细胞制备THP-1细胞置于160nmol/L含PMA的1640培养基中培养24h,贴壁后轻轻吸去上清液,换含3%胎牛血清的1640培养基,并加入终浓度80mg/L的ox-LDL孵育24h,即得泡沫细胞模型[5]。
2.3油红O染色细胞置于预先放有无菌盖玻片的6孔培养板中,诱导建模后,用PBS冲洗盖玻片3次,50%异丙醇固定,油红O染色液染色,蒸馏水冲洗3次,苏木素染色,分色和返蓝后,水性封片剂封片。
显微镜下观察并照相。
2.4细胞分组及干预培养的HepG2细胞分为以下各组:①空白对照组:THP-1细胞置于160nmol/L含PMA的1640培养基中培养24h,换含3%胎牛血清、10%空白血清的1640培养基;②模型组:即泡沫细胞组;③补气组;④化瘀组;⑤祛痰组;⑥全方组。